适于AFLP分析的蚕豆DNA提取方法的改良

蚕豆是高蛋白含酚类物质较多的作物之一,为了提取适于蚕豆AFLP分析的高质量的DNA,采用改良CTAB法,以β-巯基乙醇和PVP浓度为因素进行了实验。结果表明,用改良的CTAT法提取蚕豆DNA的质量较好,纯度高λ=260nm/280nm的平均OD值为1.915,变幅在1.81～2.08之间,绝大多数集中在1.9左右,其中,在CTAB提取液中加入1%的β-巯基乙醇和0.5%的PVP或直接加入1%PVP后,提取的DNA纯度较高,λ=260nm/280nmOD平均值分别为1.868和1.865,提取的DNA适于AFLP分析。

蚕豆蛋白的提取及NaCl浓度和pH值对其溶解性和乳化性的影响(英文)

蚕豆蛋白富含微量元素和人体必需的8种氨基酸,具有较高的开发价值。采用超声提取和水提取的方法提取蚕豆蛋白,研究了NaCl浓度和pH对蚕豆蛋白提取率、沉淀、功能性的影响。在pH值为8～12,超声提取和水提取均有较高的提取率。蚕豆蛋白的等电点在pH4.0～4.2之间。在pH4溶解性和乳化性最低,pH值在4～12时溶解性和乳化性随pH值的升高而升高,pH值为12时溶解性和乳化性最高。NaCl浓度从0到1.0mol/L,溶解性和乳化性升高;当NaCl浓度继续增加,在pH4、pH7溶解性和乳化性随之下降。在相同的NaCl浓度和pH值时,超声提取比水提取蛋白的溶解性和乳化性高。该研究为蚕豆蛋白的提取工艺的确定及其在食品中的应用提供依据。

β-巯基乙醇和PVP对蚕豆DNA质量的影响

蚕豆是高蛋白含酚类物质较多的作物,为了提取适于蚕豆AFLP分析的高质量的DNA,采用CTAB法提取蚕豆DNA,以β-巯基乙醇和PVP抗氧化剂浓度为因素,研究了β-巯基乙醇和PVP对蚕豆DNA质量的影响。结果表明,用CTAB法提取蚕豆DNA的质量较好、纯度高,λ=260nm/280nm的平均OD值为1.915,变幅在1.81～2.08之间,绝大多数集中在1.9左右,同时,两种抗氧化剂去除蚕豆DNA中酚类物质、防止褐变具有替代作用,但不会影响DNA扩增结果。其中,在CTAB提取液中添加1%的β-巯基乙醇和0.5%的PVP或直接加入1%PVP的纯度较高,λ=260nm/280nm的平均OD值分别为1.868、1.865,电泳谱带最清晰,无明显拖尾现象,DNA的质量和纯度满足于AFLP技术的要求。

春蚕豆再生植株遗传变异鉴定研究

对继代6代的蚕豆的再生植株的遗传变异进行田间鉴定、籽粒形态鉴定和DNA分子标记鉴定,结果表明:在田间对株型、叶色、茎色、花色、荚色进行鉴定均没有发现变异;对籽粒形态的鉴定中仅有1%的粒色和0.5%的脐色变异;利用AFLP技术对发生农艺学性状变异的组和未发生农艺学性状变异的组进行检测,没有检测到变异;说明在继代6代时,未检测到在基因组水平上发生变异。