小鼠IgGFc受体(moFcγRⅡ)稳定表达细胞系的建立及鉴定

为建立小鼠IgGFc受体(moFcγRⅡ)稳定表达的哺乳动物细胞系,PCR克隆小鼠moFcγRⅡ片段,构建真核表达载体pcDNAmoFcγRⅡ。转染COS-7细胞后通过G418抗性筛选和连续克隆,获得了在COS-7细胞表面稳定表达FcγRⅡ的真核细胞系。玫瑰花环试验结果显示其阳性率在90%以上。

HLA-B27异常表达在免疫相关性血细胞减少疾病中的临床意义及相关机制研究

目的观察免疫相关性血细胞减少(immunorelated hematocytopenia,IRH)和免疫相关性全血细胞减少(immunorelated pancytopenia,IRP)患者HLA-B27群体表达情况,分析HLA-B27检测分型对该类疾病诊疗的临床意义。方法①ELISA方法检测患者血清HLA-B27抗原、IL-12、IL-17和IFN-γ水平。②细胞免疫化学(immunochemistry,IC)染色观察骨髓中抗原递呈细胞(APC)HLA-DR表达情况。③原位免疫荧光(immunofluorescence,IF)染色,观察患者骨髓造血细胞表面抗人球蛋白IgG、FcγⅡR、甘露糖受体(MR)、IL-12和IL-17A表达情况。④根据HLA-B27和血沉等检测指标对IRH/IRP分型选择治疗方案。结果①106例IRH/IRP中45例(42.45%)血清HLA-B27显著升高(70.03±8.21)pmol/L,对照组仅2例(6.0%),P<0.01。②HLA-B27+组血清IL-17和IFN-γ血清质量浓度分别为(50.26±3.67)pg/ml和(42.95±3.64)pg/ml,显著高于HLA-B27-组(36.11±2.17)pg/ml和(28.875±5.81)pg/ml,P值均<0.05。③IRH/IRP患者骨髓中树突状细胞(DC)和巨噬细胞(Mφ)捕获和吞噬血细胞现象活跃,活化的DC与Mφ高表达HLA-DR抗原,HLA-B27+组骨髓中可见到淋巴细胞攻击造血细胞现象;粒细胞减少的患者骨髓中嗜酸性粒细胞攻击粒细胞现象多见。④IRH/IRP患者骨髓中部分造血细胞表面表达抗人IgG,DC和Mφ表达MR、IL-12和IL-17A,并介导对病变造血细胞的捕获和吞噬和炎性损伤。⑤在伴有IgG和ESR升高的患者骨髓中活化的Mφ高表达FcγRⅡ受体,发挥ADCC效应介导对病变造血细胞的损伤。结论 IRH/IRP是一类涉及细胞免疫和体液免疫多个环节,主要累及骨髓造血细胞且具有基因易感性的免疫相关性血细胞减少性疾病。部分患者发病与HLA-B27基因活化状态有一定关联,HLA-B27+伴体液免疫指标活化者病情更重。HLA-B27检测对疾病的评估、治疗和预后有着重要的临床意义。