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Chimera formation of platelet GPⅡb Bak a/b by intrauterine transplantation of fetal liver stem cells
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作者 陈方平 解勤之 +3 位作者 蹇在伏 张新华 张玲娜 吴新华 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2001年第7期4-7,101,共5页
Abstract:Objective To investigate whether artificial heterozygous chimeras of platelets can be established by intrauterine transplantation of fetal liver stem cells and evaluate its potential use for the treatment of ... Abstract:Objective To investigate whether artificial heterozygous chimeras of platelets can be established by intrauterine transplantation of fetal liver stem cells and evaluate its potential use for the treatment of Glanzmann thrombasthenia.Methods Platelet glycoprotein (GP) Ⅱb Bak a/b (or GPⅡb Ⅰle843Ser) was used as a genetic marker. A homozygous 16-week-old Bak a/a fetus (as donor) and a homozygous 16.5-week-old Bak b/b fetus (as recipient) were screened from 42 pregnant women hospitalized for abortion. PCR with allele specific primers and FOK Ⅰ digestion based on PCR products were used. Aborted donor fetal liver cell suspensions were prepared and intrauterine transplantation was carried out by infusion of 4?ml fetal liver cells (22×105) into the recipient umbilical vein under ultrasonic visualization.Results At gestation termination (abortion), 21 days after transplantation, chimera GPⅡb Bak a/b of the recipient were detected by FOK 1 digestion based on PCR from DNA and RT-PCR from platelet RNA. Conclusion Intrauterine transplantation of fetal liver cell may provide an effective way for curing GT or other inherited diseases. 展开更多
关键词 platelet GPⅡb Bak a/b · artificial chimera · human fetal liver stem cells · intrauterine transplantation
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胎儿骨髓和肝脏间充质干细胞的表型和生物学性状研究 被引量:12
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作者 呼莹 张丽艳 +2 位作者 马冠杰 姜学英 赵春华 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2001年第4期289-293,共5页
为研究胎儿骨髓和肝脏间充质干细胞的表型和生物学性状 ,取胎龄为 4 - 5个月水囊引产胎儿 ,将骨髓和肝脏细胞在SF(含 2 %FCS)培养基中培养 ,进行电镜观察 ,测定生长曲线 ,用流式细胞术对培养细胞进行表型测定 ,细胞周期分析 ,用SA方法... 为研究胎儿骨髓和肝脏间充质干细胞的表型和生物学性状 ,取胎龄为 4 - 5个月水囊引产胎儿 ,将骨髓和肝脏细胞在SF(含 2 %FCS)培养基中培养 ,进行电镜观察 ,测定生长曲线 ,用流式细胞术对培养细胞进行表型测定 ,细胞周期分析 ,用SA方法测定Ⅰ ,Ⅲ型胶原和vWF因子表达。结果表明 :从胎儿骨髓和肝脏培养出的间充质干细胞 ,两者在形态学、生长特性、免疫表型上是相似的 ,肝脏间充质干细胞有更好的支持造血的功能。结论提示 ,从胎儿骨髓和肝脏可分离培养出间充质干细胞 ,在体外有效扩增且保持其低分化状态。 展开更多
关键词 胎儿骨髓 胎儿肝脏 间充质干细胞 免疫表型 生物学性状
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体外不同诱导条件下对大鼠胚胎肝干细胞分化影响的实验研究 被引量:7
3
作者 高植泉 陶开山 +5 位作者 李韧 尤楠 张明 季茹 张福琴 窦科峰 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2010年第6期513-516,共4页
目的探讨和比较不同体外条件对大鼠胚胎肝干细胞分化成熟的影响。方法将取自孕14d胎龄F344大鼠胚胎肝组织的肝干细胞分别接种至含10、20、40ng/mLHGF,0.5%、1%、2%二甲基亚砜(DMSO),10ng/mLHGF+0.5%DMSO、20ng/mLHGF+1%DMSO、40ng/mLHGF... 目的探讨和比较不同体外条件对大鼠胚胎肝干细胞分化成熟的影响。方法将取自孕14d胎龄F344大鼠胚胎肝组织的肝干细胞分别接种至含10、20、40ng/mLHGF,0.5%、1%、2%二甲基亚砜(DMSO),10ng/mLHGF+0.5%DMSO、20ng/mLHGF+1%DMSO、40ng/mLHGF+2%DMSO以及空白的培养基中进行体外培养15d;诱导15d后,ELISA检测和比较不同组细胞内甲胎蛋白(AFP)和白蛋白(ALB)的浓度,实时定量PCR比较不同组细胞ALB、葡萄糖6-磷酸酶(G-6p)、角蛋白8、18(CK-8、CK-18)的mRNA的表达水平。结果与空白对照组相比,诱导15d后各实验组肝干细胞ELISA检测AFP明显下降(P<0.01),ALB明显升高(P<0.01);实时定量PCR结果表明各实验组ALB、G-6P、CK-8、CK-18mRNA水平较对照组均明显升高,其中大鼠胎肝干细胞体外最佳诱导条件为20ng/mLHGF+1%DMSO(P<0.05)。结论 HGF和DMSO均可在体外诱导大鼠肝干细胞分化,不同浓度HGF和DMSO影响其分化成熟程度;HGF、DMSO对大鼠胚胎肝干细胞的分化具有协同效应。 展开更多
关键词 肝干细胞 肝细胞生长因子 二甲基亚砜 细胞分化
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胎肝条件培养液体外诱导人骨髓间充质干细胞定向分化为造血细胞的研究 被引量:14
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作者 温冠媚 李浩威 +6 位作者 肖庆忠 陈振光 张秀明 李艳 那晓东 项鹏 李树浓 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期35-39,共5页
目的探讨人骨髓间充质干细胞(hMSCs)体外造血分化潜能。方法选用孕125-145d(125-145dpc)的昆明小鼠,分别制备小鼠胎肝基质细胞条件培养液(FLSC-CM)及胚胎成纤维细胞饲养层(FD),将体外扩增的CD34-CD45-hMSCs分别接种于含FLSC-CM、FD和IL-... 目的探讨人骨髓间充质干细胞(hMSCs)体外造血分化潜能。方法选用孕125-145d(125-145dpc)的昆明小鼠,分别制备小鼠胎肝基质细胞条件培养液(FLSC-CM)及胚胎成纤维细胞饲养层(FD),将体外扩增的CD34-CD45-hMSCs分别接种于含FLSC-CM、FD和IL-6及SCF组合的培养体系中,培养7d后,通过形态学、表型、粒-单/巨噬细胞系集落培养(CFU-GM)对分化细胞进行鉴定。结果hMSCs与FLSC-CM共培养组产生的非贴壁细胞明显增多,形态类似于单核或小淋巴细胞,部分细胞可表达人造血细胞特异性表面分子(CD34和CD45),在含人粒-单集落刺激因子(GM-CSF)的甲基纤维素培养体系中能够形成CFU-GM,而FD和IL-6+SCF诱导组无上述作用。结论FLSC-CM可诱导CD34-CD45-hMSCs分化为造血细胞,提示hMSCs具有体外造血分化潜能。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 胎肝
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人胎肝干细胞的体外培养及诱导分化 被引量:1
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作者 朱争艳 杜智 +2 位作者 李涛 张金卷 马瑞丽 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2004年第5期267-268,共2页
为体外分离培养和诱导分化人胎肝干细胞 ,从原代分离培养人胎肝干细胞集落 ,免疫细胞化学鉴定细胞集落分子标志物的表达 ;在体外特定细胞因子作用下诱导干细胞定向分化为成熟肝脏细胞 ,对其生物学特性进行初步鉴定。结果 ,从人胎肝组织... 为体外分离培养和诱导分化人胎肝干细胞 ,从原代分离培养人胎肝干细胞集落 ,免疫细胞化学鉴定细胞集落分子标志物的表达 ;在体外特定细胞因子作用下诱导干细胞定向分化为成熟肝脏细胞 ,对其生物学特性进行初步鉴定。结果 ,从人胎肝组织中成功分离表达AFP、Albumin、Cytokeratin等标志物的胎肝干细胞集落 ,在体外特定细胞因子作用下肝干细胞可定向分化为成熟肝脏细胞。因此人胎肝中同样存在具有干细胞特性的原始细胞 ,体外可定向分化为成熟肝细胞。 展开更多
关键词 胎肝 人胎 肝干细胞 集落 体外 定向分化 诱导分化 制备 分离 特性
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胎肝间充质干细胞治疗实验性糖尿病小鼠的研究 被引量:3
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作者 余卫 何冬梅 张洹 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期558-561,共4页
目的:研究胎肝间充质干细胞向胰岛β样细胞分化和治疗1型糖尿病的可行性。方法:用贴壁筛选法从正常C57BL/6j胎鼠(孕11.5~15.5d)肝脏中分离出胎肝间充质干细胞,用高浓度葡萄糖、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和尼克酰胺体外... 目的:研究胎肝间充质干细胞向胰岛β样细胞分化和治疗1型糖尿病的可行性。方法:用贴壁筛选法从正常C57BL/6j胎鼠(孕11.5~15.5d)肝脏中分离出胎肝间充质干细胞,用高浓度葡萄糖、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和尼克酰胺体外诱导胎肝间充质干细胞向胰岛B样细胞分化;制作1型糖尿病小鼠模型,并将诱导后的细胞移植到1型糖尿病小鼠肾被膜下,连续6周观察血糖变化;用组织学分析移植细胞体内的发育。结果:胎肝间充质干细胞来源的胰岛β样细胞移植到糖尿病小鼠肾被膜下后,具有一定的降低血糖的作用,经过6周以后,接近正常水平;取出移植物,小鼠高血糖重新出现,并很快死亡;移植物作免疫组织化学染色,可以观察到肾被膜下区含有大量胰岛素阳性细胞。结论:胎肝间充质干细胞有望成为1型糖尿病胰岛移植的种子细胞。 展开更多
关键词 胎肝 间充质干细胞 分化 STZ-糖尿病
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NKX6.1协同PDX1诱导人胎肝间充质干细胞分化为胰岛B样细胞 被引量:2
7
作者 唐小龙 张荣波 汪雪峰 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期258-263,共6页
目的探讨NKX6.1对PDX1诱导人胎肝间充质干细胞(fetal liver-derived mesenchymal stem cells,FL-MSCs)向胰岛B细胞分化的协同作用及可能机制,以获取足够用于移植的胰岛B样细胞。方法构建含PDX1与NKX6.1双基因的重组腺病毒载体,用该载体... 目的探讨NKX6.1对PDX1诱导人胎肝间充质干细胞(fetal liver-derived mesenchymal stem cells,FL-MSCs)向胰岛B细胞分化的协同作用及可能机制,以获取足够用于移植的胰岛B样细胞。方法构建含PDX1与NKX6.1双基因的重组腺病毒载体,用该载体感染FL-MSCs并联合相应的细胞因子分步诱导,检测诱导后的细胞中PDX1和NKX6.1基因以及NGN3、NeuroD1/Beta2、MafA因子和胰岛素等多种胰腺B细胞相关分子的表达情况。结果腺病毒载体转染24h后FL-MSCs细胞即开始表达PDX1与NKX6.1基因,检测显示诱导后的细胞先后开始表达NGN3、NeuroD1和MafA等因子,持续稳定表达胰岛素等B细胞相关分子;且这些分子表达存在时序性。结论PDX1与NKX6.1联合细胞因子在体外能有效诱导FL-MSCs分化为胰岛B样细胞;可能是通过先后活化的NGN3、NeuroD1和MafA等转录因子,限定细胞向内分泌前体细胞、进一步向B内分泌前体细胞、B细胞分化发育。 展开更多
关键词 胰腺十二指肠同源框 NKX. 胎肝 间充质干细胞 腺病毒载体 前体细胞 转录因子 胰岛素 细胞分化 细胞因子诱导
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干细胞样肝原始细胞的分离和鉴定 被引量:10
8
作者 苏娟 姚玉成 +7 位作者 王忠华 王新民 马大烈 余宏宇 熊俊 訾晓渊 赵书民 胡以平 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2000年第4期200-201,共2页
目的 :证实小鼠胎肝中肝干细胞的存在。方法 :小鼠胎肝细胞的分离培养和免疫细胞化学等。结果 :从小鼠胎肝组织中成功地分离得到了AFP、CD34及Albumin等特异性分子标记阳性、并呈集落样生长的细胞系。结论 :小鼠胎肝中存在具有干细胞特... 目的 :证实小鼠胎肝中肝干细胞的存在。方法 :小鼠胎肝细胞的分离培养和免疫细胞化学等。结果 :从小鼠胎肝组织中成功地分离得到了AFP、CD34及Albumin等特异性分子标记阳性、并呈集落样生长的细胞系。结论 :小鼠胎肝中存在具有干细胞特性的原始细胞 。 展开更多
关键词 肝干细胞 胚胎肝 分离培养 集落样生长
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单个大鼠胎肝干细胞的激光光镊喇曼光谱 被引量:1
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作者 王雁军 覃宗定 +2 位作者 姚辉路 汪蕴 丰美福 《光子学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第6期106-110,共5页
激光光镊喇曼光谱系统是将激光光镊与喇曼光谱相结合的一项光学技术,可以在接近自然的生理状态下研究单个生物细胞的识别及其构成成分的检测.本文采用胶原酶消化法,分离10~21天不同孕期大鼠的胎肝干细胞和成体大鼠的肝实质细胞,应用激... 激光光镊喇曼光谱系统是将激光光镊与喇曼光谱相结合的一项光学技术,可以在接近自然的生理状态下研究单个生物细胞的识别及其构成成分的检测.本文采用胶原酶消化法,分离10~21天不同孕期大鼠的胎肝干细胞和成体大鼠的肝实质细胞,应用激光光镊喇曼光谱技术检测分离到单个胎肝干细胞和肝实质细胞,以及WB-F344大鼠肝干细胞系细胞,并比较了胎肝干细胞和肝实质细胞的喇曼光谱.结果发现,13天以前孕大鼠胎肝干细胞在1 336cm-1(代表多聚核苷酸链(嘌呤))和1 446cm-1(代表蛋白的弯曲模型)处的峰依次增高,13天孕大鼠胎肝干细胞在1 336cm-1和1 446cm-1处的平均峰值最高,14天以后逐渐降低.结果表明激光光镊喇曼光谱系统可以鉴别不同孕期的胎肝细胞和成体肝实质细胞,分析胎肝干细胞的分化机理,为临床应用肝干细胞治疗奠立基础. 展开更多
关键词 光谱学 细胞生物物理学 激光光镊喇曼光谱 大鼠胎肝干细胞 喇曼光谱 激光束 细胞 分析
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小鼠胎肝间充质干细胞在缺血脑组织中迁移机制的研究 被引量:2
10
作者 孙艳 何冬梅 张洹 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期12-16,共5页
目的:探讨小鼠胎肝间充质干细胞(flMSC_S)在缺血脑组织中迁移的机制。方法:分离和培养小鼠flMSC_S,制备小鼠脑缺血再灌注模型,RT-PCR方法检测小鼠flMSC_S表达的趋化因子受体及其唯一配体基质细胞来源因子1α(SDF-1α)在缺血损伤脑组织中... 目的:探讨小鼠胎肝间充质干细胞(flMSC_S)在缺血脑组织中迁移的机制。方法:分离和培养小鼠flMSC_S,制备小鼠脑缺血再灌注模型,RT-PCR方法检测小鼠flMSC_S表达的趋化因子受体及其唯一配体基质细胞来源因子1α(SDF-1α)在缺血损伤脑组织中的mRNA表达;Westem blot检测SDF-1α蛋白在缺血损伤脑组织中的表达;免疫组织化学检测SDF-1α在缺血损伤脑组织中的表达和分布;Boyden chamber法进行SDF-1α诱导flMSC_S迁移的体外实验。结果:flMSC_S经RT-PCR检测表达趋化因子受体CR1,CR3,CXCR1,CXCR2,CXCR3,CXCR4。脑缺血损伤侧脑组织SDF-1αmRNA表达显著增高,与正常脑组织SDF-1αmRNA比,具有显著差异(P<0.01)。Western blot检测显示缺血侧脑组织SDF-1α蛋白表达量在12、24、48 h分别为0.35±0.05,0.88±0.04,0.74±0.07,与正常脑组织SDF-1α蛋白(0.22±0.04)比,差异有显著性(P<0.01)。免疫组织化学检测显示,缺血损伤后24 h,缺血侧脑皮质,海马等缺血边缘区SDF-1α表达显著增高,缺血对侧及正常脑组织未见明显SDF-1α表达。体外迁移实验显示SDF-1α体外可以趋化flMSC_S发生迁移,CXCR4阻断抗体可以阻断SDF-1α诱导flMSC_S发生的迁移。结论:SDF-1α可以诱导flMSC_S发生迁移,趋化因子受体CXCR4及其配体SDF-1α的相互作用是flMSC_S在缺血损伤脑组织中迁移的机制之一。 展开更多
关键词 小鼠 胎肝 间充质干细胞 脑缺血 趋化因子
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TAT-PDX1蛋白诱导的人胎肝间充质干细胞治疗NOD/SCID鼠糖尿病 被引量:2
11
作者 姜铧 张洹 +2 位作者 李东升 梁清乐 李雪峰 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1199-1203,共5页
目的:观察人胎肝间充质干细胞在TAT-PDX1蛋白的作用下体外分化为胰岛β细胞的能力以及治疗NOD/SCID鼠糖尿病的效果。方法:体外分离纯化获得人胎肝间充质干细胞,用TAT-PDX1蛋白体外诱导分化为胰岛β细胞,制作NOD/SCID鼠糖尿病模型,并将... 目的:观察人胎肝间充质干细胞在TAT-PDX1蛋白的作用下体外分化为胰岛β细胞的能力以及治疗NOD/SCID鼠糖尿病的效果。方法:体外分离纯化获得人胎肝间充质干细胞,用TAT-PDX1蛋白体外诱导分化为胰岛β细胞,制作NOD/SCID鼠糖尿病模型,并将诱导后的细胞移植到糖尿病鼠肾包膜下,观察各组小鼠血糖变化并行IPGTT试验。结果:用TAT-PDX1蛋白体外诱导分化的细胞稳定表达胰岛素,移植到糖尿病鼠肾包膜下,能快速降低血糖水平,取出移植物,血糖水平再次升高。结论:TAT-PDX1蛋白诱导的人胎肝间充质干细胞能有效降低糖尿病鼠血糖,有望成为糖尿病细胞治疗的种子细胞。 展开更多
关键词 人胎肝间充质干细胞 TAT-PDX1蛋白 糖尿病模型
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人胎肝MSCs的分离、鉴定及其向脂肪和成骨细胞的分化 被引量:3
12
作者 王跃春 张洹 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期120-123,128,共5页
目的:分离纯化人胎肝中的间充质样干细胞(mesenchymal-like stem cells,MSCs),观察化学因子诱导其定向分化的作用,并初步鉴定其生物学特性。方法:利用二步离心法、羟乙基淀粉沉淀法及细胞差速贴壁生长特性分离纯化人胎肝MSCs;流式细胞... 目的:分离纯化人胎肝中的间充质样干细胞(mesenchymal-like stem cells,MSCs),观察化学因子诱导其定向分化的作用,并初步鉴定其生物学特性。方法:利用二步离心法、羟乙基淀粉沉淀法及细胞差速贴壁生长特性分离纯化人胎肝MSCs;流式细胞仪检测其细胞周期和表面标志;添加常规诱导液诱导其向脂肪、成骨细胞分化并加以鉴定。结果:从人胎肝中成功分离纯化得到MSCs,P3代细胞有91.2%的细胞处于G0/G1期;表达CD29、CD44、CD105和CD166,不表达造血细胞标志CD15、CD34、CD45,不表达与GVHD相关的HLA-DR、CD80、CD86、CD40、CD40L。在经典诱导条件下,人胎肝MSCs可向脂肪及成骨细胞分化。结论:人胎肝中含有较丰富的MSCs,人胎肝MSCs具有多向分化潜能,且免疫原性弱,是组织工程和细胞治疗较为理想的种子细胞。 展开更多
关键词 人胎肝 间充质干细胞 分离 鉴定 分化
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体外诱导小鼠胎肝间充质干细胞向胰岛B样细胞分化的研究 被引量:12
13
作者 余卫 张洹 何冬梅 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期827-830,共4页
目的:体外分离和定向诱导小鼠胎肝间充质干细胞向胰岛B样细胞分化。方法:无菌条件下从正常C57BL/6J胎鼠肝中分离出间充质干细胞,体外培养传3代后用高浓度葡萄糖培养基以及碱性纤维生长因子(basic fihroblast growth factor,bFGF)和尼... 目的:体外分离和定向诱导小鼠胎肝间充质干细胞向胰岛B样细胞分化。方法:无菌条件下从正常C57BL/6J胎鼠肝中分离出间充质干细胞,体外培养传3代后用高浓度葡萄糖培养基以及碱性纤维生长因子(basic fihroblast growth factor,bFGF)和尼克酰胺诱导分化,观察胎肝间充质干细胞诱导前后形态变化;用RT-PCR检测细胞诱导前后胰十二指肠同源异型基因盒1(pancreatic duodenal homeobox-1,PDX-1)、胰岛素原1(proinsulin-1,INS-1)、葡萄糖转运子2(glucose transporter-2,GLUT-2)表达情况;胰岛素免疫细胞化学染色鉴定诱导后细胞胰岛素的表达;在形成胰岛样细胞簇后,用双硫腙做胰岛B细胞特异性染色。结果:RT-PCR显示诱导5 d后PDX-1、INS-1、GLUT-2均有表达,而诱导前的细胞则没有检测到表达;胰岛素免疫细胞化学表明细胞簇内的细胞胰岛素染色强阳性;细胞簇双硫腙染色阳性(每个T-25培养瓶有80-120个)。结论:从胎肝中分离出的间充质干细胞在体外可以定向诱导分化为胰岛B样细胞。 展开更多
关键词 间充质干细胞 胎肝 胰岛B样细胞 细胞分化
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人胎肝MSCs的分离培养及其类ESCs特性的研究 被引量:4
14
作者 王跃春 张洹 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期409-412,共4页
目的:建立一种简便、有效且经济的分离人胎肝间充质干细胞(hFL-MSCs)的方法,在此基础上研究hFL-MSCs的类胚胎干细胞特性。方法:利用二步离心及羟乙基淀粉沉淀法分离hFL-MSCs,根据不同类型细胞对培养瓶的不同黏附特性,通过多次传代纯化得... 目的:建立一种简便、有效且经济的分离人胎肝间充质干细胞(hFL-MSCs)的方法,在此基础上研究hFL-MSCs的类胚胎干细胞特性。方法:利用二步离心及羟乙基淀粉沉淀法分离hFL-MSCs,根据不同类型细胞对培养瓶的不同黏附特性,通过多次传代纯化得到hFL-MSCs;用流式细胞仪检测hFL-MSCs的细胞周期及表面标志;用免疫细胞化学及RT-PCR检测AKP、hTERT、SSEA-4和Oct-3等胚胎干细胞标志在hFL-MSCs中的表达;在不同条件下,诱导hFL-MSCs向类神经元、成肌细胞及胰岛β样细胞分化并加以鉴定。结果:从人胎肝中分离、纯化得到MSCs,P3代hFL-MSCs有91.2%处于G0/G1期;hFL-MSCs高表达CD29和CD44,不表达造血细胞标志CD34和CD45,极低表达与GVHD相关的HLA-DR、CD80、CD86和CD106;hFL-MSCs表达Oct-4、SSEA-4、AKP和hTERT等胚胎干细胞标志;在不同诱导条件下,hFL-MSCs可分化为类神经元、肌样细胞以及胰岛β样细胞。结论:二步离心联合羟乙基淀粉沉淀法是一种简便、高效且低成本的分离hFL-MSCs的方法;hFL-MSCs具有类胚胎干细胞的特性,体外诱导可向3个胚层来源的细胞分化,且免疫原性弱,是组织工程和细胞治疗较为理想的种子细胞。 展开更多
关键词 胎肝 间充质干细胞 羟乙基淀粉
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小鼠胎肝间质干细胞的纯化与分化多能性研究 被引量:3
15
作者 孙艳 张洹 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期1613-1617,共5页
目的:分离纯化小鼠胎肝间质干细胞(flMSCs)并探讨其分化潜能。方法:通过改良贴壁法分离BABL/c小鼠胎肝间质干细胞;流式细胞术测定细胞周期和表型;体外诱导贴壁细胞向脂肪、软骨、骨组织以及神经细胞分化;化学染色、RT-PCR和免疫细胞化... 目的:分离纯化小鼠胎肝间质干细胞(flMSCs)并探讨其分化潜能。方法:通过改良贴壁法分离BABL/c小鼠胎肝间质干细胞;流式细胞术测定细胞周期和表型;体外诱导贴壁细胞向脂肪、软骨、骨组织以及神经细胞分化;化学染色、RT-PCR和免疫细胞化学染色鉴定分化。结果:改进贴壁法分离的flMSCs呈均一梭形,(83.76±2.88)%处于G0/G1期,表达CD44、CD29,不表达造血细胞表面标志CD45、CD11b,诱导后能向脂肪、软骨、骨以及神经方向分化。结论:贴壁法可以分离纯化小鼠flMSCs,小鼠flMSCs具有较强的分化潜能和"可塑性",可用于干细胞治疗疾病的进一步研究。 展开更多
关键词 小鼠 胎儿肝 间质干细胞 细胞分化
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脐血干细胞移植治疗失代偿期肝硬化86例疗效观察 被引量:16
16
作者 杨宏丽 于发涛 +3 位作者 李桂杰 陈自平 李坤 徐昌青 《山东医药》 CAS 北大核心 2010年第45期16-17,共2页
目的探讨脐血干细胞移植治疗失代偿期肝硬化的疗效。方法对86例失代偿期肝硬化患者术前常规保肝治疗,采用细胞分离技术自脐带血中提取移植所需要的干细胞,通过肝动脉介入的方法注入肝脏内。干细胞移植后第1、4、10及16周行肝功能检查,... 目的探讨脐血干细胞移植治疗失代偿期肝硬化的疗效。方法对86例失代偿期肝硬化患者术前常规保肝治疗,采用细胞分离技术自脐带血中提取移植所需要的干细胞,通过肝动脉介入的方法注入肝脏内。干细胞移植后第1、4、10及16周行肝功能检查,第10、16周行肝脏CT检查评价影像学变化。结果术后第1~10周86例患者症状明显改善;术后16周血浆白蛋白水平、凝血酶原活动度较术前均明显提高(P均〈0.01),谷丙转氨酶、谷草转氨酶较术前均显著降低(P均〈0.05);术后第16周CT显示肝脏最大截面积较术前明显增加(P〈0.05)。结论脐血干细胞移植治疗可有效修复肝损伤、改善肝功能,提高患者的生存质量。 展开更多
关键词 肝硬化 造血干细胞移植 胎血
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具有双向分化潜能的鼠胎肝干细胞的分离、培养及鉴定 被引量:1
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作者 于黎明 陈姝 何松 《重庆医学》 CAS 北大核心 2016年第12期1666-1669,共4页
目的优化体外分离、培养和筛选胎鼠肝脏干细胞(LSC)的方法,并鉴定其双向分化的潜能。方法通过密度梯度离心和细胞差异性贴壁法分离小鼠胎肝干细胞(FLSC),以细胞平板克隆技术和四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定FLSC的增殖,通过添加二甲... 目的优化体外分离、培养和筛选胎鼠肝脏干细胞(LSC)的方法,并鉴定其双向分化的潜能。方法通过密度梯度离心和细胞差异性贴壁法分离小鼠胎肝干细胞(FLSC),以细胞平板克隆技术和四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定FLSC的增殖,通过添加二甲基亚砜(DMSO)和HGF等诱导干细胞分化。结果分离后的FLSC 24h内贴壁,卵圆形,排列紧密,1~2周内活化,CD133、CD49f、EPCAM的阳性率分别为(97.95±1.21)%、(92.71±3.49)%、和(50.73±3.45)%,表达甲胎蛋白(AFP)、细胞角蛋白19(CK19);诱导分化后糖原染色(PAS)法染色可见红色糖原颗粒,表达清蛋白(ALB)、肝细胞核因子4α(HNF-4α)。结论联合密度梯度离心和差异性贴壁法成功分离FLSC,分离后的FLSC干性强,增殖能力强,具有向肝细胞和胆管上皮细胞双向分化的能力。 展开更多
关键词 胚胎肝干细胞 离心法 梯密度 细胞 培养的 细胞分化
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Tg737基因参与胎肝干细胞正常分化的机制研究 被引量:1
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作者 党立力 黄启科 +7 位作者 周亮 阮柏 刘广欣 段涛 李伟强 张卓超 窦科峰 陶开山 《肝胆外科杂志》 2014年第1期55-58,共4页
目的探讨Tg737基因对胎肝干细胞(Fetal liver stem cells,FLSCs)正常分化的影响及相关机制。方法三步分离法富集FLSCs;在HGF诱导FLSCs的不同时间点,RT-PCR检测AFP、ALB、Tg737及HNF4α的mRNA表达,Western blot检测Tg737和HNF4α的mRNA... 目的探讨Tg737基因对胎肝干细胞(Fetal liver stem cells,FLSCs)正常分化的影响及相关机制。方法三步分离法富集FLSCs;在HGF诱导FLSCs的不同时间点,RT-PCR检测AFP、ALB、Tg737及HNF4α的mRNA表达,Western blot检测Tg737和HNF4α的mRNA和蛋白表达;慢病毒Tg737-shRNA转染FLSCs,观察转染后Tg737的抑制效果;Tg737抑制后,RTPCR检测不同诱导时间AFP和ALB的mRNA表达;Western blot检测Tg737抑制后HNF4α的蛋白表达。结果三步分离法能有效富集FLSCs;在HGF诱导FLSCs的过程中,AFP的mRNA表达呈逐渐降低的趋势,ALB的mRNA表达逐渐升高,Tg737及HNF4α的mRNA和蛋白表达均呈逐渐升高的趋势;shRNA能有效下调Tg737的mRNA和蛋白表达;在HGF诱导过程中,Tg737抑制组AFP和ALB的mRNA水平均无明显变化;Tg737抑制后HNF4α的蛋白表达显著下调。结论 Tg737和HNF4α参与了FLSCs的正常分化,Tg737的表达缺失会抑制FLSCs的正常分化,其抑分化机制可能是通过下调HNF4α来实现的。 展开更多
关键词 RNA干扰 胎肝干细胞 Tg737 HNF4α 分化 抑分化
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小鼠胎肝间充质干细胞移植治疗缺血性脑损伤的实验研究 被引量:1
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作者 孙艳 张洹 何冬梅 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期142-145,I0002,共5页
目的:探讨小鼠胎肝间充质干细胞(flMSCs)移植对缺血性脑损伤是否具有修复治疗作用。方法:用快速PCR扩增Y染色体特异sry基因方法鉴定并分离BALB/c雄性小鼠flMSCs,将其植入雌性缺血性脑损伤BALB/c小鼠损伤侧侧脑室。40d后观察神经功能,PC... 目的:探讨小鼠胎肝间充质干细胞(flMSCs)移植对缺血性脑损伤是否具有修复治疗作用。方法:用快速PCR扩增Y染色体特异sry基因方法鉴定并分离BALB/c雄性小鼠flMSCs,将其植入雌性缺血性脑损伤BALB/c小鼠损伤侧侧脑室。40d后观察神经功能,PCR检测脑组织sry基因;HE染色和尼氏染色观察脑组织结构;免疫组化和FISH双染观察flMSCs分化存活。结果:5只移植小鼠长期存活;移植后40 d,小鼠神经功能缺损有所改善;脑组织结构未见明显异常;移植小鼠脑组织sry基因阳性;(6.6±2.9)%的受体鼠损伤侧脑细胞Y染色体阳性,Y染色体和Nestin双阳性细胞占缺血侧脑组织细胞的(1.1±0.9)%,Y染色体和Tubulin双阳性细胞占(3.2±1.4)%,Y染色体和GFAP双阳性细胞占(0.9±0.7)%,对侧脑组织未见到染色体阳性细胞。结论:缺血性脑损伤条件下,小鼠flMSCs可以向神经细胞分化,参与损伤脑组织的结构重建。 展开更多
关键词 小鼠 胎肝 间充质干细胞 脑缺血 Y染色体
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脐血单个核细胞移植治疗失代偿期肝硬化 被引量:4
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作者 徐玉琴 石文明 +3 位作者 李金顺 徐建国 李宏文 胡祥 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第45期7975-7980,共6页
背景:原位肝移植是目前治疗终末期肝病的最有效手段,但是供肝来源匮乏、免疫排斥、无法有效控制反复感染等问题限制了其应用。干细胞移植技术的应用为该病种的治疗提供了新的思路和研究方法,许多研究证实可以通过各种不同的方法在体外... 背景:原位肝移植是目前治疗终末期肝病的最有效手段,但是供肝来源匮乏、免疫排斥、无法有效控制反复感染等问题限制了其应用。干细胞移植技术的应用为该病种的治疗提供了新的思路和研究方法,许多研究证实可以通过各种不同的方法在体外成功诱导脐血来源的间充质干细胞向肝细胞转化。目的:探讨人脐血单个核细胞移植治疗失代偿期肝硬化的临床疗效及可行性。方法:异体人脐血单个核细胞移植治疗23例肝硬化失代偿期患者,检测移植后2,4,8,24周的血清丙氨酸氨基转移酶、白蛋白、胆碱酯酶、总胆红素和凝血酶原时间,并观察患者临床症状体征改善情况以及不良反应。结果与结论:人脐血单个核细胞移植后2周,肝功能各项指标较治疗前无明显改善(P>0.05);移植后4周,谷丙转氨酶有显著改善(P<0.05)、其余指标无明显改善;移植后12周肝功能各项指标均有改善(P<0.05),且肝脏硬度有所改善(P<0.05);移植后24周各项指标有显著性改善(P<0.01)。移植后4周时患者临床症状有明显改善,20例乏力好转(87%)、21例食欲改善(91%)、19例腹水减轻(83%);所有患者移植期间及治疗后随访24周无严重不良反应。结果显示异体人脐血单个核细胞移植治疗肝硬化失代偿期患者临床疗效肯定,安全性好,可作为中晚期肝硬化患者的临床治疗手段。 展开更多
关键词 干细胞 干细胞临床实践 脐血单个核细胞 肝硬化 失代偿期 临床疗效 谷丙转氨酶 不良反应
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