IL-34对食管鳞癌细胞增殖、凋亡和迁移的作用研究

目的研究白细胞介素-34(interleukin 34,IL-34)在食管鳞癌中的表达及其对食管鳞癌细胞增殖、凋亡和迁移的影响。方法采用免疫组织化学染色检测IL-34在食管鳞癌组织标本中的表达情况,采用qRT-PCR法探究IL-34在不同食管鳞癌细胞系中mRNA表达水平。利用慢病毒感染,过表达食管鳞癌细胞系ECA-109中IL-34,高内涵筛选后通过Celigo细胞计数检测细胞增殖能力,通过流式细胞术检测细胞凋亡能力,通过划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移能力。结果癌组织中IL-34水平高于正常组织,但由于临床样本过少差异无统计学意义(P>0.05);食管鳞癌细胞系中IL-34的mRNA水平显著高于正常食管上皮细胞(P<0.01)。IL-34过表达可显著减少ECA-109细胞凋亡,促进其增殖和迁移(P<0.01)。结论IL-34在食管鳞癌中过表达,并与食管鳞癌细胞的增殖、迁移和凋亡显著相关,可能成为食管鳞癌新的标志物。

三氧化二砷对人食管癌细胞株凋亡的诱导作用

目的研究三氧化二砷对人食管癌细胞株凋亡的诱导作用。方法癌细胞株Ｅ８７１２和ＥＣ１７１贴壁生长，在电镜观察的基础上，用碘化丙啶（ＰＩ）染色和ＴＵＮＥＬ将凋亡细胞反映在流式细胞仪（ＦＣＭ）上。结果经三氧化二砷２μｍｏｌ／Ｌ作用后，电镜下见部分细胞核染色质凝聚，呈半月形；ＦＣＭ细胞ＤＮＡ检得亚Ｇ１细胞峰；部分Ｇ１期细胞ＴＵＮＥＬ标记呈阳性。结论结果表明，三氧化二砷能诱人食管癌细胞株的凋亡，此药对食管癌等实体瘤的治疗有诱入的应用前景。同时表明，ＦＣＭ具有敏感。

TWEAK反义寡核苷酸对人结肠癌细胞系SW480增殖及侵袭能力的影响

目的观察肿瘤坏死因子样凋亡微弱诱导剂(TWEAK)对人结肠癌细胞系SW480增殖及侵袭能力的影响。方法合成TWEAK反义寡核苷酸(ASODN)、错义寡核苷酸(SCODN)后转染人结肠癌细胞系SW480,将细胞分为空白对照组、脂质体(LF)对照组、ASODN组、SCODN组;采用MTT法检测肿瘤细胞增殖抑制情况,流式细胞术(FCM)检测肿瘤细胞周期分布,ELISA法检测细胞培养液上清中可溶性TWEAK及其受体成纤维细胞生长因子诱导早期反应蛋白14(Fn14)的表达,Western blotting法、免疫荧光细胞化学法(IF)检测细胞中的TWEAK及Fn14蛋白的表达,运用Transwell侵袭实验观测结肠癌细胞侵袭能力的变化。结果空白对照组、LF对照组、SCODN组之间结肠癌细胞的增殖情况无明显差异(P>0.05),与对照组相比ASODN组肿瘤细胞增殖受到明显抑制(P<0.05),且呈剂量-时间依赖关系;转染TWEAK ASODN后,G2+M期细胞比例明显高于对照组(P<0.05),TWEAK及其受体Fn14在结肠癌细胞培养液及细胞内的表达均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);转染TWEAK ASODN后肿瘤细胞侵袭抑制率为31.39%,明显高于对照组(P<0.05);TWEAK及其受体Fn14在结肠癌细胞培养液及细胞内的表达均密切相关(P<0.05)。结论 TWEAK ASODN可能通过抑制TWEAK与其受体Fn14结合干扰肿瘤的发生发展,抑制TWEAK表达能抑制人结肠癌细胞系SW480的增殖与侵袭。

环氧化酶-2选择性抑制剂抑制人食管癌细胞的生长及其诱导凋亡

目的:探讨NS-398对食管癌细胞的生物学效应及可能的作用机制.方法:常规方法培养食管癌Eca-109和TE-13细胞,以不同浓度NS-398(5,10,20,40,80μmol/L)处理24,48,72h.采用四甲基唑蓝法(MTT)检测NS-398对Eca-109和TE-13细胞生长的抑制作用;流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡及COX-2,Bcl-2,Bax蛋白的表达;TUNEL法检测2种细胞凋亡情况;用放射免疫分析(RIA)检测培养液上清中前列腺素E2(PGE2)含量.结果:NS-398可抑制2种细胞的生长,并随药物浓度的增高及作用时间的延长抑制率逐渐增高,并使2种细胞产生的PGE2明显降低.NS-398使2种细胞G0/G1期细胞显著增多,S期细胞显著减少(Eca-109:F=22.39,P<0.01;TE-13:F=46.99,P<0.01),并引起了明显的细胞凋亡.NS-398使2种细胞COX-2和Bcl-2表达显著减少,而Bax表达显著增高.COX-2和Bcl-2的表达呈显著正相关(Eca-109:r=0.925,P<0.01;TE-13:r=0.925,P<0.01),COX-2和Bax表达呈显著负相关(Eca-109:r=-0.937,P<0.01;TE-13:r=-0.703,P<0.01)、Bax和bcl-2表达呈显著负相关(Eca-109:r=-0.926,P<0.01;TE-13:r=-0.753,P<0.01).结论:NS-398可抑制食管癌细胞的增殖并可诱导其凋亡,应用COX-2选择性抑制剂对食管癌进行化学预防或辅助治疗具有可能性.

白花丹参根制剂对胃癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究白花丹参根制剂对体外培养的人胃癌细胞BGC823增殖和凋亡的影响．方法:用不同浓度白花丹参根制剂处理胃癌细胞BGC823后,噻唑蓝(MTT)检测细胞的相对存活率,流式细胞仪Annexin V／PI双染法检测BGC823细胞凋亡,激光扫描共聚焦显微镜检测细胞形态．对结果进行统计分析,均数比较用t检验．结果:不同浓度白花丹参根制剂作用于BGC823细胞后,细胞的存活率明显下降且呈剂量依赖性(0．4 g／L:91．7％±10．6％;0．8 g／L:66．8％±5．1％;1 g／L:57．5％±9．6％;1．5 g／L:32．6％±7.3％;2 g／L:29．4％±9．4％)．镜下可见凋亡细胞典型形态,流式细胞术分析表明经过白花丹参根制剂处理后早期凋亡细胞数和晚期凋亡细胞数与对照组相比均显著增加(2．950％±1．575％vs4．105％±2．393％．P<0．05;3．848％±2．264％vs 21．465％±6．474％,P<0．05)．结论:白花丹参根制剂能有效地抑制胃癌细胞增生和诱导细胞凋亡．

重组复合高效干扰素抗人乳腺癌细胞的体外实验研究

目的了解重组复合高效干扰素(rSIFN-co)在体外抗乳腺癌细胞的作用,以及与抗肿瘤药物合用的协同抗肿瘤作用,并初步探讨其可能的作用机理。方法采用MTT比色法和流式细胞仪技术,检测rSIFN-co、干扰素(干复津)、抗肿瘤药物(盐酸表柔比星),以及联合用药对人乳腺癌MCF-7细胞及人乳腺癌阿霉素耐药MCF-7/ADR细胞增殖、凋亡的影响,采用免疫组化SABC法检测经过各药物处理的MCF-7细胞及MCF-7/ADR细胞中P53、Bcl-2、CerbB-2蛋白的表达。结果rSIFN-co对MCF-7细胞及MCF-7/ADR细胞均具有增殖抑制、促进凋亡作用,作用强于干复津,且有剂量依赖性及时间依赖性倾向;rSIFN-co与盐酸表柔比星联用具有协同增效的作用;rSIFN-co可下调MCF-7细胞及MCF-7/ADR细胞P53、CerbB-2蛋白及上调Bcl-2蛋白的表达水平。结论rSIFN-co诱导MCF-7细胞及MCF-7/ADR细胞凋亡、抑制其增殖作用可能与下调肿瘤细胞P53、CerbB-2蛋白及上调Bcl-2蛋白的表达水平有关。

MT-3和MT-1E基因转染对食管癌细胞株增殖、细胞周期及凋亡的影响

背景与目的:金属硫蛋白(metallothionein,MT)-3具有细胞生长抑制活性,是目前已知唯一的具有独特生理功能的MT亚型。MT-1E是MT-1的1个亚型,有文献报道MT-1蛋白的表达量与食管癌的恶性程度呈正相关。本研究拟探讨MT-3和MT-1E基因转染对食管癌细胞株增殖、细胞周期及凋亡的影响。方法:采用阳离子脂质体法,将已构建好的MT-3、MT-1E及其空载体4种质粒转染食管癌Eca-109和TE13细胞株;荧光显微镜判断转染效率,RT-PCR检测目的基因的表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期与细胞凋亡。结果:转染MT-3和MT-1E基因的食管癌细胞株均有外源目的基因相应mRNA的高表达。转染MT-3基因的Eca-109和TE13细胞株,其增殖能力受到明显抑制(P<0.05),G0/G1期细胞比例明显升高(P<0.05),S期细胞比例明显降低(P<0.05),且凋亡率明显升高(P<0.05)。转染MT-1E基因的Eca-109和TE13细胞株,其增殖能力、细胞周期及凋亡率变化均不明显(P>0.05)。结论:上调MT-3基因表达能抑制食管癌细胞增殖,促进其凋亡,这可能是通过阻滞肿瘤细胞的生长周期来实现的。而MT-1E基因可能在食管癌细胞的增殖过程中作用不明显。

流式双参数检测在肿瘤增殖、分化与凋亡中的应用

流式细胞术已在生物医学研究中有广泛应用,双参数流式术显著特点是给同一细胞群提供双重信息。本文成功地将这一先进技术用于食管癌增殖、分化与凋亡的检测,显示流式双参数的广阔应用前景。

表没食子儿茶素没食子酸酯调控食管癌细胞线粒体膜电位诱导细胞凋亡作用研究

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)调控食管癌细胞Ec9706线粒体膜电位诱导细胞凋亡作用。方法不同浓度(100、200、300 mg/L)EGCG作用Ec9706细胞24 h后,Annexin V/PI双标流式细胞术方法检测细胞凋亡水平;流式细胞术检测细胞线粒体膜电位;Western Blot方法检测细胞中Caspase-3蛋白表达水平,0.9%氯化钠溶液代替EGCG作为对照组。结果 100、200、300 mg/L EGCG作用Ec9706细胞24 h后,与对照组相比Ec9706细胞凋亡率显著增高(P<0.01),300 mg/L EGCG组细胞凋亡率显著高于100、200 mg/L EGCG组(P<0.01)。EGCG可显著降低细胞线粒体膜电位(P<0.01),且具有剂量依赖性。western-blot结果显示,EGCG组与对照组相比Caspase-3蛋白表达水平显著增高(P<0.05)。结论 EGCG具有诱导食管癌Ec9706细胞凋亡作用,其作用机制可能与调控线粒体膜电位引起内源性细胞凋亡有关。

粉防己碱对人乳腺癌细胞MCF-7细胞株的作用

目的:观察粉防己碱对体外培养的人乳腺癌细胞MCF-7细胞株增殖的影响。方法:MTT法检测MCF-7细胞对粉防己碱的敏感性;流式细胞仪检测粉防己碱对MCF-7细胞的细胞周期、凋亡率的影响。结果:随着粉防己碱浓度的增加,作用时间延长,MTT试验中试验组细胞光吸收值降低;流式细胞试验中S期细胞数减少,凋亡细胞比例增加。结论:粉防己碱对MCF-7细胞株的生长有明显的抑制作用,并且这种抑制效应存在剂量和时间的依赖关系;粉防己碱可阻滞MCF-7细胞周期活动,诱导细胞凋亡,且其调亡率和浓度及作用时间呈正相关。

4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯对肺腺癌细胞株A549分化和增殖的影响

目的观察4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯(4-am ino-2-trifluorom ethyl-phenyl retinoate)对人肺腺癌细胞株A549生长抑制、分化的影响。方法4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯组及全反式维甲酸(ATRA)处理肺腺癌细胞株A549,观察A549细胞生长情况,流式细胞仪进行细胞周期分析,苏木精—伊红(HE)染色观察肺癌细胞形态变化。结果4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯及ATRA具有抑制A549细胞增殖、使细胞周期阻滞于G0/G1期,肺癌A549细胞在,发生了细胞胞体变小、分裂状态的细胞数减少等形态学变化。结论4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯及ATRA使细胞周期阻滞于G0/G1期,从而影响其DNA的合成,抑制其恶性增殖并诱导其分化。

细胞凋亡调控因子基因在食管上皮癌变过程中的表达及其意义

目的研究细胞凋亡调控因子Fas、Fasl、Fadd和Caspase 8基因在食管上皮癌变过程中的表达及其意义。方法应用免疫组化S-P法检测食管黏膜中Fas、Fasl、Fadd和Caspase 8的蛋白表达。应用碘化丙啶染色和间接免疫荧光标记方法,采用流式细胞仪对食管黏膜组织进行定量检测。结果从食管正常黏膜组织到不典型增生组织和食管癌组织,Fas、Fadd和Caspase 8蛋白表达率呈逐渐下降的趋势,Fasl蛋白表达率呈逐渐上升的趋势,在食管癌和正常组织之间差异有统计学意义,x2分别为5.659,7.73,6.32,5.65,P<0.05或P<0.01。Fas、Fasl和Caspase 8蛋白高中分化鳞癌中蛋白阳性表达率显著高于低分化鳞癌,两者差异有统计学意义,x2分别为4.88,7.79,4.68,P<0.05。与正常黏膜组织和不典型增生组织相比,癌组织中DNA含量明显增高,异倍体细胞显著增加;Fas、Fadd和Caspase 8蛋白表达水平明显降低,t值分别为8.131,7.39,5.44,Fasl基因蛋白表达水平升高,t值为6.671。结论Fas与Fasl的表达失衡与食管癌的发生、发展有密切关系,并与食管癌的分化和免疫逃避有关。Fadd与Caspase 8基因表达异常在食管癌的发生发展中可能起着重要作用。食管上皮癌变过程中,DNA含量及异倍体率增加。

AG490联合健择对人胰腺癌细胞生长的影响

目的:探讨Janus激酶(JAK)特异性抑制剂AG490联合化疗药物健择对人胰腺癌细胞系SW1990的生长增殖及STAT3转导通路的影响和其机制.方法:人胰腺癌细胞系SW1990分为对照组、AG490组、健择组及AG490+健择处理组.培养48 h后,MTT法检测细胞增殖状态,流式细胞仪检测细胞凋亡.Western blot和RT-PCR检测STAT3,Cyclin D1,Bcl-xL,Bax,Survivin的表达情况.结果:AG490组和健择组的细胞增殖明显低于对照组(2.20±0.25,2.30±0.220 vs 3.78±0.42,P<0.05),凋亡率明显高于对照组(35.40%±3.08%,34.64%±1.38% vs 16.49%±1.45%,P<0.05)。并且,AG490+健择组细胞增殖(1.49±0.15)明显低于明显低于AG490或健择组(P<0.05),而凋亡率(43.80%±1.57%)则明显高于AG490或健择组(P<0.05).AG490处理SW1990 48 h后,p-STAT3表达明显低于对照组(13.83%±0.64% vs 79.87%±1.43%,P<0.05),同时Cyclin D1(mRNA:15.63%±0.59% vs 43.83%±0.64%,P<0.05:蛋白:17.50%±0.92% vs 49.87%±1.27%,P<0.05),Bcl-xL(mRNA:13.93%±0.21% vs 75.70%±0.46%,P<0.05:蛋白:34.17%±1.70% vs 83.93%±0.80%,P<0.05)和Survivin(mRNA:58.27%±0.42% vs 82.93%±1.68%,P<0.05:蛋白:13.23%±1.03% vs 18.60±1.08%,P<0.05)表达也明显降低,而Bax的表达则明显增高(mRNA:10.33%±1.18% vs 5.43%±0.70%,P<0.05:蛋白:13.07%±1.04% vs 6.23%±2.40%,P<0.05),健择处理组上述指标与对照组相似.结论:阻断STAT3信号转导通路可以抑制人胰腺癌细胞增殖,促进其凋亡,健择联合AG490能起协同作用.AG490联合健择可能为胰腺癌治疗提供新的思路.

大鼠肝癌发生期间细胞增殖与凋亡关系初探

目的：探讨肝癌发生过程中细胞周期调控下细胞增殖与凋亡的关系。方法：以二乙基亚硝胺（ ＤＥＮ） 诱导的大鼠实验性肝癌为模型，以Ｋｉ６７ 抗原和ＳｕｂＧ１ 法分别作为细胞增殖和细胞凋亡定量分析方法。凋亡细胞比例（Ａｐ） 与Ｋｉ６７ 阳性细胞比例（Ｋｉ） 之比值（Ａｐ／Ｋｉ） 为描述两者关系的客观指标。结果：除诱癌８ 周和２０ 周外，余各实验组的细胞凋亡数目与对照组相比均存在明显差异（Ｐ＜ ０－０５） 。在肝硬变前期和肝硬变期Ａｐ 与Ｋｉ 基本呈正比关系。Ａｐ／Ｋｉ 于诱癌２ 、１０ 、１８ 周较高，峰值位于诱癌２ 周。结论：①大鼠肝癌发生过程中，机体进行细胞增殖以补偿因ＤＥＮ损害导致肝细胞减少的同时，还通过细胞周期调控机制，以细胞凋亡为表现形式，始终在监测和清除着异常细胞；②肝硬变前期和肝硬变期，机体通过细胞凋亡，使组织增生的速度和规模受到控制。

Survivin、xiap、apollon和livin反义寡核苷酸对人消化系肿瘤细胞增殖及凋亡的影响

目的观察凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis proteins,IAPs)家族survivin、xiap、apollon和livin反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASO)对人消化系肿瘤细胞增殖、凋亡的影响。方法人工合成survivin、xiap、apol-lon、livin的反义核酸和随机序列,经脂质体包裹后作用肝癌细胞、胃癌细胞、结肠癌细胞48 h后,采用WST-8法观察对细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果 IAPs ASO作用于肝癌HepG2细胞、胃癌MGC-803细胞、结肠癌Lovo细胞48 h后,与空白对照组(control)和随机寡核苷酸(random oligodeoxynucleotide,RODN)对照组相比,IAPs ASO能明显抑制肝癌细胞、胃癌细胞、结肠癌细胞的增殖和诱导细胞凋亡(P<0.01)。其中,在作用浓度为0.2μmol.L-1时,survivin ASO对HepG2、Lovo细胞的增殖抑制率最高,分别为84.2%、82.6%。xiap ASO对MGC-803细胞的增殖抑制率最高,为86.56%,并呈时间-剂量依赖效应。survivin ASO诱导Lovo细胞、MGC-803细胞凋亡作用最强,凋亡率为34.95%、27.6%,livin ASO诱导HepG2细胞凋亡作用最强,凋亡率为27.4%。结论针对凋亡抑制蛋白家族survivin、xiap、apollon、livin的反义核酸均能有效抑制消化系肿瘤细胞增殖,并诱导细胞凋亡。

去甲斑蝥素对雄激素非依赖型前列腺癌PC-3细胞增殖、凋亡的影响

目的:研究去甲斑蝥素对人雄激素非依赖型前列腺癌PC-3细胞生长抑制与诱导凋亡的作用。方法:CCK-8技术检测去甲斑蝥素对PC-3细胞生长抑制率的影响,流式细胞仪检测去甲斑蝥素对PC-3细胞周期和凋亡率的影响。结果:去甲斑蝥素对PC-3细胞有生长抑制作用,随去甲斑蝥素浓度升高,抑制作用增强,呈现剂量-效应关系。流式细胞检测提示,去甲斑蝥素作用于PC-3细胞后,G 0/G 1期细胞明显减少,S、G 2期PC-3细胞增加,凋亡率升高(P<0.05)。结论:去甲斑蝥素能抑制人雄激素非依赖型前列腺癌PC-3细胞的增殖,促进PC-3细胞凋亡。

禽流感病毒NS1A蛋白诱导人肺癌细胞SPC-A1的凋亡

目的研究禽流感病毒NS1A蛋白对人肺癌细胞SPC-A1增殖的影响。方法将含有NS1A基因的重组质粒pVAX1-NS1A经脂质体介导转染人肺癌细胞SPC-A1,用MTT检测其对细胞增殖的抑制作用;Annexin VFITC-PI结合流式细胞仪检测细胞凋亡率;PI结合流式细胞仪检测细胞周期的变化;对转染细胞的表达产物进行Western blot分析。结果NS1A蛋白能抑制人肺癌细胞SPC-A1增殖且呈时间依赖性。随着作用时间延长,重组质粒转染组细胞凋亡率可达38.17%,细胞周期中G0/G1比例升高,G1期阻滞。Western blot分析显示,重组质粒转染组细胞在相对分子质量约30000处可见特异性反应条带,与NS1A蛋白产物大小相符。结论禽流感病毒NS1A蛋白能够抑制SPC-A1细胞增殖,并诱导SPC-A1细胞凋亡。

靶向端粒酶逆转录酶基因反义寡核苷酸对人舌鳞癌细胞增殖和凋亡的影响

目的观察并探讨靶向端粒酶逆转录酶基因(humantelomerasereversetranscriptase,hTERT)反义寡核苷酸对人舌鳞癌细胞增殖和凋亡的影响。方法根据细胞形态学、DNAladder琼脂糖凝胶电泳分析、MTT法流式细胞仪检测细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡。结果反义寡核苷酸组Tca8113细胞增殖受抑、细胞周期阻滞,对照组Tca8113细胞未受抑。流式细胞仪和DNAladder检测结果显示:反义寡核苷酸转染Tca8113细胞早期凋亡率增加,并随寡核苷酸浓度和培养时间的增加而增高,与对照组比较有显著性差异(P<0.05)。对照组间比较无统计学差异(P>0.05)。结论靶向端粒酶逆转录酶基因反义寡核苷酸能抑制人舌鳞癌细胞增殖和促进细胞凋亡。

WTX基因对结肠癌细胞增殖和凋亡的作用

目的 WTX基因转染结肠癌Lovo细胞株,分析WTX基因对结肠癌细胞增殖和凋亡的影响。方法将结肠癌Lovo细胞株分为WTX基因转染组和对照组,WTX基因转染组给予WTX质粒转染,对照组给予空载质粒转染。观察WTX基因转染组和对照组WTX基因的表达情况,两组Lovo细胞株结肠癌细胞的增殖情况、凋亡情况及细胞周期变化。结果 WTX基因转染组结肠癌细胞WTX蛋白表达明显高于对照组(P<0.05);WTX基因转染组结肠癌转染后4、7d光密度值均明显低于对照组(P<0.05);WTX基因转染组G1期细胞比例明显高于对照组(P<0.05),WTX基因转染组G2期和S期细胞比例明显低于对照组(P<0.05)。结论 WTX基因抑制结肠癌细胞的增殖,影响结肠癌细胞周期,对结肠癌细胞凋亡没有影响。

帕米膦酸二钠抑制人肝癌细胞增殖及诱导凋亡机制研究

目的肝癌是常见的恶性肿瘤之一,寻找其低毒有效的化疗药物具有重要的临床价值。本研究旨在探讨一种临床常用的骨吸收抑制剂帕米膦酸二钠对人肝癌HepG2及Bel-7402细胞体外增殖和凋亡的影响及其机制。方法采用MTS法检测不同浓度的帕米膦酸二钠对HepG2和Bel-7402细胞体外增殖的影响;以TUNEL末端标记法和Annexin-Ⅴ-FITC双标记流式法检测帕米膦酸二钠对细胞凋亡的影响采用蛋白质印迹法检测帕米膦酸二钠对凋亡相关蛋白:聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)、Caspase-9、Caspase-3、active-Caspase-3、Bax及Bcl-2表达的影响。结果 MTS检测显示,帕米膦酸二钠对HepG2及Bel-7402细胞均具有明显抑制作用,并呈剂量依赖性,药物的半数抑制浓度(50%inhibitory concentration,IC_(50))分别为46.12和51.35μmol/L。流式细胞术检测发现,帕米膦酸二钠可诱导肝癌细胞剂量依赖性凋亡,20、40和60μmol/L作用HepG2细胞24h凋亡率分别为(25.70±6.00)%、(43.53±4.06)%和(74.73±2.90)%,与对照组的(3.43±1.07)%相比差异有统计学意义,F=175.5,P<0.001;20、40和60μmol/L作用Bel-7402细胞24h凋亡率分别为(25.50±3.00)%、(48.30±1.02)%和(68.97±4.90)%,与对照组(3.33±0.05)%相比差异有统计学意义,F=81.97,P<0.001。蛋白质印迹法检测结果显示,帕米膦酸二钠可诱导细胞内凋亡相关蛋白Caspase-9、Caspase-3及PARP的活化,促凋亡蛋白Bax的上调,抑凋亡蛋白Bcl-2的下调。结论帕米膦酸二钠可以明显抑制人肝癌HepG2及Bel-7402细胞的体外增殖,其机制可能与线粒体凋亡途径的激活而诱导癌细胞发生凋亡相关,帕米膦酸二钠可能成为潜在的肝癌治疗药物。