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Flt3L及CCL5对prime/boost免疫策略中抗原特异性免疫应答的增强及抗肿瘤作用
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作者 刘春燕 郑龙 +3 位作者 尤红煜 张艳 王俊霞 宋淑霞 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期982-985,共4页
目的:研究Flt3L与CCL5作为联合佐剂在prime/boost免疫策略中对HBc抗原特异性免疫应答的增强及抗肿瘤作用。方法:将两种细胞因子质粒与携带HBc抗原的DNA疫苗经肌内注射法共免疫小鼠,免疫3次后再用原核表达的HBc颗粒蛋白或HBcDNA疫苗加强... 目的:研究Flt3L与CCL5作为联合佐剂在prime/boost免疫策略中对HBc抗原特异性免疫应答的增强及抗肿瘤作用。方法:将两种细胞因子质粒与携带HBc抗原的DNA疫苗经肌内注射法共免疫小鼠,免疫3次后再用原核表达的HBc颗粒蛋白或HBcDNA疫苗加强,观察对稳定表达HBcAg的小鼠黑色素瘤细胞(B16-HBc)的生长抑制作用;并分别采用MTT法检测荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖、流式细胞术检测脾CD8+T淋巴细胞中IFN-γ表达、ELISA法检测脾淋巴细胞培养上清IL-2、IL-4含量及乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测特异性CTL杀伤活性。结果:与对照组相比,佐剂联合DNA疫苗免疫经蛋白加强组(DDP/Adj)显著抑制肿瘤生长;佐剂联合DNA疫苗免疫组(DDD/Adj)及DDP/Adj组均可促进特异性淋巴细胞增殖反应(P<0.05),且DDP/Adj高于DDD/Adj组(P<0.05);DDD/Adj及DDP/Adj组小鼠脾脏CD8+T淋巴细胞中IFN-γ表达、IL-2表达水平及CTL杀靶活性均高于对照组(P<0.01或P<0.05),IL-4表达水平在各组无显著区别(P>0.05)。结论:在prime/boost免疫策略中,采用Flt3L与CCL5两种细胞因子联合应用可显著促进荷瘤小鼠产生抗原特异性免疫应答及抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 DNA疫苗 flt3l/ccl5/佐剂 小鼠 抗原特异性免疫应答 prime/boost策略
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Polymorphisms of CCL3L1/CCR5 genes and recurrence of hepatitis B in liver transplant recipients 被引量:1
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作者 Hong Li,Hai-Yang Xie,Lin Zhou,Wei-Lin Wang,Ting-Bo Liang,Min Zhang and Shu-Sen Zheng Key Laboratory of Combined Multi-Organ Transplan-tation,Ministry of Public Health,and Division of Hepatobiliary Pancreatic Surgery,First Affiliated Hospital,Zhejiang University School of Medicine,Hangzhou 310003,China 《Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International》 SCIE CAS 2011年第6期593-598,共6页
BACKGROUND:The genetic diversity of chemokines and chemokine receptors has been associated with the outcome of hepatitis B virus infection.The aim of this study was to evaluate whether the copy number variation in the... BACKGROUND:The genetic diversity of chemokines and chemokine receptors has been associated with the outcome of hepatitis B virus infection.The aim of this study was to evaluate whether the copy number variation in the CCL3L1 gene and the polymorphisms of CCR5Δ32 and CCR5-2459A→G (rs1799987) are associated with recurrent hepatitis B in liver transplantation for hepatitis B virus infection-related end stage liver disease.METHODS:A total of 185 transplant recipients were enrolled in this study.The genomic DNA was extracted from whole blood,the copy number of the CCL3L1 gene was determined by a quantitative real-time PCR based assay,CCR5Δ32 was detected by a sizing PCR method,and a single-nucleotide polymorphism in CCR5-2459 was detected by restriction fragment length polymorphism PCR.RESULTS:No CCR5Δ32 mutation was detected in any of the individuals from China.Neither copy number variation nor polymorphism in CCR5-2459 was associated with post-transplant reinfection with hepatitis B virus.However,patients with fewer copies (<4) of the CCL3L1 gene compared with the population median in combination with the CCR5G allele had a significantly higher risk for recurrent hepatitis B (odds ratio=1.93,95% CI:1.00-3.69;P=0.047).CONCLUSION:Patients possessing the compound decreased functional genotype of both CCL3L1 and CCR5 genes might be more likely to have recurrence of hepatitis B after transplantation. 展开更多
关键词 ccl3l1 chemokine receptor 5 copy number variation hepatitis B liver transplantation
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Flt3L与CCL5细胞因子佐剂对HBc抗原DNA疫苗特异性免疫应答的促进作用 被引量:2
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作者 刘春燕 张艳 +4 位作者 郑龙 尤红煜 王俊霞 刘须 宋淑霞 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期367-371,共5页
观察真核重组表达质粒pFlt3L及pCCL5对携带HBc抗原的DNA疫苗诱导的抗原特异性免疫应答的促进作用。将pFlt3L及pCCL5分别用脂质体的方法转染Hep G2细胞,然后采用骨髓细胞增殖及趋化小室实验检测细胞上清Flt3L及CCL5两种细胞因子的生物学... 观察真核重组表达质粒pFlt3L及pCCL5对携带HBc抗原的DNA疫苗诱导的抗原特异性免疫应答的促进作用。将pFlt3L及pCCL5分别用脂质体的方法转染Hep G2细胞,然后采用骨髓细胞增殖及趋化小室实验检测细胞上清Flt3L及CCL5两种细胞因子的生物学活性。将pFlt3L和pCCL5两种重组质粒单独或联合使用与携带HBc抗原的DNA疫苗经肌内注射法免疫小鼠,采用MTT法检测脾淋巴细胞增殖、流式细胞仪检测脾CD8+T淋巴细胞中IFN-γ表达、ELISA法检测脾淋巴细胞培养上清IL-4含量及乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测特异性CTL杀伤活性。结果:骨髓细胞增殖及趋化实验证实了Flt3L及CCL5均有生物学活性。pFlt3L和pCCL5单独或联合使用均可促进特异性淋巴细胞增殖反应(P<0.05),提高小鼠脾脏CD8+T淋巴细胞中IFN-γ表达量(P<0.05或P<0.01),IL-4表达水平在各组无显著区别(P>0.05),Flt3L+CCL5组小鼠脾细胞特异性CTL活性显著高于其他各组(P<0.05)。pFlt3L和pCCL5表达质粒联用可显著促进小鼠Th1型细胞因子的表达,并对带HBc抗原的DNA疫苗的免疫应答具有促进作用。 展开更多
关键词 DNA疫苗 佐剂 flt3l/ccl5 小鼠 抗原特异性免疫应答
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人趋化因子CCL3L1融合蛋白表达和活性分析
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作者 徐斌 石英 +4 位作者 李俊红 张薇 赵国庆 陈德喜 吴昊 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期688-692,共5页
目的人趋化因子CCL3L1进行融合蛋白原核表达和真核表达,纯化后活性分析。方法克隆人类CCL3L1 cDNA,构建两种CCL3L1表达载体,获得两个CCL3L1融合蛋白,一个在BL21大肠杆菌表达的GST-CCL3L1融合蛋白,另一个在S2果蝇细胞表达的His-CCL3L1融... 目的人趋化因子CCL3L1进行融合蛋白原核表达和真核表达,纯化后活性分析。方法克隆人类CCL3L1 cDNA,构建两种CCL3L1表达载体,获得两个CCL3L1融合蛋白,一个在BL21大肠杆菌表达的GST-CCL3L1融合蛋白,另一个在S2果蝇细胞表达的His-CCL3L1融合蛋白。同时克隆了pcDNA3.1-flag-CCR5表达载体,培养了稳定表达flag-CCR5的细胞株,进行人趋化因子CCL3L1活性分析。结果成功构建人趋化因子CCL3L1融合蛋白原核表达载体pGEX-4T和真核表达载体pMT/ BiP/V5-His,免疫沉淀法检测和Western blot法分析His-CCL3L1蛋白在浓度1nmol/L到50 nmol/L存在剂量依赖性,浓度50 nmol/L到100 nmol/L没有剂量依赖性。纯化的His-CCL3L1蛋白能特异性结合CCR5受体。结论成功表达了融合蛋白GST-CCL3L1和His-CCL3L1,果蝇细胞表达的His-CCL3L1蛋白具有与天然CCL3L1相同的生物学活性,为进一步制备CCL3L1单克隆和多克隆抗体及研究CCL3L1影响HIV-1感染的机制提供基础资料。 展开更多
关键词 ccl3l1 HIV AIDS CCR5 趋化因子
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人类CC3配体样蛋白1在果蝇Schneicier-2细胞的表达和活性分析
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作者 徐斌 石英 +3 位作者 李俊红 张薇 吴昊 陈德喜 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期538-542,共5页
目的对HIV-1辅助受体趋化因子受体5(CCR5)配体人类CC3配体样蛋白1 (CCL3L1)进行果蝇Schneider-2细胞融合蛋白表达,纯化后活性分析。方法克隆人类CCL3L1 cDNA,构建CCL3L1表达载体pMT/BiP/His,获得Schneider-2果蝇细胞表达的His-CCL3L1融... 目的对HIV-1辅助受体趋化因子受体5(CCR5)配体人类CC3配体样蛋白1 (CCL3L1)进行果蝇Schneider-2细胞融合蛋白表达,纯化后活性分析。方法克隆人类CCL3L1 cDNA,构建CCL3L1表达载体pMT/BiP/His,获得Schneider-2果蝇细胞表达的His-CCL3L1融合蛋白,同时克隆pCDNA3.1-flag-CCR5表达载体,培养稳定表达flag-CCR5的细胞株,检测表达人趋化因子CCL3L1活性。结果成功构建人趋化因子CCL3L1融合蛋白真核表达载体pMT/BiP/His,表达并纯化出融合蛋白His-CCL3L1。免疫沉淀法和Western印迹法分析发现,纯化的His-CCL3L1蛋白能特异性结合CCR5受体,His-CCL3L1蛋白在浓度1~50 nmol/L存在剂量依赖性,50~100 nmol/L无剂量依赖性。结论果蝇Schneider-2细胞表达的His-CCL3L1蛋白具有与天然CCL3L1相同的生物学活性,为进一步探讨CCL3L1影响HIV-1感染的机制奠定了基础。 展开更多
关键词 ccl3l1 HIV-1 获得性免疫缺陷综合征 受体 CCR5 趋化因子类 果蝇属
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