Critical Examination of the Suitability of the Folin-Ciocalteu Reagent Assay for Quantitative Analysis of Polyphenols—The Case of Olive-Mill Wastewater

The suitability of the Folin-Ciocalteu reagent (FCR) and of HPLC for analyzing polyphenols is evaluated. FCR assay is commonly used although its flows, such as overestimating polyphenol content due to interference by oxidizable species, were previously reported. The wide range of oxidizable species present in biological systems seriously compromises this assay’s reliability. Adding small amounts of protein to olive-mill wastewater (OMWW) significantly increased the apparent polyphenol content indicated by the FCR assay. The commonly used “reference” polyphenol as a standard for “total polyphenols” quantification is problematic since each polyphenol responds differently to the FCR. Conversely, HPLC may underestimate polyphenol content. No single HPLC protocol is likely to detect the whole myriad of polyphenols which may be present in a polyphenol-containing system. In analyzing 5 OMWW samples both by FCR assay and HPLC, the polyphenol content indicated by the FCR assay was up to six-fold higher than that determined by HPLC.

Folin-Ciocalteu比色法测定铜藻中褐藻多酚含量的研究

以没食子酸为标准品，使用福林酚（Folin-Ciocalteu）试剂，通过紫外-可见分光光度法，对铜藻中褐藻多酚的含量进行了测定。结果表明，测定波长为760 nm，显色试剂Folin-Ciocalteu的用量为1.25 mL，0.1 g/mL Na2CO3溶液用量为4.0 mL，定容至10 mL，显色温度为30 ℃，反应时间为60 min，多酚含量在15～50 μg/mL范围内与吸光度呈良好线性关系，回归方程为Y = 0.0138X＋0.0267，R^2=0.9993。本测定方法的平均回收率为96.18%，相对标准偏差（RSD）为2.44%。该方法的稳定性、重现性、精密度以及加标回收率的相对标准偏差均符合要求，可用于铜藻中褐藻多酚含量的测定。按照本方法测定铜藻中褐藻多酚的平均含量为17.36 mg/g（RSD = 1.25 %）。

Folin-Denis分光光度法测定五倍子中单宁酸的含量

[目的]探索Folin-Denis可见分光光度法精确快速测定五倍子中单宁酸含量的可行性。[方法]用水温浸提法消化五倍子后，其提取液中的单宁酸与Folin-Denis试剂反应形成稳定的蓝色配合物，通过测定该反应体系的吸光度来确定单宁酸的含量，同时验证最佳的检测条件。[结果]单宁酸浓度在0．002-0．010mg／ml范围内，吸光度和单宁酸浓度具有良好的线性关系，符合回归方程A=44．31c＋0．008，R。=O．999O，加标回收率为97．8％～101．8％，相对标准偏差（RSD）〈0．5％，单宁酸平均含量为82．O％。[结论]利用Folin-Denis分光光度法测定五倍子中单宁酸的含量，操作简便、快速、精密度高、重现性好、加标回收率较高。

Folin-Ciocalteu比色法测定安化黑茶中茶多酚的含量

目的建立安化黑茶中茶多酚含量的测定方法,以控制安化黑茶及其加工品质量。方法依据GB/T8313-2008,采用Folin-Ciocalteu(FC)试剂和没食子酸对照品,运用分光光度法测定黑茶中茶多酚的含量。测定条件为:0.2 mo1/L的FC试剂5 mL,7.5%Na2CO3溶液4 mL,25℃反应1 h后于765 nm处测定吸光度。结果没食子酸浓度在0.49～4.9μg/mL范围内与吸光度的线性关系良好,平均回收率为98.0%,RSD为1.4%。测得3批安化黑茶茶多酚的平均含量为2.49%,RSD为1.3%。结论建立的方法准确、可靠,可用于测定安化黑茶及其加工品中的茶多酚含量。

Folin-酚试剂法蛋白质定量测定

蛋白质分子在碱性条件下,与酚试剂作用生成蓝色化合物,其颜色深浅与蛋白质含量成正比,根据这一原理,用比色法对蛋白质的浓度进行定量测定。

Folin B光度法测定动物组织中的维生素C

报道一种测定动物组织中维生素 C的新方法 .利用 Folin B试剂氧化维生素 C可以得到在光谱 76 0 nm处特征吸收的产物 ,其测定维生素 C的线形范围为 3.3～ 4 6 .7μg/ m L ,平均标准回收率为 10 3.0 % ,相对标准偏差 (RSD)为 1.5% (n=7) .本方法能快速有效灵敏测定生物组织中的维生素 C.

流动注射—Folin-Denis法测定制革废水中单宁

在pH 12.4的硼砂-氢氧化钠缓冲溶液中,单宁能还原Folin-Denis(佛林-顿尼斯)试剂生成蓝色化合物,此蓝色化合物在760nm处有最大吸收,据此建立了一种快速的流动注射分光光度法测定制革废水中单宁的方法。讨论了试剂流速、进样体积、Folin-Denis试剂用量、溶液pH值、缓冲溶液用量和反应圈的长度对测定的影响,确定了最佳实验条件。结果表明,单宁浓度分别在0.2～10mg/L和10～50mg/L范围内符合比尔定律,方法检出限为16.84μg/L(三倍基线噪音)。对含量为500μg/L和20mg/L的单宁标准溶液分别进行14次平行测定,其相对标准偏差分别为3.2%和2.1%。制革废水中常见的离子对测定没有干扰(SO32-除外,可以通过加热预处理去除),可用于现场在线分析。本方法已用于制革废水样品中单宁的测定,测定结果和标准方法GB/T 15686-2008测得值吻合,相对标准偏差(RSD,n=8)小于4%。

橄榄多酚含量测定方法的比较

采用酒石酸铁法、福林酚试剂法和紫外分光光度法3种方法测定橄榄多酚类物质含量。结果表明:3种方法检出限及定量限的顺序为:紫外分光光度法<福林酚试剂法<酒石酸铁法,且3者存在显著性差异(P<0.05)。3种方法回收率顺序为:酒石酸铁法>福林酚试剂法>紫外分光光度法,但差异不显著(P>0.05),这3种方法都具有良好的重复性。利用福林酚试剂法与紫外分光光度法测得的多酚含量显著高于酒石酸铁法(P<0.01),其中福林酚试剂法测得的多酚含量略高于紫外分光光度法,但差异不显著(P>0.05)。同时,各方法测得的多酚含量存在良好的线性关系。实验证明紫外分光光度法灵敏度高、重复性好,且操作简单、快速、经济,是一种较理想的测定橄榄多酚的方法。

分光光度法测定仙鹤草总酚含量的方法研究

目的建立测定仙鹤草中总酚含量的测定方法。方法通过可见分光光度法,以没食子酸为标准品,采用Folin-Ciocalteus试剂,在装有仙鹤草样品的10mL容量瓶中,依次加入Folin-Ciocalteus试剂0.5mL,20%Na2CO31.7mL,在室温条件下放置90min,然后在波长760nm和660nm测定吸光度。结果总多酚浓度在0～10.4 mg/L与吸光度有良好的线性关系。760nm时的回归方程为y=0.091.8x+0.012.9,R2=0.999 3,加标回收率为98.4%～99.8%;660nm时的回归方程为y=0.084 7x-0.002 6,R2=0.999 7,加标回收率为101.2%～101.9%。结论在760nm和660nm 2个波长处测定的结果,都具有良好的精密度、重复性和回收率,可以作为测定仙鹤草多酚定量分析的参考方法。

福林-酚法测定蜂毒口服结肠定位释药微丸含量

目的建立天然蜂毒多肽口服结肠定位释药微丸的含量测定方法。方法采用福林 酚试剂法。结果蜂毒多肽质量浓度在 2 5～ 2 5 0mg/L内线性关系良好 ,相关系数为 0 9994。测定微丸样品的平均回收率为 1 0 0 5 % ,平均相对标准差为 1 1 % (n =9)。

福林试剂光度法测定马占相思树叶中多酚含量

采用福林(Folin-Ciocalteu)试剂光度法测定马占相思树叶提取液中多酚的含量。试样用乙醇(体积分数为60%)提取。分取部分提取液在加入福林试剂与100 g·L^(-1)碳酸钠溶液(1+9)的混合液20 mL,反应时间2 h,温度30℃的条件下进行显色,并于760 nm波长处测定其吸光度,以儿茶素为标样,多酚质量浓度在0.8～9.6 mg·L^(-1)范围内呈线性关系。在同一样品的萃取液中分取9份试液,分别加入儿茶素标准液,按方法操作求得方法的回收率为98.3%～102.9%。从同一试样萃取液中分取5份进行测定,求得其相对标准偏差为1.47%。

响应面设计试验法优化复方药茶饮料提取工艺参数

目的优选复方药茶饮料的最佳提取工艺,为工业化生产提供依据。方法采用福林酚法测定药茶中茶多酚的含量并作为评价工艺的指标,响应面设计试验法优选复方药茶饮料最优提取工艺参数,单因素考察提取次数。结果药茶粉碎成20目,92℃热浸法提取2次,第1次加水量为药茶量的16倍,提取时间25 min;第2次加水量为药茶量的12倍,提取时间25 min。结论按此工艺制备复方药茶饮料可最大限度的保存茶香,提取工艺科学、合理、可行。

分光光度法测定青果多酚的含量

以没食子酸为标准品,使用酚试剂,采用分光光度法对青果(Fructus canarii)多酚的含量进行检测。结果表明,酚试剂用量为1.5 mL,与6 mL质量分数10%的Na2CO3溶液混合,30℃反应60 min,于765 nm处测定吸光度,没食子酸浓度在0.5～2.5 mg/L范围内与吸光度有良好的线性关系,回归方程为y=0.121 2x+0.004 0。该方法能较准确地定量分析青果多酚含量,具有简便、快速、稳定,重现性好的优点。

长白山笃斯越桔叶片中多酚类化合物提取技术研究

本实验采用Folin试剂分光光度法来测定笃斯越桔叶片中多酚类化合物含量,获得线性关系良好的多酚类化合物标准工作曲线:y=0.0228x-0.0021(R2=0.9994),并通过对比分析、正交试验设计等试验方法优化出乙醇浸提法提取笃斯越桔多酚类化合物的最佳工艺参数:提取时间为60min,乙醇浓度为60%,料液比为1:100。

降解铬革屑微生物发酵条件的优化研究

对一株能粗降解铬革屑菌株的发酵条件进行优化,通过Folin试剂法测定了不同发酵条件下发酵液的蛋白酶活性,确定了菌株W_(1-1)的最适产酶条件。研究表明:菌株的最适产酶条件为葡萄糖9.0%,酵母膏0.5%,CaCl_20.3%,K_2HPO_40.3%,MgSO_4 0.2%,初始pH 8.5,装液量90mL(90/250mL三角瓶),接种量4.0%,种龄14h,发酵温度37℃,发酵时间36h。在此条件下,测得发酵液的蛋白酶活力为37.36u/mL,比优化前的产酶量提高了35.4%;最后,采用该菌株在最适产酶条件下对铬革屑进行降解,降解率达到71.38%。

甘露醇对转移因子口服冻干粉制剂中多肽含量测定的影响

目的:由于转移因子口服冻干粉制剂中的辅料甘露醇会对福林酚法的测定产生干扰,因此对甘露醇对测定方法的干扰进行研究,以期在实际测定中可予以预测并排除;方法:以牛血清白蛋白为对照,制备标准品并得出标准曲线,对比不含甘露醇和含0.27%甘露醇转移因子溶液的吸光度;结果:0.27%甘露醇福林酚溶液在650nm处有吸收峰,因此可能影响多肽的测定结果,不同批号的甘露醇与福林酚试剂的呈色反应不一,吸光度值最多可差4倍以上;结论:测定管减去空白管(福林酚0.27%甘露醇)的吸光度,再计算,可得到准确的实验结果。在检测以甘露醇为辅料的转移因子冻干制剂时,空白管必须要采用同批的甘露醇。

不同方法对大鲵不同部位的蛋白质含量测定

采用考马斯亮蓝法、紫外分光光度法、福林—酚试剂法,对人工养殖大鲵(Andrias davidianus)的前胸、中胸、尾部的背部及腹部肌肉的蛋白质含量进行了测定。结果表明,大鲵肌肉中不同部位的蛋白质含量存在差异,考马斯亮蓝法、紫外分光光度法、福林—酚试剂法均测得大鲵中胸腹部肌肉的蛋白质含量最高,分别为214.58、219.20、251.41 mg/g;在尾腹部最低,分别为88.05、85.71、105.28 mg/g。尽管3种方法含量测定存在差异,但其均显示蛋白质含量在大鲵体中分布为中胸>前胸>尾部。

正交试验法优化红枣多酚提取工艺

目的获取最优的红枣多酚提取工艺。方法以新疆和田枣为研究对象,在单因素实验基础上,采用正交试验设计方案优化红枣多酚超声提取工艺条件。结果 80%甲醇浓度,料液比1:12,超声温度70℃,超声时间20min条件下,红枣多酚的提取率最大。结论最优工艺条件下,红枣多酚的提取率为0.710%±0.003%。

福林酚衍生法检测眼氨肽制剂的肽含量

目的:建立福林酚衍生法测定眼氨肽制剂中多肽含量的方法。方法:使用福林试剂衍生溶液中的多肽,衍生液采用紫外-可见分光光度仪650 nm处检测,以牛血清白蛋白为对照,标准曲线法计算。结果:线性范围0.0147～0.1325 mg/ml(r=0.9992),总回收率为98.3%,RSD为1.9%。结论:该方法操作简单,检测结果显示:多数样品中多肽含量较少。

不同浓度福林酚试剂对茶多酚检测结果影响的研究

目的研究市售不同来源和不同浓度的福林试剂对固态速溶茶中茶多酚含量测定结果的影响。方法以4种速溶茶样品为检测对象,使用市售3种不同来源的福林试剂进行测定,并应用统计学方法分析不同来源的福林酚试剂对速溶茶中茶多酚检测结果的影响。结果 4种福林酚试剂检测茶多酚的相对标准偏差(relative standardd eviation,RSD)在0.88%～1.60%之间,具有较高的精密度;不同浓度的福林酚,对检测结果有显著性的差异(P<0.05),不同厂家相同浓度的福林酚试剂,对检测结果没有显著性差异(P>0.05)。结论不同浓度的福林酚,对检测结果有显著性的差异,为确保茶多酚检测结果的准确性和一致性,使用前应对福林酚试剂的浓度进行确认。