豆豉纤溶酶的纯化及其性质研究

由发酵大豆 (豆豉 )分离纯化一种活性强的纤溶酶 ,采用硫酸铵盐析 ,SephadexG 10 0和SephacrylS 2 0 0色谱纯化的纤溶酶 ,在SDS PAGE上呈一条蛋白带 ,Mr310 0 0 ,等电点 8 6± 0 2。纯化倍数 44倍 ,纯酶比活 310 2 0UK/mg ,活性回收率 6 8%。由于该酶具有较强的催化纤维蛋白原溶解的作用 。

豆豉纤溶酶的分离纯化及部分酶学性质研究

目的从豆豉中分离出具有强纤溶活性的菌株,从该菌株的发酵液中纯化出纤溶酶并对此纤溶酶的部分酶学性质进行研究。方法利用硫酸铵盐析、DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换色谱和Sephadex G-75凝胶过滤色谱等方法进行纯化;利用N-末端氨基酸序列测定及基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对此酶进行鉴定。结果从发酵液中获得了纤溶酶单一组分,表观相对分子质量为30×103。该纤溶酶在50℃以下和pH7.0～9.0之间保持稳定,最适温度为35℃;最适pH为8.6。N-末端氨基酸序列及飞行时间质谱测定结果都表明该酶与纳豆激酶氨基酸序列有着极高的相似性。结论获得了纤溶酶单一组分,为纤溶酶发酵产品的大规模纯化和进一步研制开发新的溶栓药物提供重要理论依据。