基于法尼醇X受体通路探讨壮药依山红对胆汁淤积大鼠的影响

目的探讨壮药依山红对α-萘异硫氰酸酯(alpha-naphtyl isothiocyanate,ANIT)诱导胆汁淤积大鼠的影响及其作用机制。方法采用120只SD大鼠,随机分成6组,分别为正常组、模型组、熊去氧胆酸组及壮药依山红高、中、低剂量组,每组20只。除正常组外,余用ANIT灌胃建立胆汁淤积大鼠模型。连续给药15天后,称量计算大鼠肝脾指数;血清生化法检测血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)等转氨酶指标,测定总胆红素(total bilirubin,TBIL)、直接胆红素(direct bilirubin,DBIL)、总胆汁酸(total bile acids,TBA)等胆红素指标;苏木素—伊红(hematoxylin-Eosin,HE)染色法评估肝组织病理学变化,油红O染色评估肝脏脂滴代谢情况;蛋白免疫印迹法及实时荧光定量聚合酶链式反应检测法尼醇X受体(farnesoid X receptor,FXR)、钠牛磺胆酸共转运肽(Na+-taurocholate co-transporting polypeptide,NTCP)、多药耐药相关蛋白2(multidrug resistance-associated protein 2,MRP2)、胆汁盐转运蛋白(bile salt export pump,BSEP)蛋白和mRNA表达水平。结果与正常组比,模型组大鼠肝脾指数、血清转氨酶(ALT、AST、AKP)及胆红素(TBIL、DBIL、TBA)显著升高(P<0.05),肝组织受损。壮药依山红各剂量及熊去氧胆酸显著降低这些指标(P<0.05),改善肝组织学病变,减少脂滴沉积,效果呈剂量依赖性。同时,依山红各剂量组大鼠肝组织中NTCP、MRP2蛋白的表达量均明显升高(P<0.05);高剂量组大鼠肝组织中BSEP蛋白相对表达量显著下降(P<0.05)。与模型组相比,依山红高、中剂量组大鼠肝组织中Fxr、Ntcp、Mrp2 mRNA的相对表达量显著升高(P<0.05);依山红低剂量组大鼠仅Mrp2 mRNA表达量显著升高(P<0.05);依山红各剂量大鼠肝组织中Bsep mRNA表达水平显著下降(P<0.05)。结论壮药依山红可通过调节FXR及其调控的胆汁转运相关蛋白的表达,对ANIT诱导胆汁淤积模型大鼠起到保肝利胆的作用。

核苷(酸)类似物联合聚乙二醇干扰素对慢性乙型肝炎大鼠法尼醇X受体-成纤维细胞生长因子19通路、枯否细胞极化的影响

目的 :探究核苷(酸)类似物联合聚乙二醇干扰素对慢性乙型肝炎大鼠法尼醇X受体(FXR)-成纤维细胞生长因子19(FGF19)通路、枯否细胞极化的影响。方法 :选取SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常组、模型组、核苷(酸)类似物(核苷酸)组、聚乙二醇干扰素(干扰素)组、联合组。除正常组外,均采用腹腔注射乙型肝炎病毒进行慢性乙型肝炎建模。建模成功后,对核苷酸组灌胃10 mg/kg拉米夫定,对干扰素组皮下注射5μg/kg聚乙二醇干扰素,对联合组给予拉米夫定联合聚乙二醇干扰素治疗,正常组、模型组同期灌胃同体积生理盐水。酶联免疫吸附法检测血清病毒,全自动生化分析仪检测肝功能,H-E染色法检测肝组织病理形态,免疫印迹法检测FXRFGF19通路蛋白表达,免疫组织化学法检测枯否细胞极化。结果 :与正常组相比,模型组血清乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎E抗原(HBeAg)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)含量、iNOS、CD163阳性表达率显著升高,肝组织FXR、FGF19蛋白表达显著降低。与模型组相比,核苷酸组、干扰素组、联合组血清HBsAg、HBeAg、ALT、AST、TBIL含量、iNOS、CD163阳性表达率显著降低。肝组织FXR、FGF19蛋白表达显著升高,联合组比干扰素组降低显著。结论 :核苷(酸)类似物联合聚乙二醇干扰素,可显著激活FXR-FGF19通路,并抑制枯否细胞M1极化,促进枯否细胞M2极化,对慢性乙型肝炎大鼠具有改善作用。

胰腺导管腺癌组织中法尼醇X受体的表达及其与患者临床病理特征和预后的关系

目的观察胰腺导管癌组织中法尼醇X受体(FXR)/核因子受体1H4(NR1H4)mRNA和蛋白的表达状况,分析其与患者临床病理特征及预后的关系。方法选取2013年至2016年海军军医大学(第二军医大学)长海医院胰腺经外科手术切除的胰腺导管腺癌组织标本176例,同时收集患者临床病理资料。将176例胰腺导管腺癌组织标本制作成组织芯片,用RNAscope原位杂交技术和NR1H4探针检测胰腺导管腺癌组织芯片中NR1H4 mRNA的表达,用多聚物二步法的免疫组织化学(IHC)技术检测FXR/NR1H4蛋白的表达。采用χ^2检验分析FXR/NR1H4 mRNA和蛋白表达与临床病理特征的关系,以Kaplan-Meier生存分析和Cox比例风险回归模型研究FXR/NR1H4 mRNA和蛋白表达与预后的关系。结果 176例人胰腺导管腺癌组织中,RNAscope原位杂交技术所测的NR1H4 mRNA阳性表达率为68.75%(121/176),IHC技术所测的FXR/NR1H4蛋白阳性表达率为77.27%(136/176)。FXR/NR1H4 mRNA和蛋白表达均与肿瘤临床分期(χ^2=5.391,P=0.020;χ^2=4.108,P=0.042)、肿瘤分化程度(χ^2=6.560,P=0.010;χ^2=4.969,P=0.026)有关,蛋白的表达也与肿瘤大小有关(χ^2=4.957,P=0.026);两者与患者性别、年龄、神经浸润、肿瘤部位、淋巴结转移均无关(P均>0.05)。Kaplan-Meier生存分析结果显示,FXR/NR1H4 mRNA和蛋白高表达的患者无进展生存期及总生存期均短于低表达的患者(P均<0.05)。Cox比例风险回归分析结果显示,FXR/NR1H4蛋白高表达为胰腺导管腺癌患者无进展生存期(RR=1.701,95% CI 1.235~2.432,P<0.05)和总生存期(RR=2.356,95% CI 1.983~2.832,P<0.05)的独立危险因素。结论 RNAscope原位杂交技术与IHC技术可以相互印证,保证检测结果的可靠性。胰腺导管腺癌组织中FXR/NR1H4的表达与患者的临床分期和分化程度有关,其高表达是影响患者预后的独立危险因素。

槲皮素通过FXR信号通路对胆汁淤积幼鼠的治疗作用及其对MDR3、MRP2、OATP2表达的调控研究

目的研究槲皮素通过法尼醇X受体(FXR)通路对胆汁淤积幼鼠的治疗作用及相关蛋白表达的调控。方法60只幼鼠分为槲皮素低、中、高剂量组(20、40、80 mg/kg槲皮素灌胃),正常组、模型组等量2%二甲基亚砜(DMSO)溶液灌胃。比较各组血清谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、谷氨酰转肽酶(GGT)水平;HE染色观察肝组织病理变化,检测FXR、多药耐药蛋白3(MDR3)、多药耐药相关蛋白2(MRP2)、有机阴离子转运多肽亚型2(OATP2)mRNA及蛋白表达。结果第2、3、4周槲皮素低、中、高剂量组血清ALT、ALP、GGT水平低于模型组,3组依次降低(P<0.05)。HE染色模型组肝细胞变性及坏死,纤维组织增生,大量炎性细胞浸润;槲皮素3个剂量组脂肪变性数量减少,小胆管及汇管区纤维组织增生、炎性细胞浸润减轻。槲皮素低、中、高剂量组FXR、MDR3、MRP2、OATP2 mRNA及蛋白相对表达量高于模型组,3组依次升高(P<0.05)。结论槲皮素可改善胆汁淤积幼鼠肝功能,减轻肝组织病理变化,推测与激活FXR信号通路,上调MDR3、MRP2、OATP2表达有关。

FXR mRNA表达量与肝恶性肿瘤复发转移关系探讨

目的探讨核受体法尼醇(FXR)m RNA表达量与肝恶性肿瘤复发转移的关系。方法选取2013年3月~2016年3月于我院接受手术切除肝癌组织、癌周组织和正常肝组织的46例患者进行研究,依据病理学标准分为高侵袭组(n=21)和低侵袭组(n=25),分析FXR表达与肝恶性肿瘤复发转移的关系。结果 FXR m RNA在高侵袭组中表达量显著高于低侵袭组,在肿瘤组织中表达量显著低于癌周组织和正常组织,差异有统计学意义(P<0.05);两组术后TB、CB和总胆汁酸含量较术前显著下降,且高侵袭组手术前后TB、CB和总胆汁酸含量均显著高于低侵袭组,差异有统计学意义(P<0.05);FXR m RNA表达量与术前TB、CB和总胆汁酸呈显著正相关(r_s=0.455,P=0.038;r_s=0.357,P=0.041;r_s=0.348,P=0.042)。结论肝恶性肿瘤复发转移侵袭性高时,会促进胆汁酸分泌,加剧肝内胆汁淤滞,从而上调FXR m RNA表达量,FXR可能参与抗肝恶性肿瘤复发转移过程,具体还有待进一步研究证实。

亚砷酸钠对人正常肝细胞脂质代谢及因子调控的作用

背景:肝脏作为砷毒作用的主要靶器官,成为砷毒性作用机制相关研究的焦点。目的:探讨亚砷酸钠对人正常肝细胞脂质代谢、细胞增殖、细胞凋亡及相关调控因子表达的影响。方法:MIHA正常人肝细胞株暴露于0,10,20,30μmol/L亚砷酸钠48 h,光学显微镜观察细胞形态变化,CCK-8法检测细胞活性,单试剂COD-PAP法、单试剂GPO-PAP法及酶微板法检测细胞上清总胆固醇、三酰甘油及总胆汁酸水平,油红O染色法检测细胞内脂质含量,Edu-488渗入法检测细胞增殖,PI染色法及Annexin V-FITC/PI双标记法结合流式细胞术分别检测细胞周期和细胞凋亡,实时荧光定量PCR和Western blot检测肝细胞核因子4α、胆固醇7α-羟化酶及法尼醇X受体的m RNA及蛋白表达水平。结果与结论:(1)与对照组(0μmol/L亚砷酸钠)相比,随着亚砷酸钠浓度的增加:MIHA细胞活性逐渐降低;细胞上清中总胆固醇、三酰甘油水平逐渐增高,总胆汁酸水平逐渐降低;细胞内脂质含量逐渐增多;细胞停滞于S期及G_2/M期细胞比例逐渐增多;细胞凋亡率逐渐升高;肝细胞核因子4α mRNA表达水平未见明显变化,胆固醇7α-羟化酶与法尼醇X受体mRNA表达水平下降;肝细胞核因子4α、胆固醇7α-羟化酶、法尼醇X受体蛋白表达水平逐渐下降;(2)亚砷酸钠具有细胞毒性,显著降低MIHA细胞活性,诱导细胞脂肪变性,阻滞细胞增殖,诱发细胞凋亡等损伤;亚砷酸钠可下调肝细胞核因子4α蛋白表达以及胆固醇7α-羟化酶、法尼醇X受体的转录和蛋白表达,进一步引起肝细胞的脂质代谢紊乱。

肠道法尼醇X受体对糖脂代谢调节作用的研究进展

法尼醇X受体(farnesol X receptor,FXR),又称为胆汁酸核受体,是配体依赖性的核转录因子,可分布于体内肝脏、肠道等多个组织器官;胆汁酸是其内源性天然配体。近年有研究表明,肠道FXR对于糖脂代谢调节具有不可或缺的作用,肠道特异性FXR激动剂或抑制剂均可参与体内糖脂代谢调节。该文对近年来报道的肠道FXR在糖脂代谢中的作用进行系统的综述。

京尼平苷酸通过调控法尼醇X受体对胆管结扎诱导的胆汁淤积小鼠的影响

目的 基于法尼醇X受体(FXR)探讨京尼平苷酸(GPA)对胆管结扎(BDL)诱导的肝外胆汁淤积小鼠的影响。方法 将60只C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组、阳性药组(奥贝胆酸,40 mg·kg^(-1))及GPA高、中、低剂量组(100、50、25 mg·kg^(-1)),每组10只。采用胆管结扎法复制肝外胆汁淤积小鼠模型。术后灌胃给药,每日1次,连续7 d。采用比色法测定血清中天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆汁酸(TBA)、总胆红素(TBIL)的含量;采用qRT-PCR法测定肝组织中胆汁酸合成、吸收、转运相关基因(FXR、 SHP、BSEP、CYP27A1、CYP8B1、NTCP、MRP3、MRP4)、抗氧化应激相关基因(Nrf2、 HO-1、GCLC、GCLM)、炎症相关基因及凋亡因子(IL-6、IL-1β、TNF-α、NLRP3、NF-κB、Bax)、纤维化相关基因(TGF-β1、COL1A1、ICAM-1、p53)mRNA表达。采用HE染色法检测肝组织病理变化;采用天狼星红染色法检测肝组织纤维化情况;采用免疫荧光法测定肝细胞活性氧(ROS)含量。结果 与假手术组比较,模型组小鼠肝组织胆管周围有大量炎症细胞浸润,大面积的肝细胞坏死,肝脏组织结构病理损伤明显;黄疸指标AST、ALT、TBA和TBIL水平均明显升高(P<0.01,P<0.001);肝组织炎症因子(IL-6、IL-1β、TNF-α、NLRP3和NF-κB)和凋亡因子(Bax)的mRNA表达水平均明显升高(P<0.05,P<0.01,P<0.001);肝组织的胆管周围有明显的胶原沉积,纤维化相关基因(TGF-β1、COL1A1、ICAM-1和p53)的mRNA表达水平均显著升高(P<0.001);肝组织的主要胆汁酸核受体(FXR、SHP)、胆汁酸顶腔侧膜外排转运体(BSEP)、胆汁酸合成主要限速酶(CYP27A1、CYP8B1)、胆汁酸重吸收转运体(NTCP)mRNA表达水平均显著降低(P<0.01,P<0.001),而胆汁酸基底侧膜外排转运体(MRP3、MRP4)mRNA表达水平显著升高(P<0.001);肝细胞的ROS水平显著升高(P<0.01),抗氧化应激基因(Nrf2、GCLC、GCLM)mRNA表达水平显著降低(P<0.01,P<0.001)。与模型组比较,GPA高、中剂量组小鼠的肝组织胆管周围炎症细胞浸润、肝细胞坏死区明显减少,细胞形态和排列得到改善;AST、ALT、TBA、TBIL水平均显著降低(P<0.05,P<0.01,P<0.001),小鼠肝脏IL-6、IL-1β、TNF-α、NLRP3、NF-κB、Bax mRNA表达水平均明显降低(P<0.05,P<0.01,P<0.001),肝组织胶原沉积明显减少,TGF-β1、COL1A1、ICAM-1、p53 mRNA表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01,P<0.001),肝细胞的ROS水平显著降低(P<0.001),抗氧化应激基因(Nrf2、HO-1、GCLC、GCLM)mRNA表达水平均显著升高(P<0.01,P<0.001);GPA高剂量组小鼠肝组织的FXR、BSEP mRNA表达水平显著升高(P<0.01, P<0.001), MRP3、 MRP4 mRNA表达水平明显降低(P<0.05, P<0.001),而SHP、 NTCP、CYP27A1、CYP8B1 mRNA表达水平无差异(P>0.05)。结论 GPA可能通过激动胆汁酸受体FXR的表达,促进胆汁酸排泄,改善肝内细胞炎症、氧化应激和纤维化,发挥抗BDL诱导肝外胆汁淤积小鼠的肝损伤作用。

去脂软肝方对非酒精性脂肪性肝炎大鼠FXR-FGF19通路的影响

目的观察去脂软肝方对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)模型大鼠法尼醇X受体(FXR)-成纤维细胞因子19(FGF19)通路的影响。方法雄性SD大鼠随机分为正常组(Control组,n=8)、模型组(HFD组,n=12)、辛伐他汀组(Simvastatin组,n=8)、去脂软肝方高剂量组(QH组,n=8)、去脂软肝方低剂量组(QL组,n=8),Control组给予普通饲料喂养,其余组高脂饲料喂养。10周末取材,观察大鼠肝脏病理切片变化,检测各组血清肝功能指标、肝脏与小肠FGF19、肝脏中胆汁酸(BA)。检测小肠FXR、肝脏胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)表达情况。多组间比较采用单因素方差分析,进一步两组间比较采用LSD-t检验。结果与Control组相比,HFD组病理表现出明显炎性病变和脂肪变性。与HFD组相比,各用药组的HDL-C显著升高,ALT、AST、TC、TG、LDL-C均显著下降(P值均<0.05)。与Control组相比,HFD组大鼠小肠FGF19显著下降、肝脏BA显著升高(P值均<0.05)。与HFD组相比,各用药组的小肠中FGF19显著升高,肝脏BA显著下降(P值均<0.05)。与Control组相比,HFD组大鼠小肠FXR mRNA显著下降,肝脏CYP7A1 mRNA显著升高(P值均<0.05)。与HFD组相比,QH组小肠FXR mRNA显著升高,QL组显著降低(P值均<0.05);QH组肝脏CYP7A1 mRNA显著下降(P<0.05)。与Control组相比,HFD组大鼠小肠FXR阳性率显著下降,肝脏CYP7A1阳性率显著上升(P值均<0.05)。与HFD组相比,Simvastatin组、QH组小肠FXR阳性率显著升高(P值均<0.05),Simvastatin组、QH组、QL组肝脏CYP7A1阳性率显著下降(P值均<0.05)。结论去脂软肝方可激活NASH大鼠FXR-FGF19通路,并可能通过该途径对NASH产生防治作用。

Vonafexor(EYP001)的合成

以5-溴水杨醛为起始原料,与溴乙酸乙酯通过2步反应环合生成5-溴苯并呋喃-2-甲酸乙酯,再与1-Boc哌嗪反应生成5-(4-叔丁氧羰基哌嗪)苯并呋喃-2-甲酸乙酯;接着经N-氯代丁二酰亚胺(NCS)氯代得到4-氯-5-(4-叔丁氧羰基哌嗪)苯并呋喃-2-甲酸乙酯;最后脱去Boc保护基,与2,6-二氯苯磺酰氯反应得到4-氯-5-[4-(2,6-二氯苯磺酰基)-1-哌嗪基]苯并呋喃-2-甲酸乙酯,水解后得到目标化合物EYP001,总收率为58.3%.

肠道法尼醇X受体在非酒精性脂肪性肝病中的作用机制及相关靶向药物

近年来非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)发病率日益剧增,若患者不良生活方式无法及时调整,且临床尚缺乏有效的药物,使得NAFLD的治疗差强人意。法尼醇X受体(FXR)作为胆汁酸的主要受体,通过参与糖、脂代谢来影响NAFLD,而肠道FXR(iFXR)具有局限作用于肠道的优势,可避免全身释放所带来的副作用,在NAFLD的治疗上具有潜在的价值,但也存在一定的争议。综述了近年来iFXR在NAFLD的研究进展。

血清胆汁酸水平与2型糖尿病的相关性研究

2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus, T2DM)作为一种代谢性疾病,已经成为继肿瘤、心血管病变之后第三大严重威胁人类健康的慢性疾病。糖尿病临床表型中以T2DM为主。T2DM发病机制相对复杂,目前认为胰岛β细胞功能缺陷、胰岛素抵抗是2型糖尿病发生的主要原因。同时糖尿病患者更易引起血脂、脂蛋白异常,增加各种糖尿病并发症的风险。有研究表明糖尿病患者常伴有总胆汁酸池的增加和胆汁酸成分的改变。胆汁酸除了在膳食脂肪的吸收和胆固醇的稳态中发挥作用,还参与许多信号通路的调控。此外,胆汁酸还通过调节自身的肝肠循环,维持三酰甘油、胆固醇的平衡,并参与能量和血糖水平的调控。本文主要针对血清胆汁酸与2型糖尿病的关系及其研究进展进行综述。

胆汁酸代谢异常在非酒精性脂肪性肝病发展中的作用

非酒精性脂肪性肝病逐渐成为全球儿童发病率最高的慢性肝病之一,肠肝循环中扮演重要角色的胆汁酸在其发病机制中的作用日渐突出。近年来,研究发现胆汁酸是法尼醇X受体和G蛋白偶联受体5的信号分子,二者作为胆汁酸受体调控全身代谢。胆汁酸代谢失衡与NAFLD严重程度密切相关。对胆汁酸及其受体在NAFLD进展中的作用进行综述,以期为NAFLD无创诊断及治疗提供新的靶点。

胆汁酸及其受体在非酒精性脂肪性肝病发病机制中的作用及药物治疗的研究进展

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是以肝细胞内脂质蓄积为主要特征的肝脏代谢紊乱疾病,已成为全球范围内慢性肝病的主要病因。20%~30%的NAFLD会进展为非酒精性脂肪性肝炎(NASH),NASH的发展与多种代谢紊乱密切相关。胆汁酸及其受体功能在NASH的发病机制中起着重要作用,胆汁酸受体是治疗NASH重要的靶点。本文对胆汁酸及其受体在NAFLD和NASH发展中的作用,特别是关于法尼醇X受体(FXR)在不同组织(包括肝脏和肠道)中的功能的研究予以综述,介绍基于胆汁酸及其受体的NASH治疗药物的研究进展。

Licraside激活FXR缓解胆汁淤积的药理学研究

目的 研究异甘草素-4′-O-芹糖(1→2)葡萄糖苷(licraside)干预缓解胆汁淤积的分子作用机制。方法 用慢病毒沉默人肝癌HepG2细胞中法尼醇X受体(FXR),记为siFXR-HepG2细胞。将HepG2细胞和siFXR-HepG2细胞均分为正常组、模型组和实验组。模型组和实验组均给予胆红素+丙磺舒诱导高胆酸盐高胆红素模型;然后,正常组和模型组均不进行任何处理,实验组给予80μmol·L^(-1)licraside干预24 h。考察各组细胞的细胞活力及总胆汁酸(TBA)、胆红素等生化指标的含量,用蛋白质印迹法考察各组细胞FXR、胆酸盐输出泵(BSEP)等蛋白的表达水平。结果 HepG2细胞中正常组、模型组和实验组及siFXR-HepG2细胞中正常组、模型组和实验组的细胞活力分别为(100.00±17.15)%、(39.41±2.91)%、(70.79±3.74)%、(81.41±5.12)%、(33.49±2.69)%和(44.08±4.82)%,TBA水平分别为(7.98±5.87)、(46.18±10.93)、(9.25±7.20)、(11.18±3.36)、(38.28±5.12)和(34.79±5.39)μmol·L^(-1),总胆红素水平分别为(5.21±3.27)、(40.29±24.88)、(5.21±2.64)、(12.00±4.64)、(56.36±14.85)和(15.39±5.56)μmol·L^(-1),FXR蛋白相对表达水平分别为1.00±0.10、0.81±0.07、1.11±0.09、0.10±0.02、0.12±0.02和0.10±0.04,BSEP蛋白相对表达水平分别为1.00±0.17、0.81±0.02、0.88±0.03、0.70±0.09、0.49±0.07和0.60±0.10。HepG2细胞中实验组的上述指标和模型组相比,在统计学上差异均有统计学意义(P<0.001,P<0.01,P<0.05);除TBA外,siFXR-HepG2细胞中实验组的上述指标和模型组相比,在统计学上差异均有统计学意义(P<0.001,P<0.01)。结论 Licraside可以有效降低高胆酸盐高胆红素细胞的生化指标水平,这种作用是通过激动FXR的蛋白表达后,增加胆酸盐外排,减少胆汁酸的合成,达到缓解胆汁淤积的作用。

苓桂术甘汤干预FXR途径影响游离脂肪酸诱导的HepG2细胞脂质代谢

目的 观察苓桂术甘汤对FFA诱导的HepG2细胞脂质代谢的影响,探讨其作用机制是否与其干预FXR途径有关。方法 选用HepG2细胞,采用1mmol/L FFA诱导,实验分为正常组、模型组、苓桂术甘汤组、阿托伐他汀组。采用CCK-8法测定细胞活力,油红O染色法观察脂滴分布,生物试剂盒测定TG、TC含量,蛋白免疫印迹法检测FXR、SHP、CYP7A1、LXR、SREBP-1蛋白的表达量,免疫荧光法检测FXR的荧光表达强度。结果 与正常组相比,模型组脂滴分布增加,TG、TC含量升高(P<0.01),FXR、SHP蛋白表达水平降低,CYP7A1、LXR和SREBP-1蛋白表达水平升高,FXR荧光表达水平降低;与模型组比较,苓桂术甘汤组和阿托伐他汀组脂滴分布下降,TG、TC含量降低(P<0.01),FXR、SHP蛋白表达水平升高,CYP7A1、LXR和SREBP-1蛋白表达水平降低,FXR荧光表达水平升高。结论 苓桂术甘汤可显著抑制游离脂肪酸诱导的HepG2细胞脂肪沉积,其作用机制可能与干预FXR介导的脂质代谢通路有关。

非酒精性脂肪性肝病治疗的研究进展

非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的发病率仍在迅速增长并趋于低龄化，日渐成为危害公众健康的主要问题。NAFLD的临床结局并不限于肝硬化、肝癌等肝脏本身的病变，同时与代谢异常所致的动脉粥样硬化性心血管事件密切相关，需要积极治疗干预。改善生活方式是所有NAFLD患者治疗的基石；严重肥胖患者，可考虑减肥手术；伴有糖尿病、高血压、血脂异常等危险因素的患者还需对代谢综合征进行治疗；对于严格生活方式干预无效的NASH患者，可及时加用二甲双胍及胰岛素增敏剂［二甲双胍、过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPAR-γ）激动剂、PPAR-α/δ激动剂、胰高血糖素样1受体激动剂、法尼醇X受体激动剂］、抗氧化剂；已发展至终末期肝病的患者，除预防处理并发症外，可考虑行肝移植。

附子理中汤通过FXR-FGF15通路影响非酒精性脂肪肝胆汁酸代谢

目的探讨附子理中汤对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠胆汁酸(TBA)代谢和肝脏损伤的影响及其机制。方法采用脂肪乳灌胃大鼠,连续4周,构建NAFLD动物模型。造模后用附子理中汤和阳性药物干预治疗,将大鼠分为对照组、模型组、附子理中汤组和阳性药物组。HE染色观察肝脏的病理变化,生化分析法检测高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、游离脂肪酸(NEFA)的含量,Western blot检测回肠组织中法尼酯X受体(FXR)、成纤维细胞生长因子15(FGF15)的蛋白表达和肝脏组织中FXR的蛋白表达,RT-PCR检测回肠组织中FXR、FGF15的mRNA表达和肝脏组织中FXR的mRNA表达,ELISA检测肝组织TBA水平。结果与对照组比较,模型组大鼠肝脏出现严重病理损伤,血清中HDL-C含量下降,LDL-C和NEFA含量增加(均P<0.01),大鼠肝脏组织中FXR蛋白、mRNA表达和回肠组织中FXR、FGF15的蛋白、mRNA表达上升(均P<0.01),肝组织中TBA水平下降(P<0.01)。与模型组比较,附子理中汤组和阳性药物组大鼠肝脏病理损伤缓解,HDL-C含量增加,LDL-C和NEFA含量下降(均P<0.05),大鼠肝组织中FXR蛋白、mRNA表达和回肠组织中FXR、FGF15蛋白、mRNA表达下降(P<0.05),肝组织中TBA水平增加(P<0.01)。结论附子理中汤治疗可通过激活回肠FXR-FGF15信号,增加肝脏TBA代谢,缓解NAFLD引起的肝损伤。

胆汁酸代谢与2型糖尿病的研究进展

胆汁酸(bile acids,BA)在肝脏中合成,是胆固醇的代谢产物。进食时,BA随胆汁进入肠道,其中95%的胆盐可被肠道(主要在回肠)重吸收入肝,以保持胆盐池的稳定。BA作为一种代谢调节因子,能够激活多种核受体和膜受体介导的信号通路,参与多种代谢调节过程,不仅可以促进食物中脂类的消化吸收,还参与糖脂及能量的代谢,同时BA谱又是代谢稳态的关键调节剂。BA代谢和信号转导的改变与肥胖和2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)相关。BA螯合剂治疗的T2DM患者或进行减肥手术的病态肥胖患者,其血糖水平的显著改善均与BA谱和信号转导的变化有关。本文就BA的代谢调节通路与T2DM相关性进行综述。

胆汁酸对动物炎性肠病通路的影响及其在畜禽生产中的应用前景

胆汁酸(BA)作为胆汁的重要成分之一,在动物炎性肠病(IBD)中发挥重要作用。过多BA在肠道内聚积是引发IBD的原因之一。作为体内的一种重要信号分子,BA能激活法尼醇X受体(FXR)和G蛋白胆汁酸偶联受体5(TGR5),发挥相应生物学功能,既在一定程度上保护肠道免受BA聚积产生的危害,又对IBD具有缓解作用。本文综述了BA-FXR/TGR5信号通路对IBD的调节作用,展望了BA在畜禽生产中的应用前景,旨在为维护畜禽肠道健康、提高养殖效益提供新思路。