毛细管气相色谱法测定蜂蜡素及其胶囊中三十烷醇和二十八烷醇的含量

目的:建立蜂蜡素及其胶囊中三十烷醇和二十八烷醇毛细管气相色谱含量测定方法。方法:以氯仿为溶剂,三十六烷醇为内标物,采用SIMPLCITY-1毛细管柱(15m×0.53mm,1.5μm),FID检测器,载气为高纯氮气,流速27ml/min,进样口温度300℃,程序升温,初始温度240℃,维持1min后,以5℃/min升温至300℃,维持15min,结果:三十烷醉在0.4～1.6mg/ml;二十八烷醇在0.2～0.6mg/ml浓度范围内呈良好的线性关系(r_(30烷醇)=0.999,r_(28烷醇)=0.9996),三十烷醇的平均回收率为99.2％,RSD=1.15％;二十八烷醇的平均回收率为99.91％,RSD=1.40％(n=9)。结论:本法较准确,重现性较好,可用于蜂蜡素及其胶囊剂的质量监控。

蜂蜡素对HepG2细胞胆固醇生物合成的影响

目的:探讨蜂蜡素降低胆固醇作用机制。方法:采用体外HepG2细胞培养,以放射性标记物^(14)C-乙酸、~3H_2O和~3H-甲羟戊酸研究蜂蜡素对胆固醇生物合成步骤的影响,以^(14)C-HMG-CoA研究蜂蜡素对HMG-CoA还原酶的影响,并用Folin-酚试剂测定细胞蛋白质的含量。结果:蜂蜡素呈剂量依赖性抑制^(14)C-乙酸、~3H_2O掺入细胞胆固醇生物合成,而对~3H-甲羟戊酸掺入合成无影响;在细胞微粒体提取物中加入蜂蜡素和^(14)C-HMG-CoA孵育,对甲羟戊酸生成无影响,但在培养的HepG2细胞中加入10%LPDS上调HMG-CoA还原酶水平,同时加入蜂蜡素和^(14)C-HMG-CoA孵育,可使甲羟戊酸生成减少。结论:蜂蜡素抑制胆固醇生物合成,是从乙酸消耗到甲羟戊酸生成之间某一酶催化水平上,与HMG-CoA还原酶有关。蜂蜡素对HMG-CoA还原酶无直接抑制作用,但可通过抑制HMG-CoA还原酶上调而抑制其活性,提示蜂蜡素降低血浆胆固醇的作用点可能在对该酶的合成或降解上。

蜂蜡素对HepG_2细胞HMG-CoA还原酶mRNA表达及蛋白质水平的影响

目的:探讨蜂蜡素对HepG2细胞HMG-CoA还原酶mRNA表达及蛋白质水平的影响。方法:采用MTT比色法,Western Blot,RT-PCR等技术方法,观察蜂蜡素对HepG2细胞存活能力、HMG-CoA还原酶mRNA表达及蛋白质水平的影响。结果:当蜂蜡素浓度为100mg·L-1或以下时,对细胞存活能力无影响,为本研究可选择的剂量范围;蜂蜡素处理HepG2细胞,随着蜂蜡素浓度升高(低、中、高浓度为0.8,8,80mg·L-1),HMG-CoA还原酶蛋白质水平和mRNA的表达均逐渐降低,呈现明显的浓度依赖关系。结论:蜂蜡素可抑制HepG2细胞HMG-CoA还原酶蛋白质及mRNA的表达。

蜂蜡素固体分散体对高脂血症大鼠脂代谢的影响

目的:观察蜂蜡素(Fenglasu,FLS)及蜂蜡素固体分散体(Fenglasu solid dispersion,FLS-SD)对高脂血症大鼠脂代谢的影响。方法:高脂饲料喂养制备高脂血症大鼠模型,分别给予高,中,低剂量FLS及FLS-SD(50,100,200 mg·kg-1·d-1),测定大鼠血清中胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)、载脂蛋白A1(apoA1)、载脂蛋白B100(apoB100)含量,计算LDL-C/HDL-C和apoA1/apoB100的比值。结果:FLS及FLS-SD均呈剂量和时间依赖性显著降低高血脂大鼠血清TC,TG,LDL-C,apoB100和LDL-C/HDL-C比值,显著升高HDL-C、apoA1和apoA1/apoB100比值,且FLS-SD作用强于FLS。结论:FLS-SD可有效调节高脂血症大鼠的脂代谢紊乱。