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Effects of Mirazid~ and myrrh volatile oil on adult Fasciola gigantica under laboratory conditions 被引量:1
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作者 AM Massoud HA Shalaby +2 位作者 RM El Khateeb MS Mahmoud MA Kutkat 《Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine》 SCIE CAS 2012年第11期875-884,共10页
Objective:To evaluate the effects of Mirazid and myrrh volatile oil on adult Fasciola gigantica(F.gigantica) under laboratory conditions.Methods:The effects of oleoresin extract of myrrh(Mirazid) and myrrh volatile oi... Objective:To evaluate the effects of Mirazid and myrrh volatile oil on adult Fasciola gigantica(F.gigantica) under laboratory conditions.Methods:The effects of oleoresin extract of myrrh(Mirazid) and myrrh volatile oil on the surface morphology of adult F.gigantica following treatment in vitro had been determined by scanning electron microscopy.The results were compared with those observed in the fluke tegument following incubation in triclabendazole sulphoxide(TCBZ-SO),active form.(Fasinex,Ciba-Geigy).Results:Observations of the efficacy of Mirazid oleoresin extract and myrrh volatile oil indicated that both products showed dosedependent anthelmintic efficacy.The anterior half of the fluke was consistently more severely affected than the posterior half.The surface changes induced by Mirazid oleoresin extract were less severe than those observed after exposure to either myrrh volatile oil or TCBZ-SO.Flukes showed swelling after these treatments,but its level and blebbing were much greater with myrrh volatile oil;in which patches of tegumental sloughing were observed in the apical cone and the posterior mid-body region of flukes.This was not observed after treatment with Mirazid oleoresin extract.Conclusions:The comparatively more disruption,observed in myrrh volatile oil exposed specimens,compared to that exposed to Mirazid oleoresin extract might suggest that the anthelmintic activity of Mirazid oleo resin extract was attributed to its content of volatile oil.So,increasing the concentration of myrrh volatile oil in Mirazid might possibly help to developing its anthelmintic activity._______________________________________________ 展开更多
关键词 fasciola gigantica Mirazid Myrrh VOLATILE OIL In VITRO effect
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Prevalence of infection and molecular confirmation by using ITS-2 region of Fasciola gigantica found in domestic cattle from Chiang Mai province,Thailand
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作者 Anawat Phalee Chalobol Wongsawad 《Asian Pacific Journal of Tropical Medicine》 SCIE CAS 2014年第3期207-211,共5页
Objective:To investigate the infection of Fasciola gigantka(F.gigantka)in domestic cattle from Chiang Mai province and molecular confirmation using ITS-2 region.Methods:The liver and gall bladder of Bubalus bubalis(B.... Objective:To investigate the infection of Fasciola gigantka(F.gigantka)in domestic cattle from Chiang Mai province and molecular confirmation using ITS-2 region.Methods:The liver and gall bladder of Bubalus bubalis(B.bubalis)and Bos taurus(B.taunts)from slaughterhouses were examined adult worms and prevalence investigation.The species confirmation with phylogenetic analysis using ITS-2 sequences was performed by maximum likelihood and UPGMA methods.Results:The total prevalences of infection in B.bubalis and Bubalus taurus(B.taurus)were67.27%and 52.94%respectively.The respective prevalence in both B.bubalis and B.taurus were acquired from Doi-Saket,Muang,and Sanpatong districts,with 81.25%,62.50%and 60.00%for B.bubalis and 62.50%,50.00%and 47.06%for Bos taunts respectively.The species confirmation of F.gigantka and some related species by basing on maximum likelihood and UPGMA methods used,4 groups of trematodes were generated,first F.gigantka group including specimen of Chiang Mai,second 2 samples of F.hepatica,third group of 3 rumen flukes;Orthocoelium streptocoelium,F.elongatus and Paramphistomum epliclitum and fourth group of 3 minute intestinal flukes:Haplorchis taichui,Stellantchasmu falcatus.Haplorchoides sp.and liver fluke;Opisthorchis civerrini respectively.Conclusions:These results can be confirmed the Giant liver fluke which mainly caused fascioliasis in Chiang Mai was identified as F.gigantka and specimens were the same as those of F.gigantka recorded in olher different countries.Nucleotide sequence of ITS-2 region has been proven as effective diagnostic tool for the identification of F.gigantka. 展开更多
关键词 fasciola gigantica Domestic cattle Chiang MAI MOLECULAR CONFIRMATION ITS-2 REGION
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Morphology and viability of adult Fasciola gigantica(giant liver flukes) from Philippine carabaos(Bubalus bubalis) upon in vitro exposure to lead
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作者 Aimee Caye G. Chang Mary Jane C. Flores 《Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine》 SCIE CAS 2015年第6期491-493,共3页
Objective: To evaluate the effects of lead in the morphology and viability of Fasciola gigantica(F. gigantica)(giant liver fluke) isolated from infected livers of carabaos in vitro using the following concentrations o... Objective: To evaluate the effects of lead in the morphology and viability of Fasciola gigantica(F. gigantica)(giant liver fluke) isolated from infected livers of carabaos in vitro using the following concentrations of lead: 0, 100, 150 and 200 mg/L. Methods: In vitro viability and motility assay was conducted to evaluate the ef ects of lead using 1% methylene blue as the vital dye for assessment of the l ukes' viability. Results: Results indicate that F. gigantica can tolerate lead exposure as high as 200 mg/L with visible morphological variations. Upon exposure to lead, liver l ukes tend to curl and excrete black precipitates as a sign of physiological stress response. Furthermore, the lethal concentration(LC50) of lead against F. gigantica in vitro was 160 mg/L. Conclusions: In conclusion, tolerance of liver flukes to high levels of lead suggests its potential as a possible biomarker of environmental pollution. 展开更多
关键词 fasciola gigantica GIANT liver FLUKE Carabaos Heavy metal LEAD LC50 Philippines
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Tegumental histological effects of Mirazid~ and myrrh volatile oil on adult Fasciola gigantica
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作者 Ahmad Mohamed Massoud Hatem Abdel Mawgoud Shalaby +2 位作者 Rabab Mohamed El Khateeb Mona Said Mahmoud Mohamed Abdel Aziz Kutkat 《Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine》 SCIE CAS 2013年第6期501-504,共4页
Objective:To evaluated the histological changes within the tegument of adult Fasciola gigantica(F.gigantica)that led to the gross changes that were visible externally.Methods:The effects of oleoresin extract of myrrh(... Objective:To evaluated the histological changes within the tegument of adult Fasciola gigantica(F.gigantica)that led to the gross changes that were visible externally.Methods:The effects of oleoresin extract of myrrh(Mirazid^(?)),myrrh volatile oil and triclabendazole sulphoxide(reference drug)on the tegumental structure of adult F.gigantiea following treatment in vitro had been determined by light microscopy.Results:The internal changes in the tegument observed in this study were compatible with surface changes seen in the previous scanning electron microscopy study,using the same drugs.The swelling of tegumental syncytium was a particular feature of their action,but its level was much greater with myrrh volatile oil,in which vacuolization of the tegument and loss of spines were observed.Conclusions:The present study demonstrated the fasciocidal properties of Mirazid^(?)oleoresin extract,and it might be possible to reinforce its fasciocidal activity by increasing its content of myrrh volatile oil. 展开更多
关键词 fasciola gigantica Mirazid Myrrh VOLATILE OIL HISTOLOGICAL effect
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大片吸虫磷酸丙糖异构酶基因的克隆表达和免疫原性分析
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作者 姚文浩 吴兴隆 +5 位作者 秦志博 李文豪 朱惠丽 王磊 胡建和 韩艳辉 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2024年第1期39-45,共7页
磷酸丙糖异构酶(TPI)是生物体糖酵解的一种关键酶,对大片吸虫获取能量而赖以生存有着十分重要的作用。本试验根据肝片吸虫TPI(GenBank:KC164346.1)的基因序列,设计带有BamHⅠ和XhoⅠ作为酶切位点的引物,以大片吸虫的cDNA为模板,扩增大... 磷酸丙糖异构酶(TPI)是生物体糖酵解的一种关键酶,对大片吸虫获取能量而赖以生存有着十分重要的作用。本试验根据肝片吸虫TPI(GenBank:KC164346.1)的基因序列,设计带有BamHⅠ和XhoⅠ作为酶切位点的引物,以大片吸虫的cDNA为模板,扩增大片吸虫磷酸丙糖异构酶(FgTPI)基因。结果:FgTPI基因开放阅读框为762 bp,编码253个氨基酸,理论等电点pI为8.07;构建的重组表达质粒FgTPI-pET-28a(+)成功在大肠杆菌中表达,重组蛋白的分子量约为32 kDa;重组蛋白免疫BALB/c小鼠,收取多克隆抗体,ELISA检测结果显示,rFgTPI能诱导较高的IgG抗体水平;用感染大片吸虫动物的血清检测重组蛋白的免疫原性,Western blot分析表明,重组蛋白rFgTPI具有良好的免疫原性;生物信息学预测显示,FgTPI主要以α螺旋和β折叠为主,β转角较少,有3个较长的无规则卷曲;通过α-磷酸甘油脱氢酶偶联法测定其活性,发现FgTPI酶促反应最佳pH值为7.5,最适温度为35℃。本试验结果为深入研究FgTPI的生物学功能、评价其作为抗大片吸虫病疫苗候选分子奠定了基础。 展开更多
关键词 大片吸虫 磷酸丙糖异构酶 克隆 表达 酶活性分析
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<i>Fasciola hepatica</i>and Associated Parasite, <i>Dicrocoelium dendriticum</i>in Slaughter Houses in Anyigba, Kogi State, Nigeria
6
作者 Florence Oyibo Iyaji Clement Ameh Yaro +1 位作者 Mercy Funmilayo Peter Agatha Eleojo Onoja Abutu 《Advances in Infectious Diseases》 2018年第1期1-9,共9页
Fasciola hepatica is a parasite of clinical and veterinary importance which causes fascioliasis that leads to reduction in milk and meat production. Bile samples were centrifuged at 1500 rpm for ten (10) minutes in a ... Fasciola hepatica is a parasite of clinical and veterinary importance which causes fascioliasis that leads to reduction in milk and meat production. Bile samples were centrifuged at 1500 rpm for ten (10) minutes in a centrifuge machine and viewed microscopically to check for F. hepatica eggs. A total of 300 bile samples of cattle which included 155 males and 145 females were collected from the abattoir. Results were analyzed using chi-square (p > 0.05). The prevalence of F. gigantica and Dicrocoelium dentriticum is 33.0% (99) and 39.0% (117) respectively. Age prevalence of F. hepatica revealed that 0 - 2 years (33.7%, 29 cattle) were more infected than 2 - 4 years (32.7%, 70 cattle) while for D. dentriticum age 2 - 4 years were more infected than 0 - 2 years with prevalence of 40.2% (86) and 36.0% (31) respectively. No significant difference (P > 0.05) existed in prevalence in ages of the cattle. Out of the 300 bile samples examined, 22.3% (67 cattle) were co-infected with F. hepatica and D. dendriticum. Males were more co-infected than females having a prevalence of 24.5% (38 cattle) and 20.0% (29 cattle) respectively. Based on the age, samples of age 0 - 2 years were more co-infected than those of age 2 - 4 years with a prevalence of 23.3% (20 cattle) and 22.0% (47 cattle) respectively. The findings of this present study revealed that efforts to alleviate problems of animal health and productivity are yet to make any significant impact as this poses threat on human health. Investigation on the pattern of infections in cattle slaughtered should be strengthened. 展开更多
关键词 fasciola gigantica DICROCOELIUM dendriticum Parasites FASCIOLIASIS Kogi STATE
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大片形吸虫丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶2A的原核表达及不同时期表达水平分析
7
作者 章志涛 李祥龙 +2 位作者 孔令丽 罗雨昕 王冬英 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期1107-1117,共11页
【目的】克隆大片形吸虫丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶2A(Ser/Thr protein phosphatases 2A,PP2A)基因并构建原核表达载体,获得原核表达蛋白,为探究PP 2 A基因功能及其在大片形吸虫的发育中的作用奠定基础。【方法】提取大片形吸虫成虫虫体... 【目的】克隆大片形吸虫丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶2A(Ser/Thr protein phosphatases 2A,PP2A)基因并构建原核表达载体,获得原核表达蛋白,为探究PP 2 A基因功能及其在大片形吸虫的发育中的作用奠定基础。【方法】提取大片形吸虫成虫虫体组织总RNA,应用RT-PCR方法扩增PP 2 A基因的完整编码区序列,并以双酶切的方式连接pET-28a(+)载体;经酶切、测序鉴定后获得阳性质粒pET-28a-PP2A,将pET-28a-PP2A重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞进行IPTG诱导表达,并对重组蛋白的诱导条件进行优化;通过SDS-PAGE及Western blotting检测大片形吸虫PP 2 A基因的表达效果;应用实时荧光定量PCR检测PP 2 A基因在大片形吸虫虫卵、囊蚴、6周龄童虫和成虫阶段中的表达情况。【结果】克隆的大片形吸虫PP 2 A基因编码区序列长1161 bp,编码386个氨基酸,分子式为C_(1980)H_(3105)N_(535)O_(566)S_(24),分子质量为44.23 ku。生物信息学分析结果显示,大片形吸虫PP 2 A基因编码的蛋白为PP2Ac,分子功能为信号转导(GO:0004871),生物学过程为蛋白去磷酸化(GO:0006470),细胞组分为细胞质(GO:0005829)。PP2A蛋白无信号肽,不存在跨膜结构域,为亲水性蛋白,共含有37个磷酸位点。SDS-PAGE和Western blotting结果显示,大片形吸虫PP2A在30℃、0.8 mmol/L IPTG诱导6 h时表达量最大,表达产物主要以包涵体的形式存在,且Western blotting检测结果显示,重组蛋白可被抗His标签识别;实时荧光定量PCR结果显示,PP 2 A基因在大片形吸虫6周龄童虫阶段表达量最高,极显著高于其他阶段(P<0.01);在囊蚴阶段的表达量最低,与虫卵阶段差异不显著(P>0.05)。【结论】本研究成功构建了大片形吸虫PP2A原核表达载体并获得相应蛋白,为研究PP 2 A基因在大片形吸虫生长发育中的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 大片形吸虫 丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶2A(PP2A) 原核表达
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一次和二次感染大片吸虫水牛PBMC因子动态变化的研究
8
作者 孟震 郑梦伟 +4 位作者 何康欣 袁湘祥 王锦辉 张为宇 邸文达 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2023年第9期6-12,共7页
为了探究水牛一次和二次感染大片吸虫后外周血单核细胞(PBMC)因子的动态变化,试验将6头10月龄杂交水牛均分为一次感染组和二次感染组,一次感染组于第4周时口服感染囊蚴250个,二次感染组于第0,4周时分别口服感染囊蚴250个,采用间接ELISA... 为了探究水牛一次和二次感染大片吸虫后外周血单核细胞(PBMC)因子的动态变化,试验将6头10月龄杂交水牛均分为一次感染组和二次感染组,一次感染组于第4周时口服感染囊蚴250个,二次感染组于第0,4周时分别口服感染囊蚴250个,采用间接ELISA方法检测是否感染成功。一次感染组于第4(感染前)~10,15,20周及二次感染组于第0(感染前)~10,15,20周时采集水牛颈静脉血液并分离PBMC,提取RNA后进行实时荧光定量PCR扩增,分析不同时间PBMC标志免疫相关的细胞因子——Th1[γ干扰素(IFN-γ)]、Th2[白细胞介素-4(IL-4)]、Treg[白细胞介素-10(IL-10)、转化生长因子-β(TGF-β)]基因的相对表达量变化。结果表明:一次感染组和二次感染组水牛分别在第6,3周被确定感染,动物模型构建成功。与感染前相比,一次感染组IFN-γ基因相对表达量在第6周显著降低(P<0.05),第15周极显著升高(P<0.01),第20周显著升高(P<0.05);二次感染组在整个试验期均差异不显著(P>0.05)。一次感染组IL-4基因相对表达量在第15,20周极显著升高(P<0.01);二次感染组在第15周极显著升高(P<0.01),第20周显著升高(P<0.05)。一次感染组IL-10基因相对表达量在第5周显著升高(P<0.05);二次感染组在第15周显著升高(P<0.05)。一次感染组TGF-β基因相对表达量在第5周极显著升高(P<0.01),二次感染组在第5周显著升高(P<0.05)。一次感染组与二次感染组比较,IFN-γ、IL-4、TGF-β基因相对表达量均差异不显著(P>0.05),IL-10基因相对表达量在第15周差异显著(P<0.05),此外在第5周IFN-γ基因相对表达量呈现出明显不同的变化趋势。说明大片形吸虫一次和二次感染水牛引起的免疫应答类似,提示一次感染大片吸虫未能诱导水牛产生有效杀伤虫体的免疫应答,是水牛对大片吸虫二次感染易感的原因之一。 展开更多
关键词 大片吸虫 调节性T淋巴细胞 免疫应答 二次感染 PBMC因子
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大片形吸虫外泌体对水牛外周血单核巨噬细胞极化的影响
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作者 王渝瑞 王乐铭 +1 位作者 朱彬 王冬英 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2023年第1期88-94,共7页
为探讨大片形吸虫外泌体(FgExo)在宿主免疫调节方面的作用,本研究采用聚合物沉淀法和超速离心法从大片形吸虫分泌排泄产物(FgESP)中分离得到FgExo;采用荧光定量PCR(qPCR)法检测不同浓度的FgESP或FgExo作用于水牛外周血单核巨噬细胞(Mφ... 为探讨大片形吸虫外泌体(FgExo)在宿主免疫调节方面的作用,本研究采用聚合物沉淀法和超速离心法从大片形吸虫分泌排泄产物(FgESP)中分离得到FgExo;采用荧光定量PCR(qPCR)法检测不同浓度的FgESP或FgExo作用于水牛外周血单核巨噬细胞(Mφ)后γ-干扰素(IFN-γ)、白介素-10(IL-10)的转录水平;根据qPCR结果选择50μg/mL FgExo(+5μg/mL脂多糖)、200μg/mL FgESP(+5μg/mL脂多糖)作为试验组,以PBS为阴性对照组、脂多糖为阳性对照组,分别作用于Mφ后采用qPCR检测Mφ分型相关基因诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、CD86、精氨酸酶2(Arg-2)、CD206的转录水平;ELISA检测白介素-1β(IL-1β)、转化生长因子-β1(TGF-β1)分泌水平。结果显示:FgExo和FgESP可显著上调MφIL-10 mRNA的转录水平,显著抑制IFN-γmRNA的转录水平;显著上调M2型Mφ标记物CD206及相关因子Arg-2、TGF-β1的表达,显著抑制M1型Mφ标记物CD86及相关因子iNOS、IL-1β的表达。本研究结果表明,FgExo和FgESP均能够使水牛外周血单核巨噬细胞向M2型极化,利于大片形吸虫在水牛体内生存。 展开更多
关键词 大片形吸虫 外泌体 外周血单核巨噬细胞 极化
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云南省首次暴发巨片形吸虫感染的临床诊治分析 被引量:14
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作者 顾伟 苏慧勇 +4 位作者 邹静 李芹翠 陈白云 林灿松 焦建明 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期455-459,共5页
目的分析云南省首次暴发巨片形吸虫(Fasciola gigantica)感染的临床诊治过程,为今后对该病的诊治提供参考。方法收集27例患者的发病、诊断和治疗资料。对患者及其家属和部分村民进行问卷调查,内容包括生食史和宠物饲养史等。采集各类动... 目的分析云南省首次暴发巨片形吸虫(Fasciola gigantica)感染的临床诊治过程,为今后对该病的诊治提供参考。方法收集27例患者的发病、诊断和治疗资料。对患者及其家属和部分村民进行问卷调查,内容包括生食史和宠物饲养史等。采集各类动物粪便,使用粪便沉淀法和虫卵孵育法进行粪检。选择两户患者家饲养的牛各1头,剖检寄生虫感染情况。ELISA检测患者、患者家属和部分患者同村居民的血样。在患者居住的15个村庄附近(共选35个点)的溪流和水塘边,采集中间宿主螺类,检测感染情况。结果 27例患者,最早1例发病于2011年3月10日,最后1例发病于2012年1月10日。临床表现主要为不明原因发热、血红蛋白下降、嗜酸粒细胞增高、肝脾肿大等。粪检寄生虫卵均为阴性。先后给予抗菌、抗寄生虫治疗,均未见好转。经流行病学调查27例患者均有食生拌鱼腥草史。后经ELISA检测血清巨片形吸虫抗体,其中23例患者为阳性。2012年2月16日经反复粪检于4例患者粪便中查见巨片形吸虫卵。剖解牛的肝胆系统中查到巨片形吸虫虫卵及成虫。确诊该组病例为巨片形吸虫感染。给予三氯苯达唑[10 mg/(kg.d)×2 d]连服2 d,临床症状全部缓解,在宾川州城存在中间宿主尖膀胱螺(Physa acuta)、椭圆萝卜螺(斯氏萝卜螺)(Radix swinhoei)和小土蜗(Galba pervia)。结论人体感染巨片形吸虫较为少见,该病因无特异的临床表现而较难确诊,三氯苯达唑治疗效果良好。 展开更多
关键词 巨片形吸虫 诊断 治疗 三氯苯达唑
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云南省首次爆发流行巨片形吸虫感染10例 被引量:11
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作者 邹静 顾伟 +3 位作者 焦建明 杜茜茹 何连福 张平 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2012年第21期1978-1981,共4页
目的:探讨云南省爆发的巨片形吸虫感染的发病情况、临床表现及该病的流行病学、影像学、生化特点.方法:对我院2011-12/2012-02收治的10例感染巨片形吸虫患者临床资料进行分析和总结.结果:巨片形吸虫感染人体在国内外少见,主要以高热起病... 目的:探讨云南省爆发的巨片形吸虫感染的发病情况、临床表现及该病的流行病学、影像学、生化特点.方法:对我院2011-12/2012-02收治的10例感染巨片形吸虫患者临床资料进行分析和总结.结果:巨片形吸虫感染人体在国内外少见,主要以高热起病,均有嗜酸性粒细胞增高,伴有不同程度的消化系症状,肝脏损伤等表现.感染的10例病例具有相似的临床表现、流行病学特征、影像学、生化特点,病程也相近.结论:巨片形吸虫感染人体少见,这给临床诊治带来较大的困难,临床工作中极易误诊,所以在临床工作中遇到类似病例需要引起重视. 展开更多
关键词 巨片形吸虫 感染 肝脏损伤
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应用电化学免疫传感器检测大片形吸虫抗原抗体反应的研究 被引量:6
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作者 陈汉忠 蒋金书 李义平 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期339-342,共4页
应用电化学免疫传感器,以恒电位法检测了大片形吸虫的抗原抗体反应,结果表明,该传感器可应用于大片形吸虫的抗原抗体反应的检测,阳性血清与阴性血清的电流响应曲线具有明显的离散度;初步试验表明,该法的检测结果相对于ELISA检测结果,其... 应用电化学免疫传感器,以恒电位法检测了大片形吸虫的抗原抗体反应,结果表明,该传感器可应用于大片形吸虫的抗原抗体反应的检测,阳性血清与阴性血清的电流响应曲线具有明显的离散度;初步试验表明,该法的检测结果相对于ELISA检测结果,其符合率为83.3%;该法还具有操作简便、检测快速、选择性好等特点,测定一个样品用时不到1h,每测一个样品血清用量仅10μl,与羊等多种血清无交叉反应。 展开更多
关键词 大片形吸虫 抗原抗体反应 电化学免疫传感器 检测 诊断 大片形吸虫病
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广西钦州市郊区水牛大片吸虫感染情况调查分析 被引量:5
13
作者 何山红 班克满 +2 位作者 郭亚芬 杨丰利 韦英明 《广西农业科学》 CAS CSCD 2010年第11期1237-1239,共3页
为了掌握广西钦州市郊区水牛大片吸虫感染情况,采用ELISA方法测定了从钦州市屠宰场随机抽样采集的70份水牛血清样品。结果表明,70份水牛血清样品中有27份血清大片吸虫抗体呈阳性,阳性率为38.57%;各年龄段水牛均有大片吸虫感染,最小年龄... 为了掌握广西钦州市郊区水牛大片吸虫感染情况,采用ELISA方法测定了从钦州市屠宰场随机抽样采集的70份水牛血清样品。结果表明,70份水牛血清样品中有27份血清大片吸虫抗体呈阳性,阳性率为38.57%;各年龄段水牛均有大片吸虫感染,最小年龄为2岁,最大为12岁,但主要集中在2~8岁的水牛群体;雄性水牛阳性感染率为14.29%,雌性水牛阳性感染率为24.29%。说明广西钦州市郊区水牛受大片形吸虫危害较严重,这与当地水牛多以散养方式进行饲养有关。最后提出今后防制该病的相关措施及工作重点,以期为当地水牛产业的科学饲养管理及优质奶水牛养殖基地的建设提供科学指导。 展开更多
关键词 水牛 大片吸虫 ELISA 钦州市郊区
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抗大片吸虫分泌排泄抗原单克隆抗体制备及其生物学特性鉴定 被引量:3
14
作者 李晓栩 王华俊 +5 位作者 林贤 陈汉忠 曹池 唐大运 孟盟 刘明如 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1395-1399,共5页
【目的】制备大片吸虫分泌排泄抗原单克隆抗体,为大片吸虫病的免疫诊断、防治等研究奠定基础。【方法】利用杂交瘤技术,以大片吸虫分泌排泄抗原为免疫原制备单克隆抗体,并用ELISA、硫氰酸盐洗脱法等方法鉴定其生物学特性。【结果】通过... 【目的】制备大片吸虫分泌排泄抗原单克隆抗体,为大片吸虫病的免疫诊断、防治等研究奠定基础。【方法】利用杂交瘤技术,以大片吸虫分泌排泄抗原为免疫原制备单克隆抗体,并用ELISA、硫氰酸盐洗脱法等方法鉴定其生物学特性。【结果】通过间接ELISA筛选及3次亚克隆后,共获得5株大片吸虫分泌排泄抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为6D3、6B4、7D2、7D1和7D4。经鉴定,发现5株杂交瘤细胞染色体数为90~110条,均大于亲本细胞,其亚类鉴定分别属于IgG2b、IgM、IgM、IgG1和IgM,其轻链均为κ型;5株单克隆抗体(6D3、6B4、7D2、7D1、7D4)的上清效价分别为1:400、1:3200、1:25600、1:6400和1:6400,腹水效价分别为1:104、1:104、1:105、1:107和1:106;而表位测定结果表明,5株单克隆抗体中,6D3与7D1、7D2以及7D4与7D1、7D2作用于不同表位,6D3与6B4可能识别同一表位或重叠表位,或同一表位有空间位阻,7D4与6D3以及6B4与7D4、7D1、7D2可能具有空间位阻;5株单克隆抗体的相对亲和力为:6B4>7D4>7D1>6D3>7D2;5株杂交瘤细胞株均能稳定地分泌单克隆抗体。【结论】制备获得的分泌排泄抗原单克隆抗体可用于大片吸虫病的诊断和免疫机理等方面的进一步研究。 展开更多
关键词 大片吸虫 分泌排泄抗原 单克隆抗体 生物学特性 鉴定
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大片吸虫成虫cDNA表达文库的构建及其表达序列标签初步分析 被引量:3
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作者 罗洪林 张为宇 +1 位作者 郑小龙 黄维义 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第5期879-883,共5页
为发现潜在的抗大片吸虫病的候选疫苗分子,控制大片形吸虫病,本研究以大片吸虫成虫为材料,应用SMARTTcDNA文库构建技术,构建了以表达载体λTriplEx2为基础的大片吸虫成虫cDNA表达文库。经测定,库容量为1·08×106PFU/ml ,重组率... 为发现潜在的抗大片吸虫病的候选疫苗分子,控制大片形吸虫病,本研究以大片吸虫成虫为材料,应用SMARTTcDNA文库构建技术,构建了以表达载体λTriplEx2为基础的大片吸虫成虫cDNA表达文库。经测定,库容量为1·08×106PFU/ml ,重组率为96·6 %,扩增后的文库滴度为2·41×109PFU/ml ,插入片段平均大小约为1 000 bp;经大肠杆菌BM25·8质粒化后,从文库中随机挑选40个重组克隆测序,获得32条有效ESTs ;经BLASTX和BLASTn程序检索和分析,发现有9条ESTs代表已知基因, 16条ESTs相似性较低或无匹配,列为新基因。9条已知基因代表了半胱氨酸蛋白酶、卵壳蛋白、钙连接蛋白等三类功能蛋白,其余新基因也暗示与信号传导、蛋白合成、免疫刺激等基因相关,具有潜在的研究价值[动物学报51 (5) : 879 -883 , 2005]。 展开更多
关键词 大片吸虫 CDNA表达文库 表达序列标签 基因
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大片形吸虫免疫胶体金检测试纸条的研制及初步应用 被引量:3
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作者 王华俊 刘宇 +4 位作者 蒋薇 赵雪丽 曹伟伟 陈汉忠 闫若潜 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第1期254-261,共8页
为建立一种快速、简便、适应现场应用的水牛大片形吸虫检测方法,本试验利用抗大片形吸虫ES抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株7D1和7D4分别制备和纯化得到单克隆抗体7D1和7D4;采用柠檬酸三钠还原法制备颗粒大小为30nm的胶体金,再用胶体金标记... 为建立一种快速、简便、适应现场应用的水牛大片形吸虫检测方法,本试验利用抗大片形吸虫ES抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株7D1和7D4分别制备和纯化得到单克隆抗体7D1和7D4;采用柠檬酸三钠还原法制备颗粒大小为30nm的胶体金,再用胶体金标记纯化单克隆抗体7D1,在硝酸纤维素膜的质控带和检测带处分别包被羊抗鼠IgG二抗和单克隆抗体7D4,经反应条件优化,组装成了大片形吸虫免疫检测试纸条。经测试该检测试纸条对ES抗原的检测下限为0.94μg/mL,与胰扩盘吸虫、前后盘吸虫、支原体、弓形虫、伊氏锥虫均无交叉反应,特异性好。采集广西地区334份水牛新鲜粪样并用试纸条检测,阳性率为38.62%。结果表明,试纸条方法操作简单、快速、易于判定,特异性好,敏感性高,适合基层大面积普查和现场检测大片形吸虫。 展开更多
关键词 大片形吸虫 单克隆抗体 胶体金 试纸条
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应用LD-PCR法构建大片吸虫成虫cDNA表达文库 被引量:3
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作者 罗洪林 张为宇 +1 位作者 郑小龙 黄维义 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期1183-1186,共4页
为构建大片吸虫成虫cDNA表达文库,用Trizol试剂提取大片吸虫成虫总RNA,经反转录合成cDNA第一链,应用LD-PCR扩增方法,合成双链cDNA。用SfiⅠ内切酶修饰此双链cDNA,使形成两端分别带有SfiⅠA和SfiⅠB的黏性末端。经CHROMA SPIN-400柱纯化... 为构建大片吸虫成虫cDNA表达文库,用Trizol试剂提取大片吸虫成虫总RNA,经反转录合成cDNA第一链,应用LD-PCR扩增方法,合成双链cDNA。用SfiⅠ内切酶修饰此双链cDNA,使形成两端分别带有SfiⅠA和SfiⅠB的黏性末端。经CHROMA SPIN-400柱纯化,收集400 bp以上的双链cDNA片段,将其连接于带有SfiⅠA和SfiⅠB末端的λTriplEx2噬菌体载体,经体外包装后,以XL1-Blue为受体菌构建cDNA表达文库。经测定,库容量为1.08×106PFU/mL,重组率为96.6%。扩增后的文库滴度为2.41×109PFU/mL,插入片段平均大小约为1 000 bp。这些结果表明已成功构建大片吸虫成虫cDNA表达文库,适合进一步筛选大片吸虫新基因。 展开更多
关键词 LD-PCR 大片吸虫 CDNA表达文库
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大片形吸虫幼虫的培育及其感染小鼠的研究 被引量:3
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作者 李雪 黄甜 +5 位作者 朱丙伦 吴文德 魏志鹏 赵明龙 许心婷 陈汉忠 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第12期244-250,共7页
本试验旨在培育大片形吸虫囊蚴,着重研究大片形吸虫在中间宿主体内的发育过程和临床病理变化。人工培养和孵化大片形吸虫虫卵,用孵化出来的大片形吸虫毛蚴感染中间宿主小土蜗螺,收集大片形吸虫囊蚴,再用囊蚴感染试验小鼠。结果显示,囊... 本试验旨在培育大片形吸虫囊蚴,着重研究大片形吸虫在中间宿主体内的发育过程和临床病理变化。人工培养和孵化大片形吸虫虫卵,用孵化出来的大片形吸虫毛蚴感染中间宿主小土蜗螺,收集大片形吸虫囊蚴,再用囊蚴感染试验小鼠。结果显示,囊蚴经口感染试验小鼠后1周即可在肝脏找到虫体,幼虫可在小鼠体内发育生存7~8周,随着时间的推移和感染囊蚴数量不同,可给小鼠肝脏造成不同程度的病变,甚至造成死亡。剖检小鼠可见肝脏质地脆,颜色发黄,脾脏肿大等严重病理变化。因此,可利用小鼠作为大片形吸虫幼虫感染的试验动物,进行片形吸虫病的早期诊断、免疫预防和治疗等方面的研究。 展开更多
关键词 大片形吸虫 小土蜗螺 毛蚴 囊蚴 小鼠
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绵羊和水牛实验感染大片吸虫后外周血白细胞计数的分析 被引量:2
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作者 张为宇 黄维义 +3 位作者 卢秀红 吴文德 严红 郑启超 《广西农业生物科学》 CAS CSCD 2006年第3期205-209,共5页
对绵羊和水牛在感染大片吸虫后外周血白细胞总数计数和白细胞分类计数(嗜酸性细胞、嗜中性细胞、嗜碱性细胞、淋巴细胞和单核细胞)的特性进行研究。结果表明,绵羊对大片吸虫很不易感,水牛对大片吸虫很易感。未感染绵羊和水牛的白细胞总... 对绵羊和水牛在感染大片吸虫后外周血白细胞总数计数和白细胞分类计数(嗜酸性细胞、嗜中性细胞、嗜碱性细胞、淋巴细胞和单核细胞)的特性进行研究。结果表明,绵羊对大片吸虫很不易感,水牛对大片吸虫很易感。未感染绵羊和水牛的白细胞总数有较大的差距,分别为5 956(±825)个细胞/mm3血液和12 657(±1 053)个细胞/mm3血液。未感染绵羊和水牛的嗜酸性细胞占白细胞总数的百分比小于5%。淋巴细胞占的比例最大,绵羊为59.5%,水牛达70.8%。感染绵羊和未感染绵羊的白细胞总数、嗜酸性细胞计数在感染过程中总体上存在显著差异,感染后绵羊的嗜酸性细胞的数量迅速升高,在感染后4周(4W P I)达到高峰。而感染水牛和未感染水牛白细胞总数差异不显著,但嗜酸性细胞存在显著差异,感染后水牛的嗜酸性细胞的数量升高缓慢,到8 W P I达到高峰。结果提示嗜酸性细胞在感染绵羊中更加有效地参与了杀灭大片吸虫。 展开更多
关键词 大片吸虫 绵羊 水牛 白细胞 嗜酸性细胞
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大片吸虫成虫FG0018表达序列标签序列的电子克隆分析及实验验证 被引量:2
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作者 罗洪林 郑小龙 +2 位作者 张为宇 覃华 黄维义 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期418-422,共5页
用大片吸虫成虫FG0018表达序列标签(Expressed Sequence Tags,ESTs)序列对NCBI数据库进行Blastn比较,采用生物信息学方法,运用网上数据库资源,结合相关生物信息学软件将目标序列进行搜索、处理、拼接、延伸,得到的最后重叠群(contig,命... 用大片吸虫成虫FG0018表达序列标签(Expressed Sequence Tags,ESTs)序列对NCBI数据库进行Blastn比较,采用生物信息学方法,运用网上数据库资源,结合相关生物信息学软件将目标序列进行搜索、处理、拼接、延伸,得到的最后重叠群(contig,命名为FG0018C0N)与肝片吸虫卵壳蛋白B2序列(GenBank:M93025)相似性很高,用DNASTAR、SEQMAN程序和Blast2程序分析FG0018C0N,推测其开放阅读框为930 bp,编码310个氨基酸,蛋白质的特点及跨膜区预测其编码蛋白可能属于核蛋白,疏水性分析表明其编码一疏水蛋白。FG0018C0N基因与肝片吸虫卵壳蛋白基因有100%的相似性,310个氨基酸与之有91%的一致性。经RT_PCR、酶切验证并cDNA测序,结果证明FG0018C0N序列可能是大片吸虫的卵壳蛋白基因。 展开更多
关键词 生物信息学 大片吸虫 电子克隆 表达序列标签
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