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应用实时荧光定量PCR技术检测母体血浆中胎儿游离mRNA的研究 被引量:1
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作者 赵欣荣 程蔚蔚 +2 位作者 刘特 陈焱 张华 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2009年第9期668-670,共3页
目的:探讨孕妇血浆中胎儿游离mRNA含量变化作为产前筛查指标的可行性。方法:选择39例早中孕期(8~14周)孕妇为研究对象,其中15例行人工流产(A组),11例为稽留流产或胚胎发育异常(B组),13例为正常早孕期单胎孕妇(C组),提取其外周血血浆游... 目的:探讨孕妇血浆中胎儿游离mRNA含量变化作为产前筛查指标的可行性。方法:选择39例早中孕期(8~14周)孕妇为研究对象,其中15例行人工流产(A组),11例为稽留流产或胚胎发育异常(B组),13例为正常早孕期单胎孕妇(C组),提取其外周血血浆游离mRNA,应用实时荧光定量PCR技术(QF-PCR)检测胎盘来源的hPL,β-HCG,TFPI2基因,以此确定母体血浆中的胎儿游离mRNA含量,同时检测代表母体与胎儿总游离mRNA的18s rRNA基因作为内参。结果:3组孕妇血浆标本中均检测到hPL,β-HCG,TFPI2基因及18s rRNA基因,且不依赖于胎儿性别,3组样本表达量有差异,B组TFPI2基因显著高于A、C组(P<0.01)。结论:实时荧光定量PCR方法的灵敏度和特异性较高,作为非创性产前基因诊断的一种方法可应用于临床。胎儿游离mRNA可能成为产前筛查的有效指标。 展开更多
关键词 胎儿游离mrna 母体血浆 实时荧光定量PCR技术
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人胎儿中枢神经系统凋亡抑制因子bcl-2 mRNA的发育 被引量:1
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作者 李泽桂 蔡文琴 《局解手术学杂志》 2003年第5期347-350,共4页
目的 研究人胎儿中枢神经系统凋亡抑制因子bcl-2 mRNA的发育表达。方法 用地高辛标记的bcl-2 cRNA探针原位杂交组织化学技术,检测了12~39周胎儿中枢神经系统内bcl-2mRNA的表达情况。结果 ①在所检测的各脑区均有bcl-2mRNA表达。第12周... 目的 研究人胎儿中枢神经系统凋亡抑制因子bcl-2 mRNA的发育表达。方法 用地高辛标记的bcl-2 cRNA探针原位杂交组织化学技术,检测了12~39周胎儿中枢神经系统内bcl-2mRNA的表达情况。结果 ①在所检测的各脑区均有bcl-2mRNA表达。第12周,有强阳性的bcl-2 mRNA出现在脊髓、延髓的运动神经元、大脑额叶的皮质板;小脑和大脑室层的bcl-2 mRNA表达较弱。bcl-2 mRNA的水平一般是随胎龄的增长而下降,至第39周表达最弱。②bcl-2 mRNA主要在神经元表达。结论 在人胎儿神经系统发育中表达的bcl-2可能与编程性细胞死亡有关。 展开更多
关键词 人胎儿 中枢神经系统 凋亡抑制因子 BCL-2 mrna 地高辛 原位杂交组织化学技术
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人胎肝干细胞的分离培养、鉴定及mRNA转录分析 被引量:2
3
作者 郭向飞 金敏 +1 位作者 陈照立 李君文 《生物技术通讯》 CAS 2009年第3期346-349,共4页
目的:探讨体外大量扩增培养人胎肝干细胞的方法,研究其形态、特性及mRNA转录情况。方法:采用两步灌流法结合链霉蛋白酶消化及Percoll密度梯度离心法分离12~20周胎龄的胎肝细胞,采用免疫细胞化学染色及RT-PCR方法对分离培养的细胞进行... 目的:探讨体外大量扩增培养人胎肝干细胞的方法,研究其形态、特性及mRNA转录情况。方法:采用两步灌流法结合链霉蛋白酶消化及Percoll密度梯度离心法分离12~20周胎龄的胎肝细胞,采用免疫细胞化学染色及RT-PCR方法对分离培养的细胞进行鉴定分析。结果:刚分离的细胞活力在80%以上,原代培养3d开始出现小细胞团,2周后即形成肉眼可见的细胞集落,细胞体积小,核质比大;原代、传代培养的胎肝细胞甲胎蛋白(AFP)、细胞角蛋白19(CK19)、卵圆标记蛋白OV-6、细胞分化抗原34免疫染色阳性;RT-PCR分析证明胎肝干细胞中AFP、白蛋白、CK19、CK18和八聚体结合蛋白(OCT)-4mRNA的表达。结论:分离了胎肝干细胞,具有肝细胞、胆管细胞及干细胞表面标志及相应的基因表达,为进一步的基础研究奠定了基础。 展开更多
关键词 胎肝干细胞 分离鉴定 mrna转录
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人胎肝中肝细胞生长因子poly(A)^+mRNA在非洲爪蟾卵母细胞内的翻译 被引量:4
4
作者 贺福初 涂强 +1 位作者 邢桂春 吴祖泽 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 1990年第4期298-302,共5页
采用SDS/氯仿/苯酚法和oligo(dT)纤维素亲和层析从人胎肝提取poly(A)^+mRNA,注入非洲爪蟾卵母细胞,翻译出肝细胞生长因子(HGF),产物能从卵母细胞中分泌。在9种细胞(包括人与小鼠的4种不同组织和5种细胞系)检测系统中,证明翻译的HGF与直... 采用SDS/氯仿/苯酚法和oligo(dT)纤维素亲和层析从人胎肝提取poly(A)^+mRNA,注入非洲爪蟾卵母细胞,翻译出肝细胞生长因子(HGF),产物能从卵母细胞中分泌。在9种细胞(包括人与小鼠的4种不同组织和5种细胞系)检测系统中,证明翻译的HGF与直接提取的HGF活性一致,应用滤膜超滤法估计分子量均在10~30kDa,可以初步认为两者是同一物质。从而,支持了人胎肝HGF是胎儿肝脏细胞基因表达的产物。 展开更多
关键词 胎肝 HGF 爪蟾卵母细胞 体外翻译
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母体血清学与胎儿游离mRNA检测在产前筛查21三体综合征效能比较
5
作者 沈涟 华沛旻 李海波 《中国计划生育学杂志》 2021年第10期2196-2199,共4页
目的:分析母体血清学检测与母体血胎儿游离mRNA检测在21三体综合征产前筛查中的价值。方法:回顾性收集2016年4月—2017年10月本院产前筛查确诊胎儿为21三体综合征的单胎孕妇30例(综合征组)和胎儿正常的单胎孕妇60例(健康组)临床资料,孕... 目的:分析母体血清学检测与母体血胎儿游离mRNA检测在21三体综合征产前筛查中的价值。方法:回顾性收集2016年4月—2017年10月本院产前筛查确诊胎儿为21三体综合征的单胎孕妇30例(综合征组)和胎儿正常的单胎孕妇60例(健康组)临床资料,孕妇产前均行母体血清学检测和母体血游离胎儿mRNA检测,分析两种方法在21三体综合征产前筛查效能。结果:综合征组血清甲胎蛋白和游离雌三醇Mom值均低于健康组,绒毛膜促性腺激素Mom值高于健康组(均P<0.05);两组均检出HPL基因、β-hCG基因、TFPI2基因和PLAC4基因,两组各基因检出率无差异(P>0.05),综合征组HPL基因、β-hCG基因、PLAC4基因mRNA表达量均大于健康组(P<0.05),TFPI2基因mRNA表达量与健康组无差异(P>0.05)。母体血胎儿游离mRNA检测和外周血胎儿DNA无创筛查21三体综合征的AUC值(0.894、0.927)无差异(P>0.05)但均大于母体血清学检测(0.815)(P<0.05)。结论:母体血清学检测和母体血胎儿游离mRNA检测在21三体综合征产前筛查中均具有重要价值,但后者筛查效能更高。 展开更多
关键词 21三体综合征 产前筛查 母体血胎儿游离mrna 母体血清学
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胎脑黑质脑内移植矫正PD鼠纹状体内脑啡肽mRNA过度表达
6
作者 杨辉 蔡文琴 张可成 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 1995年第2期115-118,共4页
用6-OHDA损毁大鼠一侧黑质—纹状体通路可引起PD模型鼠脑纹状体内多巴胺匿乏.同时,亦可导致脑啡肽mRNA过度表达。我们用地高辛标记的cRNA探针对纹状体内脑啡肽mRNA含量进行了斑点杂交定量研究,发现损伤侧脑啡肽... 用6-OHDA损毁大鼠一侧黑质—纹状体通路可引起PD模型鼠脑纹状体内多巴胺匿乏.同时,亦可导致脑啡肽mRNA过度表达。我们用地高辛标记的cRNA探针对纹状体内脑啡肽mRNA含量进行了斑点杂交定量研究,发现损伤侧脑啡肽mRNA含量较健侧增高80%,胎中脑移植到失神经支配的纹状体内,脑啡肽mRNA过度表达得以矫正至正常水平,说明胎多巴胺能神经元脑内移植能够调节脑啡肽基因表达,提供了移植物能与宿主发生神经整合、建立突触联系的间接证据。 展开更多
关键词 脑啡肽mrna 胎脑黑质 脑内移植 斑点杂交
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母血中胎儿游离KISS-1 mRNA和β-HCG mRNA在子痫前期的表达 被引量:4
7
作者 王利平 王安英 李筱梅 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2012年第6期709-711,共3页
目的研究子痫前期患者母血中胎儿游离肿瘤转移抑制因子(KISS-1)mRNA和人绒毛膜促性腺激素β亚单位(β-HCG)mRNA的表达变化及意义。方法选择重度子痫前期患者40例,轻度子痫前期患者35例,对照组正常孕妇30例,提取其外周血血浆中游离mRNA,... 目的研究子痫前期患者母血中胎儿游离肿瘤转移抑制因子(KISS-1)mRNA和人绒毛膜促性腺激素β亚单位(β-HCG)mRNA的表达变化及意义。方法选择重度子痫前期患者40例,轻度子痫前期患者35例,对照组正常孕妇30例,提取其外周血血浆中游离mRNA,通过实时荧光定量PCR检测KISS-1 mRNA和β-HCG mRNA的表达。结果各组样本中均可检测到KISS-1 mRNA和β-HCG mRNA表达。其中KISS-1 mRNA和β-HCG mRNA表达量在重度子痫前期组明显高于轻度子痫前期、对照组(P<0.01)。轻度子痫前期组KISS-1 mRNA和β-HCG mRNA表达量高于对照组(P<0.01)。结论孕妇血浆中胎盘来源的游离KISS-1 mRNA和β-HCG mRNA的表达对子痫前期发病具有预测价值。 展开更多
关键词 胎儿游离mrna 人绒毛膜促性腺激素β亚单位mrna 游离肿瘤转移抑制因子mrna 子痫前期
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胎脑黑质脑内移植反转PD鼠纹状体内NPY和D_2R mRNA过度表达
8
作者 杨辉 张可成 +1 位作者 蔡文琴 何家全 《基础医学与临床》 CSCD 1997年第4期36-39,共4页
为研究胎脑黑质脑内移植对帕金森氏病大鼠纹状体内神经肽Y及多巴胺D2型受体mRNA表达的影响,本文采用核酸斑点杂交方法对胎脑黑质脑内移植前后的帕金森氏病大鼠纹状体内神经肽Y及多巴胺D2型受体mRNA含量进行了连续定量地... 为研究胎脑黑质脑内移植对帕金森氏病大鼠纹状体内神经肽Y及多巴胺D2型受体mRNA表达的影响,本文采用核酸斑点杂交方法对胎脑黑质脑内移植前后的帕金森氏病大鼠纹状体内神经肽Y及多巴胺D2型受体mRNA含量进行了连续定量地观察,研究发现胎脑黑质移植物不仅能纠正帕金森氏病大鼠的行为异常,而且还能彻底反转帕金森氏病大鼠纹状体内因去神经支配造成的神经肽Y及多巴胺D2受体mRNA过度表达,研究结果提示胎脑黑质移植物对宿主纹状体形成的神经再支配可能是促使这两种物质基因表达正常化的主要原因。 展开更多
关键词 胎脑黑质 脑移植 多巴胺D 神经肽 震颤麻痹
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Universal RNA editing in a human liver at the fetal stage
9
作者 Dong Liu Cong Liu +2 位作者 Xiyin Wang Sigurdur Ingvarsson Huiping Chen 《Open Journal of Genetics》 2012年第3期163-166,共4页
It is known that RNA editing occurs in human cells, which can change the information transmission from DNA to RNA and proteins. Most previous studies have focused on editing of the mRNAs. Here we reported that several... It is known that RNA editing occurs in human cells, which can change the information transmission from DNA to RNA and proteins. Most previous studies have focused on editing of the mRNAs. Here we reported that several kinds of RNAs, including miRNA, rRNA, mRNA, miscRNA and unknown RNA, exhibited base editing in a human fetal liver. Several editing types are displayed. Our data reveals that RNA editing may occur in different species of RNAs. 展开更多
关键词 RNA EDITING miRNA RRNA mrna miscRNA fetal LIVER
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人胎儿延髓bcl-2的发育表达
10
作者 陈德英 李泽桂 《重庆医学》 CAS CSCD 2001年第5期390-391,共2页
目的 研究人胎儿延髓bcl 2mRNA的发育表达。方法 用地高辛标记的bcl 2cRNA探针原位杂交组织化学技术 ,检测了 12~ 39周胎儿延髓内bcl 2mRNA的表达情况。结果 在所检测的延髓的运动神经元bcl 2mRNA表达较强 ,bcl 2mR NA的水平一般是... 目的 研究人胎儿延髓bcl 2mRNA的发育表达。方法 用地高辛标记的bcl 2cRNA探针原位杂交组织化学技术 ,检测了 12~ 39周胎儿延髓内bcl 2mRNA的表达情况。结果 在所检测的延髓的运动神经元bcl 2mRNA表达较强 ,bcl 2mR NA的水平一般是随胎龄的增长而下降 ,至第 39周表达最弱。结论 在人胎儿延髓发育中表达的bcl 展开更多
关键词 BCL-2 mrna 人胎儿 延髓 发育
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初步筛选心血管相关基因——表达序列片段测定法
11
作者 刘玉倩 孟宪敏 +3 位作者 许有元 魏英杰 刘冬青 丁金凤 《高血压杂志》 CSCD 1998年第2期77-79,共3页
目的从正常人胎儿心脏cDNA文库中,用DNA自动测序的方法筛选心血管相关基因。方法(1)人胚胎心cDNA文库的构建;(2)挑取有目的基因片段插入的噬菌斑,选用正向T3和反向T7引物做PCR扩增;(3)直接使用其PCR... 目的从正常人胎儿心脏cDNA文库中,用DNA自动测序的方法筛选心血管相关基因。方法(1)人胚胎心cDNA文库的构建;(2)挑取有目的基因片段插入的噬菌斑,选用正向T3和反向T7引物做PCR扩增;(3)直接使用其PCR产物做DNA测序模板,用荧光标记的T3B引物做再次PCR扩增;(4)用DNA测序仪(pharmacia)测定基因表达序列片段(ESTs);(5)将所获得的ESTs输入Genebank数据库做同源序列分析。结果(1)所构建的人胎儿心脏cDNA文库的库容量为1×109克隆,平均目的基因片段1.2~1.5kb,PCR产物阳性克隆检出率高达70%以上,用6%尿素-聚丙烯酰胺凝胶电泳5h,可测cDNA序列片段210~550bp,平均300bp;(2)在所测3132个克隆的ESTs中,新ESTs为47.4%,已知序列片段为44.1%。结论利用人胎儿心脏cDNA文库测定ESTs是筛选心血管基因的有效方法;构建高质量的cDNA文库是成功测定ESTs的保证。 展开更多
关键词 高血压 mrna 人胎心cDNA DNA序列 心血管疾病
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Single-nucleotide polymorphism screening and RNA sequencing of key messenger RNAs associated with neonatal hypoxic-ischemia brain damage 被引量:1
12
作者 Liu-Lin Xiong Lu-Lu Xue +7 位作者 Mohammed Al-Hawwas Jin Huang Rui-Ze Niu Ya-Xin Tan Yang Xu Ying-Ying Su Jia Liu Ting-Hua Wang 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2020年第1期86-95,共10页
A single-nucleotide polymorphism(SNP)is an alteration in one nucleotide in a certain position within a genome.SNPs are associated with disease susceptibility.However,the influences of SNPs on the pathogenesis of neona... A single-nucleotide polymorphism(SNP)is an alteration in one nucleotide in a certain position within a genome.SNPs are associated with disease susceptibility.However,the influences of SNPs on the pathogenesis of neonatal hypoxic-ischemic brain damage remain elusive.Seven-day-old rats were used to establish a hypoxic ischemic encephalopathy model.SNPs and expression profiles of mRNAs were analyzed in hypoxic ischemic encephalopathy model rats using RNA sequencing.Genes exhibiting SNPs associated with hypoxic ischemic encephalopathy were identified and studied by gene ontology and pathway analysis to identify their possible involvement in the disease mechanism.We identified 89 up-regulated genes containing SNPs that were mainly located on chromosome 1 and 2.Gene ontology analysis indicated that the up-regulated genes containing SNPs are mainly involved in angiogenesis,wound healing and glutamatergic synapse and biological processing of calcium-activated chloride channels.Signaling pathway analysis indicated that the differentially expressed genes play a role in glutamatergic synapses,long-term depression and oxytocin signaling.Moreover,intersection analysis of high throughput screening following PubMed retrieval and RNA sequencing for SNPs showed that CSRNP1,DUSP5 and LRRC25 were most relevant to hypoxic ischemic encephalopathy.Significant up-regulation of genes was confirmed by quantitative real-time polymerase chain reaction analysis of oxygen-glucose-deprived human fetal cortical neurons.Our results indicate that CSRNP1,DUSP5 and LRRC25,containing SNPs,may be involved in the pathogenesis of hypoxic ischemic encephalopathy.These findings indicate a novel direction for further hypoxic ischemic encephalopathy research.This animal study was approved on February 5,2017 by the Animal Care and Use Committee of Kunming Medical University,Yunnan Province,China(approval No.kmmu2019038).Cerebral tissue collection from a human fetus was approved on September 30,2015 by the Ethics Committee of Kunming Medical University,China(approval No.2015-9). 展开更多
关键词 CSRNP1 DUSP5 gene ontology ANALYSIS human fetal cortical neurons LRRC25 mrna NEONATAL HYPOXIC ISCHEMIC ENCEPHALOPATHY pathogenesis signaling pathway ANALYSIS
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孕妇血浆中胎儿游离mRNA检测在唐氏综合征产前诊断中的应用 被引量:4
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作者 程蔚蔚 赵欣荣 +2 位作者 张华 陈焱 王彦林 《中国实用妇科与产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期53-55,共3页
目的探讨孕妇血浆中胎儿游离mRNA含量变化作为唐氏综合征产前筛查指标的可行性。方法选择2007年5月至2008年8月在上海交通大学医学院附属国际和平妇幼保健院就诊的26例孕中期(15~26周)妇女作为研究对象,其中13例为单胎行常规产科检查... 目的探讨孕妇血浆中胎儿游离mRNA含量变化作为唐氏综合征产前筛查指标的可行性。方法选择2007年5月至2008年8月在上海交通大学医学院附属国际和平妇幼保健院就诊的26例孕中期(15~26周)妇女作为研究对象,其中13例为单胎行常规产科检查的孕妇(A组),9例为21-三体综合征胎儿的孕妇(B组),4例为其他染色体异常胎儿的孕妇(C组),提取其外周血血浆中游离mRNA,应用QF-PCR技术检测胎盘来源的HPL,β-HCG,TFPI2,DSCR4,LOC90625基因,以此确定母体血浆中的胎儿游离mRNA含量,并同时检测代表母体与胎儿总游离mRNA的18sRNA基因作为内参照。结果除TFPI2基因外,其他4种基因,在21-三体综合征胎儿孕妇组和其他染色体异常胎儿孕妇组血浆中胎儿游离mRNA含量明显高于正常胎儿孕妇组(P<0.01)。结论胎儿游离mRNA可能成为产前筛查唐氏综合征的有效指标。 展开更多
关键词 胎儿游离mrna 唐氏综合征 实时荧光定量PCR技术
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胎兔动脉导管平滑肌细胞氧敏感性钾通道mRNA的表达 被引量:4
14
作者 余忠琴 李涛 《武汉大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2009年第1期21-23,51,I0002,共5页
目的:建立胎兔动脉导管平滑肌细胞的体外培养方法,并检测其细胞膜氧敏感性钾通道亚型(Kv1.5)mRNA的表达。方法:采用组织块改良贴壁法(玻片压迫组织块贴壁方法)进行胎兔动脉导管平滑肌细胞的体外原代培养,并行免疫组织化学法对培养的细... 目的:建立胎兔动脉导管平滑肌细胞的体外培养方法,并检测其细胞膜氧敏感性钾通道亚型(Kv1.5)mRNA的表达。方法:采用组织块改良贴壁法(玻片压迫组织块贴壁方法)进行胎兔动脉导管平滑肌细胞的体外原代培养,并行免疫组织化学法对培养的细胞进行鉴定,用RT-PCR的方法检测其细胞膜氧敏感性钾通道亚型(Kv1.5)的表达。结果:经10-14 d培养后,培养皿底及盖玻片上铺满梭状细胞,免疫组织化学法鉴定确认为胎兔动脉导管平滑肌细胞,其细胞膜存在Kv1.5基因表达。结论:植块改良贴壁法可以成功的进行胎兔动脉导管平滑肌细胞的体外培养,且本法简便、可靠,短时间内可以获得大量细胞,从而为动脉导管未闭发病机制的研究奠定了实验基础。同时,动脉导管平滑肌细胞膜上存在氧敏感性钾通道mRNA的表达,从而为从氧敏感性钾通道层面来研究动脉导管未闭的发生机制提供了实验基础。 展开更多
关键词 氧敏感性钾通道(Kv1.5)mrna 平滑肌细胞 动脉导管 细胞培养 胎兔
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孕妇外周血中胎儿mRNA的定量分析 被引量:1
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作者 许锬 王滨有 +1 位作者 施霖 陈飞 《中国实用妇科与产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期38-40,共3页
目的 分析孕妇外周血中胎儿mRNA的含量及不同孕期不同性别胎儿mRNA含量的变化。方法 2 0 0 0年 9~ 12月哈尔滨医科大学公共卫生学院等单位提取孕妇全血mRNA ,经体外逆转录后 ,应用ε/γ引物引导扩增胎儿特异血红蛋白基因片段 ,同时... 目的 分析孕妇外周血中胎儿mRNA的含量及不同孕期不同性别胎儿mRNA含量的变化。方法 2 0 0 0年 9~ 12月哈尔滨医科大学公共卫生学院等单位提取孕妇全血mRNA ,经体外逆转录后 ,应用ε/γ引物引导扩增胎儿特异血红蛋白基因片段 ,同时用不同剂量标准mRNA经逆转录及PCR扩增后 ,琼脂糖凝胶电泳图用凝胶成像系统扫描成像 ,用GelWorks 1D软件分析凝胶图像 ,绘制定量标准曲线 ,对样品进行定量分析。结果  5 0例样品中 4 4例扩增出了胎儿ε/γ基因片段 (2 74bp) ,6例为阴性。定量标准曲线公式 :Y =- 2 83× 10 -5X2 +0 0 6 0 4 5X - 2 2 6 5 ,R2 =0 94 0 1,胎儿mRNA在孕妇外周血中的质量浓度均值为 2 0 79μg/L ,最大值 5 9 72 μg/L ,最小值 0 2 4 μg/L。不同孕期及不同性别胎儿mRNA含量统计学上差异无显著性意义。 结论 应用反转录聚合酶链反应 (RT PCR)方法可直接自孕妇外周血中扩增出胎儿ε/γ球蛋白基因片断 ,对孕妇全血中的胎儿mRNA进行定量分析 ,为探索胎儿mRNA含量变化与异常妊娠的关系奠定了基础。 展开更多
关键词 胎儿 孕妇外周血 RNA 不同性别 扩增 全血 孕期 含量 体外逆转 异常妊娠
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人胎肝CFU-S增殖刺激物Poly(A)^+mRNA在非洲爪蟾卵母细胞内的翻译
16
作者 魏启胜 吴祖泽 +1 位作者 曹菊荣 张学中 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 1990年第4期241-245,共5页
本文采用 SDS-氯仿-苯酚法提取人胎肝总 RNA,每克胎肝组织可得总 RNA870~1060μg。用 Oligo(dT)纤维素亲合层析法分离出 Poly(A)^+mRNA,其得量为40~80μg/g 胎肝组织。将人胎肝来源的 Poly(A)^+mRNA 注射到非洲爪蟾卵母细胞内,经体外1... 本文采用 SDS-氯仿-苯酚法提取人胎肝总 RNA,每克胎肝组织可得总 RNA870~1060μg。用 Oligo(dT)纤维素亲合层析法分离出 Poly(A)^+mRNA,其得量为40~80μg/g 胎肝组织。将人胎肝来源的 Poly(A)^+mRNA 注射到非洲爪蟾卵母细胞内,经体外19℃孵育48h 后,在细胞提取液中可以检出刺激小鼠 CFU-S 增殖的刺激物,这表明人胎肝来源的 Poly(A)^+mRNA 中含有编码 CFU-S 增殖刺激物的 mRNA,并能在非洲爪蟾卵母细胞内翻译表达为活性蛋白质。 展开更多
关键词 人胎肝 mrna CFU-S 刺激物
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基于mRNA的m6A修饰角度探讨恐伤肾致胎损机制的可行性 被引量:4
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作者 王启阳 潘明敏 杨丽萍 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期2173-2178,共6页
中医"恐伤肾致胎损"的经典理论和现代疾病的"胎源学说"都认为孕期恐应激对子代远近期发育均造成不良影响,但其机制仍是尚待突破的瓶颈。mRNA甲基化修饰尤其N6-甲基腺嘌呤(m6A)修饰的发现说明mRNA不仅是信息传递者,... 中医"恐伤肾致胎损"的经典理论和现代疾病的"胎源学说"都认为孕期恐应激对子代远近期发育均造成不良影响,但其机制仍是尚待突破的瓶颈。mRNA甲基化修饰尤其N6-甲基腺嘌呤(m6A)修饰的发现说明mRNA不仅是信息传递者,也是信息翻译的调控者,mRNA上的m6A修饰及其生物学效应为探索恐伤肾致胎损的机制提供了一条新的思路。研究发现,恐应激可以诱发m6A的异常修饰,而m6A的修饰水平与生长发育高度相关。鉴此,文章主要就不同种类的应激对m6A修饰的影响及异常修饰使子代产生畸形发育等国内外研究现状进行综述,以期为从mRNA的m6A修饰角度探讨恐伤肾致胎损机制提供借鉴。 展开更多
关键词 恐伤肾 N6-甲基腺嘌呤 mrna甲基化修饰 孕期应激 中医 胎损
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外周血肝癌标志物在肝癌诊断中的价值 被引量:16
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作者 张丹 李远 +1 位作者 徐泽强 许银银 《中华实用诊断与治疗杂志》 2011年第8期742-744,共3页
目的:探讨3种肝癌标志物甲胎蛋白(alpha fetal protein,AFP)mRNA,胰岛素样生长因子-Ⅱ(insulin-likegrowth factrorⅡ,IGF-Ⅱ)mRNA和转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)mRNA在肝癌诊断中的临床价值。方法:125例肝... 目的:探讨3种肝癌标志物甲胎蛋白(alpha fetal protein,AFP)mRNA,胰岛素样生长因子-Ⅱ(insulin-likegrowth factrorⅡ,IGF-Ⅱ)mRNA和转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)mRNA在肝癌诊断中的临床价值。方法:125例肝癌患者(肝癌组)、131例良性肝病患者(良性肝病组)、32例非肝脏肿瘤患者(肝外肿瘤组)及65名健康体检者(正常对照组),提取外周血中总RNA,经随机引物和反转录酶作用分别合成AFP,IGF-Ⅱ和TGF-β1的cDNA,再以巢式PCR分别扩增其cDNA片段,分析其在肝癌诊断与鉴别中的临床价值。结果:外周血中扩增出的AFP mRNA,IGF-ⅡmRNA和TGF-β1mRNA基因片段大小为分别为159,170,211 bp,与原设计一致。肝癌组外周血AFP mRNA,IGF-ⅡmRNA和TGF-β1mRNA基因片段阳性检出率明显高于良性肝病组、肝外肿瘤组和正常对照组(P<0.05)。结论:外周血AFP mRNA,IGF-ⅡmRNA和TGF-β1mRNA基因分析有助于肝癌的早期诊断、转移判断及术后复发的监测。 展开更多
关键词 肝癌 AFP mrna IGF-Ⅱ mrna TGF-Β1 mrna 诊断
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蒙古马(斑点)胎儿期黑白毛色区域皮肤组织相关基因表达分析 被引量:3
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作者 白东义 拉希玛 +9 位作者 图格琴 赵若阳 陶娜拉 韩海格 丁文淇 贾紫洁 刘慧莹 王文兴 黄博光 芒来 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期96-105,共10页
为确定相关候选基因在毛色产生过程中的差异,以及相互之间的关系,试图解析胎儿期蒙古马毛色形成的分子机制,为今后保护和开发利用蒙古马(斑点)奠定基础,本研究以蒙古马(斑点)胎儿为研究对象,首先对胎儿期蒙古马体躯白色和黑色区域皮肤... 为确定相关候选基因在毛色产生过程中的差异,以及相互之间的关系,试图解析胎儿期蒙古马毛色形成的分子机制,为今后保护和开发利用蒙古马(斑点)奠定基础,本研究以蒙古马(斑点)胎儿为研究对象,首先对胎儿期蒙古马体躯白色和黑色区域皮肤组织制作石蜡切片,进行组织学观察,其次对胎儿期蒙古马白色和黑色区域皮肤进行RNA-seq,构建mRNA表达谱,筛选相关差异表达基因,进行GO和KEGG功能富集分析。结果表明:1)通过组织学观察,黑色素在胎儿黑色皮肤组织表皮里沉积很明显,毛乳头、毛母质部位均有黑色素沉积。相反,白色皮肤组织中没有黑色素沉淀;2)RNA-seq筛选毛色产生差异的相关基因,共鉴定出660个基因,其表达量在黑白2个不同颜色皮肤组织中存在显著差异(P<0.05),其中197个基因在蒙古马胎儿黑色皮肤组织表达量较高,59个基因在蒙古马胎儿白色皮肤组织表达量较高。差异表达基因TYR、TYRP1、DCT、PAX3和DAPL1等富集到了黑色素生成通路。综上,胎儿时期蒙古马的毛色形成主要由黑色素形成相关基因决定,可为后期蒙古斑点马选育环节中对毛色的筛选提供科学理论依据。 展开更多
关键词 蒙古马(斑点) 胎儿 皮肤组织 差异表达mrna
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