肠道菌群介导次级胆汁酸及其受体调节肠黏膜免疫机制的研究进展

胆汁酸是一种胆固醇衍生物,对提高每日膳食中脂肪的消化与吸收率具有显著功效。在肝内,细胞利用胆固醇形成初级胆汁酸,初级胆汁酸在肠道菌群产生的蛋白酶的影响下产生次级胆汁酸,极大地扩大了肠道环境的分子多样性。目前最常见的次级胆汁酸受体为跨膜G蛋白胆汁酸偶联受体-5(GPBAR1,也被称为TGR5)和核受体法尼类X受体(FXR),在调节机体健康中起着多效性作用,特别是可以维持肠道菌群稳态和黏膜免疫系统平衡。本综述讨论了胆汁酸与肠道菌群的关系、次级胆汁酸的代谢以及次级胆汁酸及其受体在肠道免疫系统中的不同作用机制,可为肠道菌群在动物肠道疾病的防治以及相关研究等方面提供理论基础。

鹅去氧胆酸通过FXR调控高脂饮食诱导小鼠肠道GLP-1表达水平改善胰岛素抵抗的作用

目的 探究鹅去氧胆酸(chenodeoxycholic acid, CDCA)通过FXR对高脂饮食诱导小鼠肠道GLP-1表达水平的影响及相关机制。方法 C57BL/6小鼠40只分为对照组(Control组)、高脂饮食组(HFD组)、HFD+CDCA组、HFD+Z-Gug(FXR拮抗剂)组、HFD+CDCA+Z-Gug组,每组8只。干预8周,期间每周检测体质量及24 h摄食量。第8周进行口服葡萄糖耐量实验(OGTT)、腹腔葡萄糖耐量实验(IPGTT)。小鼠处死后,检测血清学指标GLu、TG、CHO、LDL-C、HDL-C;免疫荧光检测小鼠肠道组织GLP-1及FXR表达水平;RT-qPCR检测炎性因子TNF-α、IL-6、IL-1β、Gcg及FXR mRNA表达;ELISA试剂盒检测血清GLP-1含量;流式细胞术检测小肠IELs亚群比例及CD26/DPP4表达水平。结果 与Control组相比,HFD组小鼠体质量增加,血清糖脂代谢异常,口服糖耐量受损,胃肠激素分泌减弱(P<0.05);FXR mRNA及蛋白表达水平增加,Gcg mRNA表达及GLP-1分泌水平下降(P<0.05);肠道炎性因子TNF-α、IL-6、IL-1β mRNA表达水平升高(P<0.05);TCRαβ+IELs、TCRαβ+CD8αα+IELs与TCRαβ+CD8αβ+IELs细胞比例增加,TCRγδ+IELs比例下降,IELs总CD26/DPP4表达增加(P<0.05)。与HFD组相比,HFD+CDCA组小鼠体质量增加,口服糖耐量异常,胃肠激素分泌减弱(P<0.05);肠组织FXR mRNA及蛋白表达增加,Gcg mRNA表达及GLP-1分泌降低(P<0.05);肠道炎性因子表达降低,TCRαβ+IELs、TCRαβ+CD8αα+IELs与TCRαβ+CD8αβ+IELs细胞比例下降,TCRγδ+IELs占IELs比例升高,IELs总CD26/DPP4表达升高(P<0.05),以上作用在加入FXR拮抗剂Z-Gug后被明显抑制(P<0.05)。结论 CDCA可能通过激活FXR受体抑制肠道组织GLP-1表达,减少GLP-1分泌;同时可能抑制相关炎症因子表达调节IELs亚群比例,上调CD26/DPP4表达水平,促进GLP-1降解,加重胰岛素抵抗。

猪去氧胆酸对脂肪变性肝细胞活性的影响及其机制

目的探讨猪去氧胆酸(HDCA)在代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)发展中的作用及机制,为进一步阐明MAFLD的发病机制提供新的理论依据。方法L02肝细胞作为实验细胞,利用棕榈酸诱导L02细胞发生脂肪变性。采用FXR siRNA干扰链技术,构建FXR低表达的肝细胞株。CCK8实验检测HDCA在不同浓度(0、100、200、300、400μmol/L)和时间(12、24、36、48 h)对L02脂肪变性肝细胞的影响。通过qRT-PCR检测法尼醇X受体(FXR)、增殖细胞核抗原(PCNA)、周期蛋白D1(Cyclin D1)、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)和蛋白激酶B(AKT)mRNA表达;Western Blot检测FXR、Cyclin D1、PCNA、PI3K、pPI3K、AKT和p-AKT蛋白表达。计量资料服从正态分布且方差齐时多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用Tukey HSD检验;服从正态分布但方差不齐时采用Welch方差分析,进一步两两比较采用Games-Howell检验。两组间比较采用成组t检验。结果CCK8检测结果显示,300μmol/L HDCA处理的L02细胞和脂肪变性肝细胞活性明显下降(P值均<0.05);qRT-PCR检测结果显示,FXR mRNA表达增强,PCNA、Cyclin D1、PI3K、AKT的mRNA表达下降,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。Western Blot检测结果显示,FXR蛋白表达明显上升(P<0.05);干扰L02细胞FXR的表达后,PCNA、PI3K、p-PI3K、AKT和p-AKT的蛋白表达均明显增加(P值均<0.05)。结论HDCA通过上调FXR表达抑制PI3K/AKT信号通路,从而造成脂肪变性肝细胞活性下降。

基于FXR-FGF19通路研究益生菌对胆总管结石患者胆汁酸代谢的影响

背景:胆总管结石在取石术后有较高的复发率。近年研究表明肠道微生态失衡与胆固醇结石的形成有关。目的:探究益生菌干预对胆固醇结石高危人群血清脂多糖(LPS)以及胆汁酸代谢指标的影响。方法:选取2021年6月—2023年6月在石河子大学第一附属医院行ERCP取石术的胆总管结石患者60例,收集胆汁和粪便样本行细菌培养。将患者随机分为对照组和益生菌干预组,对照组取石术后予常规支持治疗,干预组在常规治疗的基础上服用双歧杆菌三联活菌肠溶胶囊420 mg,每日2次,连续6个月。检测治疗前后革兰阴性菌细胞壁成分LPS、胆汁酸代谢关键分子成纤维细胞生长因子19(FGF19)和胆汁酸合成限速酶胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)血清水平的变化。结果:胆总管结石患者胆汁、粪便细菌培养显示主要致病菌为大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌。ERCP取石术后6个月,患者血清LPS、FGF19水平明显降低,CYP7A1水平明显升高(P均<0.05),益生菌干预组数据变化较对照组更为显著(P均<0.05)。结论:口服益生菌制剂可降低胆固醇结石高危人群的血清LPS水平,同时调节胆汁酸经肠肝循环代谢的经典通路法尼酯X受体(FXR)-FGF19通路,从而减少胆汁中的胆固醇过饱和,降低胆固醇结石的形成概率。

核受体FXR调控内质网应激途径缓解小鼠溃疡性结肠炎病理损伤

目的 探究法尼醇X受体(farnesoid X receptor,FXR)激活对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)模型小鼠结肠组织病理损伤的影响及其作用机制。方法 将40只C57BL/6雄性健康小鼠随机分为对照组、模型组、奥贝胆酸(obeticholic acid,OCA)组、奥贝胆酸+衣霉素(OCA+TM)组,记录各组小鼠体质量、粪便性状与隐血程度、疾病活动指数(disease activity index,DAI)、剥离结肠长度。ELISA法检测各组小鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量,HE染色观察各组小鼠结肠组织病理形态变化,免疫组化染色检测各组小鼠结肠组织中GRP78和CCAAT/CHOP阳性表达情况,RT-qPCR和Western blotting检测各组小鼠结肠组织中GRP78和CHOP在mRNA与蛋白水平上的表达变化。结果 与对照组比较,模型组小鼠DAI升高,结肠长度缩短,血清中IL-1β、IL-6、TNF-α含量均增加,结肠组织发生明显损伤,可见广泛炎性细胞浸润,结肠组织中GRP78和CHOP阳性染色增强,GRP78和CHOP的mRNA相对表达量和蛋白相对表达量均上调(P<0.05);与模型组比较,OCA组小鼠DAI降低,结肠长度增加,血清中IL-1β、IL-6、TNF-α含量均减少,结肠组织损伤程度明显改善,未见炎性细胞浸润,结肠组织中GRP78和CHOP阳性染色减弱,且GRP78和CHOP的mRNA相对表达量与蛋白相对表达量均下调(P<0.05);而与OCA组比较,OCA+TM组小鼠DAI升高而结肠长度缩短,血清中IL-1β、IL-6、TNF-α含量也均增加,结肠组织损伤,表现出明显的溃疡现象,同时,结肠组织中GRP78和CHOP阳性染色增强,GRP78和CHOP的mRNA相对表达量与蛋白相对表达量也均上调(P<0.05)。结论 在UC小鼠模型中激活FXR能够有效缓解结肠组织病理损伤,该机制可能与调控内质网应激途径有关。

FXR激动剂在非酒精性脂肪性肝炎治疗中的研究进展

非酒精性脂肪性肝炎(Non-alcoholic steatohepatitis,NASH),又称代谢性脂肪性肝炎,是病理变化与酒精性肝炎相似但无过量饮酒史的临床综合征,好发于中年特别是超重肥胖个体。非酒精性脂肪性肝炎与肥胖、胰岛素抵抗、2型糖尿病、高脂血症等代谢紊乱关系密切,主要特征为肝细胞大泡性脂肪变伴肝细胞损伤和炎症,严重者可发展为肝硬化,但至今NASH尚无得到批准的治疗方案。在寻找有效的治疗方法时,解决代谢失调、炎症和抗纤维化的新策略不断涌现。法尼类X受体(Farnesoid X receptor,FXR)除了是胆汁酸代谢和肠肝循环的关键调节剂外,还参与调节代谢稳态,使其成为NASH中有吸引力的治疗靶点。本文综述了FXR激动剂对NASH治疗的研究进展。

肝肠法尼酯X受体在代谢性疾病中的作用研究进展

法尼酯X受体(FXR)具有多种生物学功能,其在代谢性疾病中发挥的重要作用已引起研究者们的极大关注。FXR高表达于肝脏和肠道,越来越多的研究表明,肝肠FXR可以通过调控多种代谢通路影响机体糖脂、能量代谢发挥代谢改善作用,因此以肝肠FXR为靶点的激动剂及拮抗剂研究已成为探索代谢性疾病干预的有效手段。肝肠FXR的激活与抑制在防治代谢性疾病中的作用机制:肝脏FXR的激活多可通过肝脏小分子异源二聚体(SHP)依赖的方式加速下游脂肪酸氧化分解及糖代谢,抑制脂质合成改善代谢;而肠道FXR的抑制与激活则均可依赖于肠道纤维母细胞生长因子通过肠肝循环调节胆汁酸代谢产生机体代谢改善作用。与此同时,临床试验阶段的不同类型FXR激动剂与拮抗剂在改善代谢的同时不可避免地出现了不良反应,限制了其应用前景。基于肝肠FXR在代谢性疾病中相反的作用,以及肠道FXR调控糖脂代谢的复杂性,为此类药物的研发带来了新的挑战与思路。

法尼醇X受体激动剂对非酒精性脂肪性肝炎治疗作用研究进展

代谢相关脂肪性肝病(metabolic dysfunction-associated fatty liver disease,MAFLD)的全球患病率为20%~40%,伴随着沉重的疾病负担和晚期疾病相关的高病死率,目前尚无批准治疗MAFLD的标准药物。法尼醇X受体(farnesoid X receptor,FXR)具有调控糖脂代谢和改善胰岛素抵抗的作用,其中奥贝胆酸作为FXR激动剂,已被多项研究证实可改善MAFLD患者的肝组织学特征。本文主要阐述FXR激动剂的作用机制和研究现状以供临床参考。

沙棘熊果酸对酒精性肝损伤大鼠肝FXR信号通路的影响

目的:初步探讨沙棘熊果酸对酒精性肝损伤大鼠肝法尼醇X受体(Farnesoid X receptor,FXR)信号通路关键蛋白表达的影响。方法:6周龄SPF级SD大鼠随机分为4组,每组9只,分别为正常对照组、酒精模型组、熊果酸对照组和熊果酸+酒精组,干预时间为8周。采用苏木精-伊红(H&E)染色法观察大鼠肝组织病理学变化;测定大鼠血清中谷丙转氨酶(Alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(Aspartateaminotransferase,AST)活力和血清总胆汁酸(Total bile acid,TBA)、肝脏甘油三酯(Triglyceride,TG)、总胆固醇(Total cholesterol,TC)含量;酶联免疫吸附(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测血清细胞因子肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素1β(Interleukin 1β,IL-1β)、白细胞介素10(Interleukin 10,IL-10)含量;免疫印迹法(Western blotting)测定大鼠肝FXR信号通路相关蛋白表达情况。结果:与正常对照组相比,酒精模型组大鼠肝脏存在大小不一的脂肪空泡和大量炎性细胞浸润;血清ALT、AST活力,TNF-ɑ、IL-1β水平,TBA含量和肝脏TG、TC含量均显著升高(P<0.05)、IL-10水平显著下降(P<0.05)。经熊果酸干预后,肝脏脂肪变性得到明显改善,炎性细胞浸润减少;血清ALT、AST活力,TNF-α、IL-1β水平,TBA含量和肝脏TG含量均有不同程度的显著下降(P<0.05),IL-10水平显著提高(P<0.05)。Western blotting结果显示,与正常对照组相比,模型组大鼠肝脏FXR蛋白表达显著降低(P<0.05),CYP7A1和SREBP-1c蛋白表达均显著升高(P<0.05);而经熊果酸干预后,FXR蛋白表达明显提高,CYP7A1及SREBP-1c蛋白表达明显下调,且差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:沙棘熊果酸能够明显改善酒精诱导的肝脏损伤,其作用机制可能与上调肝FXR、抑制CYP7A1和SREBP-1c的蛋白表达,从而维胆汁酸稳态、调节脂质代谢有关。

牛磺鹅去氧胆酸对动物免疫的调控作用及其营养调控研究进展

牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA)作为胆汁酸(BA)活性物质之一,其可通过激活G蛋白偶联受体5(TGR5)/糖皮质激素受体(GR)相关通路降低促炎因子和增加抗炎因子表达量,发挥抗炎作用。TCDCA在肠道菌群作用下解离为鹅去氧胆酸后与法尼醇X受体(FXR)结合,负反馈调节BA合成,减少胆汁淤积,减轻炎症。此外,运用营养手段调控肠肝轴TCDCA含量将改善动物的糖脂代谢、热应激、肝损伤及生长水平。因此,本文重点综述TCDCA作用于TGR5、GR和FXR相关通路对动物免疫的调节机制及其营养调控研究进展,为TCDCA预防和治疗动物疾病提供参考。

胆汁酸与非酒精性脂肪性肝病的关系

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患病率的迅速增加亟需新的治疗方法来预防疾病进展为肝纤维化、肝硬化及肝癌。尽管已经为阐明NAFLD疾病进展的病理机制做出了不懈努力,但目前尚无有效的治疗方法。胆汁酸(BA)通过激活核受体和G蛋白偶联受体调控全身代谢,已被确定为参与脂质、葡萄糖和能量代谢的重要信号分子。BA稳态的失调与NAFLD疾病的严重程度有关。本文总结了BA代谢中的重要配体和其在NAFLD进展中的作用,以期为靶向BA信使治疗NAFLD提供依据。

酒精性肝病中基于胆汁酸的调控机制及潜在治疗靶点

胆汁淤积是酒精性肝病(alcoholic liver disease,ALD)的关键致病因素,不同程度的胆汁淤积发生在ALD的各个阶段。然而,与胆汁淤积有关的病理生理学机制和生物标志物很大程度上是未知的。胆汁淤积主要以胆汁酸(bile acid,BA)转运和平衡紊乱为特点。长期饮酒可以导致人体胆汁酸池大小以及组成异常变化,胆汁酸池的变化也可能影响ALD的严重程度。因此,在ALD的基础和临床研究中,调节胆汁酸代谢及其信号通路被认为是人类ALD的一种潜在治疗策略。本文总结了ALD中基于胆汁酸调节机制的新进展,并提出了ALD各阶段胆汁酸变化不同的新视角,归纳了基于胆汁酸信号通路治疗ALD的潜在靶点,以期为ALD研究和治疗提供新思考。

护肝布祖热方对大鼠肝内胆汁淤积性肝损伤的影响及机制

目的研究护肝布祖热方(HBF)对大鼠肝内胆汁淤积性肝损伤的影响及潜在机制。方法将大鼠随机分为对照组(control组)、模型组(model组)、熊去氧胆酸(UDCA)组(阳性对照,60mg/kg)和HBF低、中、高剂量组(HBF-L、HBF-M、HBF-H组,0.4、0.8、1.6g/kg),每组6只。各药物组大鼠每天灌胃相应药液1次,连续7d;control组和model组大鼠灌胃等体积水。实验第5天,除control组外,其余各组大鼠均单次灌胃α-异硫氰酸萘酯橄榄油溶液(100 mg/kg)建模。造模48 h后,检测大鼠血清中肝功能指标(天冬氨酸转氨酶、丙氨酸转氨酶、碱性磷酸酶、总胆汁酸、总胆红素、直接胆红素)含量和氧化应激指标[丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶]水平,观察肝组织病理形态变化,检测肝组织中炎症相关因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)]和法尼酯X受体(FXR)信号通路相关因子[FXR、小异源二聚体伴侣受体(SHP)、多药耐药蛋白2(MRP2)、胆盐输出泵转运蛋白(BSEP)、钠离子依赖性牛磺胆酸共转运蛋白(NTCP)、有机阴离子转运多肽2(OATP2)和胆固醇7α羟化酶(CYP7A1)]mRNA,以及FXR信号通路相关蛋白(FXR、MRP2、BSEP、NTCP)和核因子κB p65(NF-κB p65)蛋白的表达情况。结果与model组比较,HBF-H组大鼠血清中上述肝功能指标含量和MDA水平,肝组织中上述炎症相关因子mRNA、CYP7A1 mRNA的表达水平以及NF-κBp65蛋白的相对表达量均显著降低,血清中GSH水平和肝组织中FXR、SHP、MRP2、BSEP、NTCP、OATP2mRNA的表达水平以及FXR、MRP2、BSEP、NTCP蛋白的相对表达量均显著升高(P<0.05或P<0.01),肝组织病理改变明显好转;HBF-L组、HBF-M组、UDCA组大鼠均只有部分指标显著逆转(P<0.05或P<0.01)。结论HBF可预防大鼠肝内胆汁淤积性肝损伤,此作用可能与激活FXR信号通路、减轻炎症和氧化应激有关。

肠道菌群-胆汁酸途径对2型糖尿病的影响

目的综述肠道菌群-胆汁酸通路对2型糖尿病(T2DM)发生发展及防治的研究进展,为基于该通路的糖尿病防治提供文献参考,为开发治疗糖尿病的创新治疗方法提供思路。方法通过查阅国内外相关文献,我们综述了肠道菌群与T2DM的相关性、胆汁酸和T2DM相关性、肠道菌群与胆汁酸代谢的相关性,并重点论述了肠道菌群-胆汁酸通路在T2DM发生发展及防治中的研究进展,强调该路径对血糖调节方面的局限性和挑战,并探讨如何基于该路径开发防治T2DM的创新方法。结果与结论肠道菌群-胆汁酸通路可介导T2DM的发生发展。肠道菌群可通过一系列酶促反应,影响初级胆汁酸转变为次级胆汁酸,随后通过法尼醇X受体(FXR)、G蛋白偶联胆汁酸受体5(TGR5)调节信号传导,影响宿主的代谢途径。FXR和TGR5受体已成为糖尿病等代谢疾病研究的新靶点,开发肠道特异性FXR拮抗剂和TGR5激动剂可能是未来治疗T2DM的一个很有前途的方法,然而其长期效果值得进一步评估。

有机溶质转运体α-β在动物胆汁酸代谢中的作用

有机溶质转运体α-β(OSTα-OSTβ)是影响胆汁酸代谢的关键因子之一,其主要通过转运胆汁酸,活化法尼醇X受体(FXR),激活胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)途径,调控胆汁酸合成量。且OSTα-OSTβ表达缺失时,胆汁酸合成减少,脂质吸收率降低,对胰岛素信号传导的损伤减轻,维持胰岛素敏感性,改善机体健康状况。本文就OSTα-OSTβ对动物胆汁酸的调控作用进行综述,旨在为OSTα-OSTβ在畜牧生产中的应用提供参考。

FXR通过调控脂滴蛋白PLIN5延缓纤维化的调控机制

目的:本研究旨在揭示法尼醇X受体(farnesoid X receptor,FXR)通过调控脂滴包被蛋白5(perilipin 5, PLIN5)从而延缓肝纤维化的调控机制。方法:利用生物信息学预测PLIN5基因上游的FXR反应元件(FXR response element, FXRE),构建双荧光素酶报告基因体系以检测所预测位点与FXR的结合效应;使用转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1, TGF-β1)诱导人肝星状细胞LX-2构建肝纤维化模型;过表达FXR或PLIN5后,qPCR和Western blot检测PLIN5、α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)和I型胶原蛋白(collagenⅠ)mRNA水平和蛋白水平;油红O染色检测脂滴的生成,定量检测甘油三酯(triglyceride,TG)的含量。结果:确定了PLIN5基因启动子区域含有已知的反向重复序列-1(inverted repeats-1,IR-1);FXR激活后能够上调LX-2中PLIN5的基因表达(P<0.01);过表达PLIN5能够促进脂滴的形成,TG含量的增加,并显著降低TGF-β1诱导的纤维化基因的表达(P<0.05);FXR激活后没有显示出抑制LX-2活化的作用。结论:PLIN5基因上游存在已知的FXRE位点能与FXR结合,PLIN5过表达能促进脂滴的形成和抑制LX-2细胞的活化,FXR可能是通过调控PLIN5的表达部分抑制肝纤维化。

基于胆汁酸信号通路研究栀子苷治疗小鼠非酒精性脂肪性肝炎的效应机制

目的观察栀子苷对非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)小鼠胆汁酸代谢及其信号通路的干预作用,探讨栀子苷治疗NASH的作用机制。方法高脂饮食喂养14周诱导NASH小鼠模型,实验设正常组、模型组、栀子苷组和奥贝胆酸组,从第11周开始,栀子苷组和奥贝胆酸组小鼠分别按90 mg·kg^(-1)·d^(-1)和10 mg·kg^(-1)·d^(-1)的剂量灌胃给予栀子苷和奥贝胆酸,正常组和模型组小鼠灌胃给予等体积的饮用水。HE染色观察肝组织病理变化,生化试剂盒检测肝组织甘油三酯(triglyceride,TG)含量和血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)、空腹胰岛素(fasting insulin,FINS)、空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)水平,靶向代谢组学方法检测肠内胆汁酸谱,RT-PCR方法检测肝组织法尼醇X受体(Farnesoid X receptor,FXR)、小异二聚体伴侣(Small Heterodimer Partner,SHP)、固醇调节元件结合蛋白1(sterol-regulatory element binding protein 1,SREBP1)、脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FASN)、硬脂酰辅酶A去饱和酶1(stearoyl-CoA desaturase 1,SCD1)、肉毒碱棕榈酰基转移酶1A(carnitine Palmitoyltransferase 1A,CPT1A)、脂蛋白脂肪酶(lipoprotein lipase,LPL)、胆固醇7-羟化酶(cholesterol 7α-hydroxylase,CYP7A1)、胆汁酸盐输出泵(bile salt export pump,BSEP)、钠离子-牛磺胆酸共转运多肽(sodium taurocholate cotransporting polypeptide,NTCP)、成纤维细胞生长因子受体4(fibroblast growth factor receptor 4,FGFR4)和小肠FXR、成纤维细胞生长因子15(fibroblast growth factor 15,FGF15)的基因表达水平。结果栀子苷和奥贝胆酸均能显著改善NASH小鼠的肝组织病理变化,降低NASH小鼠肝组织TG含量及血清ALT、LDL-C、FINS、FBG水平(P<0.01)。栀子苷还能显著降低肠内容物TaMCA、TβMCA含量和肝组织SREBP1、FASN、SCD1、CYP7A1基因表达水平(P<0.01),显著升高肠内容物βCDCA的含量及小肠FXR、FGF15和肝组织FXR、SHP、BSEP、CPT1A、LPL的基因表达水平(P<0.05)。结论栀子苷能调节TaMCA、TβMCA、βCDCA等影响FXR活性的胆汁酸的表达,进而激活FXR信号通路,这可能是栀子苷治疗NASH的重要机制。

肝细胞FXR对日本血吸虫感染小鼠肠道菌群的影响

目的分析肝细胞法尼醇X受体(farnesoid X receptor,FXR)特异性敲除对日本血吸虫感染小鼠肠道菌群的影响。方法6~8周龄野生型雄性C57BL/6J和肝细胞FXR特异性敲除小鼠(FXR-HKO)随机分为4组:野生型小鼠正常对照组(WT,n=5)、FXR-HKO小鼠正常对照组(FXR-HKO,n=6)、野生型小鼠日本血吸虫感染组(Sj-WT,n=6)、FXR-HKO小鼠日本血吸虫感染组(Sj-FXR-HKO,n=5)。其中,感染组每只小鼠感染(15±1)条日本血吸虫尾蚴,感染第5周处死小鼠,在无菌条件下收取小鼠结肠内容物,进行16S rDNA测序,比较各组之间的肠道菌群多样性和丰度差异。结果Beta多样性分析结果显示,Sj-WT组和Sj-FXR-HKO组小鼠的肠道菌群与正常小鼠肠道菌群有明显的分群。在门水平上,与正常对照组相比,Sj-WT组和Sj-FXR-HKO组小鼠肠道中拟杆菌门的丰度升高,厚壁菌门丰度降低,厚壁菌门与拟杆菌门丰度比值明显降低(均P<0.05)。在属水平上,与正常对照组相比,日本血吸虫感染后小鼠肠道中拟杆菌属的丰度明显升高(均P<0.05),Sj-FXR-HKO组拟杆菌属的丰度比Sj-WT组的升高更明显(P<0.05),其中Sj-WT组脱硫弧菌属、杜氏菌属、乳杆菌属的丰度显著降低(均P<0.05),Sj-FXR-HKO组瘤胃球菌科属、毛罗菌科、杜氏菌属、乳杆菌属的丰度明显降低(均P<0.05)。结论肝细胞FXR特异性敲除影响了日本血吸虫感染小鼠肠道菌群稳态,为后续进一步研究FXR-肠道菌群在血吸虫病中的作用及机制奠定了扎实的实验基础。

从法尼酯X受体探讨女子以肝为先天理论与乳腺癌发病的关系

当代常见的女性恶性肿瘤之一就是乳腺癌,这一疾病严重地威胁了女性的身心健康。肝脏在乳腺癌的疾病发病中具有重要的作用,“女子以肝为先天”这一论述在清代中医名著《临证指南医案》中曾被明确提出,在中医基础理论中,肝脏为疏泄和藏血重要脏器,因而情志失调常引起肝之疏泄失调,进而导致人身气机之郁结不畅,肝气不舒又致血行不畅,乳络闭阻,日久疾病发生。法尼酯X受体是以胆汁酸为配体的孤儿核受体,主要分布在肝内和胃肠道内。近年来,多项研究表明法尼酯X受体在乳腺癌的发病及远期预后中具有重要作用。在女子以肝为先天的理论基础,探讨法尼酯X受体与乳腺癌发病的关系为临床提供更多治疗乳腺癌的思路。

法尼醇X受体对肺成纤维细胞衰老的影响

目的探究法尼醇X受体(FXR)对肺成纤维细胞衰老的影响。方法6~8周龄野生型雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、5 mg/kg博来霉素(BLM)致小鼠肺纤维化组,免疫组化染色比较2组小鼠肺组织FXR表达量。体外培养人胚肺成纤维细胞HFL-1,通过加入FXR激动剂GW-4064,同时设转化生长因子-β1(TGF-β1)处理致HFL-1细胞纤维化对照组,观察HFL-1细胞FXR的表达情况;在上述体外处理的情况下,加入FXR抑制剂Z-GS,通过Western blot观察加入FXR激动剂和抑制剂后各组细胞衰老标志物P16、P21和P53的表达情况,通过β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色方法检测细胞SA-β-Gal阳性率。结果与正常对照组相比,无论体内还是体外,纤维化使肺细胞的FXR表达量升高;体外Western blot和SA-β-Gal染色结果显示,加入FXR激动剂后,衰老标志物P16、P21和P53的表达量升高,SA-β-Gal阳性细胞增加;加入FXR抑制剂后,衰老标志物P16、P21和P53的表达量降低,SA-β-Gal阳性细胞减少。结论FXR参与了肺成纤维细胞的衰老,这为进一步研究FXR诱导肺成纤维细胞衰老、促进肺纤维化的作用和机制奠定基础。