新疆阿魏乙酸乙酯部位体内外对CT-26.WT细胞的影响

目的研究新疆阿魏(Ferula sinkiangensis K.M.Shen)乙酸乙酯部位体内外对鼠源性结肠癌细胞(CT-26.WT)的影响。方法采用Cell Counting Kit-8(CCK-8试剂盒)法检测新疆阿魏乙酸乙酯部位体外对CT-26.WT细胞的抗肿瘤活性,计算细胞增殖抑制率、半数抑制浓度(IC50);采用流式细胞术检测新疆阿魏对CT-26.WT细胞的总凋亡率;建立小鼠CT-26.WT实体瘤模型,随机分为正常对照组,肿瘤模型组,阿魏低、中、高剂量组,顺铂组,给药10 d后观察小鼠脏器指数、体质量、肿瘤病理切片,计算肿瘤抑制率。结果新疆阿魏乙酸乙酯部位对体外CT-26.WT肿瘤细胞的IC50为28.23μg/m L,而顺铂为4.81μg/m L;低、中、高剂量新疆阿魏乙酸乙酯部位对CT-26.WT细胞具有促凋亡作用;对小鼠肿瘤抑制率分别为(38.26±7.82)%、(48.60±9.09)%和(66.54±12.02)%,而顺铂的抑制率为(95.18±3.02)%,新疆阿魏乙酸乙酯部位中、高剂量组脾指数均明显升高,与正常对照组相比差异有统计学意义,与模型组相比差异有统计学意义。胸腺指数和体质量与正常对照组比较无明显变化。结论新疆阿魏乙酸乙酯部位在体内外对CT-26.WT肿瘤生长具有一定的抑制作用。

低温解除阜康阿魏种子休眠和内源激素变化规律的研究

目的研究低温层积解除阜康阿魏种子休眠的规律和解除休眠过程中内源激素量的变化规律。方法种子在4℃低温层积处理，20℃培养箱发芽。高效液相色谱法进行种子内源激素Z、GA3、IAA和ABA的测定。结果低温层积20d时，种子发芽率为14％，40d时种子发芽率可达60%以上。解除休眠过程中种子的内源激素量逐渐降低，在低温层积10-20d过程中GA3与ABA的量比值迅速增大。结论阜康阿魏种子4℃低温层积40d解除休眠。GA3与ABA的量比是种子休眠的关键因素。IAA和Z对种子萌发的进行有重要影响。

新疆阿魏抗氧化活性部位研究

目的建立高通量的药物对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除能力的检测方法,用于新疆阿魏抗氧化活性部位的初步筛选。方法以抗坏血酸的DPPH自由基清除率为阳性对照,并以半抑制浓度(IC50)作为评价各供试品清除DPPH自由基能力的指标,评价和筛选新疆阿魏各极性部位(石油醚部、乙酸乙酯部、甲醇部、水部)的抗氧化能力。结果新疆阿魏不同极性部位对DPPH自由基清除的IC50分别为石油醚部3252.22μg/m L、乙酸乙酯部36.22μg/m L、甲醇部32.22μg/m L、水部2643.38μg/m L,抗坏血酸为27.16μg/m L。结论乙酸乙酯部、甲醇部为新疆阿魏清除DPPH自由基的有效抗氧化活性部位。本研究建立了简便、灵敏的药物对DPPH自由基清除测定方法,其高通量的快速检测可为其他抗氧化药物的筛选提供参考。

新疆阿魏愈伤组织诱导研究

目的:探索不同培养条件、激素组合对新疆阿魏愈伤组织诱导的影响。方法:以不同苗龄的新疆阿魏幼嫩子叶、下胚轴、幼根为外植体,在不同激素组合的脱分化培养基上培养,考察不同外植体、激素组合对诱导新疆阿魏愈伤组织的影响。结果:无真叶长出的阿魏幼苗较有利于出愈伤组织,诱导下胚轴愈伤组织的最佳培养基为MS+2,4-D(1.0 mg/L)+KT(1.5 mg/L),诱导幼根愈伤组织的最佳培养基为MS+NAA(0.5 mg/L)+6-BA(0.5 mg/L)。最佳继代培养基为MS+NAA(1.5 mg/L)+6-BA(2.5 mg/L)。结论:NAA、2,4-D和6-BA均有一定的诱导效应,在愈伤组织继代增殖培养过程中6-BA的效果优于KT,添加GA3有利于继代过程中胚性愈伤组织的产生。

新疆阿魏抗溃疡作用组分筛选研究

目的:筛选和确定新疆阿魏抗溃疡的有效组分。方法:以雷尼替丁作阳性对照,选择大鼠幽门结扎所致、小鼠利血平诱发、冰醋酸烧灼型3种胃溃疡模型,研究新疆阿魏挥发油、多糖、树胶3组分的抗溃疡作用。结果:挥发油均可使所致大鼠胃液pH值升高、胃蛋白酶活性降低以及溃疡指数降低,树胶也可使大鼠胃液pH值升高、胃蛋白酶活性降低和溃疡指数降低;挥发油组均对利血平所致小鼠胃溃疡有预防作用并明显降低溃疡指数;挥发油0.05mL.kg-1组对冰醋酸烧灼的大鼠胃溃疡面积均显著小于NS对照组(P<0.01),优于雷尼替丁阳性组(P<0.05)。树胶150mg·kg-1剂量组和75mg·kg-1剂量组均显著小于NS对照组(P<0.05)。结论:阿魏中挥发油为其有效组分,疗效有优于雷尼替丁的趋势,树胶为协同成分。

阜康阿魏内生真菌的组成及分布

目的：探索阜康阿魏植物内生真菌的组成及分布,为进一步深入研究其作用机理及应用价值提供理论依据.方法：采用微生物学研究方法与技术,对阜康阿魏的不同生长期、不同部位中的内生真菌进行了分离,并利用形态和分子生物学方法对其鉴定.通过分离频率、Shannon-Wiener多样性指数和系统发育树等分析阜康阿魏内生真菌的组成、分布及多样性.结果：本研究共分离得到内生真菌59株,分别归属于20个分类单元,其中,Pleosporales sp.,短枝霉属和叶点霉属为优势菌群,分别占总菌株数量的11.86％、8.47％和8.47％.阜康阿魏1～2年根的多样性指数最大,达到1.48.结论：阜康阿魏在不同生长期及不同部位中的内生真菌分布及组成存在差异,具有一定的年份及组织专一性.

新疆野生阿魏的生物学特性研究

药用植物野生阿魏是新疆特有的国家级濒危野生保护植物物种,为伞形科多年生、一次结果的草本植物。野生阿魏是早春短命植物之一,8年才能开花结果。北疆地区野生阿魏每年3月中旬萌芽,5月上旬开始回苗,留下膨大的肉质根以度严寒酷暑。如此往复,到第8年3月底开始见旬抽茎,花期4月底5月底,4月底始花,5月中旬为盛花期,此时里面充满白色乳液状树脂,收集树脂,将收集的树脂在通风阴凉处阴干,即得块状凝固的树脂,入药称阿魏。阿魏基生叶含有17种氨基酸,总量为24.46%。阿魏全国仅产新疆,生长在带有砾石的黏质土壤和石质干山坡上。

新疆阿魏胚萌发研究

研究了新疆阿魏离体胚培养中，不同培养基、光照、温度、碳源、pH值及低温层积、赤霉素、6-苄氨基嘌呤处理等因素对胚萌发及生长的影响。结果表明：诱导胚萌发较理想的培养基为MS（pH值为5.5-6.0）＋1mg／L GA3＋0.1mg／L6-BA＋3％蔗糖；光照对胚的萌发势差异不明显（P=0.334），但存在显著的温度差异（P=0.000），其中20、25、30℃较适宜；离体胚的萌发率随种子低温层积时间的延长而有所下降，推测新疆阿魏种子产生休眠效应的部位可能在胚以外的种皮或胚乳。本研究能有效克服新疆阿魏种子抑制物或种皮本身限制，萌发率可达94％。不仅为新疆阿魏人工培育奠定了基础，也为研究种子低温层积打破休眠的机制提供了新的思路。

阿魏挥发油成分GC指纹图谱研究

目的:研究阿魏挥发油毛细管气相色谱指纹图谱的分析方法。方法:色谱柱:HP-INNOWAX毛细管柱(30 m×0.53mm,1.0μm),程序升温90℃(15 min)4℃/min180℃(5 min)2℃/min200℃(3 min)10℃/min220℃(5 min),FID检测器温度230℃。结果:以仲丁基-1-丙烯基二硫化物为参照物,标定阿魏挥发油指纹图谱有17个共有峰,其稳定性、精密度、重复性均符合要求。结论:所选择的10批阿魏挥发油的指纹图谱具有良好的相似性,该方法可靠、简便,可作为阿魏质量控制的参考方法。

新疆阿魏树脂的化学成分研究

目的研究新疆阿魏树脂的化学成分。方法利用硅胶、ODS柱色谱、HPLC色谱及反复重结晶等方法进行分离纯化,根据理化性质及波谱分析对分离得到的化合物进行结构鉴定。结果分离得到6个化合物,分别鉴定为7-羟基香豆素(1)、香草醛(2)、松柏醛(3)、3-(3,4-二甲氧基苯基)-2-丙烯醛(4)、阿魏酸(5)和β-谷甾醇(6)。结论化合物3、4均为首次从该属植物中分离得到,化合物2为首次从新疆阿魏中分离得到。

阜康阿魏根际微生物种群及数量动态变化研究

目的了解阜康阿魏生长期根际微生物种群的动态变化。方法取不同生长年限阜康阿魏的根际土壤,测定其所含的细菌、真菌、放线菌数量。结果在阜康阿魏各生长时期,根际土壤微生物中以细菌占主要优势,其次是放线菌,真菌最少;随着阜康阿魏生长年限的增加,三种微生物数量变化基本一致,生长初期根际微生物数量变化不显著,5年生以上根际微生物激增,达到最多,开花期微生物数量开始下降;与对照相比,根际效应显著。结论阜康阿魏根际微生物数量与其生长年限、生长阶段有关联。

新疆阿魏化学成分的薄层色谱鉴别研究

目的:建立有效鉴别新疆阿魏化学成分的薄层色谱方法。方法:分别以稀盐酸、乙酸乙酯提取新疆阿魏;以环己烷-二氯甲烷-冰乙酸(8∶8∶1)、甲苯-乙酸乙酯(10∶3)、正己烷-石油醚(19∶1)为展开系统;以1%三氯化铁乙醇溶液-1%铁氰化钾及碘蒸气显色;分别于366nm、可见光下检视。结果:稀盐酸提取物在366nm下检视到9个斑点,显色后可见光下检视得到4个斑点。乙酸乙酯提取物以甲苯-乙酸乙酯展开,在366nm下有13个斑点,显色后有10个斑点;乙酸乙酯提取物以正己烷-石油醚展开,显色后可见光下检视到2个斑点。结论:采用本研究的薄层色谱条件可有效区分10个批次的新疆阿魏。

一株濒危药用植物新疆阿魏内生真菌生长特性研究

选择新疆阿魏植物内生真菌中一株药理活性较强的菌,研究其生长特性,分别考察不同培养基、温度、光照及起始pH值4个单因素对菌种生长的影响,通过响应面试验优化,确定菌种最佳生长条件。结果表明,在黑暗条件下,采用土豆培养基(PDA),pH值为7,温度25℃环境中,该菌种可正常生长和繁衍,菌株平均生长速率为10.25mm·d^(-1)。

氧瓶燃烧法测定阿魏药材及挥发油中的总含硫化合物

目的采用氧瓶燃烧法测定阿魏药材及挥发油中的总含硫化合物,以控制其有效部位的含量。方法含硫化合物用氧瓶燃烧法燃烧分解为硫的氧化物,以过氧化氢溶液吸收生成硫酸,氢氧化钠溶液滴定,以仲丁基-1-丙烯基二硫化物为对照品,计算总含硫化合物的含量。结果平均回收率为99.89%(RSD=0.09%)。结论建立的方法简便、灵敏、易操作,稳定性和重复性良好,可用于阿魏药材、阿魏挥发油及其制剂中有效部位的质量评价。