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题名大鼠Fcε3-4基因克隆及原核表达
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作者
张艳芬
时海浪
王培莹
乔晓强
刘中成
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机构
河北大学实验室管理办公室
河北大学药学院
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出处
《河北大学学报（自然科学版）》
CAS
北大核心
2012年第4期387-392,共6页
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基金
河北省自然科学基金资助项目(C2010000248)
河北省科学技术研究与发展计划项目(11275530)
河北大学大学生科技创新项目(2011089)
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文摘
为了获得重组Fcε3-4蛋白,从变态反应性哮喘大鼠脾组织中提取总RNA,通过RT-PCR方法克隆大鼠Fcε3-4基因,构建成原核表达载体pET17b-Fcε3-4,并转化大肠杆菌进行诱导表达,Fcε3-4蛋白主要以包涵体形式存在.经Ni-NAT亲和层析柱对尿素溶解的Fcε3-4蛋白进行了纯化,并利用降低尿素梯度的方法柱上对纯化蛋白进行了复性.经Western Blotting和ELISA鉴定,Fcε3-4蛋白具有Fcε的免疫特异性,能被抗大鼠Fcε抗体特异性识别,为下一步研究该蛋白奠定了基础.
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关键词
大鼠
fcε3-4基因
克隆
表达
免疫特异性
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Keywords
rat
fcε3-4 gene
clone
expression
immunologic specificity
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分类号
Q78
[生物学—分子生物学]
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