峡江防护区地下水中铁离子运移规律研究

针对峡江水利枢纽工程同江防护区地下水环境可能恶化的问题,选取黏土、砂壤土、细砂做了小土柱运移试验和静态吸附试验,研究分析了铁离子在三类土壤中的运移规律及吸附模式。结果表明,铁离子在三类土壤中的吸附均符合Langmuir等温非线性吸附模式,吸附能力由强到弱顺序为黏土、砂壤土、细砂,运移速度由快到慢依次为细砂、砂壤土、黏土,可为评价峡江水利枢纽工程修建前后同江防护区地下水环境的变化提供理论依据。

PrP106-126作用下N2a细胞线粒体的损伤机制

为探讨Prion相关疾病中神经细胞的损伤机制,应用毒性神经多肽PrP106-126与一定浓度的Fe3+离子共同作用,并通过测定细胞NADH活性评估细胞呼吸链功能状态,检测细胞线粒体膜电位的动态变化,及线粒体内细胞色素C的分布,探讨细胞在PrP106-126与Fe3+共同诱导的氧化应激条件下,N2a细胞线粒体可能的损伤及对整个细胞的影响。试验结果显示,毒性多肽与Fe3+作用下,N2a细胞的NADH酶活性显著下降(P<0.01),降低至正常活性的65%,细胞线粒体膜电位出现明显的去极化(P<0.01),细胞色素C自线粒体释放至细胞质中,并引起pro-caspase-9活化。

后极部巩膜层间铁异物植入对兔眼生理生化的影响

目的通过兔眼电生理检查及房水、玻璃体铁离子浓度的检测,评估后极部巩膜层间铁异物植入对兔眼生理生化的影响。方法选取健康成年日本大耳白兔12只,随机分成两组。以右眼为对照眼,左眼为实验眼。制备2.0mm×1.0mm×0.2mm中碳铁片,经眶路植入兔左眼后极部巩膜板层内。第一组植入无锈中碳铁片,第二组植入有锈中碳铁片。分别在植入前1周及术后1周、2周、1个月、3个月,对双眼进行闪光视网膜电流图(F-ERG)和闪光视觉诱发电位(F-VEP)检查。在实验结束处死前,抽取兔眼房水和玻璃体并设置空白对照,检测其中的铁离子浓度。运用统计软件SPSS16.0,采用方差分析,对检测结果进行统计分析。结果暗视F-ERG混合反应a波振幅不同时间点之间比较差异无统计学意义(F=1.885,P=0.129),不同处理组之间比较差异也无统计学意义(F=1.188,P=0.340);b波振幅差异无统计学意义(时间因素F=2.73,P=0.064;处理因素F=1.114,P=0.367);F-VEPN1波潜时(时间因素F=1.605,P=0.263;处理因素F=1.556,P=0.314)、P1波潜时(时间因素F=2.329,P=0.092;处理因素F=2.186,P=0.103)差异均无统计学意义。房水铁离子浓度各组差异有统计学意义(F=3.791,P=0.022),其中有锈铁片组与空白对照组比较差异有统计学意义(t=3.32,P=0.004)。玻璃体铁离子浓度各组差异有统计学意义(F=3.694,P=0.023),其中有锈铁片组与空白对照组(t=2.84,P=0.01)、无锈铁片组与空白对照组(t=3.23,P=0.005)比较差异有统计学意义。结论在3个月实验期内,兔眼后极部巩膜层间细小铁异物无论氧化与否,均没有对视网膜视神经造成明确的电生理改变,但房水、玻璃体铁离子浓度较铁异物植入前有明显升高。

基于荧光素-罗丹明B的双Schiff碱选择性紫外识别Fe^(3+)的探针

合成了一种新型的基于荧光素-罗丹明B的双Schiff碱(RBFH)化合物,并实现了其在水相体系中对Fe^(3+)的紫外识别。利用紫外光谱研究了探针RBFH对阳离子的识别性能,结果表明:在V(DMF):V(HEPES)=9:1体系中,探针RBFH的两个紫外吸收峰的强度均随Fe^(3+)浓度的增加而增强,且识别行为不受其他常见金属离子的干扰。化合物RBFH与Fe^(3+)的络合比为1:1。实际水样的检测表明,水样中Fe^(3+)的紫外回收率在94%~103%之间,准确度和精密度较高。

Fe^(3+)与PrP106-126共同诱导下N2a细胞的氧化应激状态

利用PrP106-126多肽的神经毒性,结合Fe3+对细胞氧化应激可能的诱导作用,建立N2a细胞的氧化应激模型,以研究氧化应激在Prion疾病过程中的作用,及其诱导神经细胞退行性损伤的机制。试验表明,通过毒性多肽PrP106-126与Fe3+共同作用,模拟神经细胞的氧化应激状态是可行的。效果较佳的攻毒浓度和攻毒时间分别是不高于50μmol/L的毒性PrP106-126多肽,不高于500μmol/L的Fe3+,最佳攻毒时间为12h。

铁离子和储铁蛋白在钩端螺旋体生长繁殖和能量代谢中的作用与机制

目的了解铁对问号钩端螺旋体生长繁殖和能量代谢的影响,确定LA_2690与LA_3598基因产物为问号钩端螺旋体储铁蛋白及其亚铁氧化酶功能。方法采用Petroff-Hausser计数法了解缺铁对问号钩端螺旋体黄疸出血群赖型56601株在EMJH培养基中生长繁殖的影响。分光光度法和化学发光法检测缺铁抑制问号钩端螺旋体DNA和ATP合成的作用。采用生物信息学软件分析问号钩端螺旋体LA_2690和LA_3598基因结构与功能。构建LA_2690和LA_3598基因原核表达系统,Ni-NTA亲和层析法提纯目的重组蛋白rLep2690和rLep3598。分光光度法检测rLep2690和rLep3598亚铁氧化酶活性。实时荧光定量RT-PCR检测问号钩端螺旋体56601株感染人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和单核细胞(THP-1)时LA_2690和LA_3598基因转录水平变化。结果在缺铁EMJH培养基中,问号钩端螺旋体生长繁殖能力、DNA和ATP合成水平均显著下降(P<0.05)。LA_2690和LA_3598基因产物分别为细菌铁蛋白(Bfr)和细菌DNA结合铁蛋白(Dps),均含有双亚铁氧化酶中心,但后者缺乏亚铁血红素结合位点和亚铁氧化酶核心。LA_2690和LA_3598基因原核表达系统能高效表达目的重组蛋白rLep2690和rLep3598,提纯后经SDS-PAGE检测均显示为单一的蛋白质条带。rLep2690和rLep3598亚铁氧化酶活性分别为1238.619和60.052 U/L。感染细胞时,LA_2690和LA_3598基因mRNA水平均显著升高(P<0.05)。结论铁离子参与问号钩端螺旋体生长繁殖、DNA和ATP合成。LA_2690和LA_3598基因(Bfr和Dps)均为问号钩端螺旋体感染细胞时所需,其中LA_2690基因产物具有较强亚铁氧化酶活性。