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Synovial mesenchymal stem cells in vivo:Potential key players for joint regeneration
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作者 Elena Jones Dennis McGonagle 《World Journal of Rheumatology》 2011年第1期4-11,共8页
Unlike bone marrow(BM)mesenchymal stem cells(MSCs),whose in vivo identity has been actively explored in recent years,the biology of MSCs in the synovium remains poorly understood.Synovial MSCs may be of great importan... Unlike bone marrow(BM)mesenchymal stem cells(MSCs),whose in vivo identity has been actively explored in recent years,the biology of MSCs in the synovium remains poorly understood.Synovial MSCs may be of great importance to rheumatology and orthopedics because of the direct proximity and accessibility of the synovium to cartilage,ligament,and meniscus.Their excellent chondrogenic capabilities and suggested transit through the synovial fluid,giving unhindered access to the joint surface,further support a pivotal role for synovial MSCs in homeostatic joint repair.This review highlights several unresolved issues pertaining to synovial MSC isolation,topography,and their relationship with pericytes,synovial fibroblasts,and synovial fluid MSCs.Critically reviewing published data on synovial MSCs,we also draw from our experience of exploring the in vivo biology of MSCs in the BM to highlight key differences.Extending our knowledge of synovial MSCs in vivo could lead to novel therapeutic strategies for arthritic diseases. 展开更多
关键词 MESENCHYMAL stem cells synoviUM fibroblastS synovial fluid ARTHRITIS
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新风胶囊通过结合Wnt5a经Wnt/β-catenin信号通路抑制类风湿性关节炎
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作者 黄玉蓉 彭艳慧 +2 位作者 王冰 缪成贵 王校 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1134-1145,共12页
目的:本研究将探讨Wnt5a是否可以作为类风湿性关节炎(RA)潜在的诊断和治疗靶点,新风胶囊(XFC)如何通过Wnt5a/β-catenin信号通路改善RA。方法:在体内Adjuvant arthritis(AA)大鼠模型中采用ELISA和RT-qPCR检测炎症因子和病理基因研究XFC... 目的:本研究将探讨Wnt5a是否可以作为类风湿性关节炎(RA)潜在的诊断和治疗靶点,新风胶囊(XFC)如何通过Wnt5a/β-catenin信号通路改善RA。方法:在体内Adjuvant arthritis(AA)大鼠模型中采用ELISA和RT-qPCR检测炎症因子和病理基因研究XFC对AA大鼠疗效,RT-qPCR检测验证XFC调控通过网络药理学预测的核心基因和关键通路。在体外原代AA成纤维样滑膜细胞(FLS)中采用RT-qPCR、Western blot和免疫荧光等方法研究XFC对Wnt/β-catenin通路的调节机制。结果:XFC显著下调AA大鼠的关节炎评分和足爪肿胀,抑制AA大鼠关节炎症。XFC降低AA大鼠外周血中炎症因子TNF-α和IL-1水平,抑制AA大鼠关节滑膜和AA FLS中病理基因MMP3和fibronectin水平。网络药理学预测出Wnt通路与XFC治疗RA高度相关。细胞水平上,含XFC血清抑制Wnt通路相关基因β-catenin、CCND1和c-Myc的表达。分子对接结果显示XFC关键成分与Wnt5a的结合能力强,在AA FLS中Wnt5a过表达(Wnt5a-ove)干扰了XFC的作用。结论:Wnt5a在AA FLS和RA FLS中表达明显升高,XFC通过与Wn5a结合,抑制Wnt/β-catenin信号通路活化改善RA,为XFC改善RA提供新的治疗机制。 展开更多
关键词 类风湿性关节炎 成纤维样滑膜细胞 新风胶囊 WNT5A WNT/Β-CATENIN信号通路
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环状RNA_0032131靶向微小RNA-145-5p调控类风湿关节炎滑膜成纤维细胞的增殖、迁移和侵袭
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作者 陶蕊 韩文朝 +1 位作者 丁天祥 范重山 《实用临床医药杂志》 CAS 2024年第11期53-57,62,共6页
目的探讨环状RNA_003213(hsa_circ_003213)靶向微小RNA-145-5p(miR-145-5p)对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RA-FLSs)增殖、迁移和侵袭的影响。方法检测RA患者和健康体检者外周血、RA-FLSs、人正常滑膜成纤维细胞中hsa_circ_0032131和miR-... 目的探讨环状RNA_003213(hsa_circ_003213)靶向微小RNA-145-5p(miR-145-5p)对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RA-FLSs)增殖、迁移和侵袭的影响。方法检测RA患者和健康体检者外周血、RA-FLSs、人正常滑膜成纤维细胞中hsa_circ_0032131和miR-145-5p的水平。将RA-FLSs分为对照(NC)组、si-NC组、si-hsa_circ_0032131组、miR-NC组、miR-145-5p组、anti-miR-NC+si-hsa_circ_0032131组、anti-miR-145-5p+si-hsa_circ_0032131组、pcDNA组、pcDNA-hsa_circ_0032131组。采用CCK-8和Transwell法检测RA-FLSs活力、迁移和侵袭数。通过双荧光素酶报告实验确定hsa_circ_0032131与miR-145-5p的靶向关系。结果与健康体检者相比,RA患者外周血中hsa_circ_0032131表达增加,miR-145-5p表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与人正常滑膜成纤维细胞相比,RA-FLSs中hsa_circ_0032131表达增加,miR-145-5p表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与NC组比较,si-hsa_circ_0032131组RA-FLSs的活力和迁移、侵袭数目降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-145-5p组RA-FLSs的活力和迁移、侵袭数目降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与anti-miR-NC+si-hsa_circ_0032131组比较,anti-miR-145-5p+si-hsa_circ_0032131组RA-FLSs的活力和迁移、侵袭数目增高,差异有统计学意义(P<0.05)。与pcDNA组比较,pcDNA-hsa_circ_0032131组RA-FLSs中miR-145-5p水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-145-5p是hsa_circ_0032131的直接靶点。结论敲低hsa_circ_0032131通过上调miR-145-5p抑制RA-FLSs的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 类风湿关节炎滑膜成纤维细胞 环状RNA_003213 微小RNA-145-5p 细胞活力 迁移 侵袭
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靶向成纤维细胞生长因子受体1信号改善类风湿关节炎的骨破坏
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作者 韩海慧 冉磊 +5 位作者 孟晓辉 辛鹏飞 向峥 边艳琴 施杞 肖涟波 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第9期1905-1912,共8页
背景:尽管科研人员已注意到成纤维细胞生长因子受体1在类风湿关节炎骨破坏中展现出巨大潜力,但尚未有学者对成纤维细胞生长因子受体1在类风湿关节炎骨破坏中的研究进展作全面综述。目的:通过查阅国内外相关文献,综合分析成纤维细胞生长... 背景:尽管科研人员已注意到成纤维细胞生长因子受体1在类风湿关节炎骨破坏中展现出巨大潜力,但尚未有学者对成纤维细胞生长因子受体1在类风湿关节炎骨破坏中的研究进展作全面综述。目的:通过查阅国内外相关文献,综合分析成纤维细胞生长因子受体1在类风湿关节炎骨破坏中的机制。方法:以“成纤维细胞生长因子受体1,类风湿关节炎,骨破坏,骨细胞,成骨细胞,破骨细胞,软骨细胞,巨噬细胞,滑膜成纤维细胞,T细胞,血管内皮细胞”为检索词检索中国知网数据库,以“fibroblast growth factor receptor 1,rheumatoid arthritis,bone destruction,osteocytes,osteoblasts,osteoclasts,chondrocytes,macrophages,synovial fibroblasts,T cells,endothelial cells”为检索词检索PubMed数据库,检索时间范围重点为1992年4月至2024年1月。通过阅读文献题目、摘要及全文,根据纳入与排除标准进行筛选,最后纳入82篇文献进行综述。结果与结论:成纤维细胞生长因子受体1广泛表达于骨组织相关细胞,包括骨细胞、成骨细胞、破骨细胞等,可以通过调控这些细胞的功能来影响骨重塑过程和维持骨稳态,促进类风湿关节炎骨破坏的发生和发展。成纤维细胞生长因子受体1还可以在滑膜成纤维细胞和巨噬细胞中参与炎症反应,在内皮细胞中调控滑膜血管生成,从多个方面促进骨破坏。成纤维细胞生长因子受体1可能是类风湿关节炎骨破坏的一个重要参与因素,为进一步研究类风湿关节炎治疗靶点提供依据。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 成纤维细胞生长因子受体1 骨破坏 成骨细胞 破骨细胞 滑膜成纤维细胞 血管内皮细胞
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丹参诱导类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞bcl-2、bax基因表达研究 被引量:14
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作者 刘青松 朱兴春 +4 位作者 蒋红 邢艳 杨明辉 唐中 袁国华 《现代中西医结合杂志》 CAS 2010年第21期2620-2622,共3页
目的探讨丹参作用类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞bcl-2和bax基因mRNA水平的表达。方法关节液原代培养获取成纤维样滑膜细胞,分别用终浓度为0,0.195和0.39 g/L的丹参作用24 h后,提取总RNA并逆转录成cDNA保存,采用rt-PCR方法检测bcl-2... 目的探讨丹参作用类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞bcl-2和bax基因mRNA水平的表达。方法关节液原代培养获取成纤维样滑膜细胞,分别用终浓度为0,0.195和0.39 g/L的丹参作用24 h后,提取总RNA并逆转录成cDNA保存,采用rt-PCR方法检测bcl-2和bax在mRNA水平的表达。结果以丹参浓度为0(bcl-2的相对表达量为0.55±0.27)作为溶剂对照组,bcl-2的表达在丹参浓度为0.195 g/L时(bcl-2的相对表达量为0.53±0.35)没有显著性差异(P=0.468),当丹参浓度达到0.39 g/L时,bcl-2的表达(相对表达量为0.25±0.17)显著性降低(P<0.05);bax的表达在2种丹参浓度条件下均无显著性差异(P均>0.05)。结论丹参可抑制类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞bcl-2的表达,从而通过降低bcl-2/bax的值促进成纤维样滑膜细胞凋亡。 展开更多
关键词 丹参 类风湿关节炎 成纤维样滑膜细胞 BCL-2 BAX
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IHH-Gli信号通路在CIA大鼠滑膜成纤维细胞增殖中的作用 被引量:4
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作者 秦苏萍 孙德旭 +4 位作者 李慧 李向阳 潘伟 郑葵阳 汤仁仙 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期937-940,共4页
目的初步探讨IHH-Gli信号通路在胶原诱导型关节炎(collagen induced arthritis,CIA)大鼠滑膜成纤维细胞(synovial fibroblast,SF)增殖中的作用。方法注射胶原诱导CIA大鼠模型,采用组织块贴壁法培养大鼠膝关节SF,免疫荧光法检测Vimentin... 目的初步探讨IHH-Gli信号通路在胶原诱导型关节炎(collagen induced arthritis,CIA)大鼠滑膜成纤维细胞(synovial fibroblast,SF)增殖中的作用。方法注射胶原诱导CIA大鼠模型,采用组织块贴壁法培养大鼠膝关节SF,免疫荧光法检测Vimentin鉴定细胞纯度,免疫荧光法检测IHH-Gli通路相关分子(IHH、Ptc、Smo及Gli1)的表达情况,给予GANT61阻断IHH-Gli信号通路,观察细胞形态变化、CCK8法检测细胞增殖情况、免疫荧光法检测糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)表达变化情况。结果病理及影像学检查显示CIA模型建立成功,培养的细胞95%以上均表达Vimentin,CIA-SF表达IHH、Ptc、Smo及Gli1蛋白,且CIA-SF表达IHH蛋白较正常SF高,10μmol/L及15μmol/L的GANT61能显著抑制CIA-SF的增殖,且降低GSK-3β的蛋白表达水平。结论 IHH-Gli信号通路参与CIA-SF的增殖机制,可能成为研究RA治疗药物的新靶点。 展开更多
关键词 滑膜成纤维细胞 关节炎 细胞增殖 IHH-Gli信号通路
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调控类风湿关节炎PBMC中miR-142-3p的表达对ADAM17表达及成纤维样滑膜细胞活性的影响 被引量:6
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作者 吴洁 马玲 +4 位作者 付冬冬 杨学华 吕书龙 范文强 王培山 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2020年第6期844-848,共5页
目的:探讨类风湿关节炎(RA)外周血单个核细胞(PBMC)中微小RNA-142-3p(miR-142-3p)的表达对RA成纤维样滑膜细胞(FLS)增殖和凋亡的影响。方法:采用生物信息学预测和双荧光素酶报告实验分析miR-142-3p和解聚素金属蛋白酶17(ADAM17)的靶向... 目的:探讨类风湿关节炎(RA)外周血单个核细胞(PBMC)中微小RNA-142-3p(miR-142-3p)的表达对RA成纤维样滑膜细胞(FLS)增殖和凋亡的影响。方法:采用生物信息学预测和双荧光素酶报告实验分析miR-142-3p和解聚素金属蛋白酶17(ADAM17)的靶向关系。分别采用实时荧光定量PCR法和Western blot法检测人正常PBMC和RA-PBMC中miR-142-3p和ADAM17蛋白的表达。利用miR-142-3p模拟物或抑制物转染调控RA-PBMC中miR-142-3p的表达,观察低表达miR-142-3p,及过表达ADAM17和miR-142-3p的RA-PBMC对RA-FLS增殖和凋亡的影响。RA-FLS增殖的检测采用MTT法,RA-FLS凋亡的检测采用Annexin V-FITC和PI双染法。结果:ADAM17和miR-142-3p存在靶向关系。与正常PBMC相比,RA-PBMC中miR-142-3p表达上调,ADAM17蛋白表达下调(P<0.05)。低表达miR-142-3p的RA-PBMC和过表达ADAM17的RA-PBMC均可增强RA-FLS增殖活性,减少其凋亡(P<0.05)。过表达miR-142-3p的RA-PBMC可降低RA-FLS的增殖活性,促进其凋亡(P<0.05)。过表达ADAM17和过表达miR-142-3p的作用可以相互拮抗(P<0.05)。结论:调控RA-PBMC中miR-142-3p的表达可以通过调控ADAM17而影响RA-FLS的增殖和凋亡。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 成纤维样滑膜细胞 miR-142-3p ADAM17 细胞增殖 细胞凋亡
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TNF-α与β1,4-GalT-Ⅰ在骨关节炎滑膜炎症过程中的关系研究 被引量:27
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作者 李冠 甘丽娇 钟妙容 《临床和实验医学杂志》 2016年第2期137-139,共3页
目的探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)和1,4-半乳糖基转移酶-Ⅰ(1,4-Gal T-Ⅰ)在骨关节炎滑膜炎症中的关系。方法选取2013年1月至2014年7月在治疗的骨关节炎患者15例,同时选取15例行膝关节探查未见异常健康者作为健康组,检测两组滑膜组织中T... 目的探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)和1,4-半乳糖基转移酶-Ⅰ(1,4-Gal T-Ⅰ)在骨关节炎滑膜炎症中的关系。方法选取2013年1月至2014年7月在治疗的骨关节炎患者15例,同时选取15例行膝关节探查未见异常健康者作为健康组,检测两组滑膜组织中TNF-α与β1,4-Gal T-Ⅰ表达水平;采用免疫荧光双标法检测TNF-α与β1,4-Gal T-Ⅰ共定位情况;同时培养成纤维滑膜细胞(FLSs),检测TNF-α刺激后β1,4-Gal T-Ⅰ的表达变化。结果观察组TNF-α和β1,4-Gal T-Ⅰ相对表达量分别为(1.22±0.17)和(0.91±0.14),明显高于健康组的(0.41±0.06)和(0.40±0.11),差异有统计学意义(P<0.05);TNF-α和β1,4-Gal T-Ⅰ在骨关节炎滑膜组织中表达,融合图有明显的共定位;各剂量TNF-α组FLSsβ1,4-Gal T-Ⅰ表达与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),说明TNF-α能够诱导FLSsβ1,4-Gal T-Ⅰ表达增加,从0.1 ng/ml TNF-α时开始增加,在5 ng/ml TNF-α时达到最高(24.18±2.16)×10-4。结论在骨关节炎滑膜炎症过程中,TNF-α可诱导β1,4-Gal T-Ⅰ表达增高。 展开更多
关键词 骨关节炎 TNF-Α β1 4-GalT- 成纤维滑膜细胞
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芍药苷上调lncRNA MALAT1抑制Wnt1/β-catenin通路促进人类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞凋亡 被引量:5
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作者 杨帆 沈俊逸 蔡辉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期692-698,共7页
目的探讨芍药苷(PAE)对体外培养类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞(RA-FLS)凋亡的影响及其作用机制。方法体外培养RA-FLS,噻唑蓝(MTT)法检测(20、40、80)μmol/L PAE培养24、48、72 h的细胞生存率,流式细胞术检测细胞凋亡率;合成3条... 目的探讨芍药苷(PAE)对体外培养类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞(RA-FLS)凋亡的影响及其作用机制。方法体外培养RA-FLS,噻唑蓝(MTT)法检测(20、40、80)μmol/L PAE培养24、48、72 h的细胞生存率,流式细胞术检测细胞凋亡率;合成3条长链非编码RNA转移相关肺腺癌转录本1的小干扰RNA(si-MALAT1)片段,脂质体转染48 h后,实时定量PCR检测筛选出敲除效果最佳si-MALAT1。将细胞分对照组、PAE组、si-NC组、si-MALAT1组、PAE联合si-MALAT1组。敲低MALAT1表达后,流式细胞术检测细胞凋亡率,实时定量PCR检测各组Wnt1、β联蛋白(β-catenin)、胱天蛋白酶3(caspase-3)、caspase-9、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)、Bcl2相关X蛋白(BAX)的mRNA表达;Western blot法检测各组Wnt1、β-catenin、caspase-3、caspase-9、Bcl2、BAX的蛋白表达。结果不同浓度PAE对RA-FLS均有抑制作用,相同浓度RA-FLS活力呈时间依赖性下降;与FLS对照组相比,RA-FLS组MALAT1表达下调,经PAE处理后细胞凋亡率增加;RA-FLS中si-MALAT1组细胞凋亡率最低,而PAE联合si-MALAT1组显著增高;PAE组较对照组Bcl2、Wnt1、β-catenin的mRNA表达降低,caspase-3、caspase-9、BAX的mRNA表达则升高;si-MALAT1组的Bcl2表达显著增高,PAE联合si-MALAT1组的Bcl2表达则显著下调,BAX、caspase-3、caspase-9表达显著升高。结论PAE通过上调MALAT1抑制Wnt1/β-catenin通路促进RA-FLS凋亡。 展开更多
关键词 芍药苷 长链非编码RNA转移相关肺腺癌转录本1(lncRNA MALAT1) WNT1 β联蛋白(β-catenin) 成纤维细胞样滑膜细胞(FLS) 细胞凋亡
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lncRNA HOXB-AS3靶向miR-379-5p调节类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞增殖、迁移和侵袭的机制研究 被引量:5
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作者 李萍 孙敏 吴伟 《河北医药》 CAS 2021年第11期1616-1620,共5页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)同源盒蛋白B8基因反义RNA3(HOXB-AS3)对类风湿性关节炎(RA)滑膜成纤维细胞增殖、迁移和侵袭的影响和分子机制。方法实时定量PCR(RT-qPCR)检测HOXB-AS3和miR-379-5p在健康对照者、RA患者滑膜组织中的表达... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)同源盒蛋白B8基因反义RNA3(HOXB-AS3)对类风湿性关节炎(RA)滑膜成纤维细胞增殖、迁移和侵袭的影响和分子机制。方法实时定量PCR(RT-qPCR)检测HOXB-AS3和miR-379-5p在健康对照者、RA患者滑膜组织中的表达。双荧光素酶报告实验和RT-qPCR验证HOXB-AS3对miR-379-5p的靶向调控作用。将si-NC、si-HOXB-AS3、miR-NC、miR-379-5p mimics、si-HOXB-AS3+anti-miR-NC、si-HOXB-AS3+anti-miR-379-5p分别转染MH7A细胞。细胞技术试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖活力;Transwell实验检测细胞迁移和迁移能力;蛋白质印记(Western blot)检测细胞周期素D1(CyclinD1)、p21、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9蛋白的表达。结果RA患者滑膜组织中HOXB-AS3呈高表达,miR-379-5p呈低表达。与si-NC组比较,si-HOXB-AS3组MH7A细胞活力、迁移侵袭细胞数、CyclinD1、MMP-2和MMP-9蛋白表达降低,p21蛋白表达增加(P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-379-5p组MH7A细胞活力、迁移侵袭细胞数、CyclinD1、MMP-2和MMP-9蛋白表达降低,p21蛋白表达增加(P<0.05)。与si-HOXB-AS3+anti-miR-NC组比较,si-HOXB-AS3+anti-miR-379-5p组MH7A细胞活力、迁移侵袭细胞数、CyclinD1、MMP-2和MMP-9蛋白表达升高,p21蛋白表达降低(P<0.05)。结论RA患者滑膜组织中HOXB-AS3呈高表达。抑制HOXB-AS3通过靶向miR-379-5p可抑制RA滑膜成纤维细胞增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 HOXB-AS3 miR-379-5p 类风湿性关节炎 滑膜成纤维细胞 细胞增殖 迁移侵袭
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miR-10a对类风湿性关节炎滑膜细胞侵袭、迁移能力的影响及机制 被引量:3
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作者 杨海 穆楠 +4 位作者 顾锦涛 张阔 张旺倩 张伟 赵金康 《生物技术通讯》 CAS 2016年第4期468-473,共6页
目的:以类风湿性关节炎(RA)患者滑膜细胞为研究对象,明确mi R-10a对滑膜细胞侵袭、迁移能力的影响及机制。方法:首先用q RT-PCR对筛选得到的异常表达mi RNA进行验证,进而利用生物信息学分析结合报告基因、Western印迹方法,明确mi R-10a... 目的:以类风湿性关节炎(RA)患者滑膜细胞为研究对象,明确mi R-10a对滑膜细胞侵袭、迁移能力的影响及机制。方法:首先用q RT-PCR对筛选得到的异常表达mi RNA进行验证,进而利用生物信息学分析结合报告基因、Western印迹方法,明确mi R-10a的靶基因,最后采用Transwell、划痕实验考察mi R-10a对RA成纤维细胞样滑膜细胞(FLS细胞)侵袭能力的影响。结果:mi R-10a在RA患者滑膜组织及细胞中低表达;TAK1和BTRC是mi R-10a的靶基因;mi R-10a可促进IL-6、IL-8等炎症因子的表达;mi R-10a可促进FLS细胞的侵袭、迁移。结论:mi R-10a可通过调节NF-κB的活性影响RA FLS细胞的侵袭、迁移。 展开更多
关键词 类风湿性关节炎 miR-10a 成纤维细胞样滑膜细胞
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薯蓣皂苷片对RSC-364细胞核转录因子-κBp65表达的影响 被引量:3
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作者 段一娜 王明娟 +3 位作者 孔素红 高玉峰 赵秀荣 宋鸿儒 《世界科学技术-中医药现代化》 北大核心 2014年第7期1625-1628,共4页
目的:观察薯蓣皂苷片对类风湿性关节炎细胞模型核转录因子NF-κBp65及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的影响。方法:用白介素-17(IL-17)+TNF-α共同孵育大鼠RSC-364细胞,以不同浓度薯蓣... 目的:观察薯蓣皂苷片对类风湿性关节炎细胞模型核转录因子NF-κBp65及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的影响。方法:用白介素-17(IL-17)+TNF-α共同孵育大鼠RSC-364细胞,以不同浓度薯蓣皂苷片进行干预,MTT法检测不同药物浓度对细胞存活率影响,采用Western blot检测各组NF-κBp65及其抑制蛋白(IκB-α)的表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养液上清中VEGF、MMP-9、TNF-α蛋白水平的变化。结果:薯蓣皂苷片可促进κB抑制蛋白的表达量,降低NF-κB蛋白水平的高表达,并降低细胞分泌VEGF、MMP-9、TNF-α水平。结论:薯蓣皂苷片对RSC-364细胞核因子κB有负向调节作用,提升IκB-α的表达并能降低炎性因子和血管新生因子分泌,提示其在类风湿发病中可能起到潜在的调节作用。 展开更多
关键词 类风湿性关节炎 薯蓣皂苷片 大鼠成纤维样滑膜细胞株 NF-κB抑制蛋白 核转录因子-ΚB
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淫羊藿苷通过上调TRIB1抑制核转录因子-κB缓解类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞炎症 被引量:1
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作者 吴志明 李慧 +4 位作者 周易芬 曹正柳 张鹏 万欣 郭健 《风湿病与关节炎》 2023年第6期6-12,共7页
目的:探讨淫羊藿苷(ICA)是否通过上调TRIB1表达抑制核转录因子-κB(NF-κB)缓解类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(RA-FLS)炎症。方法:收集南昌大学第一附属医院接受膝关节置换手术的活动期类风湿关节炎(RA)患者的滑膜组织,分离培养RA-FLS后... 目的:探讨淫羊藿苷(ICA)是否通过上调TRIB1表达抑制核转录因子-κB(NF-κB)缓解类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(RA-FLS)炎症。方法:收集南昌大学第一附属医院接受膝关节置换手术的活动期类风湿关节炎(RA)患者的滑膜组织,分离培养RA-FLS后,用肿瘤坏死因子-α(TNF-α,10 ng·mL-1)处理RA-FLS建立炎症细胞模型。首先,为明确ICA抑制RA-FLS增殖和炎症,促进细胞凋亡,分为空白对照组、TNF-α组、TNF-α+ICA组;然后,为明确TRIB1过表达可抑制RA-FLS的增殖和炎症,促进细胞凋亡,空白vector或oe-TRIB1转染TNF-α处理的RA-FLS,分为空白对照组、TNF-α组、TNF-α+vector组、TNF-α+TRIB1组;接着,为明确ICA以依赖于TRIB1的方式抑制NF-κB,siTRIB1转染TNF-α处理的RA-FLS细胞,分为空白对照组、TNF-α组、TNF-α+ICA组、TNF-α+ICA+siTRIB1组。分别采用qRT-PCR、Western blot检测基因和蛋白水平;ELISA检测炎性细胞因子;CCK-8、流式细胞术检测细胞增殖和凋亡。结果:ICA处理和TRIB1过表达均抑制TNF-α诱导的RA-FLS的增殖和炎症反应,且促进其凋亡。TNF-α处理后RA-FLS中p-p65和p-IκB水平显著上调,但ICA显著降低p-p65和p-IκB水平;且与siTRIB1联合治疗时,ICA的抑制作用消失。结论:ICA通过上调TRIB1抑制NF-κB缓解RA,提示ICA可能是一种有前景的治疗RA药物。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 淫羊藿苷 TRIB1 核转录因子-ΚB 成纤维样滑膜细胞
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肿瘤坏死因子-α与骨桥蛋白在类风湿关节炎滑膜成纤维细胞中表达的相互影响及其信号转导途径
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作者 黄文辉 吕志芬 +3 位作者 陶怡 黄成辉 陈瑞林 张北平 《实用临床医药杂志》 CAS 2012年第23期28-31,共4页
目的分析肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和骨桥蛋白(OPN)在类风湿关节炎滑膜成纤维细胞中表达的相互影响及可能的信号转导途径。方法采用牛源性Ⅱ型胶原配合不完全弗氏佐剂制造胶原诱导性关节炎(CIA)模型,取正常对照组和模型组膝关节滑膜,胶... 目的分析肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和骨桥蛋白(OPN)在类风湿关节炎滑膜成纤维细胞中表达的相互影响及可能的信号转导途径。方法采用牛源性Ⅱ型胶原配合不完全弗氏佐剂制造胶原诱导性关节炎(CIA)模型,取正常对照组和模型组膝关节滑膜,胶原酶消化法分别培养滑膜成纤维细胞(SFs),分成正常对照组、模型组、模型组+脂多糖(LPS)、模型组+LPS+p38途径抑制剂(SB203580),观察SFs中OPN mRNA的变化,分析TNF-α与OPN表达的相互影响及可能的信号转导途径。结果模型组细胞加入LPS刺激后OPN mRNA表达较模型组明显增多(P<0.01),予SB203580后,OPNmRNA的表达显著减少,4组间比较差异显著(P<0.01)。结论 TNF-α可诱导OPN的表达,这一过程可能是通过p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号转导途径而实现的。 展开更多
关键词 胶原诱导性关节炎 滑膜成纤维细胞 肿瘤坏死因子-Α 骨桥蛋白 P38丝裂原活化蛋白激酶
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BRMS1通过下调NF-κB核转位抑制成纤维样滑膜细胞分泌IL-1β
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作者 钟浩博 孙春汉 +5 位作者 马晋 郑少伟 陈楚群 赖伟强 杨剑锋 孙江森 《分子影像学杂志》 2015年第1期58-61,共4页
目的探讨乳腺癌转移抑制蛋白1(BRMS1)对人类风湿性关节炎(RA)的成纤维样滑膜细胞(FLS)分泌IL-1β的影响和机制。方法分别取4例RA患者膝关节滑膜组织及1例正常人(normal)膝关节滑膜组织,采用组织贴壁法分离FLS。用慢病毒法过表达BRMS1蛋... 目的探讨乳腺癌转移抑制蛋白1(BRMS1)对人类风湿性关节炎(RA)的成纤维样滑膜细胞(FLS)分泌IL-1β的影响和机制。方法分别取4例RA患者膝关节滑膜组织及1例正常人(normal)膝关节滑膜组织,采用组织贴壁法分离FLS。用慢病毒法过表达BRMS1蛋白。Western blot检测BRMS1蛋白及核蛋白NF-κB水平,Elisa法检测细胞培养基中IL-1β水平,免疫荧光检测NF-κB核转位。结果 RA组FLS的BRMS1蛋白表达较N组明显下调,但NF-κB核转位明显增加、IL-1β分泌明显增加。RA组FLS过表达BRMS1后,FLS核蛋白中NF-κB表达明显减少、IL-1β分泌下降。LPS诱导的NF-κB核转位和IL-1β表达增加被过表达BRMS1明显抑制。结论 BRMS1可以抑制NF-κB核转位,从而减少成纤维样滑膜细胞分泌IL-1β。 展开更多
关键词 类风湿性关节炎 乳腺癌转移抑制蛋白1 成纤维样滑膜细胞 NF-k B IL-
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TNF-α对类风湿性关节炎患者滑膜成纤维细胞RUNX3表达的影响及意义 被引量:19
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作者 王春亮 王林 潘继红 《山东医药》 CAS 2018年第20期21-24,共4页
目的探讨TNF-α对类风湿性关节炎患者滑膜成纤维细胞RUNX3表达的影响及意义。方法从类风湿性关节炎患者滑膜组织中分离并培养原代成纤维细胞,加入不同浓度(0、0.1、1、10、50 ng/m L)TNF-α分别作用0、3、6、12、24 h,采用实时荧光定量... 目的探讨TNF-α对类风湿性关节炎患者滑膜成纤维细胞RUNX3表达的影响及意义。方法从类风湿性关节炎患者滑膜组织中分离并培养原代成纤维细胞,加入不同浓度(0、0.1、1、10、50 ng/m L)TNF-α分别作用0、3、6、12、24 h,采用实时荧光定量PCR法检测RUNX3 mRNA相对表达量。取传3~8代成纤维细胞,随机分为RUNX3过表达组和对照组,分别感染人源RUNX3腺病毒、绿色荧光蛋白(GFP)对照腺病毒,感染24 h两组均加入50 ng/m L TNF-α再刺激24 h;采用实时荧光定量PCR法检测两组炎性因子[IL-6、前列腺素E2(PGE-2)、趋化因子CXC基序配体9(CXCL-9)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)及MMP-13]表达,采用Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力。取传3~8代成纤维细胞,随机分为RUNX3沉默组和对照组,分别采用脂质体转染法转染siRUNX3、NC-control siRNA,转染24 h两组均加入50 ng/m L TNF-α再刺激24 h;采用实时荧光定量PCR法检测IL-6、PGE-2、CXCL-9、MMP-2及MMP-13 mRNA表达。结果成纤维细胞RUNX3 mRNA相对表达量随着TNF-α浓度升高及作用时间延长而逐渐升高,呈浓度和时间依懒性,以TNF-α浓度50 ng/m L、作用时间24 h时RUNX3 mRNA相对表达量上调最为显著(P均<0.05)。RUNX3过表达组和对照组穿膜细胞数分别为(56±4)、(20±3)个,两组比较P<0.01。RUNX3过表达组IL-6、PGE-2、MMP-13 mRNA相对表达量均高于对照组(P<0.05或<0.01),两组CXCL-9、MMP-2mRNA相对表达量比较P均>0.05。RUNX3沉默组IL-6、CXCL-9、MMP-2及MMP-13 mRNA相对表达量均低于对照组(P均<0.05),两组PGE-2 mRNA相对表达量比较P>0.05。结论 TNF-α可促进成纤维细胞RUNX3表达,并呈浓度和时间依赖性;RUNX3表达升高可通过调控IL-6、MMP-13表达而促进成纤维细胞的侵袭能力。 展开更多
关键词 类风湿性关节炎 滑膜成纤维样细胞 肿瘤坏死因子α RUNT相关转录因子3 炎性因子
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清热活血方药对类风湿患者成纤维样滑膜细胞OPG、RANKL、TNF-α及IL-17表达影响分析 被引量:3
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作者 刘彦龙 杨林 刘娟云 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期549-552,共4页
目的:分析清热活血方药对类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞(RA-HFLS)OPG、RANKL、TNF-α、IL-17表达的影响。方法:采用不同剂量的清热活血方药治疗85例类风湿关节炎患者,采用ELISA法检测成纤维样滑膜细胞中的OPG、TNF-α及IL-17浓度,We... 目的:分析清热活血方药对类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞(RA-HFLS)OPG、RANKL、TNF-α、IL-17表达的影响。方法:采用不同剂量的清热活血方药治疗85例类风湿关节炎患者,采用ELISA法检测成纤维样滑膜细胞中的OPG、TNF-α及IL-17浓度,Western blot法检测RANKL蛋白的表达情况。结果:A、B、C 3组与对照组的TNF-α、IL-17水平、RANKL表达比较差异有统计学意义(F=13.872,P=0.003;F=9.831,P=0.011;F=7.392,P=0.039),A、B、C 3组高于对照组,B、C 2组低于A组(P<0.05),C组低于B组;A、B、C 3组与对照组的OPG分泌差异有统计学意义(F=9.856,P=0.008),A、B、C 3组高于对照组,B、C 2组高于A组,C组高于B组。结论:清热活血方药能够抑制RA-HFLS中RANKL、TNF-α及IL-17OPG的表达,促进OPG的分泌。 展开更多
关键词 清热活血方药 类风湿关节炎 成纤维样滑膜细胞
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杜仲皮水提取物调节circFADS2靶向miR-491-5p干预类风湿性关节炎滑膜成纤维样细胞生长与凋亡 被引量:4
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作者 郑国洪 孙斌 +1 位作者 王晶晶 杨正明 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期2044-2049,共6页
目的:探讨杜仲皮水提取物(water extract of Eucommia cortex,WEEC)对类风湿性关节炎滑膜成纤维样细胞(rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes,RA-FLS)生长与凋亡的影响及分子机制。方法:采用不同浓度WEEC(0.1、0.3、0.9和... 目的:探讨杜仲皮水提取物(water extract of Eucommia cortex,WEEC)对类风湿性关节炎滑膜成纤维样细胞(rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes,RA-FLS)生长与凋亡的影响及分子机制。方法:采用不同浓度WEEC(0.1、0.3、0.9和2.7 g/L)处理RA-FLS,CCK-8法检测细胞活力,选取最适WEEC浓度进行后续实验。细胞分别转染pcDNA-circFADS2和/或anti-miR-491-5p,探讨WEEC对RA-FLS生长与凋亡的影响及分子机制:用CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot法检测cleaved caspase-3的蛋白水平;RT-qPCR检测环状RNA-FADS2(circular RNA-FADS2,circFADS2)和miR-491-5p的表达水平;双萤光素酶基因报告实验检测circ-FADS2和miR-491-5p的靶向关系。结果:不同浓度WEEC处理后,RA-FLS的活力降低,凋亡率升高,cleaved cas-pase-3蛋白水平升高,circFADS2表达水平降低,miR-491-5p表达水平升高(P<0.05)。过表达circFADS2或抑制miR-491-5p表达后,WEEC处理的细胞活力升高,凋亡率及cleaved caspase-3蛋白水平降低(P<0.05)。circFADS2靶向调控miR-491-5p,过表达miR-491-5p逆转了circFADS2质粒对WEEC处理的RA-FLS活力与凋亡的影响。结论:杜仲皮水提取物通过调节circFADS2/miR-491-5p抑制类风湿性关节炎滑膜成纤维样细胞生长并促进其凋亡。 展开更多
关键词 杜仲皮水提取物 环状RNA-FADS2 微小RNA-491-5p 类风湿性关节炎滑膜成纤维样细胞 细胞活力 细胞凋亡
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黄芩苷对脂多糖诱导的大鼠滑膜RSC-364细胞自噬的抑制作用 被引量:3
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作者 王映映 孙利娟 +5 位作者 范紫微 古虹 游先梅 关天昊 张成义 陈曦 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期498-503,共6页
目的:探讨黄芩苷通过磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素(PI3k/Akt/mTOR)信号通路对脂多糖(LPS)诱导的大鼠滑膜RSC-364细胞自噬的影响,并阐明其作用机制。方法:将对数生长期大鼠滑膜RSC-364细胞分为对照组、模型组、地塞米松(DXMS)组... 目的:探讨黄芩苷通过磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素(PI3k/Akt/mTOR)信号通路对脂多糖(LPS)诱导的大鼠滑膜RSC-364细胞自噬的影响,并阐明其作用机制。方法:将对数生长期大鼠滑膜RSC-364细胞分为对照组、模型组、地塞米松(DXMS)组、10μmol·L-1黄芩苷组、20μmol·L-1黄芩苷组和40μmol·L-1黄芩苷组。对照组RSC-364细胞只加入培养基,其他各组RSC-364细胞均采用1 mg·L-1LPS体外刺激12 h制作炎症细胞模型。采用MTT法检测各组RSC-364细胞存活率,RT-PCR法检测各组RSC-364细胞中PI3k、Akt、mTOR、Beclin1和微管相关蛋白-轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)mRNA表达水平,Western blotting法检测各组RSC-364细胞中Beclin1、Atg5、Atg7、Atg12、LC3-Ⅱ和P62蛋白表达水平。结果:与对照组比较,模型组RSC-364细胞存活率明显升高(P<0.01),模型组RSC-364细胞中PI3k、Akt、mTOR mRNA和P62蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01),Atg5、Atg7、Atg12、LC3-Ⅱ、Beclin1 mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.01);与模型组比较,不同浓度黄芩苷组RSC-364细胞存活率明显降低(P<0.05或P<0.01),RSC-364细胞中PI3k、Akt、mTOR mRNA和P62蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01),Atg5、Atg7、Atg12、LC3-Ⅱ、Beclin1 mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05或P<0.01)。结论:黄芩苷可能通过激活PI3k/Akt/mTOR信号通路抑制LPS诱导的RSC-364细胞自噬。 展开更多
关键词 黄芩苷 RSC-364细胞 风湿性关节炎滑膜成纤维细胞 自噬
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lncRNA-H19通过促进成纤维细胞样滑膜细胞(FLS)活性参与胶原蛋白诱导关节炎(CIA)小鼠滑膜炎症进展 被引量:4
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作者 杨羽淇 刘楠楠 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期865-871,共7页
目的探讨长链非编码RNA H19(lncRNA-H19)对成纤维细胞样滑膜细胞(FLS)功能及对胶原蛋白诱导关节炎(CIA)小鼠模型的影响。方法分离并培养类风湿性关节炎(RA)患者FLS,利用过表达腺病毒和小干扰RNA(siRNA),分别上调和下调RA FLS的H19表达水... 目的探讨长链非编码RNA H19(lncRNA-H19)对成纤维细胞样滑膜细胞(FLS)功能及对胶原蛋白诱导关节炎(CIA)小鼠模型的影响。方法分离并培养类风湿性关节炎(RA)患者FLS,利用过表达腺病毒和小干扰RNA(siRNA),分别上调和下调RA FLS的H19表达水平,通过5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)检测RA FLS增殖、Transwell^(TM)实验检测细胞侵袭、细胞划痕实验检测RA FLS迁移能力;建立小鼠CIA模型,关节局部注射H19短发夹RNA慢病毒(LV-sh-H19),通过测量足厚度、关节炎指数和HE染色评价疾病进展。结果H19促进FLS的增殖、侵袭和迁移能力;注射LV-sh-H19的模型小鼠踝关节结构良好,关节局部有较少免疫细胞浸润和滑膜增生,敲低H19能够缓解CIA小鼠的关节炎症。结论H19通过促进FLS活化参与CIA小鼠滑膜炎症和疾病进展。 展开更多
关键词 长链非编码RNA H19(lncRNA-H19) 类风湿性关节炎 成纤维细胞样滑膜细胞 胶原蛋白诱导关节炎(CIA)
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