探讨ABO、RhD血型调查与建立Rh表型库在安全输血中的临床意义

目的调查河北省邯郸市峰峰矿区ABO、RhD血型在人群中的分布情况,分析患者不规则抗体筛查结果,探讨ABO、Rh血型调查与建立Rh表型库在安全输血中的临床意义。方法收集我院8000例住院患者ABO血型及RhD血型的检测结果,对需输血的患者5000例进行不规则抗体检测,阳性结果标本进一步行抗体特异性鉴定。随机选取3000袋RhD阳性滤白红细胞悬液样本检测Rh表型,通过电脑建立献血者Rh表型数据库,探讨其在输血中的重要意义及价值。结果8000例患者中ABO血型分布情况从多到少依次为B型血(32.02%)、O型血(28.98%)、A型血(27.01%)、AB型血(11.99%)。不同年龄组间ABO血型分布情况差异有统计学意义(P<0.05),不同性别组中ABO血型分布情况差异无统计学意义(P>0.05)。8000例患者中RhD阴性48例(0.60%)。男性和女性Rh血型分布差异无统计学意义(P>0.05)。5000例需输血患者的血样标本中不规则抗体阳性者30例(0.60%),Rh血型系统抗体阳性19例(63.33%),抗-E检出率最高。不规则抗体的检出率女性显著高于男性,差异有统计学意义(P<0.05)。3000例RhD阳性献血者血样标本Rh血型表型共8种,其中CCDee检出率最多,其次为CcDEe,DcDEE和ccDee检出率较少。结论ABO血型的分布与地域及年龄有关;临床上除在患者输血前进行不规则抗体筛查,应进一步检测其抗体特异性;建立献血者Rh表型数据库有利于预防因Rh表型不符输血引起的溶血性输血反应,对于临床安全输血工作具有重大意义。

卵巢肿瘤患者ABO和Rh(D)血型分布情况分析

目的卵巢肿瘤手术患者的ABO和Rh(D)血型构成。方法回顾性分析2002年1月至2013年7月3 134例接受手术治疗的卵巢肿瘤患者(良性344例、恶性2 790例)的ABO和Rh(D)血型构成及良、恶性卵巢肿瘤患者术中输血情况分析。结果良、恶性卵巢肿瘤患者的ABO血型表型构成比的差异有统计学意义(P<0.05),恶性卵巢肿瘤患者O型血的构成比低于良性患者(25.4%vs.31.1%,P<0.05);良恶性卵巢肿瘤Rh(D)血型构成比的差异无统计学意义(P>0.05)。恶性卵巢肿瘤患者术中用血率(67.5%vs.8.1%,P<0.0001)、用血量[8(8,12)U vs.4(2,6)U,P<0.0001]均高于良性肿瘤患者。结论良、恶性卵巢肿瘤的发生与ABO血型可能存在一定的关系,非O型血可能会增加罹患卵巢癌的风险;恶性卵巢肿瘤患者,在手术中接受输血的概率更高,输血量更多。

6月龄内婴幼儿ABO/RhD的血型结果及两种检测方法的对比分析

目的:应用全自动微柱玻璃珠法与试管法检测不同胎龄和月龄的6月龄内婴幼儿ABO/Rh D血型并对比结果的差异。方法:收集2018年1月-2019年2月患儿血标本896例,同时应用以上两种方法检测ABO/Rh D血型抗原并进行ABO反定型抗体检出率和凝集强度并进行比较分析。结果:两种方法正定型均检出A型标本308例(34.4%),B型标本281例(31.4%),O型标本210例(23.4%),AB型标本97例(10.8%),Rh D血型均为阳性,ABO/Rh D血型抗原的凝集强度无明显差异(P> 0.05);除AB型外,B型患儿反定型抗体检出率明显高于A型和O型,反定型A细胞凝集强度均明显高于B细胞(P <0.05)。全自动微柱玻璃珠法检测A型和O型患儿的反定型抗体检出率及各血型患儿的反定型凝集强度均明显高于试管法(P <0.05)。足月儿组的ABO反定型抗体检出率和凝集强度均明显高于早产儿组(P <0.05)。全自动微柱玻璃珠法检测两组患儿反定型抗体检出率以及凝集强度均明显高于试管法(P <0.05)。不同月龄4组患儿中,Ⅳ组(4月龄至6月龄)患儿ABO反定型检出率和凝集强度均明显高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组(3月龄以下,P<0.05)。全自动微柱玻璃珠法检测Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组患儿反定型抗体检出率及各组患儿反定型凝集强度均明显高于试管法(P <0.05)。结论:大部分婴幼儿可以准确检测出ABO/Rh D血型抗原,而ABO抗体检出率与胎龄和月龄相关。全自动微柱玻璃珠法对ABO血型的反定型抗体检出率及凝集强度均强于试管法,特别对于早产儿以及3月龄以内的患儿更为可靠和敏感。

两种方法鉴定老年人ABO及RH(D)血型的比较

目的比较微柱凝胶法和试管法鉴定老年人ABO血型和RH(D)血型的可靠性。方法选取400例老年人血标本,采用试管法和微柱凝胶法进行ABO血型和RH(D)血型鉴定。结果在鉴定老年人ABO血型时,试管法正定型符合率92.0%,反定型符合率89.0%;微柱凝胶法符合率96.0%。RH(D)血型检测结果两法一致。结论微柱凝胶法检测老年人的ABO血型时优于传统试管法,在常规血型检查应推广应用。

应急快速ABO及RhD固相法血型定型技术的评估研究

目的现有血型鉴定、交叉配血等技术难以满足应急输血的需求,应急快速ABO及RhD固相法血型定型技术克服了现有技术在突发事件条件下使用的缺陷。文中旨在探讨应用应急快速ABO及RhD固相法血型定型技术进行应急血型检测的可行性。方法选择2016年2月至2016年7月南京医科大学附属江宁医院输血科常规住院拟输血、申请血型鉴定的患者1258例。所有患者抽取静脉血3m L,EDTA抗凝。血型鉴定于标本送达后4h内完成,在不同的温度条件下(4、22和37℃),采用应急快速ABO及RhD固相法血型定型试剂检测患者的全血样本,以微柱凝胶卡法结果为对照,评估应急快速ABO及RhD固相法血型定型技术的准确性和特异性。结果与微柱凝胶卡法比较,应急快速ABO及RhD固相法血型定型试剂对所有全血样本定型符合率均为100%。应急快速ABO及RhD固相法各温度下温度适应性检测结果的符合率均为100%。结论应急快速ABO及RhD固相法血型定型技术具有良好的准确性,适合应急血型初筛。

血型基因检测在ABO和RhD血型鉴定困难患者输血中的应用价值

目的探讨血型基因检测在ABO和RhD血型鉴定困难患者输血中的应用价值。方法收集2015年7月—2017年10月于我院行ABO和RhD血型血清学鉴定困难的临床样本80例,其中ABO血型正反不符37例,RhD血型鉴定困难43例。采用聚合酶链反应-特异性序列引物(PCR-SSP)技术和Sanger测序方法进行基因检测。结果37例ABO血型正反定型不符的样本经Sanger测序确定抗体减弱样本13例,A亚型8例,B亚型5例,AB亚型4例,Cis AB型4例,B(A)型3例,检测出A102、Ael05、A311、B301、O02、CisAB01、B(A)04等位基因。在43例RhD血型鉴定困难样本中,通过PCR-SSP技术检测出RhD阳性、弱D15型、RhD-CE-(2-9)-D型和RhDⅥⅢ型。根据基因检测确定的血型为受血者选择ABO和RhD血型相合的血液,经抗人球蛋白卡式法进行交叉配血试验,实现临床精准化输血。结论采用血型基因测序分析的方法,可以鉴定血清学实验无法判定的ABO血型、RhD血型,从而提升解决疑难配血的能力,提高输血治疗的安全性,为精准输血提供保障。

应用微柱凝胶法鉴定婴儿ABO及RH(D)血型的分析

目的分析以微柱凝胶法全自动血型系统鉴定婴儿脐带血ABO及Rh(D)的血型可行性。方法选取500份婴儿脐带血标本,采用试管法和微柱凝胶法进行ABO和Rh(D)血型鉴定。结果在鉴定婴儿ABO和Rh(D)血型时,试管法正反定型符合率84.2%(421/500),微柱凝胶法符合率98.4%(492/500),且微柱凝胶法的正定型结果全部正确。RHD检测结果两法一致。结论微柱凝胶法检测婴儿的ABO和Rh(D)血型时优于传统试管法,在常规血型检查应推广应用。

柳州地区5个民族人群ABO及Rh(D)血型基因频率调查

目的了解柳州地区5个民族人群中ABO及Rh(D)血型分布及基因频率特征,为临床输血提供依据。方法回顾性分析2019-2021年在柳州市妇幼保健院就诊的侗族、壮族、苗族、瑶族和汉族64323例患者的ABO、Rh(D)血型结果及其临床资料,对患者血型的分布频率和基因频率进行统计分析。结果5个民族的ABO血型分布规律为O>B>A>AB,基因频率r>q>p,对5个民族的ABO血型观察值和期望值经吻合度检验,符合Hardy-Weinberg平衡定律;各少数民族血型分布间的两两比较差异均无统计学意义(P>0.05),而汉族分别与侗族、苗族、瑶族、壮族的血型分布两两比较差异均有统计学意义(P<0.05);5个民族Rh(D)阴性抗原表现频率分布较低(均小于0.5%)。结论本地区5个民族人群的ABO血型分布规律如下,O基因频率较高而A基因频率较低;汉族与少数民族之间ABO血型分布可能存在一定差异;本地区少数民族的Rh(D)阴性频率较低,符合南方地区少数民族血型分布特征。

泉州地区献血人群ABO、Rh血型分布特点分析

目的探讨泉州地区献血人群ABO和Rh血型分布特点,丰富稀有表型资料库,以期指导采供血计划和无偿献血者招募策略的制订,保障泉州地区的临床用血。方法收集2018—2022年泉州市190195名献血者数据,分析其ABO和RhD血型分布特点,进行ABO血型Hardy-Weinberg吻合度检验,并对2022年8月至2024年4月本站RhD阴性标本进行RhC、c、E、e抗原分型检测,建立稀有表型资料库。结果泉州地区献血人群ABO表现型O>A>B>AB,基因频率r>p>q,期望值与观察值差异有统计学意义,不符合Hardy-Weinberg遗传规律。汉族RhD阴性献血者占比0.44%,271名RhD阴性献血者中,共检出6种表现型:ccdee>Ccdee>CCdee>ccdEe>CcdEe>--dee;未检出CcdEE、ccdEE、CCdEE、CCdEe,2例未检出C(c)抗原,RhC、c、E、e抗原频率由高到低均为e>c>C>E。结论血型遗传规律不能真实反映献血人群的血型分布,根据研究所得的献血人群ABO和Rh血型分布特点可用来指导制订采供血计划和精准的无偿献血者招募策略,保障本地区的血液供应。

应用微柱凝胶法鉴定婴儿ABO及Rh(D)血型

目的 :比较传统试管法和微柱凝胶法全自动血型系统鉴定婴儿ABO及Rh(D)血型的研究。方法 :选取500份婴儿脐带血标本 ,采用试管法和微柱凝胶法进行ABO和Rh(D)血型 ,并选项取40份抗原性减弱的标本采用两种方法比较。结果 :在鉴定婴儿ABO和Rh(D)血型时两种方法差异无显著性。结论 :微柱凝胶法可取代试管法用于婴儿的ABO和Rh(D)血型鉴定。

孕妇及胎儿Rh(D/E)免疫性溶血病的诊断与血液治疗

目的:探讨孕妇及胎儿Rh(D/E)血型不合的免疫性溶血病的治疗,预防孕妇早孕自然流产或不足月死胎。方法:用大量去除血浆和换血疗法对孕妇及胎儿或新生儿Rh(D/E)血型不合者进行治疗,以降低IgG抗D/E的含量,提高胎儿或新生儿的成活率。结果:2例孕妇及胎儿Rh(D)血型不合者去除血浆前IgG抗-D分别为512和1024,去除血浆3周后,IgG抗-D效价降至16和32,以后间断性的治疗,减少治疗频率,保持IgG抗-D≤64,置足月行剖宫术,产下正常男、女婴儿各1名;1例Rh(E)血型不合者未经治疗而胎死宫内;另1例Rh(D)新生儿溶血病(HDN)经换血治疗而得救。1年后随访,3例婴儿发育均良好,与正常婴儿无差异。结论:大量去除血浆,同时补充高蛋白饮食是治疗孕妇及胎儿RhD/E血型不合的免疫性溶血病的好方法,换血疗法是HDN治疗的最佳选择。

陕西省ABO与Rh血型分布特征及人口迁移对血型分布的影响

目的调查分析陕西人ABO和Rh血型的分布特征,探讨区域划分及人口迁移对血型分布的影响。方法收集陕西省十个地市20年3691624人献血者数据,以陕西省地理学特征分为陕北、陕南和关中3个地域,统计分析不同区域ABO及Rh血型分布特征。采用热图软件导入陕西省地图呈现ABO血型地图。分析对比2008年和2018年2个年份ABO血型分布时空变化特征。结果陕西人ABO血型分布特征为O>B>A>AB,Rh阴性占比为0.41%。绘制了陕西省ABO血型分布地图,陕西ABO血型分布有明显的地域差异,关中ABO血型分布为B>O>A>AB,陕南为O>A>B>AB,陕北为O>B>A>AB。陕北A型占比最低为26.12%,陕南B型最低为27.48%,O型在陕北和陕南地区占比较高,分别为32.60%和32.10%。与2008年相比,2018年的陕西三个区域ABO血型分布发生显著改变。结论陕西省ABO血型总体分布特征为O>B>A>AB,地域不同血型分布存在显著差异,1998~2018年间人口迁移对血型分布产生影响。

宁夏地区回族无偿献血者ABO和Rh血型基因频率分布的研究

目的了解宁夏地区回族无偿献血人群ABO及Rh血型分布规律及基因频率。方法对宁夏地区8 384例回族初次无偿献血人群进行血型鉴定。采用血型群体遗传学研究方法,进行ABO、Rh血型基因频率研究。结果宁夏回族A型、B型、O型及AB型构成比分别为28.32%、28.73%、33.28%及9.67%;期望值构成比为28.81%、29.22%、32.86%及9.10%,基因频率p=0.212 0,q=0.214 7,r=0.573 3,观察值与期望值差异无统计学意义(P>0.05),分布符合Hardy-Weinberg平衡。ABO血型分布频率由高到低分别为O型>B型>A型>AB型。8 384例回族献血者共检出RhD阴性82例(0.98%),其中ccdee为68.29%,Ccdee为21.95%,ccdEe为4.87%,CcdEe为2.44%,CCdee为2.44%,其期望值构成比依次为68.29%、24.58%、3.04%、0.55%及2.21%,基因频率dce为0.826 394,dCe为0.148 750,dcE为0.018 388,dCE为0.0000,观察值与期望值差异无统计学意义(P>0.05),分布符合Hardy-Weinberg平衡。结论宁夏地区回族无偿献血人群ABO及Rh血型分布规律及基因频率符合Hardy-Weinberg平衡,该研究对该地区采供血计划的制订、临床科学安全用血及新生儿溶血病的防治提供了依据。

RhD阴性孕妇妊娠RhD阳性胎儿与新生儿溶血病的相关性分析

目的探讨RhD阴性孕妇产前免疫性抗D抗体的检出率与产后新生儿溶血病(HDN)发病率的相关性。方法收集2007年1月至2010年12月137例RhD阴性孕妇产前血样及40例产后血样,分析产前抗D抗体的检出率、产后HDN发病率及其与母儿ABO血型配合性的关系。结果 16例(12.60%)RhD阴性孕妇多次妊娠者检测到抗D抗体,10例首次妊娠者均未检出;产前血清抗D抗体的检出率低于产后(P<0.05);RhD阴性孕妇妊娠RhD阳性胎儿且母儿ABO血型不配合时HDN的发病率高于母儿ABO血型配合者(P<0.05),属ABO血型系统者HDN的发病率高于属Rh血型系统者(P<0.05);抗D抗体的检出率与母儿ABO血型配合性无相关性(P>0.05)。结论产前RhD阴性孕妇抗D抗体的检出率与产后发生HDN的相关性尚不明确;ABO血型不配合对RhD阴性孕妇发生RhD-HDN有保护作用,但对产生抗D抗体的检出率无影响。

Rh缺失型D--个体及其家系成员基因分型与序列分析

目的初步探讨Rh缺失型D--个体发生的分子机制。方法采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP),对两例Rh缺失型D--个体及其家系成员RHD与RHCE基因多个外显子与内含子进行扩增。根据PCR-SSP结果,对所有与血清学表型不符的异常扩增片段进行克隆测序。结果两例Rh缺失型D--个体PCR-SSP扩增后获得D、e的基因相关片段。经测序发现,RhD--个体1第5外显子第22位核苷酸出现缺失,48与90位发生点突变。RhD--个体2第5外显子第89位发生突变。结论Rh基因外显子的缺失以及单个核苷酸的缺失与突变可能是导致Rh缺失型DD--形成的重要原因之一。

2493例RhD阴性献血者的基因分析及4个新RHD等位基因的鉴定

目的研究中国汉族人群RHD等位基因多态性和分子机制。方法2008年1月-2011年9月，对2493例初筛为RH阴性的无偿献血者，采用单克隆抗体鉴定RhD／C／c／E／＇e抗原，D抗原鉴定同时采用间接抗球蛋白法；采用PCR·SSP方法测出d／d、D／d、DEL／d型，再用商用RHD基因检测试剂盒鉴定D／d型的样本中的弱D—15、RHD．CE（2-9）-D、DVI-Ⅲ和Dva型；对于排除前述基因型的样本，对其RHD基因10个外显子序列进行测序比对分析。结果2493例中，有1686名为R／／D基因完全缺失（0／O），占67．6％，其它808名检出有RHD基因：其中20．7％（516／2493）为DEL型（RHD1227G〉A／a），RHD—CE（2-9）-D／d为最常见的融合基因型，占6．5％（163／2493），其次为DⅥ·nl（RHD—CE（3-6）-D／d），占1．2％（31／2493），弱D15型为常见的弱D型，共检出62例（2．5％）；发现的4个新等位基因，分别是RHO78delC／d、RHD520G〉A＋1080dellO／dRHD、438G〉C／d和RHD101A〉G／d。结论汉族人群RHD等位基因多态性与高加索人群存在差异，有丰富的类型和不同分子机制。

Rh血型抗-D阳性个体中未见DEL型

目的分析Rh血型系统抗-D抗体阳性个体的RhCcEe表型及检测DEL等位基因,观察产生抗-D同种免疫反应个体中是否存在DEL型。方法对因输血或妊娠产生抗-D同种抗体的个体,采用间接抗人球蛋白试验(IAT)排除部分D型或弱D型,然后进行RhCcEe表型检测,同时采用PCR方法检测RHD1227A等位基因鉴别DEL型和真实Rh(D)阴性表型。同时检测99名IAT确认的、抗-D抗体阴性的Rh(D)阴性健康人作对照。结果 99名抗-D抗体阴性组共检出C抗原阳性(包括CC或Cc)个体44名(44.4%);DEL型24名(24.2%)。抗-D抗体阳性组经IAT确认共118名Rh(D)阴性,C抗原阳性22名(18.6%),未发现DEL型个体,均与抗体阴性组存在显著性差异(P<0.01)。结论抗-D抗体阳性组未见DEL型,提示DEL型个体或不会因输血或妊娠针对Rh(D)抗原发生抗-D同种免疫反应;由于DEL型多携带C抗原,因此造成抗-D阳性组C抗原频率显著降低。

广州地区人群中RHD* 960A突变型等位基因的鉴定及血型血清学与分子生物学特征分析

目的分析广州地区人群中RHD*960A突变型等位基因个体的血型血清学与分子生物学特征。方法收集RhD变异型标本,采用2种不同的单克隆抗-D试剂鉴定RhD血型,抗球蛋白凝胶卡法进行直接抗球蛋白试验,并用RhD抗原表位检测试剂盒(D-Screen)检测RhD抗原表位;此外,采用Rh血型分型卡检测Rh CE抗原;采用多重连接酶依赖的探针扩增(MLPA)方法检测RHD及RHCE基因型;对MLPA方法无法给出检测结论的标本,进行RHD基因全部10个外显子的PCR扩增及产物直接测序。结果发现3例RhD变异型标本,直抗阴性,初步血清学结果显示RhD抗原弱阳性表达,RhD抗原表位检测结果显示其红细胞与RhD抗原epD6.6、epD8.2和epD9.1表位特异性单克隆抗体无凝集反应,与其余表位抗体呈弱阳性凝集反应;RHCE抗原分型1例为CCee,其余2例为Ccee;RHD基因的MLPA基因分型显示其基因型为正常的RHD/d(即未鉴定出其携带的突变型RHD等位基因),后续RHD基因外显子直接测序发现其第7外显子携带c.960G>A(p.Leu302Leu)同义突变,RHCE基因MLPA基因分型结果与血清学表型一致。结论首次在广州地区人群中发现了RHD*960A突变型等位基因个体,并进行血清学抗原表位和基因型检测,其血清学表现为部分D。

RHD1227A型弱D的D抗原表位分析

目的分析携带RHD1227A等位基因的Rh血型弱D型个体的红细胞D抗原表位。方法采用常规血清学方法检测Rh血型D、C、c、E和e抗原表型,间接抗人球蛋白试验(IAT)确认D抗原,序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)测定RHD基因,并检测RHD杂合型。对确认的弱D型,使用12种抗-D抗原不同表位的单克隆抗体,分析红细胞D抗原表位。结果血清学筛选和PCR-SSP检测鉴定出3例携带RHD1227A等位基因的弱D型样本,Rh小因子均为C+c+E-e+,RHD合子型鉴定均为RHD+/RHD-杂合型,提示3例个体基因型为CDe/cde。3例个体红细胞D抗原表位分析显示均具有基本完整D抗原表位,与Rh(D)阳性对照样本相同。结论发现3例RHD1227A型弱D型;不管RHD1227A等位基因表达DEL型或弱D型,其D抗原表位近似,均表达基本完整D抗原,提示该等位基因不同量的表达可能与其它调节因素有关。