两类柑桔杂种砧木对脐橙(Citrus sinensis Osbeck)幼树生长和叶片糖营养含量年变化的影响

以体细胞杂种红桔+枳和红桔+粗柠檬、有性杂种Troyer枳橙和Swingle枳柚作砧木的耐湿脐橙(CitrussinensisOsbeck)2年生嫁接苗为试材,通过盆栽试验研究了砧木对苗木生长和叶片糖营养含量年变化动态的影响。结果表明:红桔+枳的生长势和花量明显地强于和大于其它砧木,红桔+粗柠檬的生长和花量表现介于2种有性杂种之间。叶绿素a/b和类胡萝卜素含量在不同砧木间无显著差异,而不同砧木显著或极显著地影响叶绿素含量各指标。砧木影响叶片可溶性糖和淀粉含量年变化动态的基本特征。在休眠期,红桔+枳的可溶性糖和淀粉含量都高于2种有性杂种砧木,而红桔+粗柠檬则反之;在生长期,红桔+粗柠檬的可溶性糖和淀粉含量表现出高于有性杂种砧木的趋势,而红桔+枳则介于2种有性杂种砧木之间。同时还重点讨论了2种体细胞杂种砧木的利用价值。

红肉脐橙(Citrus sinensis L.)果肉中特征色素提取方法探索

红肉脐橙是目前为止惟一果肉呈粉红色或红色的脐橙,其呈色色素尚未见报道。为深入研究其果肉中特征色素的构成及在果实生长发育和贮存过程中色素含量的变化,本研究在对该色素初步定性的基础上对提取方法进行了探索。在分析红肉脐橙果肉中色素萃取液的紫外可见吸收光谱时发现,该色素有类胡萝卜素的特征吸收峰,将萃取液进行薄层层析则进一步证实其内含有番茄红素。在色素提取的前处理方式上,本研究认为冷冻干燥样品的浸提效果较真空干燥的样品稳定(变异系数小),且浸提率相差无几,所以选择冷冻干燥作为合适的样品前处理方式。色素浸提条件的正交实验结果表明,最佳浸提条件为50℃、1.5h内浸提4次,浸提的料液比为1:60。此外,浸提温度、浸提时间、浸提料液比和浸提次数对浸提率都有显著影响,影响最大的因素是浸提温度,最佳温度为50℃,随温度降低浸提率显著降低。其次是侵提时间的长短,最佳浸提时间为1.5h,延长或缩短0.5h都会使浸提率下降。浸提次数对浸提率的影响是最小的。

Navelate脐橙的落花落果规律研究

[目的]对Navelate脐橙（Citrus sinensisOsbeck cv.′Navelate′）的落花落果情况进行观察研究,为制定合适的保花保果措施提供依据。[方法]选择树势中庸一致的2株树,2008年从4月7日开始,2009年从3月24日开始,每天调查其落花落果数量,探讨其落花落果规律。[结果]2008年Navelate脐橙的落花从4月上旬开始,持续到4月下旬,2次落花的高峰期为4月12-14、16日。生理落果从4月下旬开始,持续到6月下旬,第1次生理落果从4月下旬持续到5月下旬,落果高峰为5月14、89日;第2次生理落果从5月中旬开始持续到6月下旬,落果的高峰期为5月16-20日。2009年Navelate脐橙的落花从3月下旬开始持续到4月下旬,2次落花高峰为3月28-31日和4月10-17日。落果从4月下旬开始,持续到6月中旬,第1次生理落果从4月下旬持续到5月下旬,落果高峰期为4月25-28日和5月5-10日;第2次生理落果从5月中旬开始,持续到6月中旬,落果高峰为5月10-18日。在2008、2009年,Navelate脐橙的坐果率为1.09%-2.30%,脐黄落果率为19.00%39.20%,裂果率为11.80%-14.80%。[结论]该研究弄清了Navelate脐橙的落花落果、脐黄和裂果规律,可为保花保果提供科学依据。

洪江与华宁冰糖橙果实大小差异成因分析

以湖南洪江市和云南华宁县冰糖橙果实为材料,比较分析了2个产区冰糖橙外在品质特征和产地气候特征。结果表明:华宁冰糖橙平均单果质量(147.56~159.80 g)显著大于洪江冰糖橙的单果质量(106.68~109.41 g),果实横径、纵径也均显著大于洪江冰糖橙的;2个产区果实囊瓣数和单个囊瓣内汁胞数无明显差异;华宁冰糖橙单个汁胞体积为22.07 mm^(3),显著大于洪江冰糖橙的(16.62 mm^(3));环境条件比较显示,2个产区年均温和年积温无明显差异;湖南怀化地区平均年降水量达1450.3mm,4—7月中旬量大,降水集中在冰糖橙果实细胞分裂末期和果实膨大初期,水分利用效率约1.23kg/((667m^(2))·mm);云南玉溪地区平均年降水量1032.1mm,7—9月降水量较大,降水集中在果实膨大期,水分利用效率约为3.78 kg/((667 m^(2))·mm);云南玉溪地区物候期整体上比洪江早1个月,果实发育时间也较洪江长1个月左右。综上,华宁产区周年温度条件相对稳定,枝梢和果实发育期长,膨大期供水充足,单个汁胞体积膨大较充分,有利于华宁冰糖橙大果的形成。

壳聚糖处理对采后脐橙活性氧代谢和细胞膜透性的影响

为了开发一种提高采后脐橙果实耐贮性的安全、简便、低成本保鲜技术,阐明其可能的作用机理,将采后“纽荷尔”脐橙果实用壳聚糖(稀释800倍的卡多赞)浸泡5 min(以清水浸泡5 min为对照)并在相对湿度85%和温度(18±1)℃下贮藏,研究壳聚糖处理对脐橙果实贮藏期间活性氧代谢和细胞膜透性的影响。结果显示:与对照果实比较,壳聚糖处理能较好地保持“纽荷尔”脐橙果实的外观品质,有效减少果实腐烂,抑制脐橙细胞膜透性、超氧阴离子自由基、过氧化氢和丙二醛含量的上升,保持较高的超氧化物歧化酶、抗坏血酸过氧化物酶和过氧化氢酶活性,较高的还原型谷胱甘肽和还原型抗坏血酸含量及较高的还原能力和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除能力。结论:壳聚糖(稀释800倍的卡多赞)处理增强了采后“纽荷尔”脐橙果实耐贮性,与壳聚糖处理增强脐橙果实的活性氧清除能力,降低活性氧和丙二醛的产生与积累,减轻膜脂过氧化作用及较好地保持其细胞膜结构有关。

奉节脐橙果实苯丙氨酸解氨酶活性及其基因表达与果皮褐变的关系

柑橘果皮褐变严重影响果实的商品价值和耐贮性。以奉节脐橙(CitrussinensisOsbeck)果实为材料,通过采后常温、涂蜡、低温、机械损伤等处理研究了果实果皮褐变率、苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性及PAL基因在果皮褐变过程中表达水平的变化。结果表明,涂蜡、损伤处理均极显著地提高果实的果皮褐变率,而低温贮藏可显著降低其发生率;贮藏期间各处理的PAL活性均呈上升趋势,损伤处理PAL活性显著高于对照。果实发生褐变或受到机械损伤后,PAL2、PAL6基因的表达均比对照明显增强。结果首次表明脐橙果实PAL活性变化以及PAL2基因的表达与果皮褐变具有非常密切的关系。

脐橙果实发育过程中有机酸合成代谢酶活性的变化

以红桔砧 10年生罗伯逊脐橙为试材 ,研究了果实发育过程中有机酸代谢相关酶活性的变化及其与有机酸积累的关系。结果表明 :在整个果实发育过程中 ,柠檬酸合成酶(CS)和磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶 (PEPC)活性与有机酸含量呈极显著正相关。这不仅证明脐橙果实中存在通过CO2 固定合成有机酸的途径 ,还说明CS、PEPC是有机酸合成的关键酶 。

纽荷尔脐橙缺硼表现与其硼、糖含量年变化的关系

研究了赣南‘纽荷尔’和‘朋娜’脐橙果实及叶片的硼和可溶性糖含量的年变化。结果表明:幼果期两品种果皮硼含量均较高,之后果皮与果肉硼含量均趋下降,但在果实膨大中后期均出现显著上升。纽荷尔越冬老叶硼含量趋明显下降并居较低水平,而朋娜老叶硼含量变幅小且相对较高。果实膨大中后期两品种果皮和果肉的可溶性糖含量均与果实硼含量出现同步积累,此时二者老叶和朋娜春梢叶的糖含量均出现低谷,而对应纽荷尔春梢叶糖含量并无明显下降。

植物学性状参与脐橙果实油斑病调控的矿质营养代谢机制研究

对红橘砧奉节72-1脐橙正常和油斑病发生较严重的挂果枝植物学性状以及挂果枝所在营养枝功能叶片和果皮N、P、K、Ca含量进行了分析,探讨植物学性状对矿质元素代谢调控与柑橘果实油斑病发生的关系。结果发现奉节72-1脐橙果实油斑病的发生与果枝植物学性状和果枝所在功能叶片矿质营养N、K和Ca含量有紧密的关系,果枝长度6～15cm、果枝叶数7～10枚、挂果数2～3个果实油斑病程度较轻。红桔砧奉节72-1脐橙果实油斑病程度较重的挂果枝所在营养枝功能叶片和果皮中N、K和Ca含量均显著低于油斑病程度较轻的植株,呈显著或极显著负相关,而与叶片和果皮中P的含量均未达显著水平。

Cu胁迫对脐橙幼苗光合特性的影响

以"脐橙52"为材料,采用水培方法,研究了Cu胁迫对脐橙幼苗光合作用的影响。结果表明,0.1μmol·L-1Cu处理的脐橙叶片叶绿素含量比对照显著增加,而5μmol·L-1、20μmol·L-1、40μmol·L-1Cu处理使绿素含量下降,且Cu浓度越高下降幅度越大;类胡萝卜素含量随Cu浓度增加不断下降。Cu≥5μmol·L-1的胁迫造成光合效率降低,净光合速率、光饱和点下降。0.1μmol·L-1Cu处理使脐橙叶片蒸腾速率和气孔导度增加,而5μmol·L-1和20μmol·L-1Cu处理使蒸腾速度和气孔导度下降,40μmol·L-1Cu处理的两个指标变化不大。0.1μmol·L-1Cu处理叶绿体光还原活性比对照有所增加,而5μmol·L-1、20μmol·L-1、40μmol·L-1Cu处理叶绿体光还原活性受到抑制。说明低浓度Cu处理可促进脐橙幼苗的光合作用,而高浓度有明显的抑制作用。

缺镁对北碚447锦橙光合作用特性的影响

以北碚447锦橙为材料,测定叶片镁质量分数、光合色素质量分数、光响应和CO2响应有关指标,研究在自然条件下缺镁对锦橙叶片光合特性的影响。结果显示,随着黄化程度增加叶片的镁质量分数显著降低,叶片受镁胁迫程度加剧。随着缺镁程度增加,叶片光合色素呈极显著的下降趋势,叶片的光饱和点、Pnmax、表观量子效率(AQY)、CO2饱和点和羧化效率(CE)显著降低,叶片的光补偿点和CO2补偿点显著提高;在光响应和CO2响应上,随着缺镁程度增加,锦橙叶片气孔导度显著降低,而细胞间隙CO2显著增大,表明缺镁锦橙的光合作用主要是受非气孔限制。这些结果为柑橘优质、高产栽培提供了理论指导和相关依据。

锦橙果实发育过程中香气成分的变化

为了研究锦橙果实发育过程中香气成分的组成及变化,使用气相色谱-质谱联用仪分析了10月、11月、12月、翌年1月的锦橙鲜果的挥发性成分,分别检测到47,50,57,46种成分,主要成分为烃类、醛类、醇类和酯类。挥发性物质的总峰面积以及烃类、酯类在12月的果实中达到最大,反式-2-己烯醛、反式-2-己烯-1-醇、顺式-3-己烯-1-醇以及香叶醇这几种醇醛类物质都随着果实的成熟而增加。柠檬烯、芳樟醇、β-月桂烯、γ-松油烯、α-蒎烯、丁酸乙酯、反式-2-己烯-1-醇和顺式-3-己烯-1-醇和香叶醛是锦橙汁的特征香气化合物。除香叶醛和丁酸乙酯外,这些特征成分均在12月采收的果实中最高。因此,应选择特征香气化合物含量最高的12月初采收锦橙果实进行加工。

应用MSAP技术对脐橙品种进行DNA甲基化分析

应用甲基化敏感扩增多态性(MSAP)技术对24个脐橙品种胞嘧啶甲基化模式和程度进行评估。结果表明,脐橙基因组的CCGG序列中检测到4.7%～15.0%的DNA发生甲基化;18对扩增引物有10对显示有多态性,总共得到639条带,其中43条带为甲基化多态性带,平均甲基化多态性(P)比率达6.7%。结果显示DNA甲基化在脐橙中发生频繁,且品种之间的甲基化模式存在较大差异,脐橙CCGG序列中胞嘧啶甲基化外部(15.0%)多于内部(4.7%)。本文首次运用MSAP技术对脐橙品种进行胞嘧啶甲基化分析表明,使用MSAP检测脐橙品种多态性非常有效。

纽荷尔脐橙果实发育期叶片不同形态硼含量与缺硼的关系

以‘纽荷尔’脐橙为材料,连续两年研究了缺硼和正常(对照)叶片总硼和不同形态硼含量的动态变化。结果显示:1)在果实膨大期(花后120～160 d),越冬老叶和春梢新叶的总硼含量均有一个显著下降的过程,且大部分时间里缺硼处理的比对照硼含量低;2)缺硼树越冬老叶的自由态硼和半束缚态硼含量在果实膨大期很低,对照较高;缺硼树越冬老叶在花后120～160 d束缚态硼含量较低,相对含量较高;3)缺硼和对照树春梢新叶的自由态硼和半束缚态硼含量比越冬老叶高,束缚态硼含量较越冬老叶低;缺硼树叶片的3种形态硼含量在花后140～160 d显著低于对照,且束缚态硼相对含量较高。就‘纽荷尔’脐橙叶片不同形态硼的动态与缺硼的生理机制进行了讨论。

6个甜橙品种果汁的后苦味分析

选取了6个甜橙(Citrus sinensis Osbeck)品种,利用高效液相色谱法检测其果实榨汁后放置过程中柠檬苦素的含量变化,评价后苦味的差异;并分析了鹿寨蜜橙果汁中电子舌检测的苦味值与柠檬苦素含量的相关性。结果表明:在榨汁后的0～32 h内,兴国甜橙3-5中柠檬苦素含量变化最不稳定,经4次显著增加后达到(9.03±0.21)mg/L的较高水平,最终含量与塔罗科血橙的差异不显著,后苦味增加明显;纽荷尔脐橙的后苦味现象最明显,其柠檬苦素含量在28～30 h时出现最大的增长,达(11.12±1.94)mg/L,不利于果汁加工;佛罗斯特夏橙、红夏橙和鹿寨蜜橙在30 h内只增加2.37～2.79 mg/L,达到3.55～4.18 mg/L的较低水平,低于6 mg/L的阈值,有利于果汁加工。因此,兴国甜橙3-5和塔罗科血橙若用于橙汁加工均须经过脱苦过程。柠檬苦素含量的动态变化表明,若尽早在室温放置24 h前抑制柠檬苦素-D-环内酯水解酶的活性,可能会减轻甜橙汁的后苦味。鹿寨蜜橙果汁中,电子舌检测的苦味值与柠檬苦素含量线性相关(r=0.85)。此外,对电子舌预测后苦味方面的应用进行了讨论。

24份甜橙种质资源的ISSR分析

从97条ISSR引物中筛选出14条能扩增出清晰的具有多态性DNA谱带的引物,分别对24份甜橙种质基因组总DNA进行PCR扩增,共获得147个位点,其中54个位点具有多态性。利用SPSS13.0软件对数据进行分析,结果显示,24份甜橙种质间相似系数在0.815~0.983之间,表明24份甜橙种质间亲缘关系较近;相似系数在0.851处,24份甜橙种质被分为3组,ISSR分子标记的分析结果与形态学观察及传统分类结果基本吻合。通过对PCR扩增谱带的分析,结果显示,引物CW39119为‘奈维林娜脐橙’种质的特异性标记,引物CW32439为‘红肉脐橙’红梗与白梗种质的特异性标记,引物CW32445为‘纽荷尔脐橙’与‘脐橙52号’种质的特异性标记。

采后钙处理对奉节脐橙褐变及膜脂过氧化作用的影响

奉节脐橙(Citrus sinensis Osbeck)是重庆鲜食柑橘的重要品种之一,但容易发生果皮褐变,严重影响生产的经济效益。为了降低脐橙果皮褐变的发生,提高果实的耐贮性和商品价值,本研究以奉节脐橙果实为材料,分别用1%CaCl2、2%CaCl2、1%Ca(NO3)2、2%Ca(NO3)2配合施保功、2,4-D处理,分析其对果皮褐变及膜脂过氧化作用相关生理指标的影响。结果表明:钙处理能有效降低褐变指数、相对电导率和丙二醛含量,提高膜脂过氧化保护酶活性,从而降低果皮褐变率;氯化钙处理效果优于硝酸钙处理。1%CaCl2浸果处理的效果最好,贮藏110d后,褐变指数比对照降低了27.5%。

奉节脐橙果皮褐变差减文库的构建及初步分析

以奉节脐橙果实为材料,采用抑制差减杂交技术,分别以褐变与未褐变柑橘果皮作为检测方和驱动方,成功构建了果皮褐变的差减cDNA文库,对部分克隆进行了序列测定并与GenBank进行了同源性比较。选择其中的4个基因:钙结合蛋白同源基因、半胱氨酸蛋白酶同源基因、NAC蛋白质家族同源基因和膨胀素同源基因进行半定量RT-PCR分析,结果表明它们在褐变果皮中的表达量均高于未褐变果皮,说明这些基因的增强表达可能与脐橙果皮褐变有密切关系。

脐橙晚熟突变体“奉晚”与原品种“奉节 72-1”的果实着色差异(英文)

测定了果实成熟过程中“奉晚”和“奉节72．1”两个脐橙（Citrus sinensis L．Osbeck）品种果皮中叶绿素和总类胡萝卜素的含量，并采用RT-PCR技术研究了相关酶的基因表达。结果表明：“奉晚”脐橙果皮中叶绿素含量的显著降低发生在11月份，“奉节72．1”则发生存10月中下旬到11月上旬；“奉晚”脐橙果皮中的总类胡萝卜素含量显著积累始于12月中旬，而“奉节72.1”品种则始于11月初。另外，“奉晚”脐橙果皮中叶绿素含量在10～11月显著高于原品种，总类胡萝卜素含量在12-1月显著低于原品种。从基因表达分析结果看到，“奉晚”脐橙果皮中与类胡萝卜素合成酶相关的基因较强表达的时间也整体迟于“奉节72．1”脐橙；叶绿素水解酶基因表达在10～12月中旬表达较“奉节72—1”弱，翌年1月份则较“奉节72．1”强。

锦橙裂果的钙素营养生理及施钙效果研究

【目的】了解矿质营养与锦橙裂果的关系及其生理机制,探讨钙在锦橙裂果中的作用及其对果皮酶活性的影响,为有效降低柑橘裂果提供理论及技术支撑。【方法】通过对北碚447锦橙果园的调查研究和采样分析,研究裂果和正常果功能叶片、果皮和果肉中N、P、K、Ca含量及相关酶的活性;采用田间试验在花前及幼果期进行喷钙处理,研究钙对裂果及果皮结构物(果胶)及其水解酶类、活性氧清除酶类、多酚氧化酶(PPO)活性的影响。【结果】裂果植株叶片和裂果果皮、果肉中的钙含量显著低于正常果,裂果率与果皮中的钙呈极显著的负相关;裂果果皮中PPO、多聚半乳糖醛酸酶(PG)、纤维素酶(CX)的活性较高,而过氧化氢酶(CAT)的活性较低;果实的裂果率与果皮中的PPO活性成显著正相关,与CAT活性和原果胶(PP)含量呈极显著的负相关。喷钙处理显著降低了果皮中丙二醛(MDA)的含量和PPO、POD、PG、CX活性,提高了SOD、CAT活性以及原果胶含量。【结论】果皮中钙含量不足导致细胞壁水解酶(PG、CX)和多酚氧化酶活性提高、维持果皮强度和延展性的原果胶含量降低是锦橙裂果发生的主要原因,外源喷钙能显著降低果实膨大期的裂果率,喷施钙肥是减少锦橙裂果的重要措施。