载FGF10的多孔明胶微球对脊髓损伤大鼠的神经修复作用机制研究

目的探讨载成纤维生长因子10(FGF10)的多孔明胶微球(GMSs)对脊髓损伤大鼠神经保护作用的机制。方法20只健康雄性SD大鼠(220~250g)随机分为假手术组、脊髓损伤组、FGF10组、FGF10-GMSs组,每组各5只。假手术组只咬除T_(9)~T_(10)棘突及椎板等骨性组织,不造成脊髓损伤。其余3组造成脊髓损伤后,用Hamilton微量注射器向FGF10组大鼠的损伤注入20μL FGF10,向FGF10-GMSs组大鼠的损伤处注射20μL FGF10负载的多孔明胶微球,脊髓损伤组和假手术组的大鼠注射等量的生理盐水。收集大鼠胸椎(T_(9)~T_(10))脊髓组织,分别采用离体释放试验评估FGF10-GMSs的持续释放。使用大鼠脊髓损伤评分(BBB评分)和斜坡测试评估FGF10-GMSs对SCI大鼠的运动功能改善效果。使用HE、Nissl染色、TUNEL试验及Western blot评估FGF10-GMSs的治疗效果。结果离体释放实验结果显示,普通明胶微球会在短时间内迅速释放FGF10,多孔明胶微球持续而缓慢地释放FGF10,未在初始48 h内观察到显著的爆发释放模式。BBB评分结果显示,与脊髓损伤组(5分)相比,第21天FGF10-GMSs组(12分)和FGF10组(9分)的大鼠均表现出良好的运动功能恢复(P<0.05),斜坡测试结果与BBB评分结果一致,FGF10组和FGF10-GMSs组均获得了明显的行为改变。HE、Nissl染色结果显示FGF10-GMSs组内的坏死、核崩解和浸润性多核白细胞数量较少,在脊髓腔内坏死组织的比例显著降低。Western blot测定结果显示FGF10-GMSs组中的细胞凋亡抑制程度比FGF10组中更加明显。TUNEL试验也产生类似的结果,相比FGF10组和脊髓损伤组,FGF10-GMSs组具有更加明显的抑制细胞凋亡的作用。结论FGF10-GMSs通过抑制神经细胞的凋亡,从而达到保护脊髓损伤大鼠神经细胞的作用,为脊髓损伤的治疗提供新的思路,对提高脊髓损伤的预后具有十分重要的意义。

前列腺增生术后尿路感染患者FGF10、NLR、CRP/ALB变化及其临床意义

【目的】探讨前列腺增生(BPH)术后尿路感染患者成纤维细胞生长因子10(FGF10)、中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、C反应蛋白(CRP)/白蛋白(ALB)变化情况。【方法】选取2018年1月至2021年3月本院收治的164例BPH患者,均行经尿道前列腺等离子双极电切术,根据术后是否发生尿路感染将其分为感染组(n=33)和未感染组(n=131)。比较两组基线资料、手术前后FGF10、NLR、CRP/ALB,分析BPH术后发生尿路感染的影响因素,评估FGF10、NLR、CRP/ALB对BPH术后发生尿路感染的诊断价值。【结果】两组患者年龄、手术时间、术前预防性使用抗生素比例、术前因尿潴留行导尿术比例比较,差异有统计学意义(P<0.05)。两组术后1 d、3 d、5 d的FGF10、NLR、CRP/ALB呈先升高后降低趋势,且均在术后3 d达到最高峰(P<0.05);感染组术后1 d、3 d、5 d的FGF10、NLR、CRP/ALB高于未感染组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,年龄、手术时间、术前预防性使用抗生素、术前因尿潴留行导尿术及术后3 d的FGF10、NLR、CRP/ALB是BPH术后发生尿路感染的重要影响因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,术后3 d的FGF10、NLR、CRP/ALB联合诊断BPH术后尿路感染的曲线下面积为0.913,显著优于单一指标(P<0.05)。致病菌为革兰氏阴性菌患者的FGF10、NLR、CRP/ALB显著高于革兰氏阳性菌(P<0.05)。【结论】BPH术后发生尿路感染的患者FGF10、NLR、CRP/ALB增高,动态联合监测三者可为临床诊治、致病菌类型区分提供参考。

心房颤动患者血清IL-10、sCD14、FGF-21检测对左心房血栓形成的预测价值

目的观察心房颤动患者血清白细胞介素-10(IL-10)、可溶性白细胞分化抗原14(sCD14)、成纤维细胞生长因子-21(FGF-21)水平,并探究其对左心房血栓形成的预测价值。方法选取2020年8月至2021年8月上海市浦东新区人民医院收治的86例心房颤动患者作为观察组,另选取60例健康体检者作为对照组。比较两组受检者的血清IL-10、sCD14、FGF-21水平,以及观察组中发生与未发生左心房血栓患者的临床资料、超声心动图指标和血清IL-10、sCD14、FGF-21水平,采用Logistic回归分析心房颤动患者左心房血栓形成影响因素,采用Pearson相关系数模型分析血清IL-10、sCD14、FGF-21水平与超声心动图指标的相关性,采用受试者工作特征曲线(ROC)评价血清IL-10、sCD14、FGF-21水平对心房颤动患者左心房血栓形成的预测价值。结果观察组患者的血清IL-10水平为(18.74±5.32)pg/mL,明显低于对照组的(25.87±7.49)pg/mL,sCD14、FGF-21水平分别为(12.58±4.17)mg/L、(224.15±28.76)pg/mL,明显高于对照组的(4.82±1.23)mg/L、(145.16±13.94)pg/mL,差异均有统计学意义(P<0.05);发生左心房血栓患者的左心房内径(LAD)、sCD14、FGF-21水平分别为(44.56±6.13)mm、(16.94±4.06)mg/L、(250.87±32.77)pg/mL,明显高于未发生患者的(39.12±4.98)mm、(11.66±2.98)mg/L、(218.50±25.69)pg/mL,IL-10水平为(15.26±4.12)pg/mL,明显低于未发生患者的(19.48±5.94)pg/mL,差异均有统计学意义(P<0.05);经Logistic回归分析结果显示,LAD及血清IL-10、sCD14、FGF-21均为心房颤动患者左心房血栓形成的影响因素(P<0.05);经Pearson相关系数模型分析结果显示,心房颤动患者血清IL-10与超声心动图指标LAD呈负相关(r=-0.809,P<0.05),sCD14、FGF-21水平与超声心动图指标LAD呈正相关(r=0.772、0.832,P<0.05);血清IL-10、sCD14、FGF-21联合预测心房颤动患者左心房血栓形成的曲线下面积(AUC)值大于单独指标(P<0.05)。结论心房颤动患者血清IL-10、sCD14、FGF-21水平异常,联合检测其水平可预测患者左心房血栓形成,为临床工作提供参考依据。

成纤维细胞生长因子10在寻常型银屑病皮损中的检测

目的检测成纤维细胞生长因子10(FGF10)在寻常型银屑病皮损中的水平,探讨其与银屑病发病的关系。方法应用免疫组化法检测了FGF10在22例寻常型银屑病皮损、非皮损中的分布。以20例正常皮肤为正常对照。结果寻常型银屑病皮损、非皮损中FGF10的阳性检测结果均明显高于对照组(P<0.05)。结论银屑病皮损中FGF10阳性的检测结果可能与银屑病的发病有关。

成纤维细胞生长因子10mRNA在寻常型银屑病皮损中的表达

目的:研究成纤维细胞生长因子10mRNA在寻常型银屑病皮损中的表达,探讨其在银屑病发病中的作用机制.方法:应用原位杂交法检测FGF10mRNA在22例正常皮肤组织、银屑病皮损和未受累皮肤中的表达和分布.结果:原位杂交法检测发现,在22例正常皮肤组织、银屑病皮损和未受累皮肤表皮的全层或表皮中下层可见FGF10mRNA表达(95%);在正常皮肤表皮的基底层或少量细胞内可见FGF10mRNA的表达(5%);在寻常型银屑病非皮损表皮的中下层或个别细胞内可见FGF10mRNA的表达(82%).寻常型银屑病皮损表皮中FGF10mRNA的表达明显高于正常对照组(P<0.05).结论:FGF10mRNA在银屑病发病早期阶段的表达增高可能与银屑病的早期发病有关.

小鼠发育期卵巢成纤维细胞生长因子10的表达

目的研究小鼠卵巢发育期成纤维细胞生长因子10(FGF10)的表达。方法分离孕E14.5、E16.5、E18.5、生后第1天和3周龄小鼠卵巢,每组实验动物6只,应用免疫组织化学技术研究FGF10蛋白在卵巢中的表达;3周龄小鼠腹腔注射孕马血清促性腺激素(PMSG)48h后,再注射人绒毛膜促性腺激素(hCG),hCG注射后3h提取总mRNA,应用RT-PCR技术研究卵巢中FGF10、黄体生成素受体(LHR)、成纤维细胞生长因子7(FGF7)和成纤维细胞生长因子受体2Ⅲb(FGFR2Ⅲb)基因的表达变化。结果 FGF10蛋白表达于卵母细胞,并且FGF10在生后第1天小鼠的卵母细胞上表达最强;两种促性腺激素处理后,FGF10 mRNA与对照组相比表达下降,LHR mRNA表达升高,FGF7和FGFR2Ⅲb mRNA表达不变。结论 FGF10蛋白特异表达于小鼠卵母细胞膜,促性腺激素影响卵巢FGF10 mRNA的表达,推测FGF10可能参与调控小鼠卵母细胞的生长和卵泡发育。

纤维母细胞生长因子10(FGF10)的研究进展

介绍了FGF10(纤维母细胞生长因子10)的生物学特性,并从胚胎阶段和出生后阶段入手对国内外有关FGF10的研究进展进行了综述。

FGF10对小鼠植入前胚体外发育及2-细胞胚内G蛋白偶联受体30表达的影响

目的观察成纤维细胞生长因子10(FGF10)对小鼠受精卵体外发育和2-细胞胚内G蛋白偶联受体30(GPR30)水平的影响,为进一步探讨FGF10在小鼠植入前胚体外发育中的作用提供依据。方法以M16培养液为对照组,M16中分别添加不同浓度的FGF10为实验组,收集昆明(KM)雌性小鼠与KM雄性小鼠交配所得的受精卵,分别观察各组受精卵体外发育情况。收集KM小鼠受精卵,分别置于M16和含不同浓度FGF10的M16培养液中培养,获取体外发育的2-细胞胚,采用免疫荧光染色结合激光共聚焦扫描显微镜检测细胞内GPR30水平。结果添加FGF10实验组发育到4-细胞胚、桑葚胚和囊胚的比率明显高于对照组,其中以添加浓度为10ng/ml的FGF10实验组的效果最明显。免疫荧光染色结果显示,10ng/ml的FGF10实验组体外发育2-细胞胚内GPR30免疫荧光染色强度明显高于对照组。结论 FGF10可促进KM小鼠植入前胚的体外发育,其作用可能与上调2-细胞胚内GPR30有关。

吉林双阳梅花鹿成纤维细胞生长因子10的克隆和基因分析

根据多个物种的成纤维细胞生长因子10的序列,设计了特异的引物,从吉林双阳梅花鹿子宫cDNA文库中得到了梅花鹿成纤维细胞生长因子10,并应用多种数据库和软件对其进行了分析.

重组hFGF-10腺病毒促进角质形成细胞增殖

目的:构建重组人成纤维细胞生长因子10(hFGF-10)腺病毒,并观察其对角质形成细胞增殖的影响,为探索新的皮肤组织工程种子细胞的来源奠定基础。方法:用PCR方法扩增得到人成纤维细胞生长因子10(hFGF-10)基因片段,与穿梭载体pAdTrack-CMV连接,获得的重组质粒pAdTrack-CMV-hFGF-10经PmeI线性化后,通过电转法导入含腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的大肠杆菌BJ5183中进行同源重组,获得重组腺病毒质粒pAdEasy-hFGF-10,经酶切鉴定后转染HEK-293细胞,在HEK-293细胞中包装并扩增腺病毒。用重组腺病毒感染HaCat细胞,Western blotting检测培养上清中的重组hFGF-10。MTT法检测重组腺病毒对角质形成细胞增殖的影响。结果:成功构建了含hFGF-10基因的重组腺病毒,可高效感染HaCat细胞,培养上清与hFGF-10抗体呈阳性反应。重组腺病毒对角质形成细胞的增殖具有促进作用。结论:制备出的重组腺病毒感染HaCat细胞后分泌表达hFGF-10,并可促进HaCat细胞的增殖。

先天性肠闭锁近端肠壁组织中成纤维细胞生长因子10和骨形成蛋白4的表达

目的:检测先天性肠闭锁近端肠壁组织中成纤维细胞生长因子10(FGF10)和骨形成蛋白4(BMP4)的表达并探讨其临床意义。方法:选择20例先天性肠闭锁组织标本,分别于闭锁处、闭锁近端5和10 cm处取材,另取10例正常肠管组织标本作对照,分别采用免疫组织化学方法检测FGF10和BMP4蛋白的表达情况。结果:正常肠管组织和肠闭锁处组织FGF10蛋白表达量分别为(148.32±1.90)和(123.41±2.59),差异有统计学意义(t=37.198,P=0.011);BMP4蛋白表达量分别为(206.40±3.22)和(138.57±2.81),差异有统计学意义(t=50.167,P<0.001)。肠闭锁处组织FGF10蛋白表达量与闭锁近端5和10 cm处组织的表达量(139.98±2.74)和(157.51±2.76)比较,差异有统计学意义(F=404.880,P<0.001);肠闭锁处组织BMP4蛋白表达量与闭锁近端5和10 cm处组织的表达量(171.01±2.84)和(204.48±2.18)比较,差异有统计学意义(F=1 597.122,P<0.001)。结论:FGF10和BMP4表达减少可能是先天性肠闭锁形成的原因之一,外科手术尽量切除10 cm以上的闭锁近端肠管。

FGF10与相关疾病的关系及其临床应用

成纤维细胞生长因子10(FGF10)为成纤维细胞生长因子家族(FGFs)家族成员。FGF10与多种疾病相关,主要包括肿瘤和多种器官发育不全。此外,FGF10还能促进损伤修复、毛发生长和干细胞增殖分化,并能去面部红血丝。

FGF10基因rs399501位点与中国汉族人群高度近视相关性

目的探讨FGF10基因rs399501位点与中国汉族人群高度近视的相关性。方法选择442例高度近视病人和551例视力正常的健康者(均为中国汉族)作为研究对象,应用单碱基延伸法(SNaPshot技术)对其rs399501位点进行基因分型,分析rs399501位点基因型及等位基因频率与高度近视的关系。结果高度近视组和对照组基因型均符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05)。FGF10基因rs399501位点基因型GG、等位基因G与中国汉族人群高度近视高度相关(OR=3.05、1.35,P<0.05)。结论 FGF10基因可能参与了高度近视发生发展。

成纤维细胞生长因子-10及其受体对胎儿皮肤附件形成的诱导作用

目的:探讨成纤维细胞生长因子-10(FGF10)及其受体(FGFR2b 或 Bek)在胎儿皮肤附件(SA)形成中的表达特征及其生物学意义。方法:对130块分别来自26例不同胎龄(EGA 8～31周)胎儿,5个不同部位(头、下颌、耳垂、肩和胸骨柄)的皮肤标本,采用病理学、免疫组化方法和计算机图像扫描技术检测 FGF10、Bek、细胞角蛋白-19(CKl9)、Bcl-2和细胞增殖核抗原(PCNA)在胎儿皮肤组织的表达水平。结果:除 EGA8周胎儿缺乏典型的皮肤组织学结构和 FGF10和 Bek 蛋白表达外,所有蛋白在 E11周以后的皮肤内都有阳性表达。在EGA11周,表皮下成团分布的间质细胞过表达 FGF10、PCNA 和 Bcl-2,表皮细胞和周皮细胞则所有蛋白均呈强阳性表达;在 EGA13周时表皮细胞局灶性增殖形成 SA 胚芽,并逐渐向真皮内生长、分化和迁移;在 EGA11～31周的皮肤组织内,真皮内问质细胞表达 FGF10、PCNA 和 Bcl-2以及 SA 上皮细胞表达 FGF10、Bek、PCNA、CK19和 Bcl-2蛋白呈现与生长发育同步的表达特征,但单个细胞表达的平均光密度(A)值则随胎龄增加而逐渐下降(P<0.05～0.001)。结论:间质细胞旁分泌的 FGF10与上皮细胞膜 Bek 特异性结合,是诱导胚胎 SA 上皮细胞生长及其形态发生的重要信号,但有关 SA 的形成部位和种类及其与 FGF10蛋白表达的相互关系仍有待深入研究。

纤维母细胞生长因子10对鸡胚尿囊膜血管形成的作用

目的探讨纤维母细胞生长因子10(FGF10)对鸡胚尿囊膜血管生长作用。方法应用胶原蛋白共培养方法,分别于培养液中加入100ng·mL-1的FGF10(FGF10组)、100ng·mL-1 FGF10和20μmol·L-1 SU5402(SU5402组)作用于鸡胚尿囊膜血管内皮细胞组织块,同时设立空白对照组,观察3组新生血管的形成状况。结果与空白对照组比较:FGF10组新生血管形成面积显著增加(P<0.001);SU5402组中SU5402可抑制FGF10的作用,其新生血管形成面积显著下降(P<0.001)。结论 FGF10能促进鸡胚尿囊膜新生血管的形成。

成纤维细胞生长因子10mRNA在脂溢性角化病皮损中的表达

目的研究成纤维细胞生长因子10 mRNA在脂溢性角化病皮损中的表达,探讨其在脂溢性角化病发病中的作用机制。方法应用原位杂交法检测FGF10 mRNA正常皮肤组织和脂溢性角化病皮损中的表达和分布。结果28例脂溢性角化病皮损表皮的全层或中下层均可见FGF10 mRNA表达(100.0%);正常皮肤表皮的基底层或个别细胞内可见FGF10 mRNA的表达(3.57%);脂溢性角化病皮损表皮中FGF10 mRNA的表达明显高于正常对照组(P<0.05)。结论FGF10 mRNA在脂溢性角化病皮损中表达增高。

成纤维细胞生长因子-10刺激人角朊细胞表达粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子

目的:探讨成纤维细胞生长因子-10(FGF-10)促创面肉芽组织形成的作用机制。方法:将不同浓度的 FGF-10分别加入细胞培养液中,于作用后24、48和7,2h 收集细胞培养上清,采用 ELISA 方法测定粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子 GM-CSF 的含量,同时进行细胞计数。结果:当细胞接种密度为2 500细胞/cm^2时,24h 的培养上清中未能检测到 GM-CSF,48h 的上清中125 ng/ml 和500ng/ml FGF-10组 GM-CSF 的浓度及单个细胞的 GM-CSF 的分泌均显著高于对照组(P<0.05)。72h的培养上清中仅500ng/ml FGF-10组 GM-CSF 的分泌量显著高于对照组(P<0.05)。当细胞接种密度为5 000细胞/cm^2时,16～500ng/ml 的 FGF-10各组 GM-CSF 浓度显著高于对照组(P<0.05),但单个细胞的 GM-CSF 分泌量与对照组无显著差异(P>0.05),48h 收集的培养上清中,与对照组相比,FGF-10各组的 GM-CSF 均未升高,且48h 各组单个细胞的GM-CSF 分泌量与该培养皿中的细胞总数呈负相关(r=-0.881,P<0.05)。结论:实验结果提示 FGF-10可能通过刺激 GM-CSF 的分泌,从而间接作用于成纤维细胞、内皮细胞等,促进创面肉芽组织形成。

成纤维细胞生长因子10抑制脂多糖刺激下BV2细胞的活化

目的:探索成纤维细胞生长因子10(fibroblast growth factor 10,FGF10)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激下小胶质细胞BV2活化的影响。方法:小鼠BV2小胶质细胞用细胞培养基DMEM培养,置于37℃、5%CO_2、饱和湿度的培养箱中培养,1~2 d换液,4~5 d传代。实验分为对照组、LPS组和FGF10组,FGF10组的BV2细胞预先给予FGF10 1 mg/L 30 min后,在LPS组和FGF10组中加入500 mg/L的LPS,在不同时点进行检测。用倒置显微镜观察小胶质细胞的形态学改变,RT-qPCR和ELISA分别检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)转录和蛋白表达水平的改变来观测BV2细胞的活化情况。结果:静息状态下BV2细胞形态呈圆形或椭圆形,经过24 h LPS刺激后,BV2细胞形状向多极或纺锤样改变,活化细胞数量比值明显高于对照组;预先给予FGF10能抑制LPS刺激下的BV2细胞向活化形态改变,活化的BV2细胞明显减少。给予LPS刺激6 h后,LPS组TNF-α的mRNA水平相比于对照组显著升高,然而预先给予FGF10会显著抑制TNF-α的转录。LPS作用24 h后,细胞培养上清液内TNF-α的表达水平与对照组相比显著上升,而预先给予FGF10在蛋白水平显著抑制TNF-α的表达。结论:FGF10能够成功抑制LPS刺激下BV2细胞的活化,有望成为治疗经胶质细胞介导的神经系统炎症性疾病的一种有效药物。

自噬流在细颗粒物诱导的气道炎症中的变化及成纤维细胞生长因子10调控自噬流的抗炎效应

目的:探讨自噬流在细颗粒物(PM)诱导气道炎症中的变化及成纤维细胞生长因子10(FGF10)是否通过调控自噬流发挥抗炎效应。方法:选取雄性C57BL/6小鼠进行随机分组,预先1 h给予5 mg/kg FGF10气道滴注,然后予以4 mg/kg PM气道滴注,连续气道滴注2 d,构建动物模型,具体分组:空白对照(vehicle)组、FGF10组、PM组和PM+FGF10组。获取肺组织进行病理分级评分,获取支气管肺泡灌洗液(BALF)以ELISA检测炎症介质白细胞介素6(IL-6)、IL-8、前列腺素E2(PGE2)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的分泌,获取肺组织蛋白以Western blot检测自噬相关蛋白LC3和p62的表达。预先给予4 mmol/L 3-甲基腺嘌呤(3-MA)或10μg/L FGF10干预1 h,200 mg/L的PM刺激人正常气道上皮BEAS-2B细胞1 h,Western blot检测NF-κB通路p65和IκBα磷酸化水平。预先给予4mmol/L 3-MA或10μg/L FGF10干预1 h,200 mg/L的PM刺激BEAS-2B细胞24 h,ELISA检测炎症介质IL-6、IL-8、PGE2和TNF-α的分泌,Western blot检测自噬相关蛋白LC3和p62的表达。结果:动物模型中PM短时暴露可以诱导C57BL/6小鼠气道炎症的改变,伴随BALF中炎症介质IL-6、IL-8、PGE2和TNF-α升高,肺组织发生自噬流异常;FGF10干预可以逆转PM诱导的气道炎症和炎症介质分泌,伴随着自噬流的改变。细胞模型中PM可以诱导BEAS-2B细胞炎症介质IL-6、IL-8、PGE2和TNF-α分泌,3-MA干预或FGF10干预可以逆转炎症介质的分泌,3-MA干预可以逆转NF-κB通路的改变,FGF10干预可以逆转自噬流的改变。结论:FGF10在PM诱导的气道炎症中发挥抗炎效应,其中分子机制涉及自噬和NF-κB信号通路。

成纤维细胞生长因子10与呼吸系统疾病防治

成纤维细胞生长因子10(fibroblast growth factor-10,FGF-10)可调控细胞增殖、迁移、分化和凋亡,参与多种肺部疾病的发生发展。FGF-10能促进损伤修复,抑制纤维化,促进肺间充质干细胞增殖和动员,能够对抗各种刺激因素所致的急性肺损伤及气道损伤。因此,FGF-10重组蛋白的肺内局部给药可能成为某些呼吸系统疾病治疗的新策略。本文总结了FGF-10在呼吸系统疾病防治中的价值及其潜在应用前景。