黄芩苷对FM1肺炎小鼠肺组织细胞凋亡FAS/FAS-L系统的影响

目的研究黄芩苷对FM1肺炎小鼠肺组织细胞凋亡FAS/FAS-L系统的影响,探索黄芩苷抗流感病毒感染机制。方法制备小鼠甲型流感病毒性肺炎模型,通过死亡保护实验确定黄芩苷的最小有效浓度,TUNEL法观察小鼠肺组织细胞凋亡情况,RT-PCR技术检测肺组织FAS(CD95)、FAS-L(CD178)、Caspase-3 mRNA表达,Western blot方法测定肺组织FAS、FAS-L、Caspase-3蛋白表达。结果与模型组相比,黄芩苷187.5、375 mg.kg-1剂量均能明显降低肺组织细胞凋亡率,明显降低肺组织FAS、FAS-L及Caspase-3 mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。结论黄芩苷能够明显抑制FM1肺炎小鼠肺组织细胞的凋亡,其可能通过影响细胞凋亡受体途径FAS/FAS-L系统而发挥抗流感病毒感染作用。

“肺气虚”大鼠模型肺、皮肤、大肠Fas、Fas-L表达相关性的实验研究

目的:在分子水平上探讨肺与皮肤、大肠之间的内在联系。方法:单纯烟熏法建立大鼠“肺气虚”病理模型,将20只大鼠随机分为正常对照组和病理模型组。采用免疫组化SP方法,分别检测Fas、Fsa-L在两组动物肺、皮肤和大肠组织中的表达水平,并进行比较。结果:“肺气虚”病理模型组的肺、皮肤、大肠组织中Fas、Fas-L与正常对照组比较明显增高,具有显著性差异(P<0.01)。结论:肺、皮肤、大肠三种组织中Fas、Fas-L的表达水平呈平行相关性,从分子水平上提示肺与皮肤、大肠之间可能存在着内在联系,证实了中医学“肺外合皮毛”及“肺与大肠相表里”的重要理论。

安胃汤对慢性萎缩性胃炎大鼠Fas、Fas-L表达的影响

目的从细胞凋亡因子Fas、Fas-L、Bax、Bcl-2角度探讨安胃汤对慢性萎缩性胃炎模型大鼠疗效的作用机制。方法采用甲基硝基亚硝基胍(MNNG)慢性萎缩性胃炎大鼠模型,应用安胃汤进行干预;运用HE染色观察胃黏膜组织形态改变;ELISA方法检测血清中Fas-L含量;采用实时荧光定量PCR方法、Western blot检测Fas、Bax、Bcl-2基因表达及其蛋白含量的水平。结果该方可以明显上调Fas、Bax基因以及其蛋白含量的表达,下调外周血Fas-L的含量和Bcl-2基因以及其蛋白含量的表达。结论安胃汤能够明显改善CAG大鼠胃组织的病理变化,具有明显的抗CAG作用,其作用机制可能通过提高Fas基因及蛋白的表达,降低Fas-L含量,激活CAG大鼠胃黏膜细胞Fas/Fas-L信号传导通路,降低Bcl-2基因及蛋白,升高Bax基因及蛋白,促进胃黏膜细胞凋亡,可能是安胃汤防治CAG的关键机制之一。

Fas,Fas-L和Caspase-3在增生性瘢痕中表达特征及其对瘢痕形成的影响

探讨Fas、Fas L和Caspase 3在增生性瘢痕和正常皮肤组织内的表达特征及其对瘢痕形成的影响。用免疫组化方法和常规病理技术检测这三种蛋白在 8例增生性瘢痕和 8例正常皮肤中的表达变化规律。结果发现 ,在正常皮肤中 ,Fas和Fas L主要分布于表皮细胞、部分成纤维细胞的胞浆和胞膜内 ,Caspase 3则定位于这些细胞的胞浆中。Fas和Fas L在增生性瘢痕的表皮基底层细胞内有少量分布 ,阳性细胞率显著降低(P <0 0 5 ) ;Caspase 3的阳性细胞率也明显降低 (P <0 0 5 ) ,在表皮角质形成细胞的胞浆内有轻微表达。提示增生性瘢痕的发生可能与Fas、Fas L和Caspase 3蛋白表达降低、由这三种蛋白介导的细胞凋亡受阻相关。

膀胱癌组织中凋亡相关基因fas及fas-L的表达及相互关系

目的 研究凋亡相关基因 fas及 fas- L在膀胱移行细胞癌 (TCC)组织中的表达 ,探讨其与 TCC生物学行为的关系及在 TCC发生、发展中相互作用 .方法 采用 S- P免疫组化法检测 5 6例 TCC及 10例正常膀胱组织 Fas及 Fas- L的表达 ,并与 TCC病理分级、临床分期及随访结果相比较 .结果 Fas及 Fas- L在 TCC中阳性表达率分别为 41.1%及5 7.1% ,与在正常膀胱组织表达率 80 .0 %及 0 %相比 ,有显著性差异 (P<0 .0 5 ) .Fas阳性表达率与肿瘤分级及分期无显著相关性 ,与肿瘤复发有关 (P<0 .0 5 ) .Fas- L阳性表达率与肿瘤分级、分期及复发密切相关 (P<0 .0 5 ) ,随恶性程度增加 ,其表达强度也增加 .Fas及 Fas- L的表达无显著相关性 (r C=- 0 .0 84) .结论 凋亡相关基因 fas及 fas- L 表达异常可能参与膀胱肿瘤发生和发展 .检测 fas及 fas- L

缺氧环境下大鼠骨髓间充质干细胞的凋亡及Fas、Fas-L的表达

目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)在缺氧环境下是否存在凋亡及Fas和Fas-L蛋白在MSCs凋亡时是否表达及与细胞凋亡的相关性。方法将接种的P3细胞置于94%N2、1%O2和5%CO2缺氧箱中37℃孵育,分别于0.5h、1h、2h、4h、6h、8h和12h取出进行缺口末端标记(TUNEL)计算细胞凋亡指数(ApoptoticIndex,AI)和透射电镜观察细胞超微结构的改变,用Fas和Fas-L免疫组化试剂盒检测Fas-L和Fas蛋白的表达。结果1.培养的骨髓单个核细胞CD29、CD71、CD44免疫细胞化学染色均阳性,CD34染色阴性,5-氮胞苷诱导后表达TnT,提示其为MSCs。2.MSCs在缺氧前、缺氧0.5、1、2、4、6、8和12h时AI分别为0.11±2.03%、15.4±3.19%、16.7±2.51%、16.9±0.25%、17.7±2.50%、18.3±3.15%、18.4±4.22%、19.7±4.58%,缺氧不同时间点AI较缺氧前均显著性增高(P<0.01),并随着缺氧时间延伸,AI显著增加(P<0.05),不过,缺氧6h、8h和12h时AI没有统计学意义(P>0.05)。3.MSCs在不同缺氧时间点Fas、Fas-L蛋白表达较缺氧前均显著性增高(P<0.05),且随着缺氧时间延伸,表达显著增加,而在缺氧6h-12h时间点表达没有统计学意义(P>0.05)。3.缺氧0.5、1、2、4、6、8和12h,AI与Fas和Fas-L均显著正相关。结论缺氧是促进MSCs凋亡的重要因素,Fas和Fas-L蛋白可能在MSCs缺氧凋亡的调控中起着重要作用。

Survivin在子宫内膜癌中的表达及其与Fas/Fas-L表达相关性的研究

目的探讨生存素(Survivin)在子宫内膜癌组织中的表达及其与Fas、Fas-L表达的相关性。方法应用S-P免疫组化染色法检测Survivin、Fas及Fas-L蛋白在46例子宫内膜癌中的表达,同时选9例子宫内膜非典型增生及12例正常子宫内膜组织作为对照。结果Survivin在子宫内膜癌中表达率为65.2%,明显高于正常子宫内膜中的表达率25%(P<0.05)。Fas在子宫内膜癌和正常子宫内膜组织中表达率分别为52.2%和84.6%(P<0.05)。Fas-L在子宫内膜癌和正常子宫内膜组织中表达率分别为78.3%和33.3%(P<0.05)。Fas蛋白表达阳性、阴性者子宫内膜癌组织中,Survivin表达阳性率分别为45.8%、81.8%,两者间具有明显的负相关(P<0.05);而Fas-L表达阳性、阴性者中,Survivin表达率分别为75%、30%,两者之间具有明显的正相关(P<0.05)。结论Survivin引起的细胞凋亡抑制,在子宫内膜癌的发生、发展中起一定作用,Survivin与Fas、Fas-L有关。

Fas/Fas-L与体外热应激胸腺细胞亚群变化及凋亡的关系

目的探讨体外热应激胸腺细胞的亚群变化及凋亡与胸腺细胞表达 Fas、Fas- L 的关系。方法用流式细胞术检测体外热应激后再培养的胸腺细胞不同时间的凋亡率、CD4CD8亚群及表达 Fas、Fas- L的阳性率。结果体外热应激胸腺细胞的凋亡率和表达 Fas及 Fas- L 的阳性率均呈时间依赖性增高 ,凋亡的胸腺细胞以 CD4+ CD8+双阳性胸腺细胞为主。结论热应激主要诱导 CD4+ CD8+ 胸腺细胞凋亡 ;Fas与 Fas-

Fas/Fas-L介导热应激诱导的胸腺细胞凋亡

目的 探讨体外热应激诱导小鼠胸腺细胞凋亡与Fas、Fas-L表达的关系。方法 用流式细胞术检测体外热应激后再培养的胸腺细胞不同时间的凋亡率及Fas、Fas-L表达阳性率。结果 体外热应激诱导胸腺细胞的凋亡率和Fas及Fas-L表达阳性率均呈时间依赖性增高，体外热应激诱导胸腺细胞Fas/Fas-L的表达与凋亡明显相关。结论 Fas与Fas-L是介导体外热应激损伤胸腺细胞凋亡的重要分子。

组织细胞性坏死性淋巴结炎中EBV-LMP-1、Fas/Fas-L的表达

目的探讨EB病毒、Fas/Fas-L在组织细胞性坏死性淋巴结炎(histiocytic necrotizing lymphadenitis,HNL)发生、发展中的作用及相互关系。方法应用免疫组化SP法检测40例HNL和10例反应性增生淋巴结组织中的CD8、EB病毒编码的隐伏膜蛋白(EBV-LMP-1)、Fas、Fas-L蛋白的表达状况。结果LMP-1、Fas/Fas-L在HNL的表达均比对照组明显增高(P<0·05)。EBV-LMP-1的表达与Fas/Fas-L呈正相关(P<0·05)。结论EB病毒是HNL的发病原因之一,Fas/Fas-L介导的细胞毒性反应为引起EB病毒感染淋巴细胞凋亡的主要原因之一。

缬沙坦对FAS/FAS-L在甲状腺素诱导的心脏病大鼠心肌组织表达的干预作用

目的研究缬沙坦对FAS、FAS-L在甲状腺功能亢进(甲亢)性心脏病大鼠心肌组织表达的影响。方法Sprage-Dawley(SD)大鼠40只,按随机数字表法分为对照组、L-甲状腺素组、缬沙坦小剂量组(L-甲状腺素+10 mg/kg缬沙坦)、缬沙坦大剂量组(L-甲状腺素+30 mg/kg缬沙坦)。L-甲状腺素组和缬沙坦干预组予L-甲状腺素0.5 mg/(kg.d)腹腔注射28 d建立甲亢模型,缬沙坦小剂量组在建模同时予缬沙坦10 mg/(kg.d)灌胃治疗,缬沙坦大剂量组每天灌服缬沙坦30 mg/(kg.d)。造模前后分别采取大鼠静脉血,用化学发光法检测血清TT3、TT4浓度;第28天解剖动物,测定各组大鼠心脏质量指数;收集左心室心肌组织分别行苏木素伊红染色和Masson染色观察左心室心肌组织形态结构、测定左心室细胞直径和胶原容积分数及免疫组化观察FAS、FAS-L的表达情况。结果与对照组相比,L-甲状腺素组大鼠心脏质量指数、心肌细胞直径、胶原容积分数增大,FAS、FAS-L蛋白表达明显增强,差异有统计学意义(P<0.05);而缬沙坦干预组上述心室重构指标明显改善,FAS、FAS-L蛋白表达下降,差异有统计学意义(P<0.05);而缬沙坦大、小剂量组之间上述指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论缬沙坦可通过调节FAS/FAS-L的表达,抑制心肌重构,具有保护心脏功能的作用。

穿孔素、粒酶B、Fas、Fas-L和Caspase 3在心肌细胞凋亡中的作用和相互关系

目的探讨小鼠移植心脏组织中穿孔素、粒酶B、Fas、Fas-LmRNA以及活性Caspase3的表达和水平变化,以了解它们在急性排斥反应心肌细胞凋亡中的作用和相互关系。方法利用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术、Western免疫印迹(WesternBlot)等检测方法,检测了与凋亡发生机理有关的穿孔素、粒酶B、Fas、Fas-LmRNA及活性Caspase3蛋白的表达和变化。同时,通过组织学分析和TDT介导的原位末端标志(TUNEL)等检测方法,分析了小鼠心脏移植模型急性排斥反应时组织损伤和细胞凋亡的情况。结果Fas在同基因组和异基因组中均有表达,且水平无差异。但Fas-L、穿孔素、粒酶B及Caspase3只在异基因小鼠心脏移植中出现,术后第1天都开始表达,术后3d、5d强烈上调,与组织损伤、细胞凋亡呈直接相关。当使用Caspase抑制剂后,Caspase3活性随之明显降低(P<0·01),相应地组织损伤和细胞凋亡指数(AI)也明显减轻(P<0·01)。但其穿孔素、粒酶B、Fas-L却无变化。结论小鼠心脏移植急性排斥反应过程中存在心肌细胞的凋亡,是其损伤的重要机制;FasL、穿孔素、粒酶B以及活化Caspase3的出现和上调程度与凋亡细胞的数量与急性排斥反应的严重程度直接相关;由细胞毒T淋巴细胞引发的Fas/FasL、粒酶B/穿孔素两种途径介导的细胞凋亡,都必须经过Caspase3的活化这一共同通道来完成。

Fas/Fas-L在重型肝炎患者肝组织中的表达及其在肝细胞凋亡中的意义

目的 研究Fas/Fas L系统在重型肝炎患者肝细胞中的表达情况及在肝细胞凋亡中的意义。方法 采用免疫组织化学方法对 2 0例住院的重型肝炎病人之活检肝组织进行了Fas抗原及Fas配体表达的检测 ,并运用末端转移酶标记技术 (TUNEL)同时检测细胞原位凋亡的情况。结果 所检测 2 0例重型肝炎肝组织中 ,Fas抗原在肝细胞中呈强阳性表达 ;浸润的淋巴细胞上大量表达Fas L ,肝细胞中也有散在分布 ;每例标本均见凋亡细胞 ,分布在炎症坏死区及周边和小叶内。结论 Fas/Fas L系统过量表达 ,引起大量肝细胞死亡 ,参与重型肝炎的发病 ,Fas途径引起的细胞凋亡可能是重型肝炎发病过程中的重要机制之一。所检标本中 ,凋亡和坏死同时存在 ,表明这两种不同的死亡方式在重型肝炎的发病上存在着关联性。

Fas/Fas-L介导血管细胞凋亡的研究进展

凋亡是一系列主要以Caspase-8、Caspase-3为主的半胱氨酸蛋白酶激活的程序性死亡过程,Caspase可被Fas等细胞表面死亡受体和细胞内线粒体介导的级联反应这两种基本的信号转导通路激活。随着研究的深入,Fas/Fas-L介导的血管细胞的凋亡越来越受到学者的关注,已经成为血管疾病领域的研究热点之一,

1类多巴胺受体活性变化对细胞凋亡Fas/Fas-L通路的影响

目的以细胞凋亡的死亡受体(Fas/Fas-L)途径为切入点,探讨1类多巴胺受体(dopamine receptor-1,DR1)活性变化对缺血-再灌注损伤诱导的心肌细胞凋亡的影响及可能机制。方法乳鼠心肌细胞以模拟缺血溶液培养2 h后再正常培养24 h的方法建立心肌细胞缺血-再灌注损伤模型。心肌细胞随机分为4组:正常对照组,缺血-再灌注组(I/R组),10μmol/L SKF-38393(DR1激动剂)组(SKF干预组),10μmol/L SCH-23390(DR1抑制剂)组(SCH干预组)。RT-PCR和Western blot分别检测Fas、Fas-L、Caspase-8、Caspase-3 mR-NA和蛋白质的表达;TUNEL染色和流式细胞仪技术观察心肌细胞的凋亡情况;紫外分光光度计检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;透射电镜观察心肌细胞形态变化。结果与正常对照组比较,I/R组中Fas、Fas-L、caspase-8、caspase-3表达均上调,LDH活性和MDA含量增加,而SOD活性降低,心肌细胞损伤加重;与I/R组比较,10μmol/L SKF-38393使上述指标进一步增加,而10μmol/L SCH-23390对上述指标影响不显著。结论 DR1激活能够促进缺血-再灌注损伤诱导的细胞凋亡,其机制与上调Fas/Fas-L死亡途径有关。

γ-干扰素对肝纤维化大鼠肝Fas、Fas-L表达的影响

目的:研究Fas、Fas-L蛋白在四氯化碳(CCl4)诱导肝纤维化模型大鼠肝组织中的表达以及γ-干扰素(IFN-γ)对其表达的影响.方法:用CCl4诱导制作大鼠肝纤维化模型,使用IFN-γ(20 mu·kg-1·d-1,肌肉注射)对该模型肝纤维化大鼠治疗12周,设正常对照组和模型对照组,用免疫组织化学法(EnVition法)检测各组大鼠肝组织Fas、Fas-L的表达情况.结果:Fas和Fas-L在正常对照组大鼠肝细胞质表达极低,在模型对照组大鼠肝组织主要表达在纤维间隔、肝窦中,表达的量均明显高于正常对照组(P＜0.01).IFN-γ治疗组大鼠肝组织Fas和Fas-L的表达低于模型对照组(P＜0.05～P＜0.01).结论:肝纤维化时Fas和Fas-L表达加强,IFN-γ对肝纤维化大鼠肝组织Fas和Fas-L表达有明显的抑制作用.

Fas/Fas-L信号系统在绝经后骨质疏松症中作用的研究进展

Fas/Fas-L信号系统是外源性凋亡通路的重要组成部分。近年来大量研究发现,Fas/Fas-L信号系统通过诱导细胞凋亡,不仅参与了免疫系统稳态的维持,而且在骨内环境稳态的调节中也发挥了重要的作用。Fas/Fas-L信号系统在不同骨细胞上的表达和分布可能随体内雌激素水平波动而发生变化。当绝经后雌激素分泌不足时,Fas/Fas-L信号系统可通过启动骨细胞外源性凋亡通路,介导成骨和破骨平衡向破骨方向偏移,参与绝经后骨质疏松症的发生发展。通过调节骨细胞上Fas/Fas-L信号系统来平衡破骨细胞骨吸收和成骨细胞骨形成,将为绝经后骨质疏松症的治疗提供新的思路。

存活素在妊娠滋养细胞肿瘤中的表达及其与Fas/Fas-L表达的相关性研究

目的探讨存活素(Survivin)在妊娠滋养细胞肿瘤(GTT)中的表达及其与Fas/Fas-L表达的相关性。方法应用免疫组织化学方法检测存活素在侵蚀性葡萄胎(15例)及绒毛膜上皮癌(绒癌)(11例)中的表达,正常滋养细胞(40份)作为对照;并与Fas/Fas-L表达进行相关性分析。结果存活素在15例侵蚀性葡萄胎组有9例(60%)阳性,在11例绒癌组有8例(73%)阳性。而在40份正常滋养细胞中仅有11例(28%)阳性,存活素在GTT中的表达增高,且随着妊娠滋养细胞疾病的进展阳性率逐渐增高。正常滋养细胞组与绒癌组差异有统计学意义(P<0.05)。存活素与Fas表达在绒癌中呈负相关。结论凋亡抑制蛋白存活素表达上调可能参与了GTT的发生发展。Fas表达的下调和存活素表达的上调可能在GTT的发生发展过程中起协同作用,二者共同抑制细胞凋亡,逃避免疫清除,进而导致肿瘤的发生。

人参皂苷Rg1对抗脑缺血-再灌注大鼠脑组织FAS、FAS-L蛋白表达的定量分析

目的:探讨人参皂苷Rg1对脑缺血-再灌注大鼠脑组织FAS、FAS-L表达的影响。方法:取健康雄性SD大鼠30只。将其随机分为假手术组,模型组,人参皂苷Rg110、20、40mg/kg组,阳性药物对照组,每组5只。采用线栓法制作大脑中动脉栓塞模型。于MCAO术后6小时,采用免疫印迹法对CA1区的FAS、FAS-L蛋白表达情况进行定量检测。结果:模型组大鼠大脑右侧海马CA1区FAS、FAS-L含量最高;假手术组FAS、FAS-L含量最低;Rg120、40mg/kg组的FAS、FAS-L蛋白含量显著降低,与模型组比较有显著性差异(P<0.05),其中Rg140mg/kg组FAS、FAS-L蛋白含量最低。结论:人参皂苷Rg1防治大鼠脑缺血-再灌注损伤的机制可能与抑制脑组织FAS、FAS-L表达有关,且以高剂量效果较好。