3种可注射性支架体内构建组织工程软骨的比较研究

目的比较以纤维蛋白封闭剂(FS)、P luron ic-F 127(PF)、透明质酸(HA)3种可注射性支架体内构建组织工程软骨的效果。方法常规分离、消化、体外单层培养新生兔软骨细胞,分别将软骨细胞与3种支架材料混合接种于裸鼠皮下,并于第10周取材通过大体观察,湿重测定,GAG含量测定和组织化学检查来判断体内形成软骨的能力。结果三组均可形成软骨样组织块,其中FS组体积最大,质地较硬,表面光滑,软骨细胞位于成熟的陷窝中,阿尔新兰及Ⅱ型胶原免疫组化染色强阳性;PF组体积中等,质地柔韧,陷窝清楚,可以检测到阳性的阿尔新兰及Ⅱ型胶原表达。HA组只形成很小的组织块,硬度较差,含有的细胞数和分泌的基质最少,三组的GAG含量分别为(8.8±0.4)m g/g,(6.8±0.3)m g/g,(4.2±0.3)m g/g,各组间差异具有显著性(P<0.05,n=3)。结论3种可注射性支架中,FS成软骨作用最强,PF较好、HA组最差,FS和PF可以用于组织工程软骨的构建。

纤维蛋白封闭剂复合人胚关节软骨细胞体内构建可注射性软骨

目的：研究以纤维蛋白封闭剂（FS）为载体，复合人胚关节软骨细胞，体内构建可注射性组织工程软骨的可行性。方法：常规分离消化，体外单层培养胎儿关节软骨细胞，观察软骨细胞的生物学特性。分别将1×10^7、2×10^7、3×10^7第4代软骨细胞与FS混合接种于裸鼠皮下，并于第10周取材判断体内形成软骨的能力。结果：3～4代软骨细胞保持了很高的增殖和分泌基质的能力。软骨细胞与FS的复合物体内接种后各组均可形成软骨样组织块，其湿重、GAG含量随着接种细胞数量的增多而增高，各组之间差异具有显著性（P〈0．05）。3×10^7细胞组GAG含量与正常人胚关节软骨没有差异（P〉0．05）。组织切片显示软骨细胞位于类似正常软骨组织的陷窝中，阿尔新蓝染色及Ⅱ型胶原表达阳性，细胞内富含高尔基体、粗面内质网及大量分泌泡。结论：FS和人胚关节软骨细胞可以作为理想的支架材料和种子细胞应用于可注射软骨组织的构建。