新疆奶牛乳腺炎致病性金黄色葡萄球菌FnbpA基因的克隆与序列分析

采集新疆奶牛隐性乳腺炎乳样,经分离、鉴定,从中得到金黄色葡萄球菌,参考GenBank中发表的FnbpA基因序列,用Oligo 6.0软件设计一对特异性引物。提取分离株中的基因组DNA,经PCR扩增得到1 654 bp的目的片段FnbpA,将其插入PMD18-T克隆载体中构建PMD18-FnbpA重组质粒,将其转入到大肠杆菌DH5α中,并进行测序分析。结果表明,克隆的FnbpA基因片段全长1 654 bp,共编码314个氨基酸。分析表明,FnbpA蛋白基因潜在的蛋白质抗原决定簇有17个,抗原性很强,与16株FnbpA基因标准序列的同源性为77.1%-100%,本研究所克隆的FnbpA基因与AM990992株亲缘性最近。

奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌ClfA A区和FnBPA基因的克隆与串联表达

金黄色葡萄球菌是奶牛乳腺炎的重要病原[1],近50%乳腺炎由该菌引起[2],主要感染乳房、乳头导管或损伤的乳头。致病性金黄色葡萄球菌对抗生素的敏感性较低,防治较难[3]。近年研究证实,在金黄色葡萄球菌感染早期,黏附素是最重要的致病因子,只有当金黄色葡萄球菌黏附到宿主细胞上,毒素和荚膜才能表达。与金黄色葡萄球菌在奶牛乳房中定植有关的黏附素主要是Clf A和Fn BPA。