新生儿Fc受体及其抑制剂在原发免疫性血小板减少症中的研究进展

原发免疫性血小板减少症(ITP)是一种由血小板自身抗体介导的自身免疫性疾病,大多数ITP患者具有免疫球蛋白G(IgG)亚型的抗血小板抗体,其通过与血小板和巨核细胞上糖蛋白的相互作用导致血小板破坏增加和抑制血小板的生成。新生儿Fc受体(FcRn)用于维持人体内IgG水平稳态。通过FcRn抑制剂靶向FcRn可以降低血液中的致病性IgG,证明了其对治疗ITP和其他自身免疫性疾病有效,并在一定程度上可改善ITP患者的血小板计数。efgartigimod、Rozanolixizumab均可与FcRn结合进而导致循环IgG减少。FcRn抑制剂还能间接延长罗米司亭的半衰期以提高治疗效果。本综述简要总结了ITP中血小板的破坏和生成抑制机制、FcRn和FcRn抑制剂作用的分子机制、FcRn抑制剂在ITP中的应用以及FcRn与罗米司亭、静脉注射Ig的联系。

Fc受体样4蛋白在唾液腺黏膜相关淋巴组织淋巴瘤表达临床研究

目的 探讨Fc受体样4(FCRL4)蛋白在唾液腺黏膜相关淋巴组织(MALT)淋巴瘤中的临床表达。方法 选取36例唾液腺MALT淋巴瘤标本为实验组,选取17例小唾液腺BLEL、40例大唾液腺BLEL及21例弥漫性大B细胞淋巴瘤标本为参照组。观察各组FCRL4蛋白的表达情况以及实验组中FCRL4蛋白阳性表达患者情况。结果 实验组中FCRL4的表达率显著高于其他参照组,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组FCRL4阳性表达患者中,年龄≥50岁占67.6%(23/34),极少数见于未成年人;发病部位腮腺占73.5%(25/34),其他部位占26.5%(9/34);29.4%(10/34)的患者确诊时患有Sjogren综合症;Lugano分期IE期的患者占82.4%(28/34)。术后41.2%(14/34)的患者行放化疗。结论 FCRL4蛋白在唾液腺MALT淋巴瘤中呈高表达,可以作为辅助诊断唾液腺MALT淋巴瘤的指标之一。

双黄连可溶性粉对S180荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞C3b和Fc受体的影响

旨在探究双黄连可溶性粉对S180荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞表面C3b受体、Fc受体活性的影响,为扩大双黄连可溶性粉临床使用范围提供科学依据。以双黄连可溶性粉为研究材料,S180荷瘤小鼠为研究对象,YC-花环、EA-花环试验为研究手段,巨噬细胞C3b、Fc受体活性为检测指标,研究双黄连可溶性粉对S180荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞C3b、Fc受体活性的影响。结果显示,小鼠接种S180瘤细胞,荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞Fc、C3b受体活性不受影响,免疫抑制剂环磷酰胺具有降低C3b受体活性的作用(对Fc受体活性没有影响),连续给予4 d~14 d不同剂量的双黄连口服液,荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞Fc、C3b受体活性增强,吞噬能力增强,作用优于或相当于黄芪多糖。研究结果为双黄连可溶性粉的临床应用研究提供了科学依据。

新型治疗全身重症肌无力的药物—新生儿Fc受体阻滞剂Efgartigimod

重症肌无力(Myasthenia gravis, MG)是由自身抗体介导的获得性神经-肌肉接头(Neuromuscular junction, NMJ)传递障碍的自身免疫性疾病~([1])。乙酰胆碱受体(Acetylcholine receptor, AChR)抗体在MG的发病过程中发挥重要作用。目前,治疗MG的药物主要包括胆碱酯酶抑制剂、糖皮质激素、免疫抑制剂以及静脉注射免疫球蛋白等~([2])。然而这些药物主要通过抑制免疫系统发挥作用.

Fc受体结合型与非Fc受体结合型CD3单抗的制备

目的研究Fc受体结合型与非Fc受体结合型CD3单抗的制备及单抗的特性。方法利用杂交瘤细胞株扩增,使用体外培养法制备Fc受体结合型CD3单抗,利用动物体内诱生法制备非Fc受体结合型CD3单抗。使用亲和层析法纯化抗体并与市售的CD3单抗比较,行淋巴细胞培养、流式细胞术等了解Fc受体结合型与非Fc受体结合型CD3单抗的特性。结果使用体外培养法制备蛋白G琼脂糖纯化了Fc受体结合型CD3单抗;使用动物体内诱生法制备A蛋白亲和层析法纯化了非Fc受体结合型CD3单抗;CD3单抗与市售的CD3单抗一致;Fc受体结合型与非Fc受体结合型CD3单抗的增殖及T细胞受体内化效应和文献报道一致。结论利用杂交瘤细胞株扩增并成功制备了Fc受体结合型与非Fc受体结合型CD3单抗,并为后续工作的进行奠定了良好的基础。

APS IgG通过非Fc受体途径诱导血液单核细胞表达TF活性

目的 :探讨抗磷脂综合征 (AntiphospholipidSyndrome ,APS)患者血清IgG体外诱导血液单核细胞表达组织因子(TissueFactor,TF)活性的作用及其作用途径。方法 :利用纯化的APS血清IgG及其F(ab’) 2 片段 ,以及抗磷脂结合蛋白 (如 β2glucoproteinⅠ ,β2 GPI)单克隆抗体RP 1分别刺激新鲜分离的外周血单核细胞 ,通过因子Xa的生成量 ,判断单核细胞TF活性的表达。结果 :与健康人血清IgG比较 ,APS患者血清IgG以及RP 1显著增强单核细胞的TF活性 ;外源性 β2 GPI可加强APSIgG的这一诱导作用 ;从APSIgG中纯化出的F(ab)’2 片段具有与完整IgG分子相同的刺激效应。结论 :抗磷脂抗体 ,主要为抗β2 GPI,以与抗原特异结合方式 ,通过非Fc受体途径诱导血液单核细胞表达TF活性 ,成为APS患者血栓形成的机理之一。

透脓散对浅部化脓性炎症中性粒细胞FC受体、C3b受体影响的实验研究

目的:研究透脓散对浅部化脓性炎症血中性粒细胞FC受体、C3b受体、C5a与局部愈合情况的影响,探讨透脓散与透托法扶正托毒的作用机理。方法:将Wistar大鼠分为病模对照组、透脓散高、中、低剂量组、头孢拉定组,采用金黄色葡萄球菌局部注射致大鼠背部浅部化脓性炎症模型,分别给予相应药物灌胃,观察脓肿愈合情况,于3、6、9 d取血检测血中性粒细胞FC受体、C3b受体与C5a。结果:透脓散可促进脓肿愈合;给药9 d,透脓散组可降低中性粒细胞比值,恢复至正常水平,且明显优于病模对照组与头孢拉定组;透脓散组能明显升高中性粒细胞C3b受体水平,且给药6 d,明显优于头孢拉定组;给药3 d,透脓散组能明显升高中性粒细胞FC受体水平;并且可以影响血C5a水平,具有双向调节作用,炎症早中期降低C5a水平,炎症中后期升高C5a水平。结论:透脓散可促进脓肿愈合,降低中性粒细胞比值,促进炎症消退;升高中性粒细胞C3b、FC受体水平,促进中性粒细胞黏附与吞噬,双向调节血中C5a水平。

慢肾蛋白停防治实验性慢性肾炎湿热证及对白细胞Fc受体的影响

目的 :研究中药慢肾蛋白停对慢性肾炎湿热证家兔白细胞表面 Fc受体、尿蛋白、自由基、血脂等指标的影响。方法 :将 2 4只雄性、尿蛋白测定阴性的家兔随机分为模型组、中药慢性蛋白停组、中药保肾康组和正常组 ,前 3组进行免疫制模 8周 ,从制模第 3周起 ,蛋白停组和保肾康组给予相应药物。实验第 4、6和 8周各进行 1次 2 4 h尿蛋白定量检测 ,8周后测定血中红细胞表面 Fc受体、丙二醛 (MDA)、超氧化物歧化酶 (SOD)、甘油三酯 (TG)、高密度脂蛋白胆固醇 (HDL)、血肌酐 (SCr)和尿素氮 (BU N)等指标。同时观察肾组织的病理形态学变化。结果 :慢肾蛋白停能明显提高 Fc受体数 ,降低尿蛋白、TG和 MDA水平 ,升高 HDL 水平 ,并提高SOD的活性 ,减慢肾组织病理变化。结论 :慢肾蛋白停能降低尿蛋白 ,调节机体的免疫功能 ,减少肾损害 ,对慢性肾炎湿热证有良好的防治作用。

牛IgG2 Fc受体在COS-7细胞表面的稳定表达

将牛IgG2 Fc受体(boFcγ2R)编码区cDNA亚克隆到真核表达载体pcDNA3的巨细胞病毒启动子下游,构建了重组表达质粒pc3bo2R;以重组质粒转染COS-7细胞,用玫瑰花环试验检测boFcγ2R在转染细胞表面的表达,通过G418抗性筛选和连续克隆化,在转染细胞表面稳定表达了boFcγ2R受体分子,转染细胞的玫瑰花环形成率达90%。最后获得稳定表达boFcγ2R受体分子的COS-7转染细胞系,为受体的功能研究提供了良好的技术平台。

家畜IgG Fc受体研究进展

IgG Fc受体(Fcγreceptors,FcγRs)是一类重要的免疫细胞表面分子,对细胞反应的正向和负向调节发挥重要的免疫学功能,是治疗过敏和自身免疫性疾病理想的药物靶标。综述了FcγRs亚类的生物学特性及家畜FcγRs的研究进展,并对FcR(Fc受体)免疫学功能也进行了阐述。

IgA Fc受体研究进展

IgA Fc受体(FcαRI,CD89)属于免疫受体家族成员,主要表达于单核-巨噬细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和树突状细胞等免疫效应细胞表面。FcαRI能特异的与血清型和分泌型IgA结合,并通过γ链介导一系列免疫反应,包括抗体依赖细胞介导的细胞毒性作用(ADCC)、补体依赖的细胞毒性(CDC)及细胞吞噬作用等。FcαRI是一种双功能受体,在不同的生理条件下可以介导免疫系统的活化和抑制反应。FcαRI在机体免疫防御和在维持系统免疫平衡方面扮演着重要的角色,有望成为治疗人类疾病的新靶点。本文对FcαRI的结构、功能及其应用等研究现状进行综述。

牛IgG Fc受体Ⅲ的分子克隆和序列分析

目的研究牛IgGFc受体的结构与功能的关系。方法在构建了牛肺巨噬细胞cDNA文库的基础上,用PCR方法获得了编码牛IgGFc受体(boFcγR)的全长编码基因。结果通过分子克隆和序列分析,发现其编码基因为507bp,共编码168个氨基酸,其中含有信号肽序列、穿膜区和胞内结构域以及3个N-连接糖基化位点。与COLLINS等克隆的boFcγR相比,在它的胞外区中缺失了82个氨基酸,仅有一个胞外结构域。结论我们所克隆的cDNA片段属于编码牛的FcγRA(CD16-)

猪IgGⅡ类Fc受体基因的真核表达及其在组织中的分布状况

利用已克隆的猪IgGⅡ类Fc受体cDNA(swFcγRⅡ)基因序列(DQ026064)设计的引物S29和S20,通过RT-PCR技术从猪外周血白细胞cDNA中扩增了完整的960bp swFcγRⅡ ORF序列。利用基因重组技术将swFcγRⅡ ORF基因成功亚克隆到真核表达载体pcDNA3中。然后用脂质体法转染COS-7细胞,用玫瑰花环试验鉴定了swFcγRⅡ受体的亲和特性。半定量PCR检测表明,swFcγRⅡmRNA在外周血白细胞、肝、肺和肠系膜淋巴结有较高表达。

牛IgG Fc受体Ⅱ胞外区在大肠杆菌中的表达及特性鉴定

从牛肺巨噬细胞cDNA文库中扩增编码牛IgGFc受体Ⅱ(boFcγRⅡ)胞外区基因,PCR产物经EcoRⅠ和HindⅢ双酶切后,插入原核表达载体pET28a的T7启动子下游,构建重组表达质粒pETboRⅡ。以pETboRⅡ转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。SDS-PAGE分析诱导表达菌体可见分子量约为27kDa的蛋白条带,该表达蛋白在细胞质中主要以不溶性包涵体形式存在。Westernblotting和Dotblot检测表明,boFcγRⅡ重组蛋白在变性条件下可与牛IgG特异结合,提示牛FcγRⅡ胞外区可能存在IgG线性结合表位。

猪Fc受体γ亚单位基因克隆与原核表达

应用RT-PCR技术从90日龄健康仔猪肺巨噬细胞中克隆出猪Fcγ亚单位的cDNA序列,并将其亚克隆到原核表达载体pET-32a中,构建重组表达质粒pET-FcRγ,成功表达了分子量约为29 kDa的γ亚单位重组蛋白。将重组蛋白FcRγ-His免疫小鼠,制备获得鼠抗FcRγ-His重组蛋白多克隆抗体,将得到的重组蛋白多克隆抗体采用间接ELISA和Western-blotting试验方法检测,ELISA测定多克隆抗体的效价为1∶8 000。Western-blotting结果表明,制备的鼠抗FcRγ-His重组蛋白多克隆抗体可以与重组γ亚单位蛋白进行特异性结合,从而证明重组蛋白具有较好的免疫原性。成功克隆出猪Fc受体γ亚单位基因并表达,为进一步研究其结构与功能奠定了基础。

猪IgG Ⅱ类Fc受体基因真核表达重组质粒的构建及表达

利用本研究小组克隆的猪IgG Ⅱ类Fc受体cDNA(swFcγRⅡ)基因序列(DQ026064)设计引物,应用RT-PCR技术,从猪外周血白细胞cDNA中扩增了完整的960 bpswFcγRIIORF序列,利用基因重组技术将swFcγRIIORF基因亚克隆到真核表达载体pcDNA3,经PCR及双酶切鉴定:扩增出901 bp的PCR产物;KpnI/EcoR I双酶切,切出5 376和901bp DNA片段,表明重组质粒pcDNA/swFcγRⅡ构建成功。然后脂质体法转染COS-7细胞,用玫瑰花环试验鉴定了swFcγRII配体亲和特性。

Fc受体γ链基因启动子区-29位点基因多态性与系统性红斑狼疮关系的研究

目的 :探讨Fc受体γ链基因启动子区 - 2 9位点基因多态现象在中国南方人群中的分布及其与系统性红斑狼疮 (SLE)易感性和临床表现的关系。方法 :采用PCR -RFLP方法检测 180例SLE患者和 14 0例正常对照组Fc受体γ链基因启动子区 - 2 9位点基因型。结果 :SLE患者Fc受体γ链基因启动子区 - 2 9位点TT基因型频率(33 3% )及T等位基因频率 (5 4 4 % )明显高于正常对照组 (17 2 %及 4 2 9% ) (P <0 0 5 ) ,而GG基因型频率 (2 4 4 % )及G等位基因频率 (4 5 6 % )明显低于正常对照组 (31 4 %及 5 7 1% ) (P <0 0 5 )。T等位基因的比值比为 1 5 9。SLE患者各基因型频率及各等位基因频率与狼疮性肾炎 (LN)无相关关系 (P >0 0 5 )。结论 :SLE患者Fc受体γ链基因启动子区 - 2 9位点T等位基因与SLE发病相关但与LN的发生无关。

Fc受体样4蛋白在唾液腺黏膜相关淋巴组织结外边缘区B细胞淋巴瘤中的表达及意义

目的:通过检测唾液腺黏膜相关淋巴组织结外边缘区B细胞淋巴瘤(extranodal marginal zone lymphoma of mucosa-associated lymphoid tissue B cell lymphoma,MALT淋巴瘤)中Fc受体样4(Fc receptor-like 4,FCRL4)蛋白的表达,分析其表达及分布特点与临床病理指标、预后等的相关性。方法:筛选2005—2013经病理确诊为唾液腺MALT淋巴瘤的病例作为实验组;以唇腺良性淋巴上皮病(benign lymphoepithelial lesions,BLEL)、大唾液腺BLEL及弥漫性大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma,DLBCL)作为对照组。免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)法检测FCRL4蛋白表达。采用SPSS 17.0软件对FCRL4在实验组、对照组的表达及其与临床病理指标之间的关系进行分析,应用Kaplan-Meier法分析FCRL4表达与总体生存率之间的关系。结果:共收集到72例唾液腺MALT淋巴瘤。FCRL4表达主要定位于淋巴细胞的细胞膜和细胞浆,阳性细胞主要分布在上皮巢内及周边,且在唾液腺MALT淋巴瘤中的表达率显著高于唇腺BLEL(P=0.013)、大唾液腺BLEL(P=0.003)及DLBCL(P=0.001)。FCRL4蛋白表达与临床病理指标、总体生存率之间均无明显相关性(P>0.05)。结论:唾液腺MALT淋巴瘤中FCRL4主要表达于邻近上皮的淋巴细胞中,该类细胞可能与唾液腺MALT淋巴瘤的发生相关,可作为该肿瘤辅助诊断的指标。

巨噬细胞的FC受体及其与吞噬功能的关系

本文用EA花环试验及体外吞噬实验检测了小鼠腹腔巨噬细胞(Macrophage,Mφ)的EA 花环率及吞噬功能,结果发现昆明小鼠比同龄C_(57)BL/6、BALB/c及NIH小鼠Mφ的EA花环率高。在昆明及BALB/c小鼠中青年鼠的EA花环率又较老年鼠为高。用黄芪水,黄芪多糖及巯基乙醇酸钠处理后Mφ的EA花环率升高,用秋水仙碱及氢化可的松处理后Mφ的EA花环率降低。MφEA花环率的高低与Mφ吞噬功能的高低相平行。Mφ对抗体包被的CRBC的吞噬能力比对CRBC的吞噬为高,吞噬效应随抗体浓度而改变,表明FC受体介导的吞噬作用大于非特异性吞噬作用。MφFC受体的数目及其功能与Mφ的激活状态及机体的免疫功能状态密切相关。

Fc受体研究进展（一）Fc受体的结构与分类

目前发现了免疫球蛋白（Ｉｇ）类或同种型都有其相应的Ｆｃ受体（ＦｃＲ），并且它们可表达于免疫系统的多种细胞上。近几年随着单克隆抗体和ＤＮＡ探针技术的应用，已确定了一些受体的结构及编码基因。本文综述了这些ＦｃＲ的结构特征，细胞分布及其分类，其中除低亲和力ＦｃεＲ外（与动物凝集素相似），ＦｃＲ基本上均属Ｉｇ超家族成员。同时也简要介绍了参与Ｉｇ运输的ＦｃＲ样分子及ＦｃＲ的相关分子。