基于网络药理学的合欢花抗抑郁作用机制研究

在对合欢花中的化学成分进行鉴定基础上,采用网络药理学方法预测合欢花抗抑郁的化学成分和作用机制。通过超高液相色谱-高分辨质谱联用技术(UHPLC-HRMS)对合欢花中化学成分进行表征,利用SwissTargetPrediction和Similarityensembleapproach数据库筛选合欢花活性成分的潜在作用靶点,同时利用DisGeNET数据库得到抑郁症相关的靶点,采用jvenn绘制韦恩图得到疾病与药物的共有靶点;通过STRING数据库构建PPI网络并筛选关键靶点,采用DAVID 6.8数据库对关键靶点进行KEGG通路富集分析及基因本体(GO)功能注释。结果表明,合欢花发挥抗抑郁作用主要成分为木犀草素、槲皮素、异鼠李素、腺苷、槲皮素-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖苷、槲皮素-3-O-α-D-吡喃木糖苷、槲皮素-3-O-α-D-呋喃阿拉伯糖苷、山奈酚-3-O-葡萄糖鼠李糖苷、金丝桃苷、槲皮苷,这些活性成分作用于MAPK1、MMP2、PTGS2、TNF、AR、EGFR、AKT1、MMP9、IGF1R核心靶点后通过HIF-1、MAPK、C-type lectin receptor(CLRs)、AGE-RAGE、IL-17及EGFR络氨酸激酶抑制剂抵抗通路中发挥抗抑郁作用。研究结果表明,合欢花抗抑郁作用是通过多成分、多靶点和多通路共同作用的结果,该研究为合欢花抗抑郁活性作用机制深入研究提供参考。

碱胁迫对合欢种子萌发及幼苗生理指标的影响

为探求碱胁迫影响合欢幼苗生长的生理机制,采用可见分光光度法测定合欢幼苗体内丙二醛含量(MDA)、可溶性糖含量、脯氨酸含量及过氧化氢酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)活性等生理指标.结果表明,合欢树种的耐碱能力较强,半致死浓度为78.30 mmol?L-1,致死浓度为147.33 mmol?L-1.随着Na2CO3处理浓度的增加,种子萌芽率、发芽指数、活力指数逐步下降,幼苗叶片中MDA、膜相对透性、脯氨酸和可溶性糖含量增加,SOD、POD活性呈先升后降的变化趋势,且随着胁迫时间的延长,MDA、膜相对透性逐步增加,脯氨酸、可溶性糖含量、SOD、POD活性变化无规律.在Na2CO3胁迫初期,膜脂过氧化作用成为主要破坏因素,随着胁迫时间的延长,膜脂过氧化作用受碱胁迫效应的影响逐步降低,而对质膜透性破坏的影响加强;POD、SOD受胁迫效应的影响较小,成为次要保护因素;可溶性糖、脯氨酸调节渗透压成为碱胁迫初期的主要保护因素;随着胁迫的发展,可溶性糖受胁迫效应的影响逐步降低,而对脯氨酸的影响不断加强.

中药合欢花抗抑郁活性部位的初步筛选研究

目的合欢花抗抑郁作用有效部位的筛选。方法采用小鼠强迫游泳药理实验对合欢花水提物和醇提物及其各萃取部位进行抗抑郁活性筛选。结果合欢花醇提物与水提物的石油醚和醋酸乙酯萃取部位与对照品安拿芬尼类似,均能显著缩短小鼠游泳的不动时间。结论合欢花醇提物与水提物及其石油醚和醋酸乙酯萃取部位对“行为绝望”动物模型有较明显的抗抑郁作用,提示非极性成分及中等极性成分可能为合欢花抗抑郁作用的活性物质。

可见分光光度法测定碱胁迫中合欢幼苗的生理指标

为检测合欢幼苗的抗碱胁迫能力,文章试验利用可见分光光度法测定了碱胁迫下合欢幼苗体内的丙二醛、可溶性糖、脯氨酸含量及POD、SOD活性,分析这些生理指标在不同处理浓度、不同处理时间下的变化规律,探求碱胁迫下合欢幼苗的抗逆生理机制。随着Na2CO3处理浓度的增加,幼苗叶片中MDA和可溶性糖含量,均呈递增趋势,当处理浓度低于75mmol.L-1,两者含量变化较平缓,而浓度高于75mmol.L-1时,则含量急剧增加,各处理间差异显著;脯氨酸含量也呈递增趋势,当处理浓度低于100mmol.L-1,变化较平缓,浓度高于100mmol.L-1时,含量则急剧增加,各处理间差异显著;SOD和POD活性变化趋势一致,都呈单峰曲线变化,但两者活性最大值所对应的处理浓度不同,分别为50和75mmol.L-1。此外,随着胁迫时间的延长,同一浓度处理的丙二醛含量逐步增加,而脯氨酸、可溶性糖含量、SOD、POD活性变化较复杂,无明显规律性。

植物源抗烟草花叶病毒活性物质的初步筛选

利用半叶枯斑法,测定了13科18种植物蛋白粗提液对烟草花叶病（TMV）的抑制效果。结果表明,不同植物蛋白粗提液对TMV侵染心叶烟的抑制效果存在差异,6种植物蛋白粗提液对TMV的抑制效果达到50%以上,其中菠菜和合欢最高,分别达到了97.44%和96.92%。进一步通过（NH4）2SO4盐析,对菠菜和合欢蛋白粗提液抗病毒活性成分进行了初步分离,并测试（NH4）2SO4盐析的不同蛋白组分对TMV的抑制效果。结果显示,菠菜蛋白粗提液盐析后的两个蛋白组分都表现出很高的抗病毒活性,而合欢蛋白粗提液只在40%~80%饱和度盐析的蛋白组分具有较强的抗病毒活性。

HPLC测定合欢花中槲皮苷的含量

目的测定合欢花中槲皮苷的含量。方法采用高效液相色谱法，Agilent-C18柱（250mm×4．6mm，5μm），流动相为乙腈-0．1％磷酸溶液（25：75），检测波长为256nm，流速为1．0mL·min^-1。结果槲皮苷进样量在0．1204—2．408μg内呈良好的线性关系，平均回收率为99．2％，RSD=1．3％（n=6）。结论该方法快速简便，稳定可靠，专属性强。

合欢花挥发油化学成分及提取液抑菌作用研究

采用水蒸气蒸馏法提取合欢(Albizzia julibrissin Durazz.)花挥发油,并用气相色谱-质谱(GC-MS)法进行分析,利用滤纸片法进行抑菌试验。结果表明,合欢花挥发油中共鉴定出16种成分,包括二十一烷(24.762%)、植酮(22.968%)、二十八烷(16.118%)、二十四烷(8.438%)和棕榈酸甲酯(6.689%)。合欢花提取液对鳗弧菌、哈维氏弧菌、灿烂弧菌、高卢弧菌、巨大芽孢杆菌均有抑制作用,其作用随浓度升高而增强。

合欢内生菌H8的分离、鉴定及其抗菌代谢物质研究

为了寻找结构新颖，高效的农用抗菌活性物质，以药用植物合欢叶为试验材料，分离筛选出一株内生细菌H8。采用对峙培养法与琼脂扩散法进行抑菌试验，结果表明：H8菌株、发酵液、无菌发酵液及其活性组分对苹果腐烂病菌、苹果轮纹病菌等6种供试植物病原菌均具有较强的抑菌活性，抑菌带宽度可达20．5～34．5 mm。经形态观察、生理生化试验和16S rDNA系统进化分析，鉴定其为死谷芽孢杆菌（Bacillus vallismortis）。采用液-液萃取、薄层层析及硅胶柱层析，对内生菌H8的代谢液提取分离，得6个组分，对抑菌活性高的2个组分硅烷化衍生后，经GC-MS检测，确定代谢液中有脂肪酸、芳香酸、环二肽等28种活性化合物。

合欢花水提物对抑郁模型大鼠学习记忆及海马CREB表达的影响

目的:观察合欢花水提物对抑郁模型大鼠学习记忆能力及海马CREB表达的影响。方法:SD大鼠40只,随机分为空白组、模型组、氟西汀组和合欢花组,每组10只。采用孤养加慢性轻度不可预见性应激结合方法构建抑郁模型,氟西汀或合欢花水提物灌胃治疗21 d。空白组给予生理盐水。用药结束后,采用体重测定、旷场试验、糖水实验评估各组大鼠的抑郁情况。Morris水迷宫测试各组大鼠的学习记忆能力。ELISA法检测海马组织中cAMP含量。免疫组化法检测海马CREB的表达情况。结果:与模型组相比,合欢花组和氟西汀组抑郁症状明显改善。水迷宫结果显示:与空白组比较,模型组大鼠的逃避潜伏期(EL)明显延长,平台所在象限的游泳时间百分比和穿越站台次数明显减少(P<0.01);与模型组比较,氟西汀组和合欢花组EL明显缩短,游泳时间百分比和穿越站台次数增加(P<0.05或P<0.01);但氟西汀组和合欢花组以上指标的差异不明显(P>0.05)。海马cAMP含量及CREB平均光密度检测结果显示:与空白组比较,模型组大鼠海马cAMP含量、CREB的平均光密显著降低(P<0.01);与模型组相比,氟西汀组和合欢花组上述指标明显升高(P<0.01);而氟西汀组和合欢花组上述指标无统计学差异(P>0.05)。结论:合欢花水提物可以改善抑郁模型大鼠的抑郁症状提高抑郁大鼠学习记忆能力,其机制可能与提高海马CREB的表达影响cAMP-CREB通路有关。

合欢皮多糖提取工艺优化及BP神经网络模型

优化合欢皮多糖微波辅助提取工艺和建立BP神经网络模型。以多糖得率为指标,选取微波辐射时间、液固比和溶剂pH为自变量,采用Box-Behnken试验设计,结合响应面分析法(RSA),建立回归方程;在此基础上,建立BP神经网络(BPNN)模型。优化条件下的总多糖实际得率为3.648%,BPNN模型相对误差为1.042%,小于Box-Behnken设计模型相对误差(1.452%)。该BPNN模型预测性能良好,对工艺研究的开发具有一定的实用价值。

反相高效液相色谱法测定合欢不同部位中槲皮苷的含量

目的建立合欢不同部位中槲皮苷的含量测定方法。方法样品用甲醇超声提取40min，提取物用流动相溶解。Diamonsil C18柱（4．6mm×250mm），甲醇-水-冰醋酸（45：55：1．5）为流动相，检测波长为256nm。结果槲皮苷在2．545—20．36μg／ml浓度范围内线性关系良好（r=0．9999），平均加样回收率为98．09％，RSD为O．5％。结论此方法简便可靠，可为合欢花药材的质量控制提供借鉴。

恶霉灵在合欢离体快速繁殖中的应用

以合欢的子叶、下胚轴、根为外植体 ,接种于不同浓度恶霉灵 (HMI)及其它不同激素配比的改良培养基上 ,观察恶霉灵对合欢离体快速繁殖的影响。研究结果表明 ,恶霉灵对以上三种外殖体无诱导愈伤组织的作用。在单独加有 3mg/LHMI和加有 3mg/LHMI +BA( 0 .5mg/L)+NAA( 0 .0 1mg/L)的MS培养基上能诱导愈伤组织芽的分化 ,并对离体单株有增殖壮苗作用 ,效果优于单加BA和KT。恶霉灵浓度为 0 .3mg/L时能诱导再生苗生根 ,且具有促进根毛产生的作用 。

超微粉配方颗粒加味柴胡舒肝散对慢性应激性抑郁模型大鼠行为学及HPA轴的影响

目的:探讨加味柴胡疏肝散对慢性应激加孤养抑郁模型大鼠行为学及下丘脑-腺垂体-肾上腺皮质(HPA)轴功能的影响。方法:采用慢性不可预知应激刺激加孤养复制雄性大鼠抑郁模型(21 d)。将成模动物随机分为模型组、氟西汀组、加味柴胡疏肝散超微粉高、中、低剂量组,共5组,每组10只;另取10只正常雄性大鼠作为空白对照组。所有大鼠在造模后第21天开始给药,分别口服灌胃等体积的生理盐水(空白对照组、模型组)或氟西汀(2.1 mg/kg)及加味柴胡疏肝散超微粉药液(生药8.0 g/kg、4.0 g/kg、2.0 g/kg),连续21 d。选用旷场实验得分、动物体重、糖水消耗量等指标衡量各组大鼠行为学改变,采用酶联免疫法检测各组动物药后21 d时血浆CRH及ACTH的含量。结果:加味柴胡舒肝散各组大鼠抑郁样行为显著改善,血浆CRH及ACTH浓度比模型组显著降低,差异具有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结论:加味柴胡疏肝散超微粉配方颗粒可通过抑制HPA轴的功能从而起到抗抑郁的作用。

正交设计法优选合欢花黄酮的乙醇浸提工艺

目的 :采用正交设计法对合欢花黄酮浸提工艺参数进行优化。方法:采用分光光度法测定黄酮得率。在单因素试验的基础上,采用正交试验法,考察乙醇浓度、料液比、浸提温度、浸提时间对合欢花黄酮得率的影响,对浸提条件进行优化。结果:各因素对合欢花黄酮得率的影响程度依次为:料液比>乙醇浓度>时间>温度。最佳工艺条件为:料液比1∶20,乙醇浓度60%,浸提时间2 h,浸提温度70℃,合欢花黄酮得率为2.31%。结论:该工艺稳定、合理、可行,适用于工业化生产。

合欢花的化学成分及其药理作用的研究进展

合欢花作为安神类中药,药用历史悠久,其化学成分种类多样,且药理活性明显。合欢花中的化学成分包括黄酮类、挥发油类、三萜皂苷类、甾体类及鞣质类等。经现代药理研究表明,合欢花具有抗焦虑、抗抑郁、镇静催眠、保肝、抗氧化和抗肥胖等多种作用,具有较大的潜在药用价值。因此本文通过对合欢花的化学成分和药理作用进行综述,为其临床应用和药效物质基础研究提供依据。

KBT-ZTC絮凝纯化合欢皮多糖的工艺研究

文章研究了KBT-ZTC絮凝剂对合欢皮总多糖的絮凝纯化工艺,通过单因素和正交实验,得到优化的工艺条件:KBT-ZTC的A、B组分质量体积比为各0.40mL/g,絮凝温度35℃,絮凝时间2h,药液浓缩比1∶10,得到多糖保留率、脱蛋白率和纯度分别为90.81%、52.89%和49.65%,均高于水提醇沉工艺的纯化效果.

合欢皮总皂苷对人微血管内皮细胞体外增殖的影响

研究合欢皮总皂苷对人微血管内皮细胞增殖的药效学影响。采用人脐静脉微血管内皮细胞HMEC-1作为研究模型,经不同剂量合欢皮总皂苷作用48、72 h后,应用SRB法、光学显微镜观察合欢皮总皂苷对HMEC-1细胞增殖、形态的影响;应用台盼蓝染色法、DNA梯形条带法、流式细胞仪PI单染方法分析合欢皮总皂苷对HMEC-1细胞生长的影响。实验结果发现合欢皮总皂苷提取物具有抑制血管内皮细胞增殖的作用,其与时间、剂量均存在依赖关系,作用48 h的IC50为1.5μg/mL;合欢皮总皂苷使HMEC-1细胞周期阻滞在亚G0/G1期,高剂量作用48 h后可能引起细胞产生坏死。因此,合欢皮总皂苷可能通过改变细胞周期,部分引起细胞坏死,从而抑制人微血管内皮细胞的增殖。

合欢组织培养和快速繁殖研究

将合欢成熟胚的胚芽接种于含２，４—Ｄ２ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ０．１ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上诱导愈伤组织，再转入合ＢＡ３ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ的ＭＳ分化培养基上，２周后分化出芽，利用这些芽进行切段扩繁。将苗转入含ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ的ＭＳ生根培养基上生根，移栽成活率达９０％以上。所诱导的愈伤组织经过一年的继代培养，其分化能力仍很强。培养中发现高温能增加玻璃苗的发生频率。

不同浸种处理对合欢种子萌发的影响

通过用GA3、KNO_3、PEG6000进行浸种处理,对合欢种子进行发芽研究.结果表明:合欢成熟种子的净度可达98.23%,含水量为14.47%,千粒重为51.31 g,硬实率为83.02%,最大吸水率为26.99%,种皮对种子的吸胀具有明显的机械障碍作用.用不同浓度的GA3、KNO_3、PEG6000进行浸种处理,均能提高合欢种子的萌发率.用300 mg·L-1GA3浸种12 h,萌发率最好,为86.77%;用0.5%的KNO_3浸种12 h,萌发率为31.69%;用6%的PEG6000浸种12 h,萌发率为43.33%.

合欢皮化学成份的结构测定

从四川产合欢皮（ＡｌｂｉｚｚｉａｊｕｌｉｂｒｉｓｓｉｎＤｕｒａｚｚ）中分离出５种化合物。分别为：槲皮素（ｑｕｃｅｔｉｎ，ｃ－５），淫羊藿次甙Ｅ５（ｉｃａｒｉｓｉｄｅＥ５，ｃ－４），１２－羟－十二脂肪酸甘油酯－１＇（１２－ｈｙｄｒｏｘｙ－ｄｏｄｅ－ｃａｎｏｉｃａｃｉｄｇｌｙｃｅｒｉｄｅ－１＇，ｃ－３），β－谷甾醇（β－ｓｉｔｏｓｔｅｒｏｌ，ｃ－１），胡萝卜甙（ｄａｕｃｏｓｔｅｒｏｌ，ｃ－２），其中ｃ－１为首次得自合欢皮，ｃ－２、ｃ－３为首次得自合欢属植物。