防己茯苓汤对心肌纤维化小鼠巨噬细胞极化和氧化应激的影响

目的:探讨防己茯苓汤对心肌纤维化小鼠巨噬细胞极化和氧化应激的影响。方法:通过皮下注射异丙肾上腺素(5 mg·kg^(-1)·d^(-1))构建心肌纤维化小鼠模型。将50只C57BL/6J小鼠随机分为假手术组、模型组、防己茯苓汤低、高剂量组、酒石酸美托洛尔(Meto)组,每组10只。假手术组、模型给予相应体积生理盐水灌胃,防己茯苓汤低、高剂量组分别予以防己茯苓汤低、高剂量灌胃(3.315、13.26 g·kg^(-1)·d^(-1)),Meto组予以酒石酸Meto灌胃(15 mg·kg^(-1)·d^(-1))。2周后,观察小鼠心脏形态,计算平均细胞横截面积、心脏质量指数和心胫比,组织病理学方法观察心肌胶原沉积,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))、炎症因子指标[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-10]和氧化应激指标[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)]的表达水平,免疫组织化学染色观察心肌组织CD86和CD206蛋白表达水平。结果:与模型组比较,防己茯苓汤低、高剂量组和Meto组小鼠心脏外观形态明显减小,平均心肌细胞横截面积、心脏质量指数和心胫比显著降低(P<0.01);血清CK-MB、TGF-β1水平明显降低(P<0.05,P<0.01);血清促炎细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01),抗炎细胞因子IL-10明显升高(P<0.05);炎症细胞浸润、心肌损伤、胶原沉积和纤维化程度明显减轻;巨噬细胞极化标志物CD86表达水平显著降低(P<0.01),CD206表达水平显著升高(P<0.01);氧化应激指标MDA表达水平显著升高(P<0.01),SOD、GSH表达水平显著降低(P<0.01)。结论:防己茯苓汤可以改善异丙肾上腺素诱导的心肌纤维化,其机制可能是通过调控巨噬细胞极化和氧化应激发挥作用。

基于网络药理学和分子对接探究防己茯苓汤治疗缺血再灌注急性肾损伤的作用机制

目的:基于网络药理学和实验验证探究防己茯苓汤治疗缺血再灌注急性肾损伤(AKI)的作用机制。方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)数据库和文献挖掘收集防己茯苓汤活性成分,利用SwissTargetPrediction预测活性成分作用靶点;借助GeneCards、在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)、疾病相关的基因与突变位点数据库(DisGeNET)、治疗靶标数据库(TTD)收集AKI靶点;利用STRING平台构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络;采用Metascape平台对核心靶点进行基因本体(GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析;利用Cytoscape软件构建药物-活性成分-作用靶点-疾病网络图和活性成分-作用靶点-信号通路网络图;使用AutoDock进行分子对接;最后采用动物实验验证分析结果。结果:筛选出防己茯苓汤活性成分137种及药物靶点858个,AKI疾病靶点1294个,防己茯苓汤治疗AKI作用靶点267个,其中磷脂酰肌醇3-激酶调节亚基1(PIK3R1)、磷脂酰肌醇3-激酶催化亚单位α(PIK3CA)、原癌基因酪氨酸蛋白激酶(SRC)、蛋白激酶B1(Akt1)、促分裂原活化的蛋白激酶3(MAPK3)为防己茯苓汤治疗AKI的关键靶点,GO富集分析得到1609个结果,主要涉及细胞对脂质的反应、膜筏、蛋白激酶活性等,KEGG通路分析则与PI3K/Akt信号通路、趋化因子信号通路、Toll样受体(TLR)信号通路等140条通路有关,分子对接则发现核心活性成分和关键靶点均有良好的结合能力,苏木精-伊红(HE)染色结果表明防己茯苓汤能明显改善AKI的病理学状态,血清学结果则显示血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)水平明显下降。结论:该研究初步探讨了防己茯苓汤治疗AKI的作用机制,发现防己茯苓汤治疗AKI具有多成分、多靶点、多通路的作用特点,为后续进一步深入研究具体作用机制奠定基础。