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Optimization of Douchi Fibrinolytic Enzyme Production by Statistical Experimental Methods 被引量:4
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作者 张旭 运珞珈 +3 位作者 彭良斌 鲁翌 马鲲鹏 唐非 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2013年第1期153-158,共6页
Thrombus disease, one of the common cardiovascular diseases, has attracted worldwide at- tention for its rising mortality and morbidity. Due to the distinct shortages of current fibrinolytic drugs, new fibrinolytic ag... Thrombus disease, one of the common cardiovascular diseases, has attracted worldwide at- tention for its rising mortality and morbidity. Due to the distinct shortages of current fibrinolytic drugs, new fibrinolytic agents warrant investigation. In this study, 8 fibrinolytic enzyme-producing strains were isolated from Douchi--a traditional Chinese food, and strain XY-1 which produced the largest amount of the enzyme was chosen for the following experiments. The enzyme produced by strain XY-1 was named Douchi fibrinolytic enzyme (DFE). We optimized the liquid culture medium of strain XY-1 for enzyme production using Plackett-Burman and Box-Behnken design. The predicted maximal DFE yield was 19.78 FU/mL with 11.4 g/L peptone, 0.5 g/L magnesium sulfate and 1 g/L sodium chloride. How- ever, we acquired maximal production of 21.33 FU/mL in actual experiments, equal to 107.84% of the theoretical value, and the yield had been increased by 79.55% as compared to the yield of un-optimized culture. It was demonstrated that the combined use of Plackett-Burman design and response surface methodology in fermentation optimization can effectively and rapidly increase DFE production. 展开更多
关键词 douchi fibrinolytic enzyme Plackett-Burman design response surface methodology me- dium optimization
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Screening and Preservation of Douchi Fibrinolytic Enzyme Producing Strain
2
作者 ZHANG Li-mei 《Chinese Food Science》 2012年第1期25-26,36,共3页
[Objective] To isolate and preserve a high-activity Douchi fibrinolytic enzyme producing strain from Douchi products.[Method] The Douchi fibrinolytic enzyme producing strain was screened on the selected medium prepare... [Objective] To isolate and preserve a high-activity Douchi fibrinolytic enzyme producing strain from Douchi products.[Method] The Douchi fibrinolytic enzyme producing strain was screened on the selected medium prepared with self-made pork blood powder,the strain with the highest activity was screened out according to the size of hydrolysis cycle,and then preserved in LB medium.[Result] A Douchi fibrinolytic enzyme producing strain with high thrombolytic activity was successfully screened out from the Douchi produced in Hunan,Guangdong and Jiangxi Provinces.[Conclusion] The study lays foundation for the development of new-type thrombolytic drugs. 展开更多
关键词 豆豉纤溶酶 高产菌株 筛选 保存 产生菌 粉末制备 溶栓活性 溶栓药物
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紫外线诱变选育高产豆豉纤溶酶菌株及其产酶条件优化
3
作者 张文勇 张恒慧 王晓丽 《中国酿造》 CAS 北大核心 2024年第3期177-181,共5页
该研究以分离自豆豉样品中产豆豉纤溶酶的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)DC-1为出发菌株,采用紫外线诱变选育高产豆豉纤溶酶且稳定遗传的菌株,并以豆豉纤溶酶活力为评价指标,通过单因素试验及正交试验对其发酵条件进行优化。结果表明... 该研究以分离自豆豉样品中产豆豉纤溶酶的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)DC-1为出发菌株,采用紫外线诱变选育高产豆豉纤溶酶且稳定遗传的菌株,并以豆豉纤溶酶活力为评价指标,通过单因素试验及正交试验对其发酵条件进行优化。结果表明,筛选出一株高产豆豉纤溶酶活力且稳定遗传的诱变菌株DC-V5,其最优发酵条件为:接种量3%、装液量70 mL/250 mL、发酵温度34℃、初始pH 6.5。在此优化发酵条件下,诱变菌株DC-V5产豆豉纤溶酶活力最高达到(451.26±11.09)IU/mL,是优化前出发菌株DC-1的1.74倍。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 豆豉纤溶酶 紫外线诱变 产酶条件优化
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Discovery and Content Variation Analysis of Fibrinolytic Enzyme in Semen Sojae Praeparatum Fermentation 被引量:7
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作者 WENG Meizhi DENG Xiongwei +2 位作者 CHEN Qingfeng WANG Liyuan XIE Xiaomei 《Wuhan University Journal of Natural Sciences》 CAS CSCD 2020年第1期87-92,共6页
A strong fibrinolytic activity was demonstrated in the Semen Sojae Praeparatum(SSP), which is a famous traditional Chinese medicine. To study the activities and dynamic changes of fibrinolytic enzyme, standard fibrin ... A strong fibrinolytic activity was demonstrated in the Semen Sojae Praeparatum(SSP), which is a famous traditional Chinese medicine. To study the activities and dynamic changes of fibrinolytic enzyme, standard fibrin plate was used to determine the fibrinolytic activity. For the first time fibrinolytic enzyme was found during the fermentation of SSP and the fibrinolytic activities of samples were shown to increase significantly over time. In the "yellow cladding" stage, the fibrinolytic activity was 619.75 IU/g. On day 6, 12 and 15 of the "secondary fermentation" stage, the fibrinolytic activity was 711.49 IU/g, 866.67 IU/g, 1 022.31 IU/g, respectively. The results indicate that fibrinolytic enzyme was generated during the fermentation of SSP and it displayed increasing activity which peaked at the "secondary fermentation" stage. The fibrinolytic enzyme was found to not only degrades fibrin directly, but also activate plasminogen to do so. 展开更多
关键词 SEMEN Sojae Praeparatum fibrinolytic enzyme CARDIOVASCULAR diseases THROMBOLYTIC effect functional foodS
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鸡腿菇产纤溶酶液体发酵体系优化
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作者 王今雨 刘晓兰 +1 位作者 景言 郑喜群 《中国酿造》 CAS 北大核心 2023年第11期189-196,共8页
该研究采用液态发酵法发酵鸡腿菇,鸡腿菇纤溶酶活力为评价指标,通过单因素试验、Plackett-Burman试验及Box-Behnken试验对其培养基组成和培养条件进行优化。结果表明,最佳培养基的组成为果糖2.9%,豆饼粉3.6%,KH2PO_(4)0.25%,MgSO_(4)0.2... 该研究采用液态发酵法发酵鸡腿菇,鸡腿菇纤溶酶活力为评价指标,通过单因素试验、Plackett-Burman试验及Box-Behnken试验对其培养基组成和培养条件进行优化。结果表明,最佳培养基的组成为果糖2.9%,豆饼粉3.6%,KH2PO_(4)0.25%,MgSO_(4)0.2%。最佳培养条件为装液量50 mL/250 mL,接种量10%,发酵温度24℃,发酵时间6 d,摇床转速160 r/min。在此优化培养基及培养条件下,纤溶酶活力为136.89 U/mL,比优化前提高了4.28倍。 展开更多
关键词 鸡腿菇 纤溶酶 液体发酵 培养基 培养条件 响应面优化
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胞外纤溶酶产生菌的筛选及其产酶条件研究 被引量:54
6
作者 董明盛 江晓 +1 位作者 刘诚 江汉湖 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期23-26,共4页
从豆豉、酱豆和纳豆样品中分离筛选到一株具强力纤溶活性的细菌 ,编号为NK—5,经鉴定为芽孢杆菌属枯草杆菌群细菌。该菌在固态基质及液体培养基中均产生大量胞外纤溶酶。摇瓶发酵试验表明 ,其最适产酶碳源和氮源分别为蔗糖和蛋白胨。通... 从豆豉、酱豆和纳豆样品中分离筛选到一株具强力纤溶活性的细菌 ,编号为NK—5,经鉴定为芽孢杆菌属枯草杆菌群细菌。该菌在固态基质及液体培养基中均产生大量胞外纤溶酶。摇瓶发酵试验表明 ,其最适产酶碳源和氮源分别为蔗糖和蛋白胨。通过正交试验确定最适产酶培养基为 :豆粕粉 2 0 %、麸皮 0 5%、玉米淀粉 0 5%、KH2 PO4 0 2 %、K2 HPO40 4 %、MgSO4 0 0 5%、CaCl2 0 0 2 % ,pH7 0。在优化条件下 ,发酵液酶活达 6 83 展开更多
关键词 胞外纤溶酶 溶纤枯草菌 发酵制品 产酶特性 溶栓酶
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溶栓纳豆菌的筛选鉴定及其发酵特性研究 被引量:24
7
作者 董明盛 江晓 +1 位作者 江汉湖 陈伯祥 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期95-98,共4页
为开发具有特定生理活性的新型纳豆保健品 ,从酱豆、豆豉及纳豆中分离和筛选到 5株有明显纤溶活性的芽孢杆菌 ,其中NK 5菌株活性最高 ,被用作溶栓纳豆生产菌。根据形态、生理生化特征以及DNA中G +G含量 ,鉴定NK 5菌株为枯草杆菌 (Bacill... 为开发具有特定生理活性的新型纳豆保健品 ,从酱豆、豆豉及纳豆中分离和筛选到 5株有明显纤溶活性的芽孢杆菌 ,其中NK 5菌株活性最高 ,被用作溶栓纳豆生产菌。根据形态、生理生化特征以及DNA中G +G含量 ,鉴定NK 5菌株为枯草杆菌 (Bacillussubtilis)。该菌株的重要特点是产生强力纤溶酶和大量胞外粘质 ,后者经鉴定为γ 多聚谷氨酸。用NK 5菌株试制的纳豆既有日本纳豆典型的感官特征和营养组成 ,又有很高的纤溶活性。该酶在 4℃下贮存两个月后仍能保持 70 展开更多
关键词 纤溶酶 纳豆 枯草杆菌 发酵条件 溶栓活性 纳豆激酶 心脑血管疾病
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豆豉溶栓酶基因在毕赤酵母中的表达及其产物的纯化 被引量:18
8
作者 张仁怀 王海燕 +2 位作者 谈宁馨 张风豪 张义正 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期623-626,共4页
将含有和不含前肽的豆豉溶栓酶编码序列在毕赤酵母中分别进行表达研究,发现在含有前肽的豆豉溶栓酶基因转化的毕赤酵母工程菌用甲醇诱导时,其培养液中可检测到较强的溶栓酶活性;而在不含前肽的豆豉溶栓酶基因转化的毕赤酵母菌用甲醇诱导... 将含有和不含前肽的豆豉溶栓酶编码序列在毕赤酵母中分别进行表达研究,发现在含有前肽的豆豉溶栓酶基因转化的毕赤酵母工程菌用甲醇诱导时,其培养液中可检测到较强的溶栓酶活性;而在不含前肽的豆豉溶栓酶基因转化的毕赤酵母菌用甲醇诱导时,培养液中未检测到溶栓酶活性.对毕赤酵母表达和分泌的豆豉溶栓酶进行了分离纯化,并对其纯化产物进行溶栓酶活性、SDS-PAGE电泳、抑制剂作用及免疫印迹分析.结果表明,分泌到培养液中的豆豉溶栓酶已经过剪切加工,其前肽已被切除,重组与天然的豆豉溶栓酶具有相同的溶栓酶活性,其所测定的各理化指标均一致.本研究实现了豆豉溶栓酶在毕赤酵母菌中成功表达,并首次直接证明了前肽对豆豉溶栓酶在毕赤酵母中分泌表达是必须的. 展开更多
关键词 豆豉溶栓酶 基因表达 毕赤酵母 前肽 纯化
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固态发酵大豆生产豆豉纤溶酶的研究 被引量:12
9
作者 齐海萍 钱和 +1 位作者 王璋 许时婴 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期52-55,共4页
以大豆为底物进行固态发酵生产纤溶酶 ,并对其固态发酵工艺进行了探讨。得出以下结论 :最佳发酵时间 2 8h ,添加麦芽糖 2 %、NaCl 0 .1%、Ca2 +0 .2mg/kg、Mg2 +0 .3mg/kg最高酶活力可达到 12 5 6IU/g。豆豉提取物的最适存放温度为 37... 以大豆为底物进行固态发酵生产纤溶酶 ,并对其固态发酵工艺进行了探讨。得出以下结论 :最佳发酵时间 2 8h ,添加麦芽糖 2 %、NaCl 0 .1%、Ca2 +0 .2mg/kg、Mg2 +0 .3mg/kg最高酶活力可达到 12 5 6IU/g。豆豉提取物的最适存放温度为 37℃以下 ,最适pH为 8,Mn2 +、Ca2 +、Mg2 +对该酶活力有明显的激活作用 ,添加明胶对纤溶酶活力起稳定作用。PCMB、PMSF、胰蛋白酶对此酶活性抑制率几乎达 10 0 %。EDTA、β 巯基乙醇对此酶活性影响不大。 展开更多
关键词 大豆 底物 固态发酵生产 纤溶酶 豆豉 酶活性
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一种产生纤溶酶的链霉菌C-3662的鉴定及发酵研究 被引量:16
10
作者 武临专 陈昉 +2 位作者 王以光 黄英 刘志恒 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期600-606,共7页
对一株从土壤中分离的纤溶酶产生菌链霉菌C - 3 6 6 2的形态、培养、生理生化和化学分类特征进行了研究 ,发现其与泛温链霉菌 (StreptomyceseurythermusCorbazetal.1 96 8)的特征很相符。通过对链霉菌C - 3 6 6 2的 1 6SrDNA序列进行测... 对一株从土壤中分离的纤溶酶产生菌链霉菌C - 3 6 6 2的形态、培养、生理生化和化学分类特征进行了研究 ,发现其与泛温链霉菌 (StreptomyceseurythermusCorbazetal.1 96 8)的特征很相符。通过对链霉菌C - 3 6 6 2的 1 6SrDNA序列进行测定与比对 ,发现它与泛温链霉菌的1 6SrDNA序列也有高达 98 1 9%的同源性。根据多相分类原则 ,认为链霉菌C - 3 6 6 2属于泛温链霉菌。对链霉菌C - 3 6 6 2的发酵培养基组成等的研究表明 ,合适的发酵培养基中应含有氮源黄豆饼粉 2 0 %、碳源淀粉 1 0 %和葡萄糖 2 5 %以及少量的无机盐类如硫酸镁。链霉菌C 3 6 6 2的发酵过程研究表明 。 展开更多
关键词 纤溶酶 链霉菌C-3662 鉴定 发酵
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豆豉溶栓酶产生菌的筛选及其酶学性质的初步研究 被引量:62
11
作者 彭勇 张义正 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2002年第2期30-34,共5页
利用纤维蛋白平板筛选、纤溶活性测定、SDS PAGE分析和体外溶栓实验等相结合的方法 ,成功地从豆豉中筛选到一株纤溶活性高达 5 2 0U/mL和具有良好体外溶栓效果的细菌菌株 (编号为DC 4 ) ,经鉴定为解淀粉芽孢杆菌 (Bacillusamyloliquefac... 利用纤维蛋白平板筛选、纤溶活性测定、SDS PAGE分析和体外溶栓实验等相结合的方法 ,成功地从豆豉中筛选到一株纤溶活性高达 5 2 0U/mL和具有良好体外溶栓效果的细菌菌株 (编号为DC 4 ) ,经鉴定为解淀粉芽孢杆菌 (Bacillusamyloliquefaciens)。SDS PAGE和纤维蛋白自显影表明该酶的分子量为 2 8kD ,其最适反应温度和 pH值分别为 4 2℃和 8.0 ,在 pH6~ 10较稳定。PMSF和盐酸苯甲醚能抑制其纤溶活性 ,而EDTA和EGTA不能抑制 ,表明该酶是一种丝氨酸蛋白酶。它溶解纤维蛋白的方式是直接溶解纤维蛋白 ,而不激活纤溶酶原 ,并且不水解血细胞。 展开更多
关键词 筛选 细菌菌体 豆豉 解淀粉芽孢杆菌 溶栓酶 酶学性质 血栓栓塞性疾病 溶栓药物
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豆豉溶栓酶工程菌的发酵条件及重组溶栓酶的分离纯化 被引量:12
12
作者 肖璐 张仁怀 张义正 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期66-69,73,共5页
对豆豉溶栓酶工程菌株WB DFE5进行了摇瓶发酵条件的研究 ,确定了发酵的优化条件为 :可溶性淀粉 2 % ,酪蛋白 2 % ,大豆蛋白胨 0 5 % ,酵母粉 0 15 % ,K2 HPO40 2 5 % ,KH2 PO40 0 5 % ,CaCl2 0 0 2 % ,MgSO40 0 5 % ,pH7 0。通过... 对豆豉溶栓酶工程菌株WB DFE5进行了摇瓶发酵条件的研究 ,确定了发酵的优化条件为 :可溶性淀粉 2 % ,酪蛋白 2 % ,大豆蛋白胨 0 5 % ,酵母粉 0 15 % ,K2 HPO40 2 5 % ,KH2 PO40 0 5 % ,CaCl2 0 0 2 % ,MgSO40 0 5 % ,pH7 0。通过硫酸铵分段盐析、离子交换和凝胶过滤 ,从 1L工程菌株WB DFE5的发酵液中分离纯化出 12 5mg重组豆豉溶栓酶 ,酶的比活为 5 918 7IU/mg。 展开更多
关键词 豆豉 溶栓酶 大豆蛋白 可溶性淀粉 分离纯化 酪蛋白 发酵条件 酶工程 过硫酸铵 摇瓶发酵
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豆豉纤溶酶产生菌发酵条件研究 被引量:18
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作者 吴思方 向梅 +1 位作者 陶琳 孟凡涛 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期332-335,共4页
对从豆豉中筛选到的一株纤溶酶产生菌——枯草芽孢杆菌HGD107进行发酵产酶条件研究。在最适发酵条件下,该菌株产豆豉纤溶酶酶活达到尿激酶3643u/ml发酵液。
关键词 豆豉 纤溶酶 发酵条件
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纤溶酶产生菌的诱变育种及其发酵条件的研究 被引量:10
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作者 彭勇 杨晓娟 +2 位作者 胡承 王忠彦 胡永松 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2000年第S1期175-178,共4页
对纤溶酶产生菌B .L .PY进行了紫外线与亚硝基胍复合诱变 ,选育到突变株B .L .PYUM ,其纤溶酶产量较出发菌株提高了 2 7.2 % .通过正交分析法进一步优化了该突变株的发酵条件为 (% ) :食用蔗糖 3,玉米粉 1.1,酵母膏 0 .2 ,MgSO4 ·7... 对纤溶酶产生菌B .L .PY进行了紫外线与亚硝基胍复合诱变 ,选育到突变株B .L .PYUM ,其纤溶酶产量较出发菌株提高了 2 7.2 % .通过正交分析法进一步优化了该突变株的发酵条件为 (% ) :食用蔗糖 3,玉米粉 1.1,酵母膏 0 .2 ,MgSO4 ·7H2 O 0 .0 9,CaCl2 0 .0 2 ,K2 HPO4 0 .1,pH7.2 ,通气量为 1∶0 .5~ 1∶1,转速为 4 50r/min ,37℃下发酵 4d ,其纤溶酶产量为 1140U/mL ,较出发菌株提高 4 0 .7% . 展开更多
关键词 地衣芽孢杆菌 纤溶酶 诱变 发酵条件
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微生物发酵法生产纤溶酶的研究进展 被引量:7
15
作者 艾瑞波 刘晓兰 +4 位作者 邓永平 李琰 何宁 王晓杰 袁欣 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2013年第2期227-230,共4页
血栓类疾病严重威胁人类生命和健康,溶栓疗法是目前治疗该类疾病安全有效的手段,传统的溶栓药物疗效显著,但是还存在一定缺陷。目前,利用微生物发酵产生的纤溶酶制备溶栓药物已经成为研究热点。文章对不同微生物来源的纤溶酶的发酵、分... 血栓类疾病严重威胁人类生命和健康,溶栓疗法是目前治疗该类疾病安全有效的手段,传统的溶栓药物疗效显著,但是还存在一定缺陷。目前,利用微生物发酵产生的纤溶酶制备溶栓药物已经成为研究热点。文章对不同微生物来源的纤溶酶的发酵、分离纯化及性质等方面的资料进行总结,并对纤溶酶研发领域存在的问题进行探讨。 展开更多
关键词 微生物 发酵 纤溶酶 纯化 性质
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蛹虫草产纤溶酶活性菌株的筛选及产酶条件的研究 被引量:8
16
作者 白伟芳 郭丽琼 +2 位作者 林俊芳 康林芝 曾厚儒 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2013年第5期1014-1018,共5页
蛹虫草是著名的药用真菌,具有扩张气管、镇静、抗心律失常、降血压、抗病原微生物、抗恶性肿瘤等多种药理活性。本研究采用蛋白纤维平板法筛选出具有溶纤活性的蛹虫草菌株,通过综合分析,选择产纤溶酶比活性最高的菌株,并对该菌株的产酶... 蛹虫草是著名的药用真菌,具有扩张气管、镇静、抗心律失常、降血压、抗病原微生物、抗恶性肿瘤等多种药理活性。本研究采用蛋白纤维平板法筛选出具有溶纤活性的蛹虫草菌株,通过综合分析,选择产纤溶酶比活性最高的菌株,并对该菌株的产酶条件进行了优化。研究结果显示:菌株产酶最佳营养条件的组分为2%葡萄糖,2%蛋白胨,碳氮比为1/1;最佳环境条件为温度25℃,pH为6,装液量60 mL,发酵周期9 d,接种量2%,转速150 r/min。在此条件下,发酵液纤溶酶活力可达到111.85 U/mL。 展开更多
关键词 蛹虫草 纤溶酶 产酶条件
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解淀粉芽孢杆菌DC-4豆豉溶栓酶成熟肽编码序列的克隆及表达 被引量:25
17
作者 彭勇 张义正 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 2002年第3期285-289,共5页
利用PCR方法从解淀粉芽孢杆菌DC 4总DNA中扩增出豆豉溶栓酶 (DFE)成熟肽编码区片段 .测序结果表明 :DFE成熟肽编码区长 82 5bp,编码 2 75个氨基酸残基 ,分子量为 2 7.7× 10 3 ,推导的N’ -端氨基酸序列与豆豉溶栓酶N’ -端氨基酸... 利用PCR方法从解淀粉芽孢杆菌DC 4总DNA中扩增出豆豉溶栓酶 (DFE)成熟肽编码区片段 .测序结果表明 :DFE成熟肽编码区长 82 5bp,编码 2 75个氨基酸残基 ,分子量为 2 7.7× 10 3 ,推导的N’ -端氨基酸序列与豆豉溶栓酶N’ -端氨基酸测序结果完全一致 ,说明克隆到的基因确实是豆豉溶栓酶基因 .同源性分析表明 ,DFE成熟肽编码区的核苷酸和氨基酸序列与日本纳豆激酶的同源性分别为 80 .0 %和 86 .5 % ,这提示豆豉溶栓酶可能是一种新型的溶栓酶 .将表达质粒pET Nde转化E .coliBL2 1(DE3)中 ,IPTG可诱导表达大量的DFE融合蛋白 ,占菌体可溶性蛋白的 4 0 % ,主要以包涵体的形式存在 .图 3表 1参 展开更多
关键词 解淀粉芽孢杆菌DC-4 豆鼓 溶栓酶 成熟肽 编码序列 克隆 表达
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豆豉纤溶酶产生菌的筛选及菌种鉴定 被引量:16
18
作者 向梅 吴思方 +1 位作者 王伟平 杨荆树 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2005年第1期21-24,共4页
在收集的全国 2 1个豆豉产品中分离到 36 9株革兰氏阳性芽孢杆菌 ,对其进行产纤溶酶活性筛选 ,得到 1株高产纤溶酶菌株HGD10 7。对菌株HGD10 7进行形态、生理、生化鉴定 ,初步鉴定为枯草芽孢杆菌。
关键词 枯草杆菌 豆豉 纤溶酶 筛选 菌种鉴定
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嗜麦芽寡养单胞菌(DR-929)纤溶酶的发酵条件优化及其分离纯化 被引量:6
19
作者 王高学 梁朝军 +2 位作者 黄海洪 王建福 原居林 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期47-52,共6页
研究了嗜麦芽寡养单胞菌(DR-929)纤溶酶的液体发酵条件及其分离纯化。最佳发酵条件为:可溶性淀粉2.0%,黄豆粉1.0%,酵母膏0.5%,NaCI1.0%,CaCl20.02%,MgS040.05%,种龄36h,发酵时间4d,初始pH8.0或9.0,温度25℃... 研究了嗜麦芽寡养单胞菌(DR-929)纤溶酶的液体发酵条件及其分离纯化。最佳发酵条件为:可溶性淀粉2.0%,黄豆粉1.0%,酵母膏0.5%,NaCI1.0%,CaCl20.02%,MgS040.05%,种龄36h,发酵时间4d,初始pH8.0或9.0,温度25℃,装样量30ml,接种量5%或6%。采用发酵液离心除菌,25%-70%饱和度的硫酸铵沉淀,Phenyl FF(highsub)疏水层析,Q—SepharoseFF离子交换层析,Superdex 75凝胶过滤层析对活性成分分离纯化。用SDS—PAGE电泳对纯化效果进行检验,结果表明在SDS—PAGE中得到单一条带,分子量28.3kDa。最终纯化倍数和酶活回收率分别为271.5和24.5%。 展开更多
关键词 嗜麦芽寡养单胞菌 纤溶酶 发酵条件 分离纯化
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蛹虫草纤溶酶酶学性质的初步研究 被引量:5
20
作者 宿红艳 刘金星 +2 位作者 王磊 冯二梅 程显好 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第21期221-224,共4页
采用盐析和离子交换层析法制备蛹虫草纤溶酶粗酶样品,并对其酶学性质进行初步研究。结果显示:该酶最适pH值和作用温度分别为8.0和37℃;在pH6~10.6范围内较稳定,但对高温较为敏感;EDTA对蛹虫草纤溶酶具有抑制作用,说明该酶是一种基质金... 采用盐析和离子交换层析法制备蛹虫草纤溶酶粗酶样品,并对其酶学性质进行初步研究。结果显示:该酶最适pH值和作用温度分别为8.0和37℃;在pH6~10.6范围内较稳定,但对高温较为敏感;EDTA对蛹虫草纤溶酶具有抑制作用,说明该酶是一种基质金属蛋白酶;金属离子Ca2+、Fe2+在低浓度(0.01mmol/L)时对此酶有促进作用,但高浓度时有抑制作用,而NH4+对酶活性影响不大。 展开更多
关键词 蛹虫草 发酵 纤溶酶 酶学性质
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