Fas/FasL mRNA在小细胞肺癌石蜡包埋组织中的表达及其临床意义

目的探讨Fas、FasLmRNA在小细胞肺癌石蜡包埋组织中的表达情况及其临床意义。方法应用RT-PCR方法检测Fas、FasLmRNA在46例小细胞肺癌和相应的癌旁正常肺组织中的表达情况。结果46例小细胞肺癌中FasmRNA阳性表达率为47.8%,明显低于在正常肺组织中的表达率(80.0%)P<0.05,FasLmRNA阳性表达率为58.7%,明显高于在正常肺组织中的表达率(35%)P<0.05,FasLmRNA在淋巴结转移和TNM分期中的表达差异有统计学意义,FasLmRNA表达阳性组患者累计生存率明显低于阴性组患者。结论FasmRNA低表达可能对SCLC发展起促进作用;FasLmRNA高表达可能与SCLC转移和预后相关。

血脂康预处理对大鼠在体心脏急性缺血-再灌注心肌Fas/FasL mRNA表达的影响

目的探讨血脂康对大鼠在体心脏急性缺血-再灌注心肌Fas/FasLmRNA表达的影响。方法40只雄性SD大鼠随机分成5组,每组8只。假手术组,双蒸水灌胃1周;模型对照组,双蒸水2ml灌胃1周;甲羟戊酸组,甲羟戊酸150mg/kg·d溶于2ml双蒸水灌胃1周;血脂康组,血脂康原粉2.8g/kg·d溶于2ml双蒸水配成悬液灌胃1周;血脂康+甲羟戊酸组,血脂康原粉2.8/kg·d联合甲羟戊酸150mg/kg·d溶于2ml双蒸水灌胃1周。1周后应用0000无创丝线结扎左冠脉前降支,结扎30min后松开恢复冠脉血流复制在体心脏急性缺血-再灌注模型,假手术组仅穿线而不结扎前降支,其他手术步骤相同。再灌注120min后用RT-PCR检测各组心肌Fas和FasLmRNA的表达。结果与假手术组大鼠心肌Fas/FasLmRNA表达相比较,其他4组大鼠心肌Fas/FasLmRNA表达明显升高(P<0.01);与模型对照组比较,血脂康组大鼠心肌Fas/FasLmRNA表达显著减少(P<0.01),血脂康+甲羟戊酸组和甲羟戊酸组大鼠心肌Fas/FasLmRNA表达无差异(P>0.05)。结论血脂康能减少大鼠心脏急性缺血-再灌注心肌Fas/FasLmRNA的表达。

压力对大鼠纯化视网膜神经节细胞中Fas/FasL mRNA表达的影响

目的 通过检测不同压力及时间纯化培养的大鼠视网膜神经节细胞 (retinalgangal cells,RGCs)中 Fas/ Fas L m RNA的表达 ,探讨 Fas/ Fas L在 RGCs凋亡中的作用。方法 用 SD系大鼠脑源性星型胶质细胞同化培养液双界面法培养羊抗鼠 Thy1.1单克隆抗体纯化的 SD系大鼠 RGCs。分别在 0 m m Hg(对照组 )和 2 0、4 0、6 0 and80 mm Hg(1k Pa=7.5 m m Hg)的压力下培养 2 4 h及 4 8h后 ,用免疫组化和原位杂交对 RGCs中 Fas/ Fas L及其 m RNA的变化进行定性及半定量观察 ;TU NEL 法检测各组细胞的凋亡。结果纯化的 RGCs培养 2 4 h用羊抗鼠 FITC- Thy- 1.1单克隆抗体进行鉴定阳性 ,纯度为 97% .免疫组化和原位杂交检测 Fas/ Fas L及其 m RNA,结果培养 2 4 h对照组无表达 ,2 0 mm Hg组有较弱的表达信号 ,4 0、6 0及 80 mm Hg组表达逐渐增强 ;与对照组比较差异均有显著性 (P<0 .0 5 ) ;培养 4 8h对照组弱表达 ,压力≥ 2 0 mm Hg各组较相同压力培养 2 4 h各组表达增强 ,差异有显著性 (P<0 .0 5 )。 TU NEL 法检测细胞凋亡 ,培养 2 4 h对照组未见细胞凋亡20 m m Hg见少量细胞凋亡 ,随着压力的增高细胞凋亡数增多 ,凋亡指数增高 ;与对照组相比均有显著性差异。培养 4 8h组压力≥ 2 0 m m Hg各组较相同压力培养 2 4 h组?

益心康对感染柯萨奇病毒B_3大鼠体外心肌细胞凋亡相关因子Fas/FasL mRNA表达的影响

目的探讨益心康对体外感染柯萨奇病毒(CV)B3的新生SD大鼠心肌细胞的保护作用,分析其对细胞凋亡相关因子Fas/Fas L mRNA表达的影响。方法取新生SD大鼠心肌细胞,分成4组并进行不同干预:正常细胞对照组、病毒对照组给予感染病毒,益心康组感染病毒后加入益心康,利巴韦林组感染病毒后加入利巴韦林。用RT-PCR方法检测各组心肌细胞中Fas及Fas L mRNA的表达。结果益心康组给药48h后细胞内Fas及Fas L mRNA的表达较病毒对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。益心康组及利巴韦林组减轻Fas及Fas L mRNA的表达效果差异无统计学意义(P>0.05)。结论益心康可有效减轻细胞凋亡相关因子Fas/Fas L mRNA的表达水平,证实该方有抑制心肌细胞凋亡的作用。

Inhibition of Fas/FasL mRNA expression and TNF-a release in concanavalin A-induced liver injury in mice by bicyclol

AIM: Bicyclol, 4,4'-dimethoxy-5,6,5',6'-dimethylene-dioxy-2-hydroxymethy1-2'-carbonyl biphenyl, is a new anti-hepatitis drug. The aim of the present study was to investigate the protective effect of bicyclol on concanavalin A (Con A)-induced immunological liver injury in mice and its mechanism. METHODS: Liver injury was induced by injection of Con A via tail vein of mice and assessed biochemically and histologically. Serum transaminase and tumor necrosis factor alpha (TNF-a were determined. Liver lesions were observed by light microscope. Expressions of TNF-a, interferon gamma (IFN-y), Fas and Fas ligand (FasL) mRNA in the livers were measured by RT-PCR. RESULTS: Serum transaminase level and liver lesions in Con A-induced mice were markedly reduced by oral administration of 100, 200 mg/kg of bicyclol. TNF-a level inserum was also reduced by bicyclol. Con A injection in ducedup-regulation of TNF-a, IFN-7, Fas and FasL mRNA expression in liver tissues. Bicyclol significantly down-regulated the expression of IFN-y, Fas and FasL mRNA, but only slightly affected TNF-a mRNA expression in liver tissues. CONCLUSION: Bicyclol protects against Con A-induced liver injury mainly through inhibition of Fas/FasL mRNA expression in liver tissues and TNF-a release in mice.

基于Fas/FasL介导的凋亡信号通路研究通管方对输卵管炎性不孕模型大鼠的作用机制

目的:探讨通管方对输卵管炎性不孕(SI)模型大鼠输卵管组织中Fas/FasL通路的影响。方法:采用经阴道内接种混合菌液的方法,建立输卵管炎性不孕大鼠模型。造模后,77只SD雌性大鼠随机分成空白组、假手术组、模型组、妇可靖胶囊组(0.29 g·kg^(-1)·d^(-1))、通管方低剂量组(7.515 g·kg^(-1)·d^(-1))、通管方中剂量组(15.03 g·kg^(-1)·d^(-1))、通管方高剂量组(30.06 g·kg^(-1)·d^(-1)),各组大鼠分别灌胃给药28 d后处死并取材。采用蛋白免疫印迹法(WB)检测SI模型大鼠输卵管组织中Fas、FasL蛋白及Caspase-1的表达水平,酶联免疫吸附法(ELISA)检测SI模型大鼠血清IL-4、IL-10、Caspase-1的表达变化。结果:与空白组比较,模型组血清中IL-4和IL-10的水平均明显降低,血清和输卵管组织中的Caspase-1水平明显升高(P<0.01);与模型组比较,通管方各剂量组和妇可靖胶囊组降低了血清和输卵管组织中的Caspase-1的表达(P<0.01),上调了血清中IL-4和IL-10水平、输卵管组织中Fas和FasL蛋白的表达(P<0.05,P<0.01)。其中,通管方高剂量组的作用均明显优于其他剂量组和妇可靖胶囊组(P<0.05,P<0.01)。结论:通管方可能通过调控Fas/FasL凋亡信号通路而消除SI模型大鼠输卵管炎症。

穿心莲内酯通过抑制Fas/FasL信号轴降低子宫内膜癌Ishikawa/DPP细胞对顺铂的耐药性

目的:探讨穿心莲内酯(Andro)调节脂肪酸合成酶(Fas)/脂肪酸合成酶配体(FasL)信号轴对子宫内膜癌Ishikawa细胞顺铂(DDP)耐药性的影响。方法:采用0、5、10、20μg/mL DDP分别处理Ishikawa细胞和顺铂耐药的Ishikawa/DPP细胞,0、5、10、25、50μmol/L Andro处理Ishikawa/DDP细胞,MTT法检测细胞增殖情况并为后续实验选择合适的给药剂量。将Ishikawa/DDP细胞随机分为对照组、DDP组(DDP干预)、Andro组(DDP、Andro干预)、pcDNA3.1-NC组(转染pcDNA3.1+DDP、Andro干预)、pcDNA3.1-Fas/FasL组(转染pcDNA3.1-Fas/FasL+DDP、Andro干预),24 h后,采用qPCR法检测Fas、FasL mRNA的表达,平板克隆形成实验、Transwell实验和流式细胞术分别检测细胞克隆能力、细胞迁移与侵袭和细胞凋亡,WB法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、BAX、Bcl-2、MMP-2、PD-L1、多药耐药蛋白-1(MDR-1)及Fas、FasL蛋白表达。结果:DDP以剂量依赖的方式抑制Ishikawa和Ishikawa/DPP细胞增殖,并且与Ishikawa细胞比较,Ishikawa/DPP细胞对DDP的敏感性更低(均P<0.05);Andro以剂量依赖性的方式抑制Ishikawa/DPP细胞的增殖(均P<0.05)。Ishikawa/DPP细胞中Fas、FasL的表达水平均高于Ishikawa细胞(均P<0.05)。选取20μg/mL DDP和25μmol/L Andro为干预剂量,干预时间24h。与对照组比较,DDP组Ishikawa/DPP细胞中PD-L1、MDR-1、Fas、FasL mRNA及蛋白表达水平显著升高(P<0.05),而克隆形成率、迁移与侵袭细胞数、凋亡率差异均无统计学意义(均P>0.05);与DDP组比较,Andro组Ishikawa/DPP细胞中Fas、FasL mRNA表达水平、细胞克隆形成率、迁移与侵袭细胞数、PCNA、Bcl-2、MMP-2、PD-L1、MDR-1、Fas、FasL蛋白表达水平显著降低,BAX蛋白表达水平及凋亡率显著升高(P<0.05或P<0.01),pcDNA3.1-NC组与Andro组类似;与pcDNA3.1-NC组比较,pcDNA3.1-Fas/FasL组Ishikawa/DPP细胞上述指标变化均被逆转(P<0.05)。结论:Andro可能通过抑制Fas/FasL信号轴来抑制Ishikawa/DPP细胞增殖、迁移与侵袭,促进凋亡,从而降低细胞对DDP的耐药性。

疏肝健脾颗粒对大鼠乳腺癌癌前病变组织Fas、FasL表达的影响

目的:观察疏肝健脾颗粒对模型大鼠乳腺癌癌前病变组织Fas、FasL表达的影响,探讨其阻断乳腺癌癌前病变发展的机制。方法:90只SD大鼠,随机分为6组,正常对照组、模型组、三苯氧胺组及疏肝健脾颗粒低剂量组、中剂量组、高剂量组。以雌孕激素与DMBA联合诱导乳腺癌癌前病变模型,各组分别给予生理盐水、三苯氧胺、疏肝健脾颗粒不同剂量干预60 d后,进行组织病理学及Fas、FasL表达的免疫组化检测。结果:模型组大鼠乳腺癌前病变率为69.2%,疏肝健脾颗粒各剂量组及三苯氧胺组的癌前病变发生率均低于模型组(P<0.01),模型组和疏肝健脾颗粒中、低剂量组部分大鼠乳腺组织发生浸润癌。正常对照组大鼠乳腺组织Fas蛋白表达较高,FasL蛋白表达在模型组大鼠乳腺组织表达较高,疏肝健脾颗粒各剂量组和三苯氧胺组Fas蛋白表达增强,FasL蛋白表达减弱,与模型组比较差异显著(P<0.05或P<0.01)。结论:疏肝健脾颗粒可以显著降低DMBA诱导的大鼠乳腺癌癌前病变的发生率,调控乳腺癌癌前病变组织Fas、FasL的表达是其部分作用机制。

益母草碱调节Fas/FasL信号通路对乳腺癌细胞恶性生物行为的影响

目的探讨益母草碱(Leonurine,Leo)对乳腺癌细胞的增殖、迁移、凋亡、细胞周期进展以及上皮间质转化的影响及作用机制。方法体外培养4T1乳腺癌细胞,将细胞分为对照组(Control组)、益母草碱低、中、高浓度组(Leo-L组、Leo-M组、Leo-H组)、益母草碱高浓度+转染短发夹RNA慢病毒阴性对照组(Leo-H+sh-NC组),益母草碱高浓度+转染Fas短发夹RNA慢病毒组(Leo-H+sh-Fas组)。使用不同浓度的益母草碱(10~160 mmol/L)处理细胞,CCK-8法检测细胞的存活率,筛选最佳实验浓度;通过Transwell小室法评价细胞的迁移能力;流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞周期进展;Western blot检测N-cadherin、Vimentin、Fas、FasL表达,建立荷瘤小鼠模型评价益母草碱对乳腺癌移植瘤生长的影响。结果使用浓度为10~160 mmol/L的益母草碱处理细胞12 h,4T1细胞存活率显著降低(P<0.05),半数抑制浓度(IC50值)为(53.61±1.729)mmol/L,选择10、20、30 mmol/L为后续实验浓度;与Control组相比,Leo-L组、Leo-M组、Leo-H组4T1细胞的增殖活力、迁移率、G2/M期细胞比例及S期细胞比例、N-cadherin、Vimentin表达显著降低(P<0.05),细胞凋亡率、G0/G1期细胞比例、Fas、FasL表达显著升高(P<0.05);与Leo-H+sh-NC组相比,Leo-H+sh-Fas组4T1细胞的增殖活力、迁移率、G2/M期细胞比例及S期细胞比例、N-cadherin、Vimentin表达显著升高(P<0.05),细胞凋亡率、G0/G1期细胞比例、Fas、FasL表达显著降低(P<0.05);益母草碱可以抑制乳腺癌移植瘤的生长(P<0.05)。结论益母草碱可以抑制乳腺癌细胞恶性生物行为,其作用机制可能与激活Fas/FasL信号通路有关。

水飞蓟宾抑制Fas/FasL信号通路对肺结核大鼠炎症损伤及巨噬细胞凋亡的影响

目的:探究水飞蓟宾对肺结核(TB)大鼠肺部炎症损伤、巨噬细胞凋亡的影响,及对死亡受体Fas及其配体FasL的调控作用。方法:采用尾静脉注射结核分枝杆菌(Mtb)法制备TB大鼠模型,并随机分为模型组、水飞蓟宾组、Fas过表达重组蛋白(pcDNA-Fas)组、pcDNA-Fas阴性对照(pcDNA-NC)组、水飞蓟宾+pcDNA-Fas组,每组15只,另取15只大鼠为正常对照组。抗酸染色检测肺组织感染情况;HE染色观察肺组织病理变化;ELISA法检测肺组织TNF-α、IL-6表达;Annexin VFITC/PI双染结合流式细胞术检测肺泡巨噬细胞凋亡率;Western blot检测Fas、FasL、caspase8、caspase3、巨噬细胞炎症蛋白-2(MIP-2)表达水平。结果:与正常对照组相比,模型组大鼠肺组织炎症因子表达、肺泡巨噬细胞凋亡率升高,肺组织Mtb感染及干酪样坏死严重,Fas/FasL介导的caspase8/3凋亡途径活化(P<0.05)。与模型组相比,水飞蓟宾组大鼠肺组织炎症因子表达、肺泡巨噬细胞凋亡率降低,肺组织Mtb感染及干酪样坏死缓解,Fas/FasL介导的caspase8/3凋亡途径活性降低(P<0.05)。pc-DNA-Fas可进一步激活Fas/FasL介导的caspase8/3凋亡途径活化,加重肺组织Mtb感染及干酪样坏死,促进肺组织炎症损伤及巨噬细胞凋亡,并减弱水飞蓟宾发挥的抗Fas/FasL活化、抗炎及抗巨噬细胞凋亡作用(P<0.05)。结论:水飞蓟宾可能通过抑制Fas/FasL信号通路发挥抗Mtb感染、抗肺组织巨噬细胞凋亡及抗肺部炎症损伤作用。

Fas/FasL传导通路研究电针对慢性萎缩性胃炎小鼠的作用机制

目的探讨电针合募配穴对慢性萎缩性胃炎小鼠Fas/FasL传导通路的影响,揭示电针治疗慢性萎缩性胃炎的作用机制。方法制备慢性萎缩性胃炎小鼠模型。将已成模的慢性萎缩性胃炎小鼠分为模型组10只、普通针刺组、电针组各20只,并另设10只为对照组。对照组、模型组不进行操作;普通针刺组予合募配穴(中脘-足三里)普通针刺治疗;电针组予合募配穴(中脘-足三里)电针治疗,采用免疫组化法检测各组小鼠胃组织中Fas和FasL的表达水平。结果治疗前普通针刺组、电针组、模型组的体质量都显著低于对照组(P<0.05),治疗14 d后普通针刺组、电针组的体质量高于模型组(P<0.05),电针组治疗14 d后的体质量与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗前普通针刺组、电针组、模型组的血清IL-6、IL-1β含量都高于对照组(P<0.05),治疗14 d后普通针刺组、电针组的血清IL-6、IL-1β含量低于模型组(P<0.05),电针组治疗14 d后的血清IL-6、IL-1β含量与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗14 d后普通针刺组、电针组、对照组的胃黏膜组织病理形态评分与黏膜组织Fas蛋白、FasL蛋白相对表达水平都低于模型组(P<0.05),电针组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论电针在慢性萎缩性胃炎小鼠的应用能介导Fas/FasL传导通路的表达,抑制血清IL-6、IL-1β的表达,促进恢复小鼠的体质量,能改善小鼠的胃黏膜病理状况。

黄芩苷通过调节Fas/FasL信号通路减轻小鼠癫痫持续状态神经细胞凋亡的机制

目的探讨黄芩苷通过调节Fas/FasL信号通路减轻小鼠癫痫持续状态(SE)神经细胞凋亡的机制。方法45只雄性ICR小鼠按随机数字表法分为三组:对照组、SE组、黄芩苷治疗组。采用腹腔注射海人酸建立小鼠癫痫模型,对照组注入等量的生理盐水,黄芩苷治疗组腹腔注射100 mg/kg的黄芩苷。通过原位末端标记法(TUNEL)染色观察小鼠海马CA1区神经细胞的凋亡;免疫组化观察海马组织中Fas、FasL的表达与分布;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测海马组织中天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(caspase)-3、caspase-8 mRNA的含量;免疫印迹试验检测Fas、FasL和caspase-8蛋白的表达量。结果黄芩苷治疗组海马CA1区神经细胞的凋亡数明显低于SE组,差异有统计学意义(P<0.05);同时,黄芩苷治疗组海马中caspase-3、caspase-8mRNA和Fas、FasL、caspase-8蛋白的含量均低于SE组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论黄芩苷能够减轻小鼠癫痫发作后海马神经细胞的凋亡,其机制可能与抑制Fas/FasL信号通路及降低其下游的caspase-8、caspase-3的表达有关。

Let-7e-5p调控Fas/FasL影响小鼠变应性鼻炎发病的机制研究

目的探讨let-7e-5p对小鼠变应性鼻炎的影响及机制。方法将18只BALB/c小鼠按随机数字表法均分为对照(Control)组、变应性鼻炎(AR)组、let-7e-5p激动剂阴性对照(AR+agomir-NC)组、let-7e-5p激动剂(AR+agomir)组、let-7e-5p抑制剂阴性对照(AR+antagomir-NC)组和let-7e-5p抑制剂(AR+antagomir)组。除Control组外,其余组应用卵白蛋白(OVA)致敏建立AR模型,AR+agomir组和AR+antagomir组同时给予let-7e-5p agomir或let-7e-5p antagomir进行干预,末次激发致敏后对小鼠变应性鼻炎进行评分,HE染色观察鼻黏膜组织,统计嗜酸性粒细胞数量,real-time PCR检测let-7e-5p、Fas、FasL m RNA表达,Western blot检测Fas、FasL蛋白表达,酶联免疫吸附试验检测血清免疫球蛋白E(IgE)、特异性IgE(sIgE)、干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-12、IL-4、IL-13水平,双荧光素酶实验分析let-7e-5p和Fas、FasL的靶向关系。结果与Control组比较,AR组小鼠变应性鼻炎评分升高,鼻黏膜增生明显,嗜酸性粒细胞数量增加,let-7e-5p mRNA表达及IFN-γ、IL-12水平下降,Fas、FasL表达及IgE、sIgE、IL-4、IL-13水平升高(均P<0.05)。与AR+agomir-NC组比较,AR+agomir组小鼠变应性鼻炎评分降低,鼻黏膜结构清晰,嗜酸性粒细胞数量减少,let-7e-5p mRNA表达及IFN-γ、IL-12水平升高,Fas、FasL表达及IgE、sIgE、IL-4、IL-13水平下降(均P<0.05)。与AR+antagomir-NC组比较,AR+antagomir组小鼠变应性鼻炎评分升高,鼻黏膜增厚,嗜酸性粒细胞数量增加,let-7e-5p mRNA表达减少,Fas、FasL表达及IgE、sIgE、IL-4、IL-13水平升高(均P<0.05),IL-12、IFN-γ水平差异无统计学意义。与NC+3’UTR-WT组比较,let-7e-5p agomir+3’UTR-WT组荧光素酶活性下降(P<0.05)。结论Let-7e-5p通过靶向调节Fas/FasL影响1型辅助性T细胞(Th1)/2型辅助性T细胞(Th2)平衡,从而参与AR小鼠变应性鼻炎发病的进展。

麻黄升麻汤对肝纤维化患者肝功能及血清Fas、Fasl的影响研究

【目的】探究麻黄升麻汤对肝纤维化患者肝功能和血清凋亡相关因子Fas、Fasl及肝纤维化指标的影响。【方法】将120例肝纤维化肝郁脾虚、寒热交错证患者随机分为治疗组和对照组,每组各60例。对照组给予西医常规治疗,治疗组在对照组的基础上加用麻黄升麻汤治疗,疗程为2周。观察2组患者治疗前后肝功能指标和血清凋亡相关因子Fas、Fasl及肝纤维化指标的变化情况。【结果】(1)肝功能方面:治疗后,2组患者的谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和总胆红素(TBIL)水平均较治疗前下降(P<0.05),且治疗组的下降作用均明显优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。(2)凋亡相关因子方面:治疗后,2组患者血清Fas、Fasl水平均较治疗前下降(P<0.05),且治疗组的下降作用均明显优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。(3)肝纤维化方面:治疗后,2组患者血清透明质酸酶(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、层粘连蛋白(LN)水平均较治疗前改善,且治疗组的改善作用均明显优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。【结论】麻黄升麻汤可有效改善肝纤维化肝郁脾虚、寒热交错证患者肝功能,抑制凋亡相关因子Fas、Fasl和血清肝纤维化指标的表达。

白头翁汤含药血清对口腔扁平苔藓上皮细胞增殖、凋亡及Fas/FasL信号通路的影响

目的探究白头翁含药血清对口腔扁平藓上皮细胞增殖、凋亡及Fas/FasL信号通路的影响。方法选取人口腔黏膜角质形成细胞(HOK)用脂多糖诱导建立口腔扁平藓细胞模型,分别比较空白组(正常培养)、脂多糖组(10μg/ml脂多糖)、低剂量组(10μg/ml脂多糖+2.5%的白头翁汤含药血清培养)、中剂量组(10μg/ml脂多糖+5.0%的白头翁汤含药血清培养)、低剂量组(10μg/ml脂多糖+10.0%的白头翁汤含药血清培养)细胞的增殖、凋亡及炎性因子[白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α]的表达;对5组细胞中凋亡诱导配体(FasL)受体(Fas)、FasL蛋白和mRNA进行检测。结果脂多糖组细胞分泌的炎性因子较空白组显著增加(P<0.05);低剂量组、中剂量组和高剂量组细胞中炎性细胞表达较脂多糖组均显著降低,且呈逐渐递减趋势(P<0.05)。与空白组相比,脂多糖组细胞的增殖能力明显下降,凋亡率显著升高(P<0.05);低、中、高剂量组细胞的增殖能力较脂多糖组得到明显回升,凋亡率较脂多糖组明显回降(P<0.05)。与空白组相比,脂多糖组细胞中Fas和FasL蛋白和mRNA表达显著增加(P<0.05);与脂多糖组相比较,低、中、高剂量组细胞中Fas和FasL蛋白和mRNA表达均明显回降,呈逐渐递减趋势(P<0.05)。结论白头翁含药血清可调节口腔扁平藓上皮细胞的生物学活性,促进口腔黏膜角质形成细胞增殖,抑制其凋亡,降低炎性水平,其作用机制可能与调控Fas、FasL蛋白有一定相关性。

电磁脉冲对小鼠脾细胞Fas和FasL mRNA表达的影响

目的 观察电磁脉冲对小鼠脾细胞 Fas和 Fas Lm RNA表达的影响 .方法 40只体质量 (18± 2 ) g的健康雄性 BAL B/c小鼠随机分为未照射组 (8只 )和全身照射组 (32只 ) .小鼠连续 2 d接受每日 2 5次脉冲的电磁脉冲全身照射 ,每次照射间隔约 2 min.于照射后 2 ,4,8和 12 h分别取 2只未照射小鼠和 8只照射小鼠的脾脏 .采用 RNA打点杂交法检测小鼠脾细胞 Fas和 Fas L RNA的表达水平 ,并对杂交信号进行灰度扫描后计算 RNA表达指数 .结果 受电磁脉冲照射后 2 h,小鼠脾细胞 Fas和 Fas L 的 RNA表达指数即分别从未照射的 0 .5 9± 0 .2 6和 0 .5 6± 0 .2 3升高到 0 .97± 0 .2 5和 0 .96± 0 .2 1,4h又下降至 0 .75± 0 .2 4和 0 .6 9± 0 .2 2 ,8h再度上升达最高峰 1.2 2± 0 .2 2和 1.32± 0 .5 0 (与对照组相比P<0 .0 0 1) ,于 12 h时下降至接近正常水平 .结论 电磁脉冲辐照可引起小鼠脾细胞 Fas和 Fas L RNA表达水平波动性升高 .

肝癌组织中Fas和FasL mRNA表达水平的变化及其意义

目的 探讨肝癌、癌旁及正常肝组织中Fas和FasL mRNA表达水平的变化与肝癌发生、发展的关系及其意义。方法 应用半定量RT PCR的方法检测肝癌(40例)、癌旁(40例)及正常肝(25 例)组织中Fas及FasLmRNA表达的相对含量。结果 正常肝组织、癌旁及肝癌组织中Fas 和FasL mRNA 表达的相对含量分别为0.792±0.039和0.245±0.043、0.857±0.031和0.429±0.035以及0.473±0.047和0.185±0.041。肝癌组织中Fas mRNA表达的相对含量明显低于正常肝组织和癌旁组织(P<0.05); 肝癌组织中FasL mRNA表达的相对含量亦明显低于正常肝组织(P<0.05)和癌旁组织(P<0.01),但癌旁组织中FasL mRNA表达的相对含量高于正常肝组织中的表达(P<0.05)。结论 肝癌组织不仅通过低表达Fas来逃避机体的免疫监视作用,而且还通过癌旁组织FasL的高表达,使与之接触的淋巴细胞(表达Fas)凋亡,最终使肝癌细胞逃脱机体的免疫杀伤作用,得以增殖和转移。

系统性红斑狼疮外周血单一核细胞Fas和FasL mRNA的表达

目的 探讨系统性红斑狼疮（ＳＬ）患者外周血淋巴细胞Ｆａｓ及其相应配体ＦａｓＬ的表达水平及在ＳＬＥ发病中的作用。方法 应用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测３４例活动期ＳＬＥ患者和３０例正常人外周血单一核细胞（ＰＢＭＣ）中 Ｆａｓ和 ＦａｓＬ ｍＲＮＡ的表达水平。结果活动期 ＳＬＥ患者 ＰＢＭＣ中 ＦａｓＬ的阳性检出率为 ９１． １８％，明显高于正常对照组（６３．３０％），差异非常显著（Ｐ＜０．０１）；Ｆａｓ的阳性检出率与对照组相比无明显差异（Ｐ＞０．０５）。活动期ＳＬＥ患者．ＰＢＭＣ中Ｆａｓ和ＦａｓＬ ｍＲＮＡ的平均表达水平均高于正常对照组，差异显著（Ｐ＜０．０５）。结论Ｆａｓ和ＦａｓＬ的高水平表达可能与ＳＬＥ患者外周血Ｔ淋巴细胞活化、凋亡增加有关，Ｆａｓ介导的淋巴细胞凋亡可能参与了ＳＬＥ的发病过程。

桥本甲状腺炎UGRP1与Fas介导的凋亡通路的相关性研究

目的探讨桥本甲状腺炎(HT)中子宫球蛋白相关蛋白1(UGRP1)与Fas介导的凋亡通路的相关性。方法免疫组化(IHC)法检测正常人、HT患者甲状腺细胞UGRP1的表达。在体外用质粒转染大鼠甲状腺细胞(FRTL-5细胞),分别为空载体质粒组、UGRP1质粒组、Fas质粒组,采用实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)方法检测各组细胞Fas、UGRP1基因表达水平的变化。结果HT患者甲状腺细胞UGRP1表达呈阳性,正常人甲状腺细胞UGRP1表达呈阴性。转染UGRP1质粒组的Fas基因表达水平较空载体质粒组无明显变化(1.0850±0.1249 vs1.0210±0.1139),转染Fas质粒组的UGRP1基因表达水平较空载体质粒组显著升高(P<0.0001,5.8070±0.3232 vs0.7527±0.0760)。结论桥本甲状腺炎UGRP1高表达可能与Fas介导的凋亡通路相关。

诊断超声照射后人早孕绒毛细胞Fasm RNA FasL mRNA表达的改变

目的 探讨诊断超声与人早孕绒毛Fas/FasLmRNA表达的关系。方法 对拟进行人工流产的 2 4例早孕 (4 5～ 6 0d)妇女随机分为 4组 :Ⅰ组 (对照组 )、Ⅱ组 (10min组 )、Ⅲ组 (2 0min组 )和Ⅳ组 (30min组 )。应用HP 85 0 0彩色多普勒超声诊断仪 ,对孕囊进行不同时间的持续照射 ,照射后 2 4h取材。用原位杂交技术检测上述各组绒毛滋养层细胞Fas/FasLmRNA表达情况。结果 超声照射后 10min组绒毛滋养层细胞Fas/FasLmRNA表达率与对照组差异无显著性 (P >0 0 5 ) ,2 0min组和 30min组滋养层细胞表达率明显增加 ,显著大于对照组和10min组 (P <0 0 0 1)。结论 诊断超声持续照射早孕孕囊组织 >10min可引起绒毛滋养层细胞Fas/FasLmRNA表达率增加 。