提高激素性股骨头坏死模型成活率的方法

背景:激素性股骨头坏死动物模型建立过程中动物的死亡成为影响实验结果的主要因素。目的:观察以脂多糖和地塞米松建立股骨头坏死模型,提高模型成功率的方法。方法:新西兰大白兔48只随机等分为模型组、庆大霉素组、庆大霉素+兰索拉唑组和对照组,前3组连续2 d经耳缘静脉注射脂多糖,再连续3 d,臀部肌肉注射地塞米松注射液建立股骨头坏死模型,庆大霉素组和庆大霉素+兰索拉唑组在建模成功后连续7 d以庆大霉素灌胃,同时庆大霉素+兰索拉唑组肌肉注射兰索拉唑注射液。对照组兔仅注射生理盐水。结果与结论:模型组、庆大霉素组和庆大霉素+兰索拉唑组均造模成功;其中庆大霉素+兰索拉唑组存活状况最好,3组动物死亡率分别是33.3%,25%,8.3%,模型组、庆大霉素组、庆大霉素组+兰索拉组和对照组兔的死亡数量差异有显著性意义(P<0.05)。提示在兔激素性股骨头坏死模型建立中,庆大霉素+兰索拉唑的使用,可以提高实验动物的生存率。

液氮冷冻兔股骨头坏死模型制备新方法及可靠性评价

目的建立一种可靠的并可用于治疗和研究新的液氮冷冻法制成的兔股骨头坏死动物模型。方法采用成年新西兰大白兔21只,无菌条件下手术分离臀肌,切断股骨头圆韧带,显露股骨头。用医用棉签蘸取液氮,对股骨头进行3次冷冻3次复温,制备兔双侧股骨头坏死模型。于术后3、7d及2、4、6、8周进行X线摄片,股骨头大体形态和组织病理学观察。结果 X线摄片结果显示,制模2周时股骨头密度增高;4周时出现密度不均影像;6周时外形出现不规则变化,边缘有透亮区;8周时开始塌陷,关节间隙增大,骺板模糊。股骨头大体形态随时间推移,其受损程度呈加重演变特点。制模3 d的股骨头组织切片可见软骨细胞和骨细胞坏死;2周见骨小梁断裂、排列紊乱;4周见髓腔脂肪细胞坏死,内有新生血管及增生纤维组织;6周时出现匍行附着;而8周可见新骨沉积性生长,骺板处细胞挤压、变形。结论本实验中建立的液氮冷冻股骨头坏死模型新方法具有创伤性小、贴近人股骨头坏死病理演变规律的优点,为干细胞移植等治疗和研究提供了一种新的模型制备方法。

股骨头骨骺缺血再灌注模型的建立

目的:建立缺血再灌注引起幼年兔股骨头骨骺细胞损伤的模型。方法:取12只1 kg左右幼年新西兰兔,月龄,性别不限。切开兔髋关节囊,切断圆韧带,显露股骨颈,取皮筋对股骨颈进行加压,皮筋拉力约0.5 kg,阻断股骨头骺动静脉血供6 h、24 h。松开皮筋分别恢复血供6 h、24 h、168 h后取兔股骨头标本。结果:在取标本前进行同位素骨扫描及腹主动脉造影,证实缺血及再灌注有效。常规HE染色及胶原染色病理切片显示:单纯股骨头骨骺缺血6h骨骺骨细胞变性不明显,缺血24 h组骨骺骨细胞变性;缺血24 h股骨头再灌注168 h后骨细胞明显坏死。结论:缺血再灌注可加重幼年兔股骨头骨骺骨细胞损伤。

兔股骨头缺血性坏死手术治疗方法的比较

目的 建立股骨头缺血坏死动物模型 ,研究不同术式的治疗效果。方法 标准白兔 4 0只 ,制作股骨头坏死模型 ,将股骨头离断后埋于皮下组织中 4周后 ,分成 5组 :A组为无处置对照组 ,B组采用带血运肋骨瓣植入治疗 ,C组采用股深动脉植入治疗 ,D组采用带血运骨瓣与游离骨膜植入治疗 ,E组采用植入血管加游离骨膜治疗。对各组的治疗效果进行对照研究。结果 B、C、D、E组骨小梁细胞充满 ,有明确的血供重建 ,D、E两组因植入骨膜生发层细胞 ,可见到骨小梁间隙内有大量的骨髓细胞出现 ,电镜下骨基质排列整齐 ,有周期性横纹 ,骨细胞发育正常 ,在促进骨修复方面取得了更好的效果。结论 截断股骨头皮下埋藏是制作股骨头缺血坏死动物模型的有效方法 ,所采用的 4种方法对改善缺血坏死均有一定效果 ,以血运重建加骨膜生发层细胞 (D组和E组 )

辅助人工髋关节治疗股骨头缺血性坏死的实验研究

目的通过动物实验探讨一种新的非限制性支撑装置-辅助人工髋关节对早期股骨头缺血性坏死的治疗效果。方法采用骨龄成熟杂交犬32只,用液氮冷冻法建立股骨头缺血性坏死动物模型。实验组手术植入辅助人工髋关节,减轻、替代股骨头负重,对照组不与处理。结果4,12周实验组(累计观察数分别为19,15)和对照组(累计观察数分别为11,9)股骨头高度比分别为0.871±0.007,0.870±0.006和0.871±0.007,0.869±0.008(单位),差异无统计学意义。24周,对照组的实验侧股骨头不规则密度增高伴囊性变,呈现出不同程度的塌陷,实验组(累计观察数为10)和对照组(累计观察数为6)股骨头高度比分别为0.868±0.006,0.747±0.046(t=6.905,P=0.009)。48周,对照组股骨头大部分塌陷,髋关节呈现骨性关节炎改变,股骨头高度比降低,实验组(累计观察数为5)和对照组(累计观察数为3)股骨头高度比分别为0.871±0.007,0.637±0.091(t=4.446,P=0.046)。相反实验组24周及48周手术侧股骨头仅出现不同程度的密度降低,未见囊性变及股骨头塌陷。结论辅助人工髋关节能有效地维持髋关节空间构形,减少或替代股骨头负重,对液氮冷冻所至的早期股骨头缺血性坏死具有治疗作用。

液氮冷冻致兔股骨头坏死病理学特征研究

目的探讨液氮冷冻法制备兔股骨头坏死动物模型的病理学特征。方法采用成年新西兰大白兔,无菌条件下手术显露股骨头;采用棉签蘸取液氮,对股骨头软骨面负重区冷冻、复温以制备股骨头坏死模型。于制模后第3、7天及第2、4、6、8周随机选择模型兔,手术取下股骨头,进行股骨头纵切面肉眼观察,常规石蜡包埋、切片,经HE染色后光镜观察。结果股骨头纵切面4周前各观察时间点,股骨头局灶性坏死区域渐增。制模术后第3天兔股骨头组织切片镜下可见软骨细胞及骨细胞坏死;术后第7天见坏死区空骨陷窝较多;术后第2周见关节软骨缺损,软骨下区域小血管充血,骨小梁开始断裂、排列紊乱;术后第4周见关节软骨剥脱,髓腔内脂肪细胞坏死,并现增生纤维组织;术后第6周见股骨头塌陷,并出现纤维化骨的匍伏附着;术后第8周见新骨沉积性生长,骺板细胞挤压、变形。结论本研究建立的液氮冷冻致兔股骨头坏死模型具有典型的病理演变特征,贴近已知人类股骨头坏死病理演变规律,是干细胞移植等治疗研究的理想模型。

甲泼尼龙诱导股骨头坏死发生发展的实验研究

目的：动态观察甲泼尼龙诱导家兔股骨头坏死的发生发展，找出股骨头坏死动物模型的确切观察终点。方法：以马血清和甲泼尼龙联用诱导兔股骨头坏死模型的产生，通过活体股骨头 Ｘ 线照片、骨密度的测量、股骨头切片光镜和电镜及骨动力学检查，对动物模型不同阶段进行评价。结果：模型８ 周时 Ｘ 线照片显示：骨质软化，不规则骨小梁吸收，坏死，光镜、电镜检查显示软骨下区骨骼造血细胞减少，脂肪细胞肥大；１６ 周时 Ｘ 线照片显示模型动物骨质疏散，骨小梁模糊，股骨头密度减低，光镜、电镜检查呈现股骨头坏死的早期病理改变，属 Ｆｉｃａｔ 分级的Ⅰ级和Ⅱ级，计数空骨陷窝率明显增加，股骨骨生长测定值明显降低。结论：甲泼尼龙诱导的家兔股骨头坏死８ 周时已开始发生，１６ 周已具备确切、明显股骨头坏死特征。

腺病毒介导hBMP-2转染BMSCs复合DBM修复兔缺血性股骨头坏死的实验研究

目的评价人骨形态发生蛋白(h BMP)-2/骨髓间充质干细胞(BMSCs)/脱钙松质骨(DBM)对兔股骨头坏死的修复作用,探索临床治疗股骨头坏死的新途径。方法髓芯减压联合液氮冰冻法制备兔股骨头坏死模型。将造模成功兔随机分为A、B、C、D 4组(n=12),A组不植入材料,为对照组,B、C、D分别植入DBM、DBM/BMSCs、h BMP-2/BMSCs/DBM。术后4、8及12周各组分别处死4只,运用X线技术、大体标本观察、HE染色技术评判股骨头坏死修复情况。结果 X线示A组股骨头塌陷,无明显成骨;B、C、D组股骨头缺损区有骨再生现象,但D组再生情况明显优于B、C组。Lane-Sandhu X线评分A组<B、C组<D组(P<0.05),B和C组差异无统计学意义。大体观示A组股骨头塌陷,钻孔存在;B、C组股骨头未塌陷,钻孔存在;D组股骨头未塌陷,钻孔消失。HE染色示A组骨小梁坏死、碎裂,大量空骨陷窝;B、C组可见成骨细胞及新生幼稚骨小梁;D组大量骨细胞,新生骨小梁与正常骨小梁无异。空骨陷窝率A组>B、C组>D组(P<0.05),B和C组差异无统计学意义。结论 h BMP-2/BMSCs/DBM植入体内后能够诱导BMSCs向成骨方向分化,对兔股骨头坏死具有较好的修复效果。

鸡激素性股骨头缺血性坏死动物模型的建立

本文报道肌肉注射大剂量甲基氢化泼尼松６～１８周，引起鸡的股骨头缺血性坏死，包括骨髓水肿、造血细胞减少，脂肪细胞肥大，大量空骨细胞陷窝，软骨下骨折塌陷及坏死反修复反应。结果表明双下肢负重的鸡，其病理变化比较接近人类，死亡率低，制作激素性股骨头缺血性坏死动物模型比用家兔更为理想。

兔股骨头缺血坏死模型的建立研究及比较

目的:为研究股骨头坏死治疗建立理想的动物模型.方法:采用健康的成年新西兰兔24只,随机分为3组,A组:注射马血清及地塞米松(n=10);B组:用液氮将股骨头冷冻坏死(n=10);C组:正常对照组(n=4).术后定期行X线检查,并取股骨头行组织切片,通过计算空骨陷窝率比较股骨头坏死情况.结果:光镜下A,B两组均股骨头均出现缺血性坏死表现,空骨陷窝率比C组均有升高(P<0.05,P<0.01),A组8wk时的模型复制成功率小于55%;B组8wk后的成功率大于95%.结论:通过异种血清加激素或液氮冷冻股骨头均可建立兔的股骨头缺血坏死动物模型,但异种血清加激素的方法并非一定能引起股骨头坏死;通过液氮冷冻方法建立的兔股骨头缺血坏死模型方法简便、坏死明显,可作为研究股骨头缺血坏死治疗的理想动物模型.

激素法与液氮法在兔股骨头坏死造模中的应用比较研究

目的分析比较激素法与液氮法在股骨头坏死动物模型的应用。方法 30只兔随机分为3组,A组为单纯激素注射组,兔子每周2次臀肌注射醋酸泼尼松龙,每次8 mg/kg,连续6周;B组为用液氮将股骨头冷冻坏死;C组为空白对照组。对一般形态学、影像学MRI、组织病理学等进行观测。结果 A、B两组股骨头均出现缺血性坏死表现,空骨陷窝率较对照组明显增高(P<0.01),并且3周时A组空骨陷窝率明显低于B组(P<0.01),6周时A组与B组空骨陷窝率无明显差异(P>0.05)。A组兔全身药物反应明显,骨坏死修复晚且能力差,且骨陷窝空虚率随时间延长而增加(P<0.01)。B组兔造模所需时间短,骨修复反应大,随着实验观察时间延长,骨坏死程度是进行性减轻(P<0.01)。结论通过单纯激素或液氮冷冻股骨头均可建立兔非创伤性缺血性坏死动物模型,前者较适合于病因、病理方面或者综合性研究;后者更适合于标准化治疗的研究。

p53与bcl-2基因变化在股骨头缺血性坏死发病中的影响实验研究

目的:观察p53和bcl-2基因在股骨头坏死动物模型中的变化,了解其在该疾病发病的作用。方法:32只3个月龄新西兰大白兔随机分为实验组和对照组(均以幼兔的右侧股骨头为实验侧),给予实验组动物经右侧股骨颈注射医用TH胶0.5ml致骺板缺血,建立幼兔Perthes病模型(A组),以相同方法用给予对照组右侧股骨头注射同等剂量生理盐水(B组),分别于建模后第6、8、10、12周取两组等量动物进行股骨头病理切片,观察两组股骨头p53和bcl-2凋亡基因表达的变化。结果:A组p53基因表达阳性率与股骨头骺板细胞凋亡率呈明显正相关性(r=0.7,P<0.05),bcl-2基因表达阳性率与其之间呈明显负相关性(r=-0.7,P<0.01)。B组p53与bcl-2基因无明显变化。结论:p53和bcl-2凋亡基因与儿童股骨头坏死有相关性。

晚期兔股骨头坏死时空递进的组织形态学特征

目的：探讨液氮冷冻法制备晚期兔股骨头坏死动物模型随时空递进的组织形态学特征，籍以评价其在髋关节置换术研究中的应用价值。方法：采用成年新西兰大白兔21只，对股骨头进行3次冷冻3次复温制备双侧股骨头坏死模型。于制模后4、5、6、8、10周随机选择模型兔，手术取下股骨头，进行股骨头纵切面大体形态观察，之后常规石蜡包埋、切片，经HE染色后进行组织病理切片光镜观察。结果：股骨头纵切面可见股骨头逐渐失去其外形轮廓，坏死区域清晰可见。术后4周见关节软骨塌陷，髓腔内脂肪细胞坏死，并见骨坏死及增生的纤维组织；术后5周见病情持续性发展；6周时见股骨头塌陷加重，软骨下骨暴露，出现纤维化骨的匍行附着；8周出现新骨沉积性生长，骺板细胞挤压、变形。10周见坏死的骨小梁与新生骨小梁并存，骺板区更薄，骺板区下方有骨细胞坏死。结论：液氮冷冻法制备兔股骨头坏死模型能提供延续性强、重复性高、模拟人类晚期股骨头坏死形态学特征的模型。