京尼平对下咽癌FaDu细胞增殖及线粒体功能的影响

目的:探讨解偶联蛋白2(UCP2)抑制剂京尼平(GEN)对人下咽癌FaDu细胞增殖及线粒体功能的影响。方法:使用不同浓度的GEN作用于FaDu细胞24 h,实验分为GEN 0(对照)、50、100、200和400μmol/L组。采用CCK-8法检测各组细胞增殖能力,DCFH-DA探针及JC-1染色联合流式细胞术检测GEN对FaDu细胞活性氧(ROS)含量及线粒体膜电位的影响,激光共聚焦显微镜观察GEN对FaDu细胞线粒体膜通透性转换孔的影响,可见分光光度法检测细胞中乳酸的含量,WB法检测细胞中UCP2蛋白的表达变化。结果:与对照组相比,GEN可显著抑制FaDu细胞的增殖活力(P<0.05或P<0.01)、细胞中UCP2蛋白的表达(P<0.05),降低线粒体膜电位(P<0.05或P<0.01)、乳酸含量(P<0.0001),改变细胞线粒体膜孔道通透性,提高细胞中ROS水平(P<0.05或P<0.01)。结论:GEN通过调节细胞中UCP2的表达水平进而影响细胞的氧化还原能力及线粒体功能,从而发挥抑制人下咽癌FaDu细胞增殖并诱导细胞凋亡的作用。

咪达唑仑通过下调p300抑制人咽鳞癌FaDu细胞增殖

目的:探讨咪达唑仑(midazolam)抑制人咽鳞癌FaDu细胞增殖的机制。方法:咪达唑仑处理FaDu细胞后,MTT及BrdU掺入比色法检测细胞增殖情况,RT-PCR及Western blotting检测p300 mRNA及蛋白水平;沉默p300后,MTT比色法及BrdU掺入法检测细胞增殖情况,Western blotting检测细胞周期相关蛋白的表达水平。结果:咪达唑仑抑制FaDu细胞增殖;咪达唑仑抑制p300表达;沉默p300后p21及p27表达上调,p-Rb表达下调FaDu细胞增殖被抑制。结论:咪达唑仑通过下调p300抑制人咽鳞癌FaDu细胞增殖。

mAb-EGFR功能化修饰的纳米金棒靶向光热作用对下咽癌FADU细胞株和293T细胞株的温度影响

目的：探讨上皮生长因子受体单克隆抗体（epidermal grow th factor receptor monoclonal antibody ， mAb－EGFR）功能化修饰的纳米金棒靶向光热作用对下咽癌FADU细胞株和非肿瘤细胞的温度影响。方法在CTAB体系下合成实验所需纳米金棒并完成上皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor ，EGFR）单克隆抗体功能化修饰，用紫外分光光度计及电镜表征；以体外培养的下咽癌FADU 细胞和非肿瘤细胞293T 细胞系为实验材料，用western blot免疫印迹法定性比较两株细胞EGFR的表达及明确细胞内吞纳米金棒；Annexin－5／PI双染法荧光显微镜观察FADU细胞和293T 细胞凋亡情况；设定不同剂量纳米金浓度（15％、25％、35％），应用808 nm波长近红外激光照射6分钟，每隔一分钟检测细胞培养介质温度，并用X T T 法检测细胞存活率。结果纳米金棒浓度在15％～25％、近红外激光照射6分钟时，细胞温度为41～43℃，并且趋于稳定，对下咽癌细胞有明显的杀伤作用（P＜0．05），而对293T 细胞没有明显的杀伤作用，而纳米金棒浓度在35％时对下咽癌 FADU细胞和293T细胞都具有明显的杀伤作用（P＜0．05）。结论浓度为15％～25％ mAb－EGFR功能化修饰的纳米金棒在近红外激光照射6分钟时细胞温度升至41～43 ℃，对下咽癌细胞具有明显的杀伤作用，而对非肿瘤细胞无明显损伤。

PDGF-BB对Fadu细胞增殖侵袭的影响及可能的机制研究

目的:研究不同浓度血小板衍生生长因子PDGF-BB诱导后Fadu细胞增殖侵袭能力及粘着斑激酶(FAK)、基质金属蛋白酶-2(MMP2)、基质金属蛋白酶-9(MMP9)表达的变化。方法:不同浓度(0,1,10,20,100 ng/mL)PDGF-BB诱导人下咽癌Fadu细胞株,RT-PCR方法检测FAK及MMP9、MMP2mRNA表达变化,噻唑蓝法(MTT)检测细胞增殖,侵袭实验检测细胞侵袭能力,Western blot检测不同浓度PDGF-BB处理后Fadu细胞蛋白表达变化。结果:诱导后细胞FAK、MMP9、MMP2mRNA水平上调,在20 ng/mL或10 ng/mL浓度时达到最高(与对照组相比P<0.05);各组蛋白表达增加与mRNA基本一致,在20 ng/mL达高峰(与对照组相比P<0.05),MTT示各组增殖无明显变化(与对照组相比P>0.05)。导后侵袭细胞数在各组均有增加,在20 ng/mL组达高峰为(20.12±4.5)个,较对照组差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PDGF-BB上调Fadu细胞中FAK、MMP9及MMP2表达,从而使Fadu细胞侵袭能力增强,但对Fadu细胞增殖无明显影响。

三七皂苷R1调控PI3K/AKT/mTOR信号通路诱导人下咽鳞状细胞癌FaDu细胞凋亡和自噬

目的:探讨三七皂苷R1(notoginsenoside R1,NGR1)对人下咽鳞状细胞癌(hypopharyngeal squamous cell carcinoma,HSCC)FaDu细胞凋亡以及自噬的影响,并对其涉及的信号通路进行研究。方法:75μmol/L、150μmol/L、300μmol/L NGR1作用于FaDu细胞24 h后,采用MTT检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡;自噬双标腺病毒检测自噬流;Western blot检测自噬相关蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ以及PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达水平。结果:NGR1能够抑制FaDu细胞的增殖并促进细胞凋亡;NGR1可诱导FaDu细胞自噬,并呈一定浓度依赖性;Western blot结果显示,NGR1作用于Fa Du细胞24 h后,LC3Ⅱ表达明显增加,而p-PI3K、p-AKT、p-m TOR表达相较于Control组明显下降。结论:NGR1可抑制Fa Du细胞增殖,诱导细胞凋亡与自噬,其机制可能与抑制PI3K/AKT/m TOR信号通路有关。

三七皂苷R1上调miR-132对人下咽鳞癌FaDu细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用

目的探讨三七皂苷R1(NGR1)对人下咽鳞癌FaDu细胞中miR-132表达的影响及其抗肿瘤作用机制。方法以0、75、150、300μmol/L NGR1处理FaDu细胞,并分别标记为Control组、75μmol/L NGR1组、150μmol/L NGR1组、300μmol/L NGR1组。采用MTT法检测各组细胞增殖能力,Real-time PCR检测各组细胞miR-132相对表达量。再将FaDu细胞分为Control组(未处理)、NGR1组(给予150μmol/L NGR1)、miR-132 inhibitor-NC组(转染miR-132 inhibitor-NC)、miR-132 inhibitor组(转染miR-132 inhibitor)、miR-132 inhibitor-NC+NGR1组(转染inhibitor-NC后,给予150μmol/L NGR1处理)、miR-132 inhibitor+NGR1组(转染inhibitor后,给予150μmol/L NGR1处理),通过MTT、划痕以及Transwell侵袭试验检测抑制或上调miR-132后对FaDu细胞增殖、迁移以及侵袭能力的影响。结果Control组、75μmol/L NGR1组、150μmol/L NGR1组、300μmol/L NGR1组FaDu细胞增殖能力依次降低,细胞中miR-132的相对表达量依次升高,组间差异有统计学意义(P均<0.05)。与Control组相比,miR-132 inhibitor组FaDu细胞活力、迁移侵袭能力增强,NGR1组FaDu细胞活力、迁移、侵袭能力减弱(P均<0.05)。miR-132 inhibitor+NGR1组与NGR1组比较,FaDu细胞活力、迁移、侵袭能力增强(P均<0.05)。结论NGR1可能通过上调miR-132表达,抑制FaDu细胞的增殖、迁移以及侵袭。

左旋含羞草碱下调Bcl-2的表达并促进FaDu细胞凋亡的研究

目的探讨左旋含羞草碱对人咽鳞状细胞癌FaDu细胞Bcl-2、Bax等表达的影响及促进细胞凋亡的可能机制。方法培养和传代FaDu细胞,不同浓度左旋含羞草碱作用后观察细胞生长状况;流式细胞仪检测左旋含羞草碱与柠檬酸铁铵(FAC)对FaDu细胞凋亡的影响;CCK8法检测左旋含羞草碱与FAC干预后FaDu细胞的增殖活性;Westernblot法检测左旋含羞草碱处理FaDu细胞后Bcl-2、Bax、Bak、Bik、Bid等凋亡相关蛋白的表达。结果不同浓度的左旋含羞草碱作用于FaDu细胞后细胞的生长受到抑制;左旋含羞草碱200μmol/L组FaDu细胞凋亡最显著,左旋含羞草碱200μmol/L+FAC 50μmol/L组和左旋含羞草碱200μmol/L+FAC 100μmol/L组与对照组比较,细胞凋亡率无统计学差异(t分别=2.64、2.13,P均>0.05)。FAC 50μmol/L组和FAC 100μmol/L组FaDu细胞凋亡率均低于对照组(t分别=3.61、3.98,P均<0.05)。对FaDu细胞增殖活性的抑制作用由强到弱依次为左旋含羞草碱200μmol/L组、左旋含羞草碱200μmol/L+FAC 50μmol/L组、左旋含羞草碱200μmol/L+FAC 100μmol/L组;随着左旋含羞草碱浓度的增加,FaDu细胞Bcl-2蛋白的表达降低,Bax、Bak、Bik、Bid等蛋白的表达增高。结论200μmol/L左旋含羞草碱抑制FaDu细胞生长,促进细胞凋亡,是通过干扰肿瘤细胞铁代谢,激活Bcl-2家族蛋白发挥重要调控作用的线粒体通路实现的。

丙泊酚对人咽鳞癌FADu细胞系增殖、迁移、侵袭和凋亡的调节作用

目的:探讨丙泊酚对人咽鳞癌FADu细胞系增殖、迁移、侵袭和促进凋亡的潜在机制。方法:将不同浓度(0、5、10、20μg/mL)丙泊酚处理的人咽鳞癌FADu细胞系分别进行CCK-8毒性测试,平板克隆实验测试增殖能力,划痕实验检测细胞横向迁移能力,Transwell实验检测细胞纵向迁移能力和侵袭能力,通过Western免疫印迹实验检测Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3蛋白表达情况。采用SPSS 18.0软件包对数据进行统计学分析。结果:细胞毒性实验表明,人咽鳞癌FADu细胞系存活率在不同浓度丙泊酚处理后呈时间浓度依赖性下降(P<0.01),随着处理时间增加,细胞存活率显著下降。平板克隆实验表明,细胞增殖能力随着丙泊酚浓度增高而显著下降(P<0.01)。划痕实验表明,10、20μg/mL丙泊酚处理的细胞横向迁移能力与对照组有显著差异(P<0.05)。Transwell实验表明,丙泊酚有效抑制纵向迁移能力和侵袭能力(P<0.001),且呈浓度依赖性。Western免疫印迹实验检测表明,Bcl-2表达递减,Bax、Cleaved Caspase-3表达递增(P<0.01);随着丙泊酚处理浓度的增加,细胞显著凋亡。结论:丙泊酚抑制人咽鳞癌细胞FADu增殖、迁移和侵袭,并且通过抑制Bcl-2/Bax通路促进凋亡,其作用机制可能是促进Caspase-3的表达。

mAb-EGFR功能化修饰的金纳米棒靶向光热作用对人咽鳞状细胞癌FaDu细胞株和293T细胞株的细胞毒性分析

目的：探讨mAb-EGFR功能化修饰的金纳米棒靶向光热作用对人咽鳞状细胞癌FaDu细胞株和对非肿瘤细胞的细胞毒性,初步明确特定吸光度的金纳米棒在体外实验中所需剂量。方法：在CTAB体系下合成实验所需金纳米棒并且完成EGFR单克隆抗体功能化修饰,用紫外分光光度计及电镜表征,以体外培养的人咽鳞状细胞癌FaDu细胞和非肿瘤细胞293T细胞系为实验材料,用Western blot免疫印迹法定性比较两株细胞EGFR的表达,及明确细胞内吞金纳米棒。设定不同剂量金纳米棒浓度（15%、25%、35%）,乳酸脱氢酶法比较金纳米棒对FaDu细胞株和293T细胞株毒性差异及初步明确实验剂量。结果：金纳米棒对于FaDu细胞株的细胞毒性高于293T细胞株（P〈0.01）,在293T细胞株实验组中金纳米棒剂量浓度15%、25%两组间无明显差异,而这两组与35%剂量比较均差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：mAb-EGFR功能化修饰的金纳米棒在近红外激光照射时对人咽鳞状细胞癌细胞作用表现出比非肿瘤细胞更高的细胞毒性,对于特定吸光度功能化修饰的金纳米棒光热作用杀伤人咽鳞状细胞癌FaDu细胞株的安全剂量浓度为15%~25%。

人咽鳞癌Fadu细胞RNA负载人树突状细胞后体外诱导特异性CTL的研究

目的:探讨咽鳞癌细胞总RNA转染的树突状细胞(DC)疫苗体外诱导特异性抗肿瘤免疫的能力。方法:分离人脐血单个核细胞,经重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)、重组人IL-4(rhlL-4)诱导不成熟DC(iDC),提取人咽鳞癌细胞FaDu总RNA后,转染入人iDC,成为FaDuRNA/DC疫苗,用流式细胞仪检测DC表面分子CD40、CD80、CD83、CD86、HLA-DR的表达,混合淋巴细胞反应测定DCs刺激同种异基因T细胞增殖能力,用LDH法评估转染肿瘤总RNA的DC瘤苗的细胞毒性T淋巴细胞反应。结果:与转染前比较,人咽鳞癌细胞FaDu总RNA转染后脐血单核细胞来源DCs表面CD40、CD80、CD83、CD86、HLA-DR分子水平明显升高(P均<0.05);可显著促进T细胞增殖,在体外能诱导高效而特异的抗下咽癌免疫效应(P<0.05)。结论:人咽鳞癌细胞的总RNA转染的DC肿瘤疫苗能诱导CD8+、CD4+T细胞免疫,是较有临床应用前景的下咽癌免疫治疗方法。

盐霉素对头颈部鳞状细胞癌Fadu细胞增殖和侵袭的影响

目的:研究盐霉素对头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)Fadu细胞增殖和侵袭的影响,初步探讨盐霉素在HNSCC发生发展中的作用。方法:不同浓度盐霉素(2、4、8、16μMmol/L)作用于Fadu细胞,分别处理12、24、36、48 h,用MTT法检测盐霉素对Fadu细胞增殖的影响,Transwell小室法测定盐霉素对Fadu细胞迁移和侵袭能力的影响;Western blot法检测盐霉素对Fadu细胞中基质金属蛋白酶-7(MMP-7)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和基质金属蛋白酶-13(MMP-13)蛋白表达的影响。结果:盐霉素呈时间-剂量依赖性抑制Fadu细胞的增殖(P<0.05),使Fadu细胞的迁移和侵袭能力明显下降。盐霉素还使MMP-7和MMP-9蛋白的表达水平下调(P<0.05)。结论:盐霉素可以降低Fadu细胞的增殖能力,抑制该肿瘤细胞的迁移和侵袭能力,迁移和侵袭能力的改变可能与下调MMP-7和MMP-9的蛋白表达有关。

不同剂量柚皮素对FADU细胞生长的调节及机制研究

目的:探究不同剂量柚皮素(naringenin)对人下咽癌FADU细胞的作用及其相关机制。方法:以不同剂量(0、100、200、400、800μg/m L)柚皮素对FADU细胞进行处理,倒置显微镜观察细胞形态学变化;cck-8法检测药物作用后不同时间(24、48、72 h)FADU细胞增殖的变化;流式细胞仪检测柚皮素作用48 h细胞凋亡的变化;采用Transwell趋化小室体外侵袭实验测定48 h后细胞的侵袭能力的变化;蛋白免疫印迹法检测48 h后细胞内PI3K/AKT信号通路凋亡相关蛋白表达的影响。结果:cck-8法检测发现柚皮素抑制FADU细胞增殖作用明显,呈浓度和时间依赖性;流式细胞结果发现200,400,800μg/m L柚皮素作用48 h后,FADU细胞的凋亡率显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。Transwell体外侵袭实验发现,随着柚皮素浓度增加,FADU细胞穿透聚碳酸酯滤膜的能力逐渐减弱,柚皮素有效的抑制FADU细胞在体外的侵袭能力,呈浓度依赖性。同时,蛋白免疫印迹法凋亡相关蛋白检测结果表明,FADU细胞内BCL2、P-AKT和P-PI3K蛋白表达均受到明显抑制。结论:柚皮素能有效抑制人下咽癌FADU细胞的增殖、体外侵袭能力,诱导细胞凋亡;其机制与下调PI3K/AKT信号通路凋亡相关蛋白表达有关。

丹参酮ⅡA通过下调survivin促进顺铂对咽鳞状细胞癌Fadu细胞抑制作用的研究

目的:研究丹参酮ⅡA(TanⅡA)联合顺铂(DDP)对咽鳞癌Fadu细胞的肿瘤抑制作用及其机制。方法:利用CCK-8法检测TanⅡA联合DDP对Fadu细胞增殖抑制率的影响,流式细胞分析法检测细胞凋亡率变化及细胞周期分布情况,Western blotting法检测survivin、cleaved caspase-3及cleaved PARP蛋白的表达水平。结果:与丹参酮ⅡA和顺铂单独作用相比,两药联合作用于下咽鳞癌Fadu细胞72h后,细胞增殖受到明显抑制(均P<0.01),细胞周期阻滞于S期,凋亡细胞比例增加显著;caspase-3和PARP剪切段蛋白表达增多,survivin蛋白表达明显减少(P<0.01)。结论:丹参酮ⅡA联合顺铂具有协同抗咽鳞癌Fadu细胞的作用,其作用机制可能与下调凋亡抑制蛋白survivin的表达有关。

双氢青蒿素对下咽癌Fadu细胞内质网应激途径的作用

目的探讨双氢青蒿素(DHA)抑制下咽癌Fadu细胞增殖的机制,为其应用于临床抗肿瘤治疗提供理论依据。方法应用含不同浓度葡萄糖(5.5、10、15、25、50、100 mM)培养基,培养Fadu细胞36 h,Western blot检测p-STAT3及内质网应激相关蛋白GRP78的表达情况。应用不同浓度(10、20、40、80、160 μM)DHA在培养基糖浓度为25 mM条件下处理下咽癌Fadu细胞,24 h后用MTT比色法检测对细胞增殖的影响;Western blot检测p-STAT3、GRP78的表达情况。结果 DHA抑制下咽癌Fadu细胞增殖,且具剂量依赖性;低糖培养基可以降低p-STAT3的表达,增加GRP78的表达;DHA抑制p-STAT3表达,低浓度DHA刺激GRP78表达,随着浓度逐渐增高则抑制其表达。结论 DHA可以显著抑制下咽癌Fadu细胞的增殖,抑制p-STAT3的表达,诱导内质网应激,其作用机制可能与干扰细胞糖代谢密切相关。

STIM1基因在人下咽癌细胞系FaDu中的表达及对细胞凋亡的影响

目的探索STIM1基因在人下咽癌细胞系Fa Du中的表达情况及其表达沉默后对细胞凋亡的影响。方法培养人下咽癌Fa Du细胞,根据不同慢病毒感染分2组。STIM1-siRNA组为经STIM1-siRNA慢病毒感染的下咽癌细胞;对照组为经阴性对照慢病毒感染的下咽癌细胞。Real-Time PCR法检测STIM1在人下咽癌Fa Du细胞中的表达以及siRNA慢病毒感染后STIM1mRNA水平的表达;Western blot检测siRNA慢病毒感染后STIM1在蛋白水平的表达;流式细胞仪检测STIM1基因沉默后的人下咽癌Fa Du细胞的凋亡情况。采用SPSS 17.0软件对数据进行统计学分析。结果以GAPDH为内参(Ct=12.08±0.05),STIM1在下咽癌细胞系Fa Du中表达显著(Ct=22.21±0.05,P<0.01);Real-time PCR结果显示对照组和STIM1-siRNA组人下咽癌Fa Du细胞的表达值分别为(1.00±0.08)和(0.12±0.01),2组差异具有统计学意义(P<0.01);Western blot的结果显示,STIM1-siRNA组Fa Du细胞中STIM1蛋白明显受抑制,与Real-time PCR结果一致,慢病毒感染成功;流式细胞仪检测结果显示对照组凋亡率为(4.36±1.32)%;实验组凋亡率为(9.81±0.56)%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 STIM1基因与人下咽癌Fa Du细胞凋亡显著相关,人下咽癌Fa Du细胞中,STIM1可能抑制凋亡,可能成为下咽癌诊治的全新切入点。

雷公藤红素对FADU细胞增殖抑制和促进凋亡作用

目的:探索不同浓度雷公藤红素(celastrol)对下咽癌FADU细胞增殖抑制及促进其凋亡的机制。方法:用不同浓度(0μmol/L,1μmol/L,3μmol/L,5μmol/L)雷公藤红素作用于FADU细胞,倒置显微镜下观察雷公藤红素干预后细胞形态变化情况;CCK-8法检测不同时间段(24、48、72 h)药物干预后FADU细胞的增殖变化;流式细胞仪检测雷公藤红素干预24 h后细胞凋亡率变化;Western-Blot检测不同药物浓度作用24 h后FADU细胞PI3K信号通路中与凋亡相关的关键蛋白的表达变化情况。结果:与对照组相比,在倒置显微镜下FADU细胞形态明显改变,细胞数量明显减少,细胞边界模糊不清,漂浮细胞增多,而随着用药浓度的增加细胞的增殖能力被显著抑制,PI3K、AKT、P-m TOR、Bcl-2蛋白表达明显减少,并且肿瘤细胞的凋亡率明显增高。结论:雷公藤红素对FADU细胞具有显著的增殖抑制效果,同时能够促进细胞凋亡,其原理主要与通过下调PI3K信号通路凋亡相关蛋白的表达有关。

整合素亚单位α3对人下咽鳞癌FaDu细胞迁移和侵袭的影响

目的 观察人下咽鳞癌FaDu细胞整合素亚单位α(integrin subunitα, ITGA3)表达变化,探讨其对FaDu细胞迁移和侵袭能力的影响。方法 取对数生长期人下咽鳞癌FaDu细胞,分为转染组(转染siRNA-ITGA3质粒)、空载组(转染ITGA3空载质粒)、空白对照组(不作处理);取对数生长期人鼻咽上皮细胞NP69为正常细胞组(不作处理)。转染48 h, 4组采用实时荧光定量PCR法检测ITGA3 mRNA相对表达量,采用Western blot法检测ITGA3蛋白相对表达量;转染组、空载组、空白对照组采用细胞划痕实验检测细胞迁移能力,采用Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,采用Western blot法检测基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMP)-2、MMP-9蛋白相对表达量。结果 转染48 h,转染组(0.19±0.04、0.36±0.06)、空载组(0.95±0.13、0.91±0.10)、空白对照组(1.04±0.19、0.95±0.12)ITGA3 mRNA及蛋白相对表达量均高于正常细胞组(0.14±0.02、0.28±0.02)(P<0.05),转染组均低于空白对照组、空载组(P<0.05)。转染48 h,转染组细胞迁移率[(0.27±0.09)%]及MMP-2、MMP-9蛋白相对表达量(0.12±0.03、0.10±0.02)均低于空载组[(0.53±0.06)%、0.42±0.05、0.37±0.05]和空白对照组[(0.55±0.08)%、0.43±0.06、0.36±0.05](P<0.05),侵袭细胞数[(104.73±14.68)个]少于空载组[(210.29±20.14)个]和空白对照组[(214.54±21.56)个](P<0.05),空载组与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 FaDu细胞ITGA3表达上调,下调ITGA3表达可抑制FaDu细胞迁移和侵袭,其机制可能与抑制MMP-2、MMP-9蛋白表达有关。

去甲肾上腺素对FaDu鳞癌细胞系生物学行为的影响

目的研究去甲肾上腺素对人咽鳞状细胞癌细胞系FaDu增殖、侵袭及迁移等细胞生物学行为的影响。方法分别采用MTT实验、Transwell细胞侵袭及迁移实验和划痕实验检测不同浓度去甲肾上腺素对人咽鳞状细胞癌细胞系FaDu增殖、侵袭及迁移能力的影响,同时观察普萘洛尔预处理对去甲肾上腺素作用的干预效果。结果 MTT实验、Transwell实验和划痕实验结果表明浓度为10μmo/L的去甲肾上腺素可以显著促进人咽鳞状细胞癌细胞系FaDu的增殖、侵袭及迁移(P<0.001),而浓度为1μmol/L的普萘洛尔预处理可以有效抑制去甲肾上腺素对人咽鳞状细胞癌细胞系FaDu增殖、侵袭及迁移的促进作用(P<0.001)。结论去甲肾上腺素对人咽鳞状细胞癌细胞系FaDu的增殖、侵袭及迁移有促进作用,而非选择性β肾上腺素能受体阻断剂普萘洛尔可以抑制该促进作用。

羟基喜树碱对人咽鳞癌细胞系FaDu增殖、迁移、凋亡及周期的影响

目的探讨羟基喜树碱对人咽鳞癌细胞系FaDu增殖、迁移、凋亡及周期的影响。方法培养人咽鳞癌细胞系FaDu,采用MTT实验、Transwell细胞迁移实验和流式细胞仪检测不同浓度的羟基喜树碱对FaDu细胞增殖、迁移、凋亡及周期的影响。结果 MTT实验、Transwell侵袭实验结果表明一定浓度羟基喜树碱可以抑制Fadu细胞的增殖和迁移能力,流式细胞仪检测结果显示80μg/L羟基喜树碱可以将FaDu细胞阻滞在S期并促进其凋亡。结论羟基喜树碱可以抑制FaDu细胞的增殖和迁移能力并诱导其凋亡,且羟基喜树碱对FaDu的凋亡诱导作用与其对FaDu细胞周期的影响有关。

p27及HIF-1α在二甲双胍调节下咽癌细胞增殖与凋亡中的作用研究

目的探讨二甲双胍在下咽癌细胞增殖与凋亡中的作用,以及p27和缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1,HIF-1α)蛋白在该调节机制中的作用,为临床治疗下咽癌提供进一步的理论基础。方法以0、5、10 mmol/L二甲双胍干预体外培养人下咽癌Fadu细胞24 h,5 mmol/L组再干预至48 h,应用免疫细胞化学法检测p27和HIF-1α蛋白的表达。下咽癌移植瘤裸鼠随机分为对照组(不予二甲双胍干预),低剂量二甲双胍治疗组(met 40组,每日40 mg/kg),高剂量二甲双胍治疗组(met 200组,每日200 mg/kg),各5只,腹腔注射给药28 d后,取移植瘤测量肿瘤体积,计算抑瘤率;HE染色观察肿瘤细胞形态,免疫组织化学染色法检测p27和HIF-1α蛋白表达水平的变化。结果体外培养的Fadu细胞p27蛋白表达随二甲双胍干预浓度的增加及干预时间的延长而增加(P均<0.05),而HIF-1α蛋白表达随二甲双胍干预浓度的增加及干预时间的延长而降低(P均<0.05)。下咽癌移植瘤裸鼠药物干预后,met 40组和met 200组移植瘤体积均较对照组缩小(P均<0.05);移植瘤标本p27蛋白表达随给药浓度的增加而增加,HIF-1α蛋白表达随给药浓度增加而降低(P均<0.05)。结论二甲双胍可有效抑制下咽癌细胞体内、体外的增殖并促进其凋亡,为临床治疗下咽癌提供进一步的理论依据。