丹参对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其机制研究

目的:探讨丹参对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其机制。方法:采用单侧肾切除、腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病肾病大鼠模型,予以丹参药物干预。观察大鼠肾脏形态学及肾功能的变化。采用荧光实时定量逆转录-聚合酶链反应法检测转化生长因子β1(transforming growth factor-beta1,TGF-β1)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)、纤溶酶原激活物抑制物1(plasminogen activator inhibi-tor-1,PAI-1)等细胞因子在糖尿病大鼠肾皮质中的表达水平。结果:与正常对照组比较,用药第8周末糖尿病肾病模型组大鼠的肾脏肥大指数、平均肾小球体积、尿白蛋白排泄率、肌酐清除率均有明显升高(P<0.05),肾皮质TGF-β1、CTGF、PAI-1和纤维连接蛋白的表达水平也有显著增高(P<0.05)。丹参治疗组大鼠的上述指标与糖尿病肾病模型组比较,则有明显的降低(P<0.05)。结论:丹参可通过抑制TGF-β1、CTGF、PAI-1等细胞因子的表达,从而对糖尿病大鼠肾脏起保护作用。

益母草对糖尿病肾病大鼠血液流变学及转化生长因子-β_1表达的影响

目的:观察益母草对糖尿病肾病大鼠血液流变学及转化生长因子-β1的影响.方法:取健康SD大鼠48只.随机均匀分为正常组、模型组、益母草组、黄芪组4组.益母草组、黄芪组分别灌服5g/(kg·d)益母草、黄芪水煎液,正常对照组、模型对照组灌服相同体积生理盐水.造模前禁食12h.将链脲佐菌素(STZ)用0.1mmol/L,pH为4.4的枸椽酸缓冲液配成1%的浓度,以50mg/kg的剂量一次性腹腔注射,同时喂养高脂高糖半合成高热量饲料,2wk后测定空腹血糖,血糖值超过16.65mmol/L者,确定为模型成功.所有大鼠均自由饮食,分别于造模和杀检时测量体质量,并于杀检时称量肾质量,用代谢笼收集24h尿液.实验8wk后,大鼠在戊巴比妥钠麻醉下,腹主动脉取血并灌洗肾脏,将肾脏分为两部分,一部分于-80℃冰箱保存,另一部分用中性福尔马林固定.运用免疫组化法及血液流变仪分别观察益母草对糖尿病肾病大鼠转化生长因子-β1的表达及血液流变学的影响.结果:益母草水煎液对糖尿病肾病大鼠肾组织中TGF-β1蛋白表达有下调趋势,但无统计学意义(P>0.05),而对其血流变学指标具有明显改善作用.结论:益母草对糖尿病肾病防治作用可能与其改善血流变学指标有关.

基质金属蛋白酶9及转化生长因子β1在人动脉粥样硬化斑块的表达及其与斑块稳定性的关系

目的探讨基质金属蛋白酶9、转化生长因子β1及转化生长因子β受体Ⅰ在人动脉粥样硬化粥样斑块中的表达水平,以及三者与粥样斑块稳定性的关系。方法收集人冠状动脉斑块组织共41例,常规石蜡包埋切片,作HE染色,根据镜下结构将斑块组织分为稳定组和不稳定组,采用免疫组织化学方法分析基质金属蛋白酶9、转化生长因子β1及转化生长因子β受体Ⅰ在人粥样斑块中的表达,并通过计算机图像分析系统进行定量。结果不稳定性斑块内,基质金属蛋白酶9的表达要明显强于稳定性斑块(面积密度为0.21±0.04比0.16±0.02,吸光度为3.48±0.65比2.84±0.27,P<0.01);转化生长因子β1则明显弱于稳定性斑块(面积密度为0.17±0.02比0.23±0.05,P<0.01;吸光度为3.16±0.65比3.60±0.55,P<0.05);两者在斑块内的表达呈明显的负相关(面积密度为r=-0.332,P=0.034;吸光度为r=-0.373,P=0.016),转化生长因子β受体Ⅰ的表达无明显差异。结论基质金属蛋白酶9、转化生长因子β1同斑块的稳定性密切相关,基质金属蛋白酶9是形成不稳定性斑块的重要促进因素,转化生长因子β1则是重要的斑块稳定因素。

TGF-β1及其受体在不孕患者粘连、闭锁输卵管伞部的表达及意义

目的初步探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)在输卵管伞粘连发病机制中的作用及意义。方法应用免疫组化SP法检测TGF-β1及其受体在粘连组(30例)与不粘连组(15例)的分布与定位,用Image-ProPlus6.0图像分析系统对其进行定量分析。结果TGF-β1、TGF-βR1、TGF-βR2主要在输卵管上皮细胞表达,成纤维细胞和血管内皮细胞中也有表达,这3种因子在粘连组的表达均高于不粘连组(P<0.05),粘连组中TGF-β1与TGF-βR1、TGF-βR2的表达呈正相关(P<0.05),TGF-βR1与TGF-βR2的表达无相关性。不粘连组3个因子间均无相关性。结论TGF-β1信号系统可能在不孕患者输卵管伞粘连的发生过程中起促进作用。

红花注射治疗对兔耳增生性瘢痕中TGFβ_1的表达变化

目的观察红花对兔耳增生性瘢痕(HS)及其转化生长因子β1(TGFβ1)表达的影响。方法取27只新西兰大白兔兔耳腹侧建立HS模型,每耳2块。术后第45天开始对HS行注射治疗,每周1次,连续注射4次。设立正常皮肤组、阳性对照组、生理盐水组、低浓度红花(125 g/L)组、高浓度红花(500 g/L)组。注射完成后第2、4、6周分别测量HS厚度及硬度并切取8只兔耳HS及皮肤,采用免疫组织化学方法检测每块组织TGFβ1蛋白的表达(TGFβ1蛋白面密度),RT-PCR方法检测每块组织TGFβ1mRNA的表达。结果注射后4、6周,高浓度红花组HS厚度及硬度均较其他HS组低(P<0.05);注射后2、4、6周,高浓度红花组TGFβ1蛋白面密度值及TGFβ1mRNA的表达均较其他HS组低(P<0.05);低浓度红花组TGFβ1mRNA的表达在注射后4、6周均较阳性对照及生理盐水组低(P<0.05)。结论红花能促进兔耳HS的软化、变薄,并能抑制兔耳HS的TGFβ1的表达,尤以高浓度红花组明显。红花抑制兔耳HS的机制可能与TGFβ1的表达被抑制相关。

高压氧抑制TGF-β1改善STZ糖尿病大鼠周围神经病变

目的研究高压氧治疗(HBOT)对链脲佐菌素(STZ)糖尿病大鼠外周神经传导速度和血清、局部转化生长因子β1(TGF-β1)的影响。方法STZ糖尿病大鼠造模成功2个月,经电镜证实有神经病变后,随机分为3组:①HBOT组(n=31):用胰岛素控制血糖,每天接受0.15MPa、HBOT1h,连续20d;②糖尿病对照(DM,n=32)组:仅用胰岛素控制血糖;③正常对照(NC,n=20)组:腹腔注射生理盐水的无糖尿病的正常STZ大鼠。分别在疗程10、20d时做肌电图后处死,取股动脉血用EIA法测定血清TGF-β1水平,同时取后肢神经进行苏木精-伊红染色、病理学观察和电镜观察,并用TGF-β1多抗对神经组织做DAB二步法免疫组化染色。结果HBOT10d后,治疗组后肢坐骨神经的传导速度明显高于同期DM组(P<0.05),但低于NC组;HBOT20d后,治疗组后肢胫、腓神经的传导速度明显高于同期DM组(P<0.01);而与NC组间无明显差异(P>0.05);血清TGF-β1水平较DM组明显降低(P<0.05),与NC组间无明显差异。病理观察显示神经组织髓鞘内外的TGF-β1染色明显减少。结论HBOT可改善STZ大鼠糖尿病周围神经病变,其机制可能与抑制TGF-β1生成和其在神经组织表达有关。

肝细胞癌组织中高尔基体蛋白73和转化生长因子β_1及Smad2的表达水平及其意义

目的探讨高尔基体蛋白73(GP73)及转化生长因子β(TGF-β)/Smads信号通路与肝细胞癌(肝癌)的关系。方法选取2010年1月—2014年12月新疆医科大学第一附属医院病理科收集的80例肝癌患者的肝癌组织及癌旁组织蜡块标本,并从本院病案室调阅患者的临床病历资料,包括性别、年龄、乙型肝炎表面抗原(HBs Ag)、血清甲胎蛋白(AFP)水平、有无肝硬化、有无门静脉癌栓、分化程度、TNM分期、有无血管侵犯。采用免疫组织化学En Vision二步法检测肝癌组织和癌旁组织GP73、TGF-β1和Smad2的阳性表达情况和积分光密度(IOD)。结果GP73定位于胞质,呈棕黄色颗粒。肝癌组织GP73阳性表达率为73.8%(59/80),高于癌旁组织的5.0%(4/80)(χ2=76.50,P<0.05)。TGF-β1和Smad2主要表达于胞质,偶见于胞核,为棕黄色深染颗粒。肝癌组织TGF-β1阳性表达率为81.2%(65/80),高于癌旁组织的6.2%(5/80)(χ2=65.67,P<0.05);肝癌组织Smad2阳性表达率为66.2%(53/80),高于癌旁组织的10.0%(8/80)(χ2=47.62,P<0.05)。Spearman相关分析结果显示,GP73与TGF-β1、Smad2呈正相关(rs=0.841、0.405,P<0.05)。不同性别患者肝癌组织GP73、Smad2表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05),TGF-β1表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);不同年龄、HBs Ag、AFP、有无肝硬化及门静脉癌栓患者肝癌组织GP73、TGF-β1和Smad2表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);不同分化程度、TNM分期、有无血管侵犯患者肝癌组织GP73、TGF-β1和Smad2表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 GP73在肝癌组织中多呈阳性表达,其可能通过调控TGF-β/Smads信号通路参与肝癌的发生与发展。

丹参注射液对大鼠梗阻性肾间质纤维化的保护作用

目的 :探讨丹参注射液对梗阻性大鼠肾间质纤维化的影响。方法 :30只雌性SD大鼠 ,随机分为假手术组、造模组和丹参组。以单侧输尿管结扎术建立输尿管梗阻的动物模型。术后第 10d取术侧肾组织做HE、PAS染色及TGF - β1、α -SMA、I型胶原免疫组化检测并以反转录 -PCR(RT -PCR)方法对肾皮质TGF - β1mRNA表达作半定量分析。结果 :丹参组显著改善梗阻侧肾组织病理变化 ,下调TGF - β1mRNA及蛋白表达 ,减少α -SMA表达及Ⅰ型胶原沉积。结论 :丹参注射液对梗阻性大鼠肾间质纤维化有保护作用。

甘草酸二胺抗大鼠肾间质纤维化作用及其机制

目的探讨甘草酸二胺对肾间质纤维化的影响及其与TGF-β1/Smad2通路的关系。方法以Wistar大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)为模型,在不同的时间点(7、14、28 d)处死动物,以Masson染色观察甘草酸二胺治疗前后梗阻侧肾小管的损害、肾间质纤维化指数;以免疫组化染色观察肾小管间质中转化生长因β1(TGF-β1)、Smad2信号蛋白及纤维连接蛋白(FN)等的表达情况;结果①随着梗阻时间的延长,肾小管损害、肾间质纤维化程度逐渐加重,呈时间依赖性(P<0.01);TGF-β1、Smad2、FN蛋白呈时间依赖性上调(P<0.01),均显著高于假手术组(P<0.01);TGF-β1与Smad2、Smad2与FN、TGF-β1与FN蛋白之间均呈显著正相关(r=0.987,r=0.992,r=0.981,均P<0.01)。②甘草酸二胺能改善UUO所致的肾间质纤维化程度(P<0.01),下调肾脏组织TGF-β1、Smad2、FN蛋白的表达(P<0.01)。结论甘草酸二胺能减轻UUO所致的肾间质纤维化损伤,其作用机制可能是通过抑制TGF-β1/Smads通路的激活,减少肾间质纤维连接蛋白的沉积,减轻肾间质的纤维化。

TGF-β1基因转染骨髓基质干细胞促进BMP-2活性多肽大鼠体内异位成骨

目的评价转化生长因子β1(TGF-β1)基因转染骨髓基质干细胞(BMSC)能否增强骨形态发生蛋白(BMP)活性多肽P24在大鼠体内异位成骨的能力。方法通过新型非病毒基因载体K(16)GRGDSPC将TGF-β1真核表达载体质粒pcDNA3-TGF-β1导入BMSC,筛选出阳性克隆并扩大培养。将稳定转基因细胞与胶原海绵复合,同时加入BMP-2活性肽P24,构建转基因细胞/胶原海绵/P24复合体。将该复合体植入大鼠竖脊肌浅层肌袋,3、5、8周时对植入局部行CT成像,组织碱性磷酸酶(ALP)活性检测及组织切片的苏木精-伊红染色,观察复合体异位成骨的能力。结果免疫组化SABC法检测转染后BMSC中TGF-β1的表达,见实验组呈阳性染色。3、5、8周时CT成像两组均可见骨组织形成,且呈时间相关性,实验组CT值分别为(254±20)、(331±34)、(477±37)Hu,均明显高于同期对照组的CT值[分别为(237±17)、(298±31)、(433±45)Hu](均P<0.05);植入局部ALP活性测定实验组分别为(57.78±0.64)、(65.70±0.59)、(71.83±0.67)U/L,亦高于对照组[分别为(55.46±0.55)、(63.27±0.53)、(70.32±0.63)U/L];苏木精-伊红染色可见实验组编织骨的数量明显多于对照组。结论K(16)GRGDSPC能成功介导TGF-β1基因转染BMSC并有效表达;TGF-β1基因转染BMSC可增强BMP-2活性肽P24的异位成骨能力。

Th3、Th17及相关细胞因子在自身免疫性甲状腺疾病发病中的作用

目的:研究Th17、Th3细胞及相关细胞因子IL-17、TGF-β1在自身免疫性甲状腺疾病(AITD)发病机制中的作用及意义。方法:收集49例初诊的自身免疫性甲状腺疾病患者,分为Graves'病(GD)(n=30)组和桥本甲状腺炎(HT)(n=19)组,另选年龄、性别匹配的18个正常人作为健康对照。Graves'病组采用甲巯咪唑治疗,桥本甲状腺炎组采用甲状腺素钠治疗,均随访至甲状腺功能正常。采用流式细胞仪技术检测外周血中Th17和Th3细胞比例。采用ELISA方法检测血浆IL-17、TGF-β1水平。结果:GD和HT初诊组患者外周血Th17细胞较正常对照组明显升高(P<0.05)。Th3细胞在HT初诊组中明显升高,而其在GD初诊组中明显下降(P<0.05)。血浆IL-17水平在GD和HT初诊组、缓解组均较正常对照组明显升高(P<0.05)。血浆TGF-β1水平在HT初诊组和缓解组均明显升高(P<0.05)。结论:Th17、Th3细胞和相关细胞因子IL-17、TGF-β1可能参与了自身免疫性甲状腺疾病的发病,TGF-β1可能在HT的发病中起了一个促炎因子的作用。

骨形态蛋白-7对糖尿病大鼠nephrin表达和分布的影响

目的观察骨形态蛋白-7(BMP-7)对糖尿病(DM)大鼠nephrin表达和分布的影响。方法20只链脲左菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠模型随机分为糖尿病组(DM)和BMP-7治疗组(BMP-7)各10只,另以10只大鼠作对照组(NC)。BMP-7组每周2次腹腔注射人重组BMP-730μg/kg。DM组和NC组给予等量的生理盐水注射。于8、16、24周检测不同时间点24h尿蛋白、尿肌酐和血糖。24周处死动物,PAS染色和透射电镜观察肾组织学改变,RT-PCR、免疫荧光检测nephrin的表达和分布,免疫组化技术检测TGF-β1和WT1的表达。结果与NC组比,DM组24h尿蛋白、肾质量/体质量指数、TGF-β1的表达均显著高于NC组(F值分别为174.3、38.9、117.7,P均小于<0.01)差异均具有统计学意义。而内生肌酐清除率(Ccr)、足细胞数目、nephrin的表达显著低于NC组(F值分别为13.4、79.04、65.5,P均<0.01),而且nephrin由正常的沿毛细血管襻线状分布向颗粒状、团块状改变。BMP-7组24h尿蛋白、肾质量/体质量、TGF-β1的表达较DM组显著降低,Ccr、足细胞数目和nephrinmRNA的表达显著增加,且保持着正常的沿毛细血管襻线状分布,肾脏病理改变减轻。结论外源性的运用BMP-7可以有效地抑制糖尿病引起的nephrin表达的下调,维持nephrin在足细胞上的正常分布;BMP-7对糖尿病大鼠肾脏保护作用可能与拮抗了TGF-β1的活化有关。

大鼠脑震荡伤后脑组织HSP70、bFGF及TGF-β1表达变化

目的研究脑震荡后脑组织损伤修复相关因子表达变化,为推断脑损伤时间提供法医学依据。方法建立SD大鼠脑震荡伤模型,提取脑组织行常规HE染色及热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)和转化生长因子β1(transforming growth factor beta1,TGF-β1)免疫组织化学染色,在光学显微镜下观察并进行图像分析及相应统计学处理。结果伤后30min,在大脑皮质、海马区见少量呈弥散性分布的HSP70免疫组化染色阳性细胞,12h达高峰,伤后1d阳性细胞数量开始减少;伤后3h,在大脑皮质、海马区bFGF免疫组化染色阳性细胞开始增多,至12h时达高峰,然后开始下降;伤后6h～1d,在大脑皮质、海马区TGF-β1免疫组化染色阳性细胞逐渐增多,至3d时达高峰,然后开始下降。结论HSP70、bFGF、TGF-β1在脑震荡后脑组织中表达呈时序性改变。多指标综合应用为法医学损伤时间的推断提供了全新的视角。

TGFβ1对原发性肝癌诊断价值的Meta分析

目的采用Meta分析方法系统评价TFGβ1在原发性肝癌(以下简称肝癌)诊断中的价值。方法计算机检索Pub Med、EMBASE、Cochrane Library、中国生物医学文献数据库(CBM)、中国期刊全文数据库(CNKI)、万方数据库及维普数据库中公开发表的TGFβ1诊断原发性肝癌的文献,检索时间为数据库建库至2016年6月30日。筛选出的文献采用OQAQ量表进行评价质量。通过Stata 13.0软件进行效应量诊断比值比、阳性似然比、阴性似然比等指标合并,并绘制综合受试者工作特征曲线(SROC曲线),进行发表偏倚检验。可信度以95%可信区间(95%CI)表示。异质性检验采用Q检验和I2检验,同时进行亚组分析。结果共纳入16篇文献,合计肝癌组1124例,对照组1443例。敏感度及95%CI为0.68(0.52~0.80),特异度及95%CI为0.85(0.74~0.92),诊断比值比及95%CI为11.75(6.18~22.36);阳性似然比及95%CI为4.6(2.7~7.9),阴性似然比及95%CI为0.38(0.26~0.56),SROC曲线下面积及95%CI为0.84(0.80~0.87)。亚组分析所得结果显示,ELISA检测方法的阳性似然比、诊断比值比和SROC曲线下面积均高于免疫组化检测,阴性似然比小于免疫组化检测。纳入的文献存在异质性,主要来源为研究对象的肝病背景不同,非原发性肝癌组的构成不统一(包含良性对照组和正常对照),以及实验设计差异等导致。描绘Deeks漏斗图,提示无明显发表偏倚。结论 TGFβ1在肝癌的诊断中具有较高的灵敏度及特异度,有可能成为肝癌的一种辅助诊断指标。

TGFβ1对转染Smad4/Smad7基因的大鼠系膜细胞Ⅰ、Ⅳ型胶原表达的影响

目的 探讨Smad4 /Smad7信号蛋白在转化生长因子β1(TGFβ1)作用下对大鼠系膜细胞 (MsC)Ⅰ、Ⅳ型胶原表达的影响。方法 经脂质体介导分别将Smad4 /Smad7基因瞬时转染体外培养的大鼠MsC ,并用免疫荧光、RT PCR和Westernblot法检测其转染成功与否 ;再用Westernblot法分别观察转基因MsC及其在TGFβ1作用下 ,其Ⅰ、Ⅳ型胶原蛋白表达的改变。结果 与转染空载体的MsC相比较 ,转染Smad4基因的MsC ,其Ⅰ、Ⅳ型胶原蛋白表达分别增强 1.2和 1.8倍 ,经TGFβ1作用后升高 1.8和 3.3倍 (P <0 .0 1) ;而转染Smad7基因的MsC ,其Ⅰ、Ⅳ型胶原蛋白表达分别下降 1.4和 1.9倍 ,经TGFβ1作用后则降低 1.7和 2 .4倍 (P <0 .0 1)。 结论 TGFβ1/Smad信号通路可从正反两方面调节MsCⅠ。

当归补血汤总苷抗大鼠肺纤维化的实验研究

目的观察当归补血汤总苷(TGDB)对平阳霉素致大鼠肺间质纤维化模型的保护作用,探讨TGDB抗肺纤维化形成的作用机制。方法Wistar雄性大鼠105只随机分为对照组、模型组、醋酸泼尼松组、TGDB 13 mg/(kg.d)和39mg/(kg.d)剂量组,于给药7、14、28 d各组分别处死7只大鼠,Masson染色观察肺组织病理学变化,测定7、14、28 d时大鼠血清中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和肺组织中羟脯氨酸(HYP)含量,以及28 d时血清TGF-β1的水平,肺组织TGF-β1 mRNA的表达情况。结果TGDB能减轻大鼠肺纤维化程度,提高血清中GSH-Px和SOD含量,降低MDA含量和肺组织中HYP含量,降低血清TGF-β1水平,TGF-β1 mRNA的表达下降。结论TGDB能调节肺纤维化大鼠体内自由基水平,减轻自由基对肺组织结构的氧化损伤,并能显著降低血清TGF-β1水平,减少TGF-β1 mRNA的表达,这可能是其防治肺纤维化的作用机制之一。

2型糖尿病性动脉粥样硬化大鼠血浆VEGF、TGF-β1、CTRP3的表达及辛伐他汀的干预作用

目的观察2型糖尿病性动脉粥样硬化大鼠血浆血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子β1(TGF-β1)、C1q/TNF相关蛋白3(CTRP3)的表达及辛伐他汀的干预作用。方法将SD大鼠随机分为正常饮食(NC)组(n=8)、高脂饮食(HFD)组(n=8)、高脂干预(HFD+S)组(n=8)、模型(M)组(n=18)、模型干预(M+S)组(n=16)。采用链脲佐菌素+维生素D3+高脂饮食建立糖尿病动脉粥样硬化大鼠模型,HFD+S、M+S组用辛伐他汀溶液20 mg/(kg·d)灌胃进行干预,蒸馏水20 m L/(kg·d)灌胃作为对照。测定各组大鼠空腹血糖(FPG)、血脂、空腹胰岛素(FINS)、VEGF、TGF-β1、CTRP3的水平。结果 M组动脉病理可见明显粥样斑块,M+S组病变较M组明显减轻。HFD组VEGF、TGF-β1及CTRP3高于NC组;M组VEGF、TGF-β1高于NC组,VEGF高于HFD组,CTRP3低于HFD组。辛伐他汀干预后,HFD+S组TGF-β1、CTRP3高于HFD组,M+S组VEGF低于M组,且TGF-β1、CTRP3均高于M组(P<0.05)。结论 VEGF、TGF-β1、CTRP3可能参与糖尿病性动脉粥样硬化的发生,辛伐他汀除降脂外,还能下调VEGF、上调TGF-β1、CTRP3表达,并对糖尿病性动脉粥样硬化发挥保护作用。

氯沙坦对大鼠糖尿病肾损害的保护作用

目的:探讨血管紧张素Ⅱ受体阻滞剂氯沙坦对糖尿病肾损害的保护作用与机制。方法:36只大鼠分成正常对照组、糖尿病模型组和氯沙坦治疗组,每组12只。模型组和氯沙坦组腹腔注射链脲佐菌素65 mg.kg-1建立糖尿病模型,在模型建立1周后氯沙坦组灌胃给予氯沙坦5 mg.kg-1.d-1,共12周。检测各组第1,4,12周血糖、24 h尿视黄醇结合蛋白(RBP)、尿白蛋白(A lb)排泄率;分别于第4和12周每组各处死5只大鼠,取肾,称重,计算肾脏肥大指数;分离肾皮髓质,荧光定量RT-PCR法检测皮质转化生长因子β1(TGFβ1)mRNA水平;透视电子显微镜检查肾小球基底膜、系膜区的病理改变。结果:第4和12周时模型组尿Alb,RBP排泄、肾脏肥大指数和TGFβ1mRNA表达量均显著高于正常对照组(P<0.01),氯沙坦组的这些指标则较模型组明显减少(P<0.01)。电镜显示模型组肾小球毛细血管基底膜增厚,系膜和系膜细胞增生;氯沙坦组肾小球毛细血管基底膜也有不规则增厚,较同时期模型组减轻。结论:氯沙坦对糖尿病肾损害有确切的保护作用,其机制可能部分与氯沙坦抑制肾脏TGFβ1过度表达有关。

通络益肾方对高糖培养大鼠肾小球系膜细胞MMP-9/TIMP-1和TGF-β1表达的影响

目的观察通络益肾方对高糖培养下大鼠肾小球系膜细胞增殖、细胞外基质调控系统MMP-9/TIMP-1、TGF-β1表达的影响,探讨其防治糖尿病肾病的可能机制。方法以体外培养的大鼠肾小球系膜细胞为研究对象,将培养的肾小球系膜细胞分为空白对照组、高糖培养组(高糖组)、通络益肾方高、中、低剂量组及西药对照组,用大鼠含药血清给药,分别给予相应处理48 h后,采用四甲偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖,ELISA法检测细胞培养上清液TGF-β1、MMP-9和TIMP-1的水平。结果与空白对照组比较,高糖组肾小球系膜细胞增殖明显(P<0.01),上清液中TGF-β1和TIMP-1水平显著增加,MMP-9水平减少(均P<0.01);通络益肾方高、中、低剂量均能明显抑制肾小球系膜细胞增殖(P<0.01或P<0.05),下调TGF-β1和TIMP-1表达,上调MMP-9表达(P<0.05或P<0.01),尤以高剂量组效果最佳,呈剂量依赖性;西药对照组上述指标表达水平和中药中剂量组相当(P>0.05)。结论通络益肾方可能通过抑制肾小球系膜细胞增殖和下调TGF-β1、促进细胞外基质的降解而拮抗糖尿病肾病肾小球硬化,发挥其肾保护作用。

胃癌组织中TGF-β1、Smad2与CyclinD1的表达及其相关性的研究

目的探讨胃癌组织中转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad2与细胞周期蛋白D1(CyclinD1)的表达及三者之间的相关性。方法选择2007年1月至2012年1月腔镜活检正常胃黏膜20份(正常胃组织)作为对照组,手术切除胃癌标本60份(高-中分化、低分化)作为胃癌组,用免疫组化法检测TGF-β1、Smad2、CyclinD1正常胃组织及胃癌组织中的表达。结果 TGF-β1及CyclinD1在胃癌组织中的表达高于对照组,Smad2在胃癌组中的表达低于对照组;TGF-β1及CyclinD1在低分化胃癌组中的表达高于高-中分化胃癌组;TGF-β1及CyclinD1在无淋巴结转移的胃癌组中的表达低于有淋巴结转移的胃癌组;TGF-β1、CyclinD1在胃癌组中的表达随着TNM分期的提高而升高,高-中分化胃癌组Smad2较低分化胃癌组表达升高,Smad2的表达在无淋巴结转移的胃癌组中的表达高于有淋巴结转移的胃癌组;Smad2在胃癌中的表达随TNM分期的提高而降低,TGF-β1、Smad2及CyclinD1的表达与患病年龄、性别无关;TGF-β1与Smad2呈负相关,TGF-β1与CyclinD1呈正相关,CyclinD1与Smad2呈负相关。结论 TGF-β1、Smad2与CyclinD1的表达与胃癌的发病有关。