老年人牙周炎牙龈组织中凋亡细胞免疫组织化学研究

目的 :观察老年人牙周炎牙龈组织中凋亡细胞分布特点。方法 :采用特异性凋亡细胞免疫组织化学染色法 (TUNEL染色 ) ,对 15例老年人牙周炎患者 ,10例慢性成人牙周炎患者 ,10例青少年牙周炎患者和 11例健康老年人牙龈组织中阳性凋亡细胞的分布及计数进行比较研究。结果 :老年人牙周炎组阳性凋亡细胞总例数明显高于健康老年人组和慢性成人牙周炎组 (P <0 .0 5 ) ;慢性成人牙周炎组和青少年牙周炎组阳性凋亡细胞总例数也明显高于健康老年人组 (P <0 .0 5 ) ;老年人牙周炎组阳性凋亡细胞计数明显高于慢性成人牙周炎组、青少年牙周炎组和健康老年人组 (P <0 .0 5 )。结论 :感染性炎症因素和衰老因素均能促进老年人牙周炎时牙龈组织细胞凋亡 ,这两个因素的双重协同作用造成了老年人牙周炎患者局部牙龈组织对刺激做出过强的细胞凋亡反应。

增生性玻璃体视网膜病变增殖膜的免疫组织化学及细胞凋亡研究

目的 检测增生性玻璃体视网膜病变 (PVR)增殖膜标本中细胞Fas、Fas配体 (Fasligand ,FasL)的表达和凋亡 ,并探讨Fas/FasL与凋亡的关系。方法 通过免疫组织化学的方法检测 12例增殖膜标本Fas和FasL的表达 ,TUNEL技术检测凋亡细胞。结果 PVR增殖膜标本中Fas和FasL阳性细胞百分率分别为 60 6%和 43 75 % ,偶见两者同时表达的细胞。 5例前膜和 2例下膜标本可见TUNEL染色阳性细胞核。凋亡与Fas、FasL相关系数均为 0 77(t =3 82 ,P <0 0 5 ) ,PVR病程与凋亡的r值为 0 74(t =3 11,P <0 0 1)。结论 Fas、FasL高表达与凋亡的正相关性提示 ,通过Fas/FasL系统诱导增殖细胞及炎症细胞凋亡 。

TNF-相关诱导凋亡因子及其受体在人胎盘组织中的免疫组织化学定位

目的 探讨TNF相关诱导凋亡因子 (TRAIL)及其DR4、DR5受体在人胎盘组织的表达及其意义。 方法 免疫组织化学结合图像分析定量方法观察TRAIL及其DR4、DR5受体在人胎盘组织的表达及其含量的周龄变化。 结果 人胎盘滋养层细胞、绒毛基质细胞及毛细血管的内皮细胞均呈TRAIL及DR4、DR5受体免疫反应阳性 ,阳性反应物分布于胞膜及胞质 ,胞核阴性。在人胎盘绒毛的不同发育阶段中 ,TRAIL的含量相对稳定 ,而其受体DR4、DR5的含量随着周龄的增加而升高。 结论 结果显示胎盘不仅能产生TRAIL ,而且也是TRAIL的靶器官 ,TRAIL及其DR4。

TUNEL法──细胞凋亡的组织化学鉴定法

ＴＵＮＥＬ法──细胞凋亡的组织化学鉴定法细胞凋亡的概念于１９７２年由Ｋｅｒｒ等病理学家首次在形态学方面证实，认为是与坏死不同的细胞死亡现象．坏死过程中，早期细胞肿大、随后溶解；与此相反，凋亡过程中，细胞逐渐萎缩，片段化，形成所谓的凋亡小体．作为凋亡形...

地塞米松诱导小鼠胸腺凋亡的形态学及组织化学研究

地塞米松诱导小鼠胸腺凋亡的形态学及组织化学研究陈英杰孙品伟朱小辉（北京医科大学组织学与胚胎学系）采用半薄切片技术研究小鼠胸腺内细胞凋亡。对ＢＡＬＢ／ｃ小鼠腹腔内注射地塞米松诱发胸腺细胞凋亡，制成凋亡模型。于注射后１、７、１５、１９、３０ｈ取材，常规电...

固始鸡免疫器官内细胞凋亡基因Fas和FasL的动态表达

【目的】探讨固始鸡免疫器官内细胞凋亡基因Fas和FasL的动态表达。【方法】应用免疫组织化学技术和Leica显微图像处理系统,对细胞凋亡基因Fas和FasL在固始鸡免疫器官内的动态表达进行研究。【结果】Fas在不同发育阶段固始鸡免疫器官内均有表达,但表达量均不相同,呈波浪样动态变化;Fas表达于固始鸡免疫器官内淋巴细胞细胞膜和细胞质,不表达于细胞核;Fas表达阳性细胞在固始鸡不同免疫器官内分布位置不同,呈散在或簇团状分布:法氏囊内阳性细胞主要分布于黏膜靠近上皮细胞的固有膜层内、淋巴小结与淋巴小结之间区域、淋巴小结边缘,淋巴小结内少量淋巴细胞也有Fas表达;胸腺内主要分布于胸腺小叶髓质,极少出现在皮质内;脾脏内主要分布于红髓和边缘区、淋巴小结周围和动脉周围淋巴鞘周围的区域,动脉周围淋巴鞘极少有Fas表达,淋巴小结无Fas表达。FasL在固始鸡免疫器官内的表达与Fas相似,但表达量与Fas相比较少。【结论】细胞凋亡基因Fas和FasL参与了固始鸡免疫器官内淋巴细胞发育分化过程中的凋亡调控,并对免疫器官的稳定发挥重要作用。

Fas、FasL在非小细胞肺癌中的表达及其与肿瘤免疫和细胞凋亡的关系

目的为探讨Fas/FasL系统在非小细胞肺癌(NSCLC)发生发展中所起的免疫逃逸作用,为临床早期诊断肺癌、判断预后、设计新的治疗策略提供依据。方法采用免疫组织化学方法检测Fas、FasL在NSCLC组织及正常肺组织中的表达,同时采用抗CD45RO抗体检测肿瘤组织中浸润淋巴细胞(TIL)的数量,应用TUNEL技术检测肺癌细胞凋亡。结果 Fas在肺癌组织低表达并存在异位表达,表达率与细胞分化有关;FasL在肺癌组织中高表达,表达率和细胞类型及淋巴结转移相关,与TIL浸润程度呈负相关,Fas表达与肺癌细胞凋亡水平无关。结论 NSCLC肺癌组织中普遍存在Fas表达的下调、异位表达及FasL高表达,导致癌细胞的免疫逃逸,参与NSCLC的发生和发展。

黄芪皂苷钠治疗后烫伤鼠肺组织细胞凋亡及Fas/FasL的表达

目的 探讨黄芪皂苷治疗后烫伤鼠肺组织细胞凋亡及基因调控变化机制 ,为进一步阐明烫伤鼠肺组织细胞凋亡机制和在细胞凋亡水平防治烧伤后脏器损伤提供理论依据。方法 采用Tunel法及免疫组化技术观察黄芪皂苷治疗后烫伤鼠肺组织细胞凋亡 ,同时测定肺组织Fas/FasL的表达的变化。结果 鼠烫伤后肺组织细胞凋亡明显增加 ,表现为肺泡上皮细胞和肺血管内皮细胞凋亡增加 (P <0 0 5 ) ;Fas抗原、FasL在烫伤鼠肺组织表达明显上调 (P <0 0 1) ,Fas抗原、FasL表达的增加与肺组织细胞凋亡增加呈平行关系 ;用黄芪皂苷治疗后凋亡明显减少 ,Fas抗原、FasL表达减弱。结论 黄芪皂苷治疗后可在一定程度上防治烫伤鼠肺泡上皮和肺血管内皮细胞凋亡 。

化学修饰的茯苓多糖抗肿瘤效应的免疫组织化学观察

目的:揭示化学修饰的茯苓多糖抗肿瘤效应与凋亡相关基因蛋白Fas、Bcl-2和Bax的关系。方法:①在背部皮下接种了Sarcoma 180肿瘤细胞(5×106)的7-8周龄BALB/c小鼠,被随机分为茯苓多糖治疗组和PBS缓冲溶液阴性对照组,每组10只。进行腹腔注射,每天1次,连续注射7 d。于第9天处死小鼠取出肿瘤组织。②用免疫组织化学SP法测定荷瘤小鼠肿瘤组织中Fas、Bcl-2和Bax基因蛋白的表达。结果:实验组Fas阳性率为64.99%,阴性对照组阳性率为4.12%,两组间差异有显著性意义(P<0.01);实验组Bcl-2阳性率为17.97%,阴性对照组阳性率为47.96%,两组间差异有显著性意义(P<0.01);实验组Bax阳性率为48.05%阴性对照组阳性率为2.45%,两组间差异有显著性意义(P<0.01)。结论:化学修饰的茯苓多糖对小鼠Sarcoma 180肿瘤细胞有诱导凋亡的作用。

胃癌组织中FasL表达及其与细胞凋亡的关系

Ｆａｓ配体（Ｆａｓｌｉｇａｎｄ，ＦａｓＬ）是一种介导细胞凋亡的膜蛋白，属ＴＮＦ家族成员。目前研究认为ＦａｓＬ是死亡因子，Ｆａｓ则是它的受体，当ＦａｓＬ与Ｆａｓ结合时，Ｆａｓ可向细胞传递“死亡信号”，触发Ｆａｓ所在靶细胞凋亡〔１〕。过去认为人类只有激活...

凋亡小体形成的组织化学分析

本文采用地塞米松磷酸钠诱导小鼠胸腺细胞发生凋亡为模型，通过浮尔根染色，以及电镜方法，观察了凋亡细胞的凋亡小体的形成过程。光镜下凋亡细胞内形成致密的被染成红色的ＤＮＡ成份，逐渐断裂、分离。电镜下可见凋亡细胞染色质浓缩、凝聚，被双层核膜所包绕；逐渐断裂后，向细胞外移动，最后形成由细胞膜包绕的凋亡小体，并与细胞分离。形成的凋亡小体可与巨噬细胞相结合，并被巨噬细胞所吞噬。本文从形态学上连续地观察了凋亡小体的形成过程，并证实了凋亡小体中主要成份为凝聚、断裂的染色质（ＤＮＡ）成份。

自身免疫性甲状腺疾病甲状腺组织中凋亡调控蛋白Fas/FasL、Bcl-2/Bax的表达及意义

目的探讨凋亡调控蛋白Fas/FasL、Bcl-2/Bax在Graves病(GD)和桥本氏病(HT)中的表达及意义。方法取外科手术切取的GD及HT病人甲状腺组织标本,颈部手术时取正常甲状腺组织作为对照;采用免疫组织化学方法检测甲状腺标本Fas/FasL、Bcl-2/Bax的表达和分布状况。结果(1)Fas/FasL在GD和HT甲状腺滤泡上皮细胞表达均较正常对照组增高(P<0.01)。(2)在GD甲状腺滤泡上皮细胞Bcl-2及Bax表达明显高于HT组及正常对照组,以Bcl-2表达强度显著高于同组Bax(P<0.01),而在HT,Bcl-2表达强度与正常对照组比较差异无统计学意义。(3)GD与HT相比较,GD甲状腺滤泡细胞及浸润淋巴细胞Fas,Bcl-2抗原表达均强于HT,但其浸润淋巴细胞表达强度明显低于同组甲状腺滤泡细胞(均P<0.05)。结论Fas/FasL高表达和Bcl-2的低表达可能引起HT甲状腺滤泡上皮细胞的凋亡。在GD,Fas、Bax诱导细胞凋亡的作用可能被高表达Bcl-2对抗,从而致甲状腺体积增大、功能亢进。此外,Bcl-2与Bax表达强度的比值对于凋亡的调控有重要影响作用。

肺气虚证模型大鼠肺组织细胞凋亡及Fas、FasL蛋白表达变化

目的 :探讨肺气虚证细胞凋亡机制。方法 :用两次气管内注入脂多糖 (LPS)及熏香烟 4周的复合刺激法复制肺气虚证大鼠模型 ,4周后对两组动物进行电镜观察和免疫组化检测。结果 :与对照组比较 ,模型组可见肺组织细胞凋亡明显增加 ,Fas、FasL蛋白在肺组织中的表达明显上调。结论 :Fas、FasL可能参与了肺气虚的发病及肺组织细胞凋亡的调控。

补骨脂素加长波紫外线光化学疗法诱导HL-60、K562细胞凋亡及对Fas、FasL表达的影响

目的探讨补骨脂素(PSO)加长波紫外线(PUVA)光化学疗法(UVA)诱导人白血病细胞HL-60、K562凋亡及对Fas、FasL表达的影响。方法以HL-60、K562细胞为研究对象,以细胞凋亡率、电镜下细胞超微结构改变以及细胞Fas、FasL在基因、蛋白水平的表达为检测指标,观察PSO加波长为360 nm的UVA对人白血病细胞诱导凋亡的作用以及部分作用途径,并采用多因素方差分析法进行统计学处理。结果PSO、UVA照射及PUVA均可诱导HL-60、K562细胞发生凋亡,PUVA的作用显著强于前两者。电镜下观察经PUVA处理后的HL-60、K562细胞超微结构,可见明显的凋亡形态学改变。PSO、UVA照射及PUVA均可上调HL-60、K562细胞Fas在基因、蛋白水平的表达,下调FasL在基因、蛋白水平的表达,PUVA的作用显著强于前两者。结论PUVA可诱导白血病细胞HL-60、K562发生凋亡,作用强于PSO及UVA照射。PUVA诱导HL-60、K562细胞凋亡的途径之一为上调细胞Fas基因表达水平,下调FasL基因表达水平。

补骨脂素光化学疗法对人白血病细胞凋亡及FasL表达的影响

目的探讨补骨脂素(PSO)加长波紫外线(UVA)光化学疗法(PUVA)对人白血病细胞HL-60、K562、NB4凋亡及FasL表达的影响。方法以HL-60、K562、NB4细胞为研究对象,观察PSO加波长为360 nm的UVA对人白血病细胞诱导凋亡的细胞凋亡率、电镜下细胞超微结构改变以及细胞FasL在基因、蛋白水平的表达情况以及作用途径。结果PSO、UVA照射及PUVA均可诱导白血病细胞发生凋亡,PUVA的作用效果最强;电镜下观察经PUVA处理后的白血病细胞超微结构,可见明显的凋亡形态学改变;PSO、UVA照射及PU- VA均可下调FasL在基因、蛋白水平的表达,PUVA的作用显著强于前两者。结论PUVA可诱导白血病细胞发生凋亡,作用强于PSO及UUA照射;PUVA诱导白血病细胞凋亡的途径之一为下调FasL基因表达水平。

大鼠脑组织损伤后局部细胞免疫与神经元凋亡的关系

目的研究大鼠脑组织损伤后不同时期损伤灶局部CD4+、CD8+T淋巴细胞浸润情况的变化及其与损伤灶局部神经元凋亡之间的关系。方法制作大鼠脑组织损伤模型,应用免疫组化方法,在不同时程检测脑组织损伤灶局部CD4+、CD8+T细胞数及神经元凋亡数。结果伤后24h脑组织损伤灶局部CD4+、CD8+T细胞即有明显增加,伤后10d达到高峰,与对照组比较分别上升了15倍和20倍,伤后30d逐渐下降。同时期损伤灶局部神经元凋亡数亦呈现出类似的变化规律。相关分析显示损伤灶局部CD4+、CD8+T细胞数变化与神经元凋亡数之间呈密切的正相关关系。结论颅脑损伤后,脑组织损伤灶局部CD4+、CD8+T细胞增加非常显著,细胞免疫应答显著增强,介导损伤灶局部神经元凋亡,加重脑组织继发性损伤。

口腔鳞癌组织细胞凋亡相关蛋白Fas/FasL的表达研究

目的 研究调亡相关蛋白Fas、FasL在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及意义。方法 应用免疫组织化学方法检测 10例正常口腔粘膜、 38例口腔鳞癌组织及肿瘤浸润淋巴细胞 (TIL)和 11例转移淋巴结中Fas、FasL的表达。结果 Fas在正常口腔粘膜中广泛表达 ;鳞癌组织表达明显下调 (P <0 .0 5 ) ;Fas表达与口腔鳞癌分化程度有关 ;淋巴结转移癌中Fas表达减弱。FasL在正常口腔粘膜不表达 ;鳞癌组织表达明显上调 (P <0 .0 5 ) ;FasL表达与口腔鳞癌分化程度无关 (P >0 .0 5 ) ;有淋巴结转移者FasL阳性表达率高于无转移者 (P <0 .0 5 )。TIL细胞Fas、FasL阳性表达率为 81.6 %和 84 .2 % .。Fas、FasL在口腔鳞癌的表达有明显相关性 (P <0 .0 5 )。结论 Fas表达与口腔粘膜上皮细胞的自然分化成熟衰老及口腔鳞癌的形成和肿瘤的恶性度有关。FasL的表达上调可能是口腔鳞癌组织免疫反攻击的体现 ,对促进肿瘤的发生发展及转移有重要作用。

癌旁组织中FasL表达与淋巴细胞凋亡的关系

目的 通过对人体肿瘤标本的连续切片 ,测定同一区域肿瘤周边病灶中淋巴细胞上的FasL和肿瘤浸润淋巴细胞凋亡的关系 ,探讨肿瘤免疫逃避的机制。方法 应用免疫组织化学法染色检测 30例肿瘤病理标本中FasL的表达和淋巴细胞凋亡 ,采用显微图像分析系统进行平均灰度值测定。结果 肿瘤周边病灶中淋巴细胞上的FasL和淋巴细胞凋亡的平均灰度值之间具有相关性 (r=0 .75 7) ,且有统计学意义 (P <0 .0 0 1)。结论 肿瘤细胞能通过主动分泌FasL ,并与肿瘤浸润淋巴细胞 (TIL)上的Fas受体结合 ,进而诱导淋巴细胞凋亡 ,从而成功逃避机体的免疫攻击。