Pax-8基因敲除小鼠心脏中Fgf-6基因表达的上调及其意义

目的探讨先天性心脏病相关基因转录因子Pax-8的下游基因以及Pax-8基因下调引起心脏形态改变的机制。方法分别提取Pax-8基因敲除小鼠纯合子（Pax-8 KO^-/-）和杂合子（Pax-8 KO^4/-）的心脏总RNA，利用含31802个小鼠基因的基因芯片检测Pax-8 KO^-/-和Pax-8 KO^-/-小鼠的基因表达水平，找出差异表达的基因，并经荧光实时定量PCR技术初步筛选出转录因子Pax-8的下游基因。结果基因芯片检测发现，Pax-8 KO^-/-小鼠较Pax-8 KO^＋／-小鼠有25个基因表达下调，另有17个基因表达上调，差异基因涉及细胞周期及信号转导的调节因子、直接参与代谢的酶以及核转录因子等。定量RT-PCR证实，Pax-8 KO^-/-小鼠Fgf-6基因的表达水平较Pax-8 KO^＋/-小鼠及野生型（Pax-8^＋/＋）小鼠分别上调1.13倍和1．67倍，差异均较显著（P〈0.01）。结论Fgf-6基因是转录因子Pax-8的下游基因，可能在心脏的发育过程中发挥着重要作用。

鸡FGF6基因生物学特性及其多态性与经济性状的关联分析

旨在探究鸡成纤维细胞生长因子6(fibroblast growth factor 6,FGF6)基因的生物学特性,挖掘FGF6基因单核苷酸多态性(SNP)位点并分析其与经济性状的相关性,为后续研究鸡FGF6基因对生长性状的影响提供参考。本研究对FGF6蛋白序列进行生物信息学分析;基于768只固始鸡-安卡鸡F_2资源群的GBS数据及相关经济性状表型数据对FGF6基因包含启动子2 kb区域SNP位点进行筛选,并进行连锁不平衡和关联分析,探究FGF6基因SNP和单倍型与鸡经济性状的相关性。生物信息学分析结果显示,鸡FGF6氨基酸序列与火鸡同源性为91.26%;系统进化分析表明,鸡FGF6与火鸡亲缘关系最近,其次是绿海龟,与斑马鱼遗传距离最远;保守性分析显示不同物种间FGF6保守性较高。鸡FGF6蛋白为亲水性蛋白、存在1个跨膜区,主要定位于细胞质;其二级、三级结构相符。鸡FGF6蛋白被22个磷酸化位点和1个N-糖基化位点修饰;与其受体家族FGFR1~4和EGF存在互作关系。鸡FGF6基因启动子区域筛选到6个SNPs位点,均位于1号内含子上;多态性分析显示6个SNPs位点存在高多态性,其中5个处于哈代-温伯格平衡,呈强连锁状态(D′=1,r^(2)=1)。关联分析结果显示,rs73399071位点与F_2资源群不同阶段体重(BW)、胫长(SL)、胫围(SG)、体斜长(BSL)等17个生长性状指标显著相关(P<0.05),与全净膛重(EW)、半净膛重(SEW)、屠体重(CW)、胸肌重(BMW)等10个屠体性状指标显著相关(P<0.05),与肉质性状的关联未达到显著水平(P>0.05),与高密度脂蛋白(HDL)和胆碱酯酶(ChE)显著相关(P<0.05),CC基因型个体的大部分性状表型均值高于GG基因型个体;单倍型组合分析显示不同阶段CCTTCCTTCC组合个体的体重均高于其他单倍型组合个体。本研究结果为进一步探究鸡FGF6基因的功能提供理论参考,筛选到FGF6基因存在5个与固始鸡-安卡鸡F_2资源群体重、体尺、屠体性状和血液生化指标显著关联的SNPs位点,为鸡育种提供候选的分子标记,为地方鸡标记辅助选择提供新的思路。

凝血酶和PAR-1受体对成骨细胞白介素-6和成纤维细胞生长因子-2表达的影响

目的探讨凝血酶对小鼠成骨细胞某些因子表达的调节作用。方法使用小鼠颅骨的成骨细胞,通过荧光定量PCR方法和人工合成的PAR-1或PAR-4特异性激活短肽了解受体介导的凝血酶对成骨细胞因子表达的影响。结果凝血酶不影响成骨细胞转化生长因子、血小板生长因子A、胰岛素样生长因子-Ⅰ和-Ⅱ的表达,凝血酶和PAR-1受体激活肽可以显著上调成骨细胞成纤维细胞生长因子-2(FGF-2)和白介素-6(IL-6)的表达,但对IL-6表达的调节作用,凝血酶远较PAR-1激活肽为强,而PAR-4特异性激活肽并不影响这两种因子的表达。结论凝血酶可以促进小鼠成骨细胞FGF-2和IL-6的表达,此作用可能是通过PAR-1和非PAR-1通路介导的,凝血酶对FGF-2表达的调节可能完全是由PAR-1介导的,而凝血酶对IL-6表达的影响部分是由PAR-1介导的,部分可能是由未知受体介导的。PAR-4并不参与介导凝血酶对FGF-2和IL-6表达的调节作用。

白细胞介素-1β促进人真皮成纤维细胞分泌促血管生成及炎症因子

目的探讨IL-1β对人真皮成纤维细胞(human dermal fibroblast,HDF)的细胞抑制率、促血管生成因子和炎症因子分泌的影响。方法 CCK8法检测不同浓度IL-1β对HDF的细胞抑制率,ELISA法检测3,10ng/m L IL-1β处理HDF24h后上清中血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、IL-6的表达。结果 0.3、1、3、10ng/m L IL-1β对HDF的抑制率分别为(1.22±0.78)%,(3.72±1.21)%,(9.10±2.60)%,(14.42±3.36)%。3、10ng/m L IL-1β作用于HDF 24h后,两组上清的VEGF、FGF水平较空白对照组均升高(FGF P<0.05,VEGF P<0.01),3,10ng/ml IL-1β两个浓度组间无统计学差异。3、10ng/m L IL-1β两组HDF上清中IL-6浓度较空白对照组均增加(P<0.05,P<0.001),且10ng/m L IL-1β组较3ng/m L组IL-6浓度更高,有统计学差异(P<0.001)。结论 IL-1β可促进HDF分泌VEGF、FGF和IL-6,提示IL-1β可能通过促进成纤维细胞分泌促血管生成和炎症因子,进而促进肿瘤生成、浸润和转移。

小剂量甲氨蝶呤对RA患者血浆TNFαIL-6水平影响的研究

目的 探讨小剂量甲氨蝶呤（ Ｍ Ｔ Ｘ） 对 Ｒ Ａ 患者血浆 Ｔ Ｎ Ｆα、 Ｉ Ｌ６ 水平的影响。方法 用放射免疫分析（ Ｒ Ｉ Ａ） 法研究了３０ 例 Ｒ Ａ 患者 Ｍ Ｔ Ｘ（１０ ｍｇ／ Ｗ） 治疗前后血浆 Ｔ Ｎ Ｆα、 Ｉ Ｌ６ 水平的变化。结果 Ｍ Ｔ Ｘ 治疗６ 周后血浆 Ｔ Ｎ Ｆα、 Ｉ Ｌ６ 水平明显降低，以后进一步降低（ Ｐ＜ ００１） 。结论 Ｍ Ｔ Ｘ 能有效地降低 Ｒ Ａ 患者血浆 Ｔ Ｎ Ｆα、 Ｉ Ｌ６ 水平。

荷丹胶囊联合瑞舒伐他汀治疗老年高脂血症的临床研究

目的探讨荷丹胶囊联合瑞舒伐他汀钙治疗老年高脂血症临床疗效。方法选取2015年6月—2018年6月在航天中心医院老年病门诊进行治疗的100例高脂血症患者,根据用药不同分为治疗组(50例)和对照组(50例)。对照组口服瑞舒伐他汀钙片,10 mg/次,1次/d;治疗组在对照组治疗基础上口服荷丹胶囊,4粒/次,3次/d。两组均连续治疗8周。观察两组的临床疗效,比较两组治疗前后血脂指标、血清学指标和氧化应激指标的变化情况。结果治疗后,对照组和治疗组的总有效率分别是82%、96%,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平均显著下降,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平均显著增高,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,治疗组TC、TG、LDL-C水平低于对照组,但HDL-C水平高于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组C反应蛋白(hs-CRP)、嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)、成纤维细胞生长因子21(FGF-21)、摄食抑制因子-1(NSF-1)、瘦素(LEP)、白细胞介素-6(IL-6)、总氧化态(TOS)水平均较治疗前显著降低,而总抗氧化态(TAS)水平、对氧磷酶-1(PON1)表达均显著增高,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,治疗组hs-CRP、ECP、FGF-21、NSF-1、LEP、IL-6、TOS水平明显低于对照组,而TAS、PON1水平明显高于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论荷丹胶囊联合瑞舒伐他汀钙治疗老年高脂血症具有较好的临床疗效,可显著改善患者的血脂指标,降低血清炎性因子水平,改善机体氧化应激状态,具有较好的临床推广应用价值。