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延边株气肿疽梭菌鞭毛蛋白FliA基因克隆及生物信息学分析
被引量:
4
1
作者
张永佳
张皓
+1 位作者
李成辉
金鑫
《延边大学农学学报》
2017年第2期35-40,59,共7页
根据气肿疽鞭毛基因(GenBank登录号:AB058932)的参考序列,PCR扩增并克隆延边株气肿疽梭菌鞭毛蛋白FliA基因。成功克隆后测序,并采用生物信息学方法对鞭毛蛋白FliA基因的蛋白质二级结构、结构功能域、三级结构及抗原表位等重要参数进行...
根据气肿疽鞭毛基因(GenBank登录号:AB058932)的参考序列,PCR扩增并克隆延边株气肿疽梭菌鞭毛蛋白FliA基因。成功克隆后测序,并采用生物信息学方法对鞭毛蛋白FliA基因的蛋白质二级结构、结构功能域、三级结构及抗原表位等重要参数进行了预测和分析。结果表明:与AB058932序列相比,存在38处突变,核苷酸序列的同源性和氨基酸序列的同源性均为97%;FliA蛋白的理论等电点为6.99,不存在跨膜区和信号肽序列,二级结构以α-螺旋和β-折叠为主,主要有15个潜在B细胞抗原表位区,17个限制性CTL抗原表位区。本试验为延边株气肿疽FliA蛋白功能的深入研究奠定了基础。
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关键词
气肿疽梭菌
延边株
flia基因
克隆
生物信息学分析
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职称材料
气肿疽延边株FliA基因真核表达载体的构建
被引量:
2
2
作者
张永佳
张皓
+1 位作者
李成辉
金鑫
《延边大学农学学报》
2017年第3期50-54,共5页
为构建气肿疽延边株FliA基因的真核表达载体PVAX1-FliA,根据Genbank气肿疽鞭毛基因(登录号:AB058932)的参考序列,利用Primer 5.0设计1对引物,通过PCR扩增出完整的气肿疽延边株FliA基因。将目的基因与pMD-19T载体连接转化到大肠杆菌DH5α...
为构建气肿疽延边株FliA基因的真核表达载体PVAX1-FliA,根据Genbank气肿疽鞭毛基因(登录号:AB058932)的参考序列,利用Primer 5.0设计1对引物,通过PCR扩增出完整的气肿疽延边株FliA基因。将目的基因与pMD-19T载体连接转化到大肠杆菌DH5α,进行测序、PCR、双酶切鉴定阳性克隆质粒。用回收后的基因与真核表达载体PVAX-1连接,并经双酶切、测序鉴定。本试验成功构建了鞭毛基因的重组真核表达载体PVAX1-FliA,为探讨气肿疽延边株FliA基因的分子生物学特性和功能及免疫新途径提供依据。
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关键词
气肿疽延边株
flia基因
真核表达载体
构建
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职称材料
气肿疽梭菌不同靶基因检测方法的比较
被引量:
1
3
作者
云巾宴
任春宇
+4 位作者
车达
金清洙
段雪岩
司唯
金鑫
《江苏农业科学》
北大核心
2015年第11期278-280,共3页
为检测牛、羊等反刍动物的气肿疽梭菌,筛选出更为特异、敏感的PCR检测方法,分别以fli A(C)、nan A、cct A为靶基因进行PCR检测,并对其敏感性、特异性等方面进行比较。结果表明,以cct A为靶基因的PCR检测方法敏感性最高,最小检测DNA量为1...
为检测牛、羊等反刍动物的气肿疽梭菌,筛选出更为特异、敏感的PCR检测方法,分别以fli A(C)、nan A、cct A为靶基因进行PCR检测,并对其敏感性、特异性等方面进行比较。结果表明,以cct A为靶基因的PCR检测方法敏感性最高,最小检测DNA量为12.30×10^(-5)pg/μL;以fli A(C)、nan A为靶基因的PCR检测方法敏感性较低,最小检测DNA量为0.123 ng/μL;3种靶基因引物菌未扩增出D型产气荚膜梭菌、E型产气荚膜梭菌、腐败梭菌、巴氏杆菌等基因片段,具有较好的特异性。本试验为气肿疽的快速诊断提供了更为敏感、特异的检测技术。
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关键词
气肿疽梭菌
flia
(C)
基因
nanA
基因
cctA
基因
PCR方法
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职称材料
题名
延边株气肿疽梭菌鞭毛蛋白FliA基因克隆及生物信息学分析
被引量:
4
1
作者
张永佳
张皓
李成辉
金鑫
机构
延边大学农学院
出处
《延边大学农学学报》
2017年第2期35-40,59,共7页
基金
吉林省教育厅"十二五"科学技术重点项目
文摘
根据气肿疽鞭毛基因(GenBank登录号:AB058932)的参考序列,PCR扩增并克隆延边株气肿疽梭菌鞭毛蛋白FliA基因。成功克隆后测序,并采用生物信息学方法对鞭毛蛋白FliA基因的蛋白质二级结构、结构功能域、三级结构及抗原表位等重要参数进行了预测和分析。结果表明:与AB058932序列相比,存在38处突变,核苷酸序列的同源性和氨基酸序列的同源性均为97%;FliA蛋白的理论等电点为6.99,不存在跨膜区和信号肽序列,二级结构以α-螺旋和β-折叠为主,主要有15个潜在B细胞抗原表位区,17个限制性CTL抗原表位区。本试验为延边株气肿疽FliA蛋白功能的深入研究奠定了基础。
关键词
气肿疽梭菌
延边株
flia基因
克隆
生物信息学分析
Keywords
Clostridium chauvoei
Yanbian strain
flagellin gene(
flia
)
cloning
bioinformatics analysis
分类号
S852.61 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
气肿疽延边株FliA基因真核表达载体的构建
被引量:
2
2
作者
张永佳
张皓
李成辉
金鑫
机构
延边大学农学院
出处
《延边大学农学学报》
2017年第3期50-54,共5页
基金
吉林省教育厅资助项目(吉教科合字[2014]第6号)
文摘
为构建气肿疽延边株FliA基因的真核表达载体PVAX1-FliA,根据Genbank气肿疽鞭毛基因(登录号:AB058932)的参考序列,利用Primer 5.0设计1对引物,通过PCR扩增出完整的气肿疽延边株FliA基因。将目的基因与pMD-19T载体连接转化到大肠杆菌DH5α,进行测序、PCR、双酶切鉴定阳性克隆质粒。用回收后的基因与真核表达载体PVAX-1连接,并经双酶切、测序鉴定。本试验成功构建了鞭毛基因的重组真核表达载体PVAX1-FliA,为探讨气肿疽延边株FliA基因的分子生物学特性和功能及免疫新途径提供依据。
关键词
气肿疽延边株
flia基因
真核表达载体
构建
Keywords
Clostridium Chauvoei of Yanbian Strain
flagellin gene
eukaryotic expression vector
construction
分类号
S858 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
气肿疽梭菌不同靶基因检测方法的比较
被引量:
1
3
作者
云巾宴
任春宇
车达
金清洙
段雪岩
司唯
金鑫
机构
延边大学农学院动物医学系
吉林省延边州畜牧总站
吉林省延边州动物疫病预防控制中心
吉林省延吉市动物卫生监督所
出处
《江苏农业科学》
北大核心
2015年第11期278-280,共3页
基金
吉林省教育科学技术研究项目[编号:吉教科合字(2014)第6号]
文摘
为检测牛、羊等反刍动物的气肿疽梭菌,筛选出更为特异、敏感的PCR检测方法,分别以fli A(C)、nan A、cct A为靶基因进行PCR检测,并对其敏感性、特异性等方面进行比较。结果表明,以cct A为靶基因的PCR检测方法敏感性最高,最小检测DNA量为12.30×10^(-5)pg/μL;以fli A(C)、nan A为靶基因的PCR检测方法敏感性较低,最小检测DNA量为0.123 ng/μL;3种靶基因引物菌未扩增出D型产气荚膜梭菌、E型产气荚膜梭菌、腐败梭菌、巴氏杆菌等基因片段,具有较好的特异性。本试验为气肿疽的快速诊断提供了更为敏感、特异的检测技术。
关键词
气肿疽梭菌
flia
(C)
基因
nanA
基因
cctA
基因
PCR方法
分类号
S855.1 [农业科学—临床兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
延边株气肿疽梭菌鞭毛蛋白FliA基因克隆及生物信息学分析
张永佳
张皓
李成辉
金鑫
《延边大学农学学报》
2017
4
下载PDF
职称材料
2
气肿疽延边株FliA基因真核表达载体的构建
张永佳
张皓
李成辉
金鑫
《延边大学农学学报》
2017
2
下载PDF
职称材料
3
气肿疽梭菌不同靶基因检测方法的比较
云巾宴
任春宇
车达
金清洙
段雪岩
司唯
金鑫
《江苏农业科学》
北大核心
2015
1
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职称材料
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