AECOPD患者血清FOXM1和CCR5水平与肺功能及预后的预测价值研究

目的探讨叉头框蛋白M1(fork head box M1,FOXM1),CC趋化因子受体5(CC chemokine receptor 5,CCR5)对老年慢性阻塞性肺疾病急性加重期(acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease,AECOPD)患者肺功能及预后的评估价值。方法选取2022年1月~2023年1月岳阳市人民医院收治的128例AECOPD患者作为急性加重期组,选择同期收治的135例稳定期COPD患者作为稳定期组,年龄、性别相仿的120例健康体检志愿者为对照组。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中FOXM1和CCR5的表达水平,肺活量计检测肺功能指标。Pearson法分析AECOPD患者血清FOXM1,CCR5与肺功能指标的相关性;多因素Logistic回归分析筛选AECOPD患者预后影响因素,受试者工作特征(receiver operator characteristic,ROC)曲线分析FOXM1,CCR5水平对AECOPD患者预后不良的评估价值。结果AECOPD组患者和稳定期组患者血清中CCR5(49.36±12.31 ng/ml,34.25±8.87 ng/ml),FOXM1(40.21±10.74 pg/ml,23.38±5.77 pg/ml)水平较对照组(14.55±4.58 ng/ml,15.06±3.55 pg/ml)明显升高,FEV1(1.15±0.13 L,1.67±0.19 L),FVC(2.93±0.30 L,3.28±0.36 L),FEV1/FVC(39.25%±3.97%,50.91%±5.01%)较对照组(1.95±0.26 L,3.57±0.44 L,54.62%±5.20%)下降,差异具有统计学意义(F=111.034~641.907,均P<0.05)。血清FOXM1,CCR5水平随着肺功能分级加重而逐渐升高,肺功能指标FEV1,FVC水平随着肺功能分级加重而逐渐降低,差异具有统计学意义(F=31.27,49.37;42.72,29.48,均P<0.05)。血清FOXM1,CCR5表达与FEV1,FVC,FEV1/FVC呈负相关(r=-0.639~‐0.479,均P<0.05)。Logistic回归分析发现,CCR5[OR(95%CI):3.380(1.944~5.876)],FOXM1[OR(95%CI):5.711(3.175~10.273)],APACHEⅡ评分[OR(95%CI):2.132(1.243~3.60)],肺功能分级[OR(95%CI):2.017(1.007~4.037)]为预后不良发生的危险因素(均P<0.05),FEV1[OR(95%CI):0.649(0.441~0.955)],FVC[OR(95%CI):0.120(0.073~0.198)]为预后不良发生的保护因素(均P<0.05)。ROC曲线结果显示,血清FOXM1,CCR5水平预测AECOPD患者预后不良的曲线下面积(area under curve,AUC)分别为0.821,0.831,二者联合预测的AUC为0.895,高于单一指标检测(Z=2.800,2.654,均P<0.05)。结论FOXM1和CCR5在AECOPD患者血清中均呈高水平,早期检测二者可作为评估AECOPD患者肺功能及预后不良的血清标志物。

和厚朴酚调控FOXM1表达对口腔鳞状细胞癌顺铂耐药的影响

目的 研究和厚朴酚调控叉头盒蛋白M1(FOXM1)表达对口腔鳞状细胞癌(OSCC)顺铂耐药的影响。方法 用药物浓度递增法建立顺铂耐药细胞株CAL27/DDP。将CAL27/DDP细胞随机分为对照组(正常培养)、模型组(4μmol·L^(-1)顺铂)、和厚朴酚组(20μmol·L^(-1)和厚朴酚+4μmol·L^(-1)顺铂)、和厚朴酚+空载组(20μmol·L^(-1)和厚朴酚+4μmol·L^(-1)顺铂+转染空载质粒)、和厚朴酚+FOXM1过表达组(20μmol·L^(-1)和厚朴酚+4μmol·L^(-1)顺铂+转染FOXM1过表达质粒)。以CCK-8法检测细胞增殖情况,以流式细胞实验检测细胞凋亡情况,以实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)实验检测细胞FOXM1、多药耐药(MDR1) mRNA表达水平,以蛋白质印迹法检测细胞FOXM1、P-糖蛋白(P-gp)表达水平。结果 对照组、模型组、和厚朴酚组、和厚朴酚+空载组、和厚朴酚+FOXM1过表达组的细胞增殖率分别为(100.00±0.00)%、(90.13±17.95)%、(43.69±6.11)%、(45.01±7.23)%和(83.94±15.72)%,细胞凋亡率分别为(3.71±0.85)%、(5.03±1.13)%、(60.12±8.64)%、(61.50±7.96)%和(6.62±0.87)%,FOXM1 mRNA相对表达水平分别为0.99±0.14、0.98±0.19、0.39±0.04、0.37±0.05和0.90±0.17,MDR1 mRNA相对表达水平分别为0.98±0.16、0.99±0.17、0.47±0.08、0.48±0.05和0.91±0.20,FOXM1蛋白相对表达水平分别为1.01±0.20、1.04±0.19、0.60±0.08、0.58±0.06和0.95±0.16,P-gp蛋白相对表达水平分别为0.90±0.21、0.93±0.15、0.49±0.06、0.47±0.09和0.85±0.17。和厚朴酚组的上述指标与对照组、模型组、和厚朴酚+FOXM1过表达组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 和厚朴酚可抑制FOXM1及耐药基因表达,增强人OSCC顺铂耐药细胞株的顺铂敏感性,减弱其耐药性。

肿瘤相关巨噬细胞通过FOXM1/Wnt/β-catenin通路影响乳腺癌内分泌抵抗

目的探讨肿瘤相关巨噬细胞(tumor associatedmacrophages,TAMs)通过叉头框M1(forkhead boxM1,FOXM1)/Wnt/β-catenin通路影响乳腺癌内分泌抵抗。方法培养他莫昔芬耐药的乳腺癌细胞,将THP-1细胞诱导成巨噬细胞(M),并进一步诱导成为肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)。MΦ在MCF-7细胞的条件培养基(conditionedmedium,CM)中培养24h后被定义为MS细胞,MΦ在MCF-7R细胞的CM中培养24h后被定义为MR细胞,MCF-7细胞在巨噬细胞的CM中培养24h后被定义为MCF-7(MΦ)细胞,MCF-7细胞在MS细胞的CM中培养24h后被定义为MCF-7(MS)细胞,MCF-7细胞在MR细胞的CM中培养24h后被定义为MCF-7(MR)细胞。借助CCK8与Transwell实验检测细胞活性与侵袭能力。qRT-PCR与Westernblot检测各组细胞中CD163、Wnt1、β-catenin、FOXM1蛋白水平。结果与MS(mRNA:1.49±0.12)(蛋白:1.15±0.12)相比,MR(mRNA:2.33±0.16)(蛋白:1.52±0.11)中CD163表达更高(t=7.28,P=0.002)(t=3.94,P=0.017),表明他莫昔芬耐药的乳腺癌细胞能诱导更多MΦ极化成TAMs。TAMs增加乳腺癌细胞中FOXM1的表达,FOXM1进一步促进Wnt/β-catenin通路激活。与MCF-7(MΦ)组细胞相比,MCF-7(MS)和MCF-7(MR)组细胞的活性与侵袭增强,MCF-7(MR)组细胞增幅最显著。较MCF-7(MΦ)组细胞,MCF-7(MS)与MCF-7(MR)组细胞中Wnt1、β-catenin、FOXM1水平显著升高,极化成最多TAMs的MCF-7(MR)组细胞中Wnt1、β-catenin、FOXM1水平最高。较MCF-7组,MCF-7(MR)组与MCF-7+pcDNA-FOXM1组中Wnt1、β-catenin水平均升高,细胞活性与侵袭能力增强,较MCF-7(MR)组,MCF-7(MR)+si-FOXM1组中Wntl、β-catenin水平降低,细胞活性与侵袭能力减弱。结论TAMs通过上调FOXM1并激活Wnt/β-catenin促进乳腺癌细胞内分泌抵抗.

白花丹素下调FoxM1对食管鳞癌细胞增殖、凋亡的影响

鉴于白花丹素(Plumbago zeylanica L.)抗癌谱广、毒性低的特点,分析白花丹素抑制食管鳞癌细胞系增殖及诱导凋亡的分子机制对其进一步的结构改造和临床应用具有重要的理论意义。本研究采用0~20μmol·L^(-1)浓度处理KYSE-30、KYSE-70和KYSE^(-1)40细胞24、48和72 h,分别用CCK-8检测细胞增殖、Annexin V和PI荧光染色检测凋亡、real-time PCR和Western blot检测FoxM1表达、双荧光素酶报告基因实验检测FoxM1启动子转录活性。并采用裸鼠体内治疗实验分析白花丹素抗肿瘤作用与FoxM1的关系。结果显示,白花丹素明显抑制食管鳞癌细胞增殖,诱导细胞凋亡,抑制细胞在体内的增殖,其有效作用浓度为5~10μmol·L^(-1)。此外,研究发现白花丹素能够通过抑制FoxM1启动子转录活性而下调FoxM1的m RNA和蛋白表达。本研究表明,白花丹素能够通过下调FoxM1基因的表达抑制食管癌细胞的体内体外增殖。