SERPINA5调控Fn/Integrin-β1信号通路影响食管鳞癌细胞迁移、侵袭和化疗敏感性

目的探索SERPINA5对食管鳞癌细胞迁移、侵袭能力和化疗敏感性的影响及可能机制。方法利用TCGA数据库分析SERPINA5在食管癌及癌旁正常组织中的表达水平。通过Western blot检测人食管黏膜上皮细胞系SHEE及食管鳞癌细胞系TE-1、ECA109、KYSE150中SERPINA5的表达情况。选取KYSE150/TE-1细胞系转染过表达对照(oe-NC)、过表达SERPINA5(oe-SERPINA5)慢病毒,CCK-8实验检测不同浓度(0、20、40、60、80、100μmol/L)顺铂(CDDP)处理48 h的半数抑制浓度(IC_(50))。通过细胞划痕、Transwell实验检测细胞的迁移、侵袭能力。Western blot检测上皮间质转化相关蛋白Vimentin、E-cadherin和Fn/Integrinβ1信号通路相关蛋白表达水平。结果SERPINA5在食管癌组织及食管鳞癌细胞中呈低表达。过表达SERPINA5使食管鳞癌细胞的迁移、侵袭能力降低,对顺铂的敏感性增加。SERPINA5可抑制Vimentin、Fn、Integrinβ1、p-FAK蛋白的表达,促进E-cadherin蛋白的表达。结论SERPINA5可能通过调控Fn/Integrinβ1信号通路抑制细胞的上皮间质转化,从而影响食管鳞癌细胞迁移、侵袭能力和化疗敏感性。

基于TGF-β1/p38MAPK/FN信号通路的放射性食管炎发病机制的研究

目的从黏膜修复角度探讨放射性食管炎的发病机制,并明确是否与TGF-β1/p38MAPKs/FN信号通路相关。方法HE染色法对放射性食管炎标本进行病理分析,Real-time PCR法检测标本FN、TGF-β1基因表达水平,Western blot法检测组织蛋白TGF-β1、p38、FN的表达。结果SD大鼠发生放射性食管炎后第一周体质量、进食量、进水量明显下降(P<0.05),第四周恢复;病理方面,第一、二周食管黏膜层破坏,第四周出现再生;黏膜相关细胞因子TGF-β1、FN与病理变化一致,TGF-β1、p38MAPK蛋白表达先上升后下降,而FN蛋白表达先下降后上升。结论TGF-β1/p38MAPK/FN信号通路可能参与了其黏膜修复过程。

炙马钱子胶囊抑制BIPN的临床疗效及基于lncRNA ZFAS1(XIST)活化FAK信号通路抑制神经炎症的机制

[目的]评估炙马钱子胶囊医治硼替佐米相关性周围神经病(bortezomib induced peripheral neuropathy,BIPN)的有效性,初步探究其基于长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)X失活特异性转录本(X inactive specific transcript,XIST)/锌指结构反义转录本1(ZNFX1 antisense RNA 1,ZFAS1)干预BIPN的机制。[方法]通过前瞻性非随机对照的研究方法,共收集20例符合多发性骨髓瘤中西医诊断并接受硼替佐米(bortezomib,BTZ)治疗而且发生BIPN接受炙马钱子胶囊治疗的患者,与未接受马钱子治疗的患者进行中医症候积分、神经毒性评分、周围神经病变(peripheral neuropathy,PN)分级、部分周围神经传导速度的比较。通过自身对照,采集治疗组患者的外周血液样本,使用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测炎症相关因子表达。培养DRG 50B11细胞,通过细胞增殖毒性检测筛选马钱子最佳作用浓度和时间及BTZ最佳作用时间,随机分为正常对照组、BTZ组、马钱子+BTZ组,以实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,Real-time qPCR)检测炎症相关因子及细胞总RNA相关指标表达,分析差异性及相关性。[结果]临床研究显示,与对照组比较,患者治疗后PN、中医证候积分、神经毒性评分降低,周围神经传导速度增加(P<0.05),无明显不良反应。实验研究显示,与治疗前比较,白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)、IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、神经生长因子(nerve growth factor,NGF)、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)表达均降低(P<0.05),且与时间存在显著负相关性(P<0.01)。与BTZ组比较,马钱子+BTZ组IL-17、TNF-α、IL-1β、IL-6、NGF、BDNF、lncRNA XIST、纤维粘连蛋白1(fibronectin 1,FN1)、磷酸化局部黏着斑激酶(phospho-focal adhesion kinase,p-FAK)表达降低(P<0.05),miR-96-5P、miR-1271-5P表达升高(P<0.05),lncRNA ZFAS1表达量差异无统计学意义(P>0.05);lncRNA XIST表达与IL-17、TNF-α、IL-1β、IL-6、NGF、BDNF、FN1、p-FAK表达显著正相关(P<0.01),与miR-96-5P存在中等负相关性(P<0.05),与miR-1271-5P存在极弱相关或无相关性(P>0.05)。[结论]炙马钱子胶囊在一定程度上可缓解BIPN且较为安全,其机制可能与调控lncRNA XIST,促进miR-96-5P/FN1表达,抑制p-FAK介导的神经炎症有关。

甲状腺乳头状癌的FN1表达增加与BRAF突变、免疫浸润及预后不良有关

目的:探索甲状腺乳头状癌(PTC)在诊断和预后判断的关键因素。方法:通过下载NCBI-GEO的3个甲状腺乳头状癌数据集并应用R语言进行关键基因的筛选,结合TCGA数据集及在线分析网站对其进行综合分析。同时,利用RTPCR对50例甲状腺乳头状癌及癌旁组织进行mRNA表达量检测。结果:从3个甲状腺乳头状癌GEO数据集中鉴定出142个差异表达基因,在50例甲状腺乳头状癌组织中检测到FN1表达显著上升且BRAF-V600E基因突变的甲状腺乳头状癌组织中有着更高的FN1表达水平。此外,FN1的表达水平与甲状腺乳头状癌中的不良预后及免疫浸润密切相关,基因共表达分析结果显示FN1共表达的基因富集在p53信号通路。结论:FN1可作为甲状腺乳头状癌诊断及预后标志物,同时FN1在甲状腺乳头状癌中的作用机制可能与BRAF-V600E突变、免疫浸润及p53信号通路相关。

栝楼桂枝汤通过抑制小胶质细胞活化改善大鼠脑缺血/再灌注损伤

目的探讨栝楼桂枝汤(gua lou gui zhi decoction,GLGZD)是否通过影响脑缺血/再灌注损伤大鼠皮层小胶质细胞活化来发挥脑保护作用。方法采用线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,GLGZD治疗7 d后,改良神经功能缺损评分评价各组大鼠的神经功能,小动物核磁共振检测大鼠脑梗死体积,TUNEL法检测缺血侧皮层神经细胞凋亡情况,免疫组化法检测缺血侧皮层脑组织中TNF-α蛋白的表达情况,RT-qPCR检测缺血侧皮层脑组织中神经元-小胶质细胞相互作用的相关因子TWEAK、Fn14、NIK、Rel B、CCL21、CXCR3 mRNA及小胶质细胞活化标志物IBA-1 mRNA表达情况。结果GLGZD能明显改善MCAO大鼠神经功能,显著减少MCAO大鼠脑梗死体积和缺血侧皮层神经细胞的凋亡;并可明显下调MCAO大鼠缺血侧皮层脑组织中TNF-α蛋白及TWEAK、Fn14、NIK、Rel B、CCL21、CXCR3、IBA-1 mRNA的表达。结论GLGZD能明显改善大鼠脑缺血/再灌注损伤,这一作用可能与其通过影响TWEAK/Fn14/CCL21/CXCR3信号通路抑制小胶质细胞活化有关。