水蛭对肝内胆汁淤积大鼠模型法尼醇X受体通路的调节作用

目的研究水蛭对肝内胆汁淤积大鼠模型法尼醇X受体(FXR)通路的调节作用。方法选取40只8周龄SPF级雄性SD大鼠,按照随机数字表法分为正常组、模型组、熊去氧胆酸(UDCA)组、水蛭高剂量组、水蛭低剂量组,每组8只。UDCA组按60 mg/kg的剂量灌胃UDCA溶液,水蛭高、低剂量组分别按50 mg/kg和20 mg/kg剂量灌胃水蛭颗粒剂,1次/d,连续7 d,正常组和模型组予以等量生理盐水。除正常组外,其他各组大鼠于灌胃第5天予以100 mg/kgα-异硫氰酸萘酯(ANIT)灌胃造模,灌胃3 d,1次/d,正常组予以等量生理盐水。末次给药24 h后腹主动脉取血,检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBil)、总胆汁酸(TBA)水平;取肝脏组织进行HE染色镜检,观察大鼠肝脏组织病理情况;采用实时荧光定量PCR与Western blot检测FXR及下游小异源二聚体伴侣受体(SHP)、尿苷二磷酸葡萄糖苷酸转移2B4(UGT2B4)、胆盐输出泵(BSEP)mRNA及蛋白表达。结果水蛭高剂量组血清ALT、AST、TBil水平低于模型组,差异均有统计学意义(均P<0.05);水蛭高剂量组与模型组TBA水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);水蛭低剂量组血清AST、TBA、TBil水平低于模型组,差异均有统计学意义(均P<0.05),水蛭低剂量组与模型组ALT水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);UDCA组血清AST的水平低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05),UDCA组与模型组ALT、TBA、TBil水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组比较,水蛭高、低剂量组大鼠肝脏组织损伤减轻。水蛭高、低剂量组及UDCA组FXR、BSEP、UGT2B4、SHP mRNA表达高于模型组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。水蛭高、低剂量组FXR、BSEP、UGT2B4、SHP蛋白表达高于模型组,差异均有统计学意义(均P<0.05),UDCA组与模型组蛋白水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论水蛭可以缓解ANIT诱导的肝内胆汁淤积,减轻肝脏组织损伤。水蛭可通过对FXR基因表达上调,促进SHP、UGT2B4、BSEP基因表达上调,抑制胆汁淤积通路来保护肝细胞,为临床治疗肝内胆汁淤积提供有效药物。