中药960诱导人肝癌细胞凋亡的研究

目的:观察960抗癌合剂对人肝癌细胞的凋亡作用,揭示其治疗原发性肝癌作用机理。方法:丫啶橙(AO)染色,琼脂糖凝胶电泳,碘化丙锭染色细胞周期分析(PI-FCM)和末端转移酶DNA断裂点原位标记(TUNELFCM)。结果:经960药物血清处理后,细胞皱缩,深染,AO染色,细胞呈致密浓染的黄绿色荧光;DNA电泳见典型“梯形”带;ANA直方图上见典型凋亡峰(0.95％～27.77%),TUNEL标记率64.12%～70.02%。结论:960合剂可诱导人肝癌细胞发生凋亡,这可能是其抗癌作用主要机制之一。

三色免疫荧光标记法检测外周血Th细胞亚群

目的建立一种流式细胞仪三色法检测外周血Th细胞亚群的方法。方法外周全血用RPMI1640培养液和终浓度为25ng/ml的PMA、1μg/ml的Ionomycin、20ng/ml的Monensin培养2h,固定和破膜后,加入荧光标记的CD4、IFN-γ和IL-4抗体,应用流式细胞仪进行检测。结果CD4+细胞与CD4-细胞能明显区分,12份标本Th0、Th1和Th2分别为(2.46±0.97)%、(12.77±4.01)%和(1.82±0.81)%。结论三色免疫荧光标记法可以同时快速准确地测定外周血Th0、Th1和Th2细胞亚群。

胃癌患者外周血CD4＋CD25high CD127low/-调节性T细胞表达临床意义分析

目的:研究CD4+CD25highCD127low/-调节性T细胞(Treg)在胃癌患者外周血中的表达水平,探讨其在肿瘤发病机制及治疗中的作用。方法:采用流式细胞术检测法检测90例胃癌患者(35例为早中期胃癌,55例为晚期胃癌)和30名健康体检者外周血中CD4+CD25highCD127low/-Treg的表达水平。结果:90例胃癌患者外周血CD4+T细胞中CD4+CD25highCD127low/-Treg含量为(11.60±5.99)%,高于健康体检者(5.19±1.72)%,t=5.610,P=0.007;Ⅲ+Ⅳ期患者外周血CD4+T细胞中CD4+CD25high CD127low/-Treg含量为(12.55±6.59)%,明显高于Ⅰ+Ⅱ期患者(10.39±4.68)%(t=4.113,P=0.04)和健康体检者(5.19±1.72)%(t=5.923,P=0.001)。手术后胃癌患者CD4+CD25highCD127low/-Treg水平为(6.12±2.13)%,明显低于手术前(11.25±5.63)%,t=5.237,P=0.04。结论:胃癌患者外周血CD4+CD25highCD127low/-Treg数量增多且与病程分期相关,手术后Treg数量明显减少,Treg可能参与了胃癌的发生发展。