FOXO1基因多态性与2型糖尿病易感性的关联性分析

目的:探讨中国北方汉族人群叉头转录因子O1(FOXO1)基因多态性与2型糖尿病(T2DM)易感性的关系,阐明FOXO1基因与T2DM的关联性。方法:采用病例-对照研究设计,选取190例T2DM患者为病例组,193例健康人为对照组。应用基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱分析技术(MALDI-TOF-MS)检测FOXO1基因上rs2755213、rs2701880和rs10507486位点的多态性。结果:病例组和对照组rs2701880、rs2755213和rs10507486位点的等位基因和基因型频数分布差异均无统计学意义(P>0.05);3个位点组成的3种单倍型rs2755213-rs2701880、rs2701880-rs10507486、rs2755213-rs2701880-rs10507486在病例组和对照组中的分布差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:未发现FOXO1基因rs2755213、rs2701880和rs10507486多态性与中国北方汉族人群T2DM的易感性存在关联。

红景天苷调控FoxO1/β-catenin通路对2型糖尿病骨质疏松大鼠的保护作用研究

目的探讨红景天苷(SDS)对2型糖尿病骨质疏松(DOP)大鼠的保护作用及叉头框转录因子O亚族1(Fox O1)/β-连环蛋白(β-catenin)通路的影响。方法高糖高脂饲养8周,8周后腹腔注射30 mg/kg链脲佐菌素(STZ),第10周无菌条件下去除卵巢构建DOP大鼠模型,建模成功后随机分为模型组、SDS组、Fox O1激动剂组,每组8只;正常组8只大鼠常规饲料正常饲养相同时间。造模成功后第2天予SDS组灌胃36 mg/(kg·d) SDS,Fox O1激动剂组灌胃40 mg/(kg·d)白藜芦醇(Res),连续11周。血糖仪检测空腹血糖水平;苏木精-伊红(HE)检测大鼠股骨组织形态;双能X射线吸收法测定股骨组织骨密度情况;活性氧(ROS)试剂盒、超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒、丙二醛(MDA)试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)试剂盒检测血清中ROS、SOD、MDA、GSH-Px水平;蛋白免疫印迹检测股骨组织中Fox O1、β-catenin蛋白水平。结果建模后给药前,与正常组相比,模型组、SDS组、Fox O1激动剂组空腹血糖水平升高(P<0.05)。给药后,模型组骨小梁出现明显断裂、破坏严重、数量减少;SDS组、Fox O1激动剂组骨小梁明显断裂,但空隙间隔有所缓解,数量有所增加。与正常组相比,模型组空腹血糖水平,血清中ROS、MDA水平升高(P<0.05);股骨组织骨密度,血清中SOD、GSH-Px水平,股骨组织中Fox O1、β-catenin蛋白水平降低(P<0.05)。与模型组相比,SDS组、Fox O1激动剂组空腹血糖水平,血清中ROS、MDA水平降低(P<0.05);股骨组织骨密度,血清中SOD、GSH-Px水平,股骨组织中Fox O1、β-catenin蛋白水平升高(P<0.05)。结论SDS可激活Fox O1/β-catenin通路,增强抗氧化应激作用,实现对DOP大鼠的保护。

CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg细胞与2型糖尿病肾病的相关性研究

目的探讨CD4^+CD25^+Foxp3^+T细胞与2型糖尿病肾病的相关性。方法将120例研究对象分为对照组、糖尿病前期组、糖尿病无肾病组、糖尿病肾病组,每组各30例。采用流式细胞术检测CD4^+CD25^+Foxp3^+T细胞表达率,以高压液相色谱法检测糖化血红蛋白,用全自动生化分析仪检测血糖、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、三酰甘油和总胆固醇。结果与对照组比较,其余3组CD4+CD25+T细胞表达率均下降,差异有统计学意义(P<0.05),不同组别之间CD4^+CD25^+Foxp3^+T细胞表达率差异有统计学意义(P<0.01),且糖尿病肾病组明显低于其余3组,差异均有统计学意义(P<0.05)。4组之间CD4^+CD25^+Foxp3^+T细胞表达呈现随病情加重而下降的趋势。糖化血红蛋白、空腹血糖、三酰甘油、糖尿病病程与CD4^+CD25^+Foxp3^+T细胞表达率之间呈负相关(P<0.05)。结论 CD4^+CD25^+Foxp3^+T细胞表达率下降可能与2型糖尿肾病的发病相关。

2型糖尿病FOXC2基因C-1702T多态性与血清总胆固醇相关性

目的探讨叉头框C2(FOXC2)基因3’非翻译区C-1702T多态性与2型糖尿病的相关性.方法选择云南省汉族人280例,其中2型糖尿病患者159例,无糖尿病家族史的健康对照121例.应用半巢式PCR检测FOXC2基因3’非翻译区C-1702T多态性.结果在2型糖尿病组和对照组中,FOXC2基因C-1702T的基因型和等位基因频率无统计学意义(P>0.05),并与性别无关(P>0.05).在2型糖尿病患者中与FOXC2基因1702杂合子和突变型(C/T和T/T)相比,FOXC2基因1702C/C野生型者,其血清胆固醇的水平明显升高(P<0.05).结论 FOXC2基因C-1702T基因多态性与性别及2型糖尿病没有相关性.2型糖尿病患者FOXC2基因3’非翻译区C-1702T多态性与血清总胆固醇相关.

辽宁地区FoxO3a基因rs4946936多态性与2型糖尿病的相关性研究

【目的】探讨FoxO3a基因rs4946936单核苷酸多态性与辽宁地区2型糖尿病（T2DM）相关性。【方法】收集374例T2DM患者（T2DM组）及283例非糖尿病健康人群（对照组），检测两组FoxO3a基因rs4946936单核苷酸多态性，比较两组等位基因与基因型分布频率。【结果】T2DM组中C等位基因、CC基因型频率分别为76．74％、58．82％，与对照组的C等位基因频率77．21％、CC基因型58．66％比较差异无统计学意义（P〉0．05）。【结论】FoxO3a基因rs4946936单核苷酸多态性与T2DM无相关性。

FoxM1、Skp2在宫颈癌中的表达及与临床特征的关系分析

目的研究叉头转录因子蛋白1(FoxM1)、S期激酶相关蛋白2(Skp2)在宫颈癌组织中的表达及与临床特征的关系。方法选择2017年3月至2019年5月于都江堰市中医医院及深圳市龙岗区第三人民医院活检、手术所获的106例宫颈癌组织标本作为宫颈癌组,另选同期所获50例正常宫颈组织作为正常组,以免疫组化染色法对两组标本中的FoxM1、Skp2表达情况进行检测,探讨二者在宫颈癌组织中的表达特性与患者临床特征的关系。结果宫颈癌组FoxM1与Skp2阳性表达率显著高于正常组(P<0.05);二者在宫颈癌组织中的表达呈正相关(P<0.05)。FoxM1、Skp2在FIGO分期Ⅱ期、低分化、肌层浸润≥1/2组织的阳性表达率均显著高于FIGO分期Ⅰ期、高+中度分化、肌层浸润<1/2组织的阳性率(P<0.05);有淋巴结转移、脉管受侵犯的宫颈癌组织Skp2阳性率显著高于无淋巴转移、脉管受侵犯的宫颈癌组织(P<0.05)。结论 FoxM1、Skp2蛋白在宫颈癌组织中高度表达,二者的高度表达与患者临床分期、肌层的浸润程度等临床特征密切相关。

YTH结构域家族蛋白2和叉头蛋白转录因子3在肺腺癌中的表达关系研究

目的 分析YTH结构域家族蛋白2(YTHDF2)及叉头蛋白转录因子3(FOXO3)在肺腺癌病人中的表达及与预后的关系。方法 收集2020年1月至2021年5月在郑州大学第一附属医院行手术治疗的肺腺癌病人癌组织及对应的癌旁组织(距离癌组织5 cm以上)80对,收集病人临床病理资料;利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库查询YTHDF2、FOXO3基因在肺腺癌中的表达水平;采用免疫组织化学法检测YTHDF2、FOXO3蛋白在肺腺癌组织中的表达情况;分析YTHDF2、FOXO3蛋白水平与肺腺癌病人临床病理资料的关系;分析肺腺癌中YTHDF2与FOXO3基因表达水平的相关性;对病人进行为期3年的随访,分析病人3年累积生存率。结果 YTHDF2、FOXO3蛋白在肺腺癌组织中的高表达率分别为34.00%、26.00%,明显低于癌旁正常组织中79.48%、61.54%(P<0.05)。YTHDF2蛋白表达情况与肺腺癌病人年龄、淋巴结转移和分化程度相关(P<0.05);与TNM分期、性别无关(P>0.05);FOXO3蛋白表达情况与肺腺癌病人性别和分化程度相关(P<0.05);肺腺癌组织中YTHDF2蛋白高表达组和低表达组病人3年累积生存率分别为53.30%、14.00%,经log-rank比较,差异有统计学意义(P<0.05);FOXO3蛋白高表达组和低表达组病人3年累积生存率分别为64.50%、12.20%,经Log-Rank比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 YTHDF2、FOXO3在肺腺癌组织中均低表达,与病人肿瘤分化程度及3年累积生存率有关,有望成为评估肺腺癌病人预后的生物标志物。

2-十三烷酮胁迫下棉铃虫FoxAl调控CYP6B6的表达

旨在研究2-十三烷酮胁迫对棉铃虫Helicoverpa armigera叉头框A类似蛋白(forkhead box A-like protein,FoxAl)基因表达水平的影响,及FoxAl蛋白是如何调控解毒酶基因CYP6B6表达,为进一步明确FoxAl参与棉铃虫解毒代谢和生长发育过程提供依据。通过酵母自激活检测FoxAl蛋白的转录激活能力;通过凝胶阻滞检测FoxAl蛋白与CYP6B6启动子的结合能力;通过RNAi沉默棉铃虫5龄幼虫中肠内FoxAl基因,检测不同时间(24,48,72和 96 h)后FoxAl和CYP6B6的表达变化情况;最后通过qPCR检测不同浓度(5,10和20 mg/g)2-十三烷酮处理不同时间(6,12,20,30和48 h)后棉铃虫6龄幼虫中肠内FoxAl和CYP6B6的表达谱,并分析FoxAl和CYP6B6表达谱的相关性。FoxAl蛋白具有激活酵母MEL1报告基因转录的能力,且该蛋白能与CYP6B6启动子中响应植物次生物质应答的核心片段结合。利用dsFoxAl沉默棉铃虫5龄幼虫中肠内FoxAl的表达量后,CYP6B6的表达量也显著降低。2-十三烷酮处理棉铃虫6龄幼虫后,中肠内FoxAl和CYP6B6的表达量变化情况相似,基本都呈抛物线趋势,在短时间12 h内两者的表达量迅速上升后,随胁迫时间的延长两者的表达量逐渐降低;此外,FoxAl和CYP6B6的表达量变化基本呈正相关,甚至在20 mg/g的胁迫浓度以及12 h和48 h的胁迫时间下两者都是高度正相关(r=0.819,P=0.045;r=0.987,P=0.007;r=0.978,P=0.011)。棉铃虫FoxAl蛋白可能是CYP6B6的转录激活因子,在植物次生物质2-十三烷酮短期胁迫下,FoxAl的表达量增加,进一步上调CYP6B6的表达,从而参与棉铃虫对2-十三烷酮的解毒作用。

千金藤素对口腔鳞癌细胞凋亡及FOXL2、Ki67表达的影响

目的:探讨千金藤素对口腔鳞癌细胞系TSCCA的凋亡及翼状螺旋/叉头转录因子(FOXL2)、细胞增殖抗原Ki67表达的影响。方法:培养人口腔鳞癌细胞系TSCCA,采用不同浓度(10,20,30μmol·L^(-1))的千金藤素处理细胞将其分别对应设为LD组、MD组、HD组。MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测FOXL2、Ki67 mRNA表达水平,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测FOXL2、Ki67蛋白表达水平。结果:与正常口腔HIOE细胞系相比,TSCCA细胞FOXL2、Ki67 mRNA及蛋白表达均显著升高(P<0.05);与空白组相比,LD组、MD组、HD组细胞增殖抑制率与凋亡率均显著升高(P<0.05),且HD组显著高于LD组、MD组(P<0.05);与空白组相比,LD、MD、HD组FOXL2、Ki67 mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05),且HD组显著低于LD组、MD组(P<0.05)。结论:千金藤素可有效抑制口腔鳞癌细胞TSCCA的增殖,并可抑制FOXL2与Ki67表达并发挥抗肿瘤的作用进而诱导TSCCA细胞凋亡。

超促排卵Gn用量对卵泡液FOXL2水平及临床结局的影响

目的:探究卵泡液翼螺旋/叉头转录因子基因2(FOXL2)对辅助生殖技术过程中超促排卵外源性促性腺激素(Gn)用量及临床结局的影响。方法:收集2017年4月-2020年4月本院收治的体外受精-胚胎移植或卵胞浆内单精子显微注射患者98例临床资料,根据促排卵过程中促性腺激素(Gn)总剂量分为小剂量组(<2000IU,29例)、中剂量组(2000~4000IU,42例)和大剂量组(≥4000IU,27例)。获取患者临床资料、实验室指标和妊娠结局、FOXL2与人绒毛膜促性腺激素(hCG)日血清雌二醇(E_(2))水平、FOXL2水平及其影响妊娠危险因素。结果:小剂量组、中剂量组、大剂量组比较,随着患者年龄增加其基础黄体生成素(LH)增加、窦卵泡数(AFC)降低,获卵数和优质胚胎率逐渐降低,Gn用量逐渐增加,卵泡液FOXL2和hCG日E;逐渐降低(均P<0.05);3组正常受精率、临床妊娠率无差异(P>0.05)。与未妊娠组比较,妊娠组Gn剂量较低,卵泡液FOXL2水平较高(P<0.05)。经logistic回归分析,Gn剂量过多和卵泡液FOXL2降低是影响辅助生殖技术后妊娠结局危险因素[OR(95%CI)2.285(1.287~5.195),P=0.021)]。结论:患者年龄越大Gn用量越多,Gn用量增加会降低卵泡液FOXL2水平;而促排卵过程Gn用量越少,卵巢对Gn反应越大,FOXL2水平增加,卵巢对超促排卵药物反应越大,获卵数越多,优质胚胎率和临床妊娠率增加,对辅助生育结局有积极作用。

外周血FOXO3a、VCAM-1水平评估2型糖尿病患者心血管病风险的价值

目的探讨外周血叉头盒O类转录因子-3a(Foxo3a)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)评估2型糖尿病患者心血管病风险的价值。方法前瞻性选择2020年3月至2022年3月青岛市城阳区人民医院收治的2型糖尿病患者120例作为研究组,将同期体检的正常者50名作为对照组。采集所有入组者外周血,检测并对比两组FOXO3a、VCAM-1水平。将120例2型糖尿病患者按有无发生心血管疾病分为CVD组(n=45)及非CVD组(n=75),统计CVD组和非CVD组的一般资料、VCAM-1、FOXO3a水平等差异。采用单因素、多因素分析两组影响2型糖尿病患者发生心血管疾病的危险因素。采用受试者工作特征(ROC)评估外周血FOXO3a、VCAM-1水平预测2型糖尿病患者发生心血管疾病的价值。结果研究组患者VCAM-1水平(3.25±0.69)ng/mL,高于对照组[(1.76±0.59)ng/mL],FOXO3a水平为0.42±0.06,低于对照组(0.91±0.24),差异均有统计学意义(P<0.05)。CVD组体重指数≥24 kg/m2占比、有心血管疾病家族史占比、收缩压≥140 mmHg占比、VCAM-1、甘油三酯、总胆固醇水平为66.67%、57.78%、62.22%、(4.02±1.02)ng/mL、(2.67±0.52)mmol/L、(5.36±1.02)mmol/L,均高于非CVD组[33.33%、37.33%、41.33%、(3.06±0.98)ng/mL、(2.01±0.50)mmol/L、(4.12±1.01)mmol/L],FOXO3a水平0.33±0.09,低于非CVD组(0.54±0.12),差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logisitic回归分析发现,体重指数≥24 kg/m2、有心血管疾病家族史、收缩压≥140 mmHg、VCAM-1≥3.817 ng/mL、FOXO3a≤0.440、甘油三酯≥2.338 mmol/L、总胆固醇≥4.483 mmol/L均是导致2型糖尿病患者发生心血管病的危险因素(P<0.05)。经过ROC曲线分析证实,VCAM-1、FOXO3a、甘油三酯、总胆固醇可用于2型糖尿病患者发生心血管病的预测,曲线下面积分别为0.735、0.936、0.893、0.833。结论2型糖尿病患者外周血VCAM-1、FOXO3a水平存在异常表达,可用于2型糖尿病患者发生心血管病的预测。

吉马酮通过FOXO3-FOXM1轴调控甲状腺癌BCPAP细胞的增殖、迁移和化疗耐药

目的:探究吉马酮通过叉头盒蛋白O3(FOXO3)-FOX亚类M1转录因子(FOXM1)信号通路调控人甲状腺癌细胞BCPAP和多柔比星(DOX)耐药BCPAP细胞(BCPAP/DOX)的增殖、迁移和化疗耐药。方法:常规培养BCPAP细胞,用BCPAP细胞构建BCPAP/DOX细胞,用MTT法检测不同浓度吉马酮对BCPAP和BCPAP/DOX细胞增殖的影响。将BCPAP和BCPAP/DOX细胞分为Ctrl组(空白对照)、sh-NC组(转染sh-NC质粒)、低浓度吉马酮组(0.10 mmol/L)、高浓度吉马酮组(0.15 mmol/L)、高浓度吉马酮(0.15 mmol/L)+sh-FOXO3组(转染sh-FOXO3质粒),用转染试剂将sh-NC质粒和sh-FOXO3质粒转至相应的BCPAP和BCPAP/DOX细胞中。用CCK-8法、划痕愈合实验和WB法分别检测各组细胞的增殖、迁移能力,以及FOXO3、FOXM1、BAX、MMP-9和多药耐药-1(MDR-1)蛋白的表达。结果:在BCPAP和BCPAP/DOX细胞中成功地敲减了FOXO3的表达,低浓度和高浓度吉马酮均可显著抑制BCPAP和BCPAP/DOX细胞的增殖、迁移能力,降低细胞中FOMX1、MMP-9或MDR-1(BCPAP/DOX细胞)蛋白的表达,提升FOXO3和BAX蛋白的表达(均P<0.05),与低浓度比较,高浓度吉马酮的作用更为显著(均P<0.05),敲减FOXO3后可部分逆转吉马酮对这两种细胞的作用(均P<0.05)。结论:吉马酮可能通过FOXO3/FOXM1信号通路调控BCPAP和BCPAP/DOX细胞的增殖和迁移能力,降低BCPAP/DOX细胞化疗耐药性。

叉头框(Fox)转录因子家族的结构与功能

叉头框(forkheadbox,Fox)蛋白家族是一类DNA结合区具有翼状螺旋结构的转录因子,目前已有17个亚族。Fox蛋白不仅能作为典型的转录因子通过招募共激活因子等调节基因转录,有些还能直接同凝聚染色质结合参与其重构,协同其他转录因子参与转录调节。PI3K-Akt/PKB、TGFβ-Smad和MAPKinase等多条信号通路都可以影响Fox蛋白的磷酸化水平,从而调节其活性。Fox蛋白在胚胎发育、细胞周期调控、糖类和脂类代谢、生物老化和免疫调节等多种生物学过程中发挥作用。

黄芪多糖调控Sirt1/FoxO1通路抑制多囊卵巢综合征大鼠颗粒细胞自噬的研究

目的探究黄芪多糖(APS)调控沉默信息调节因子1/叉头状转录因子O1(Sirt1/FoxO1)通路对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠颗粒细胞自噬的影响。方法大鼠中分离卵巢颗粒细胞并经促卵泡刺激素受体(FSHR)免疫荧光鉴定,且CCK8检测APS对卵巢颗粒细胞增殖的影响。10-5mol/L丙酸睾丸酮、10μmol/L C2-神经酰胺作用大鼠卵巢颗粒细胞24 h诱导PCOS大鼠颗粒细胞自噬模型,CCK8检测细胞增殖情况;透射电镜观察自噬体情况;免疫印迹法检测细胞中Sirt1、Fox O1、微管相关蛋白1轻链3(LC3)蛋白表达情况。结果免疫荧光检测显示,FSHR蛋白在大鼠卵巢颗粒细胞中的平均阳性表达量93.18%>90%,可进行接下来实验。0、100、200、400μg/mL APS处理正常卵巢颗粒细胞,在贴壁0、24 h比较,细胞OD450差异均无统计学意义(P>0.05)。与正常组相比,模型组细胞核附近出现大量自噬小体,双层、单层膜包裹胞质形成封闭、圆形结构,部分自噬小体内膜溶解,自噬小体周围可见单层膜结构包裹着一些被降解的胞浆、类似自噬小体结构;100μg/mL APS组与模型组细胞结构类似,随着APS剂量的升高,自噬小体数量减少,在400μg/m L APS组时细胞正常。正常组、模型组、100、200、400μg/mL APS组在细胞贴壁0 h时,细胞OD450差异无统计学意义(P>0.05)。细胞贴壁24 h,与正常组相比,模型组细胞OD450降低(P<0.05),细胞中Sirt1、Fox O1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白水平升高(P<0.05);与模型组相比,100、200、400μg/mL APS组细胞OD450升高(P<0.05),细胞中Sirt1、Fox O1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白水平降低(P<0.05)。结论APS可以抑制PCOS大鼠颗粒细胞自噬,可能是通过抑制自噬通路Sirt1/FoxO1实现的。

白芍总苷调控Sirt1/Foxo1通路对慢性心力衰竭大鼠的保护作用研究

目的:探讨白芍总苷对慢性心力衰竭大鼠的保护作用及沉默信息调节因子1(Sirt1)/叉头状转录因子1(Foxo1)通路的影响。方法:腹主动脉缩窄法建立慢性心力衰竭大鼠模型,建模成功后随机分为模型组、白芍总苷组、Sirt1激活剂组,每组8只;假手术组除不缩窄腹主动脉外,其余操作步骤相同。白芍总苷组给予1 g/kg白芍总苷胶囊生理盐水稀释液;Sirt1激活剂组给予5 mg/kg Sirt1720生理盐水稀释液;假手术组和模型组给予等体积生理盐水,连续给药28 d。无创血压测量系统读取左室舒张末期压(LVEDP)和左心室收缩压(LVSP);苏木素-伊红(HE)、Masson染色观察心肌组织形态;酶联免疫吸附(ELISA)法检测心肌组织中纤维连接蛋白(FN)、血清白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;蛋白免疫印迹检测大鼠心肌组织中Sirt1、Foxo1、乙酰化Foxo1(Ac-Foxo1)蛋白水平。结果:模型组心肌纤维化严重,细胞破坏严重和排列紊乱,心肌细胞增生性炎症浸润现象明显;白芍总苷组、Sirt1激活剂组心肌纤维化得到缓解,细胞排列较整齐、炎症程度降低。模型组LVEDP水平、纤维化评分,心肌组织中FN水平、Ac-Foxo1蛋白水平,血清IL-1β、TNF-α水平明显高于假手术组,差异有统计学意义(q=4.661、15.058、15.834、17.689、26.087、10.157,均P<0.05);模型组LVSP水平,心肌组织中Sirt1蛋白水平明显低于假手术组,差异有统计学意义(q=9.194、18.782,均P<0.05)。与模型组相比,白芍总苷组、Sirt1激活剂组LVEDP水平、纤维化评分,心肌组织中FN水平、Ac-Foxo1蛋白水平,血清中IL-1β、TNF-α水平降低,差异有统计学意义(q=4.334、4.007、6.472、5.052、11.888、7.791、30.120、17.689、20.274、11.133、7.136、6.701,均P<0.05);而LVSP水平、心肌组织中Sirt1蛋白水平升高,差异有统计学意义(q=7.522、5.983、30.130、26.217,均P<0.05)。结论:白芍总苷对慢性心力衰竭大鼠的保护可能是通过激活Sirt1/Foxo1通路实现的。

慢病毒介导叉头框转录因子F2过表达抑制子宫内膜癌RL95-2细胞增殖与迁移

目的:探讨慢病毒介导叉头框转录因子F2(FoxF2)过表达对子宫内膜癌RL95-2细胞增殖与迁移的影响。方法:将体外培养的RL95-2细胞随机分为3组:Control、Lv-NC组和Lv-expFoxF2组。分别采用FoxF2过表达的慢病毒颗粒(Lv-expFoxF2组)和空载体对照慢病毒颗粒(Lv-NC组)感染RL95-2细胞,检测各组细胞FoxF2的mRNA和蛋白表达水平和各组细胞的增殖活性、细胞周期及体外迁移能力。结果:与Control组比较,Lv-expFoxF2组RL95-2细胞中FoxF2 mRNA和蛋白表达水平显著上调(P<0.001)。与Control组比较,Lv-expFoxF2组的细胞存活率显著降低(P<0.05),G_0/G_1期细胞百分比明显增加,S期细胞百分比明显减少(P<0.05),体外迁移细胞数显著降低(P<0.05)。结论:慢病毒介导的FoxF2过表达可抑制子宫内膜癌RL95-2细胞的增殖和迁移,诱导细胞发生G_0/G_1期阻滞。

口腔扁平苔藓患者血清血管生成素-2水平与叉头翼状螺旋转录因子阳性调节性T细胞及疾病活动度的相关性分析

目的探讨口腔扁平苔藓(OLP)患者血清血管生成素-2(Ang-2)水平与叉头翼状螺旋转录因子(Foxp3)阳性调节性T淋巴细胞(Treg)及疾病活动度相关性分析。方法选取113例不同分型OLP患者为研究对象(试验组),其中网纹型45例,充血型36例,糜烂型32例。另选取健康志愿者76例设为对照组。血清Ang-2和Foxp3+Treg水平分别采用酶联免疫吸附法和流式细胞仪进行检测。统计OLP患者临床体征评分、OLP网纹-萎缩-糜烂(RAE)病损评分和疾病活动评分。采用Pearson相关性分析明确Ang-2水平与Foxp3+Treg及各评分的相关性。结果与对照组相比,不同分型OLP患者血清Ang-2、Foxp3+Treg水平均升高(P<0.05);与网纹型相比,糜烂型和充血型患者血清Ang-2、Foxp3+Treg水平升高(P<0.05);与充血型相比,糜烂型患者血清Ang-2、Foxp3+Treg水平升高(P<0.05)。糜烂型和充血型患者临床体征评分、RAE病损评分、疾病活动评分均高于网纹型(P<0.05);与充血型患者相比,糜烂型患者上述指标水平升高(P<0.05)。OLP患者血清Ang-2水平与Foxp3+Treg、临床体征评分、RAE病损评分、疾病活动评分均呈正相关(r值分别为0.531、0.548、0.554、0.528,P<0.001)。结论血清Ang-2水平在OLP患者体内异常升高,且其升高程度与患者Foxp3+Treg水平、临床体征、病损程度及疾病活动程度呈正相关。

FOX03a-Bim信号通路在雷公藤内酯醇诱导膀胱癌T24细胞凋亡中的作用

目的探讨FOXO3a-Bim信号通路在雷公藤内酯醇诱导膀胱癌T24细胞细胞凋亡的作用。方法培养膀胱癌T24细胞，将实验分为空白对照组，雷公藤内酯醇组（50nmo/L），MK2206组（50nmo/L雷公藤内酯醇＋5μmol／LMK2206），FOXO3a-siRNA组（50nmo/L雷公藤内酯醇＋100nmo/LFOXO3a-siRNA）和Bim-siRNA组（50nmol/L雷公藤内酯醇＋100nmol/L Bim-siRNA），用噻唑蓝（MTF）法检测124细胞生长抑制率，Annexin V／Propidiumiodide（PI）双染法检测细胞凋亡，Western印迹方法检测p-Akt、Akt、p-FOXO3a、FOXO3a、Bim、Bax、cleaved-caspase3表达。结果25、50、100、250nmo/L雷公藤内酯醇处理24h（17％±9％、24％±5％、43％±8％、61％±8％）、48h（20％±7％、34％±6％、56％±7％、74％±5％）和72h（32％±8％、41％±7％、69％±7％、84％±3％）后细胞生长抑制率均明显高于对照组（P〈0．05）。24、48、72h的Ic。分别为（113±10）、（91±8）、（68±5）nmo/L。24h（10％±4％、15％±5％、29％±8％、46％±8％）、48h（16％±5％、24％±6％、40％±7％、55％±9％）和72h（27％±4％、38％±5％、50％±9％、65％±8％）后细胞凋亡率均明显高于对照组（均P〈0．05）。25、50、100nmo/L雷公藤内酯醇诱导细胞凋亡、降低p-Akt、P-FOXO3a表达同时增高Bim、Bax、cleaved-caspase3表达。FOXO3a-siRNA及Bim-siRNA降低了雷公藤内酯醇诱导Bim、Bax、cleaved-caspase3高表达。雷公藤内酯醇组细胞抑制率（30％±8％）明显高于空白对照组（P〈0．05）。MK2206组（54％±6％）、FOXO3a-siRNA组（18％±7％）和Bim-siRNA组（11％±6％）细胞抑制率亦高于对照组，但与雷公藤内酯醇组相比，MK2206组细胞抑制率明显增高，FOXO3a-siRNA组和Bim．siRNA组细胞抑制率明显降低（P〈0．05）。结论雷公藤内酯醇通过激活FOXO3a-Bim信号通路诱导细胞凋亡，抑制124细胞生长。

FOXC2基因C-512T和G—350T多态性与2型糖尿病相关性的初步分析

目的探讨叉头框C2(FOXC2)基因5'非翻译区C-512T和G-350T多态性与2型糖尿病(T2DM)的相关性。方法选择云南省汉族人群280例,其中T2DM患者159例为T2DM组,无糖尿病家族史的健康对照121名为对照(NC)组。应用PCR-RFLP检测FOXC2基因5'非翻译区C-512T和G-350T多态性。结果 T2DM组和NC组组间,FOXC2基因C 512T和G-350T的基因型和等位基因频率分布差异均无统计学意义,且与性别无关。T2DM组-512C/C基因型携带者具有更高的WHR(P<0.05),该人群患脂肪肝的比例明显升高(P<0.05)。 350G/G基因型携带者具有更高的HDL-C(P<0.05),该人群患脂肪肝的比例明显降低(P<0.01)。结论 T2DM患者FOXC2基因C-512T多态性与WHR、脂肪肝相关;G-350T多态性与HDL-C、脂肪肝相关。

RBP4与FOXO1基因单核苷酸多态性与2型糖尿病的相关性研究

目的探讨视黄醛结合蛋白（RBP4）基因、叉头框因子-1（FOXO1）基因单核苷酸多态性（SNPs）在中国汉族人群中的频率分布及其与2型糖尿病（T2DM）的相关性。方法采用TaqMan探针基因分型技术结合琼脂糖凝胶电泳技术，检测384例T2DM患者和384例健康者RBP4、FOX01共10个SNP位点的基因型及等位基因频率分布，同时测定其空腹血糖（FBG）、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）水平。结果T2DM组RBP4—803，G〉A；＋5169，C〉T；＋6969，G〉C3个SNP位点的基因型频率和等位基因频率分布与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。经logistic回归分析，各位点均未发现与rF2DM有关的基因型。单倍体表型分析也未发现与T2DM有关的单倍型。FOX01的7个SNP位点检测结果显示，rs7324943G／T的等位基因频率与基因型频率在T2DM组和对照组间差异均有统计学意SZ（χ^2=4．02，P=0．044）。分层分析显示，在年龄〉40岁和非高血压的人群中，GT基因型患T2DM的风险较GG纯合子高[比值比（OR）分别为1．47，1.80]。T等位基因携带者患T2DM的风险较非T等位基因携带者高（OR分别为1．42，1．79）。两组间rs17592236C／T的等位基因频率和基因型频率（χ^2=0．39，P=0．401），差异均无统计学意义，但分层分析发现，在年龄≤40岁的人群中，CT与TT基因型患T2DM风险较CC纯合子高（OR分别为6．33，10．15），T等位基因携带者患T2DM风险较非T等位基因携带者高（OR=7．11）。单倍体表型分析结果显示，单倍型CT可使T2DM患病风险下降约28％。结论中国汉族人群RBP4—803，G〉A；＋5169，C〉T；＋6969，G〉C的3个SNP位点与T2DM发病风险无关。FOXO1的rs7324943G／T、rs17592236C／T和单倍型CT与中国汉族人群T2DM发病风险有关，但其作用机制需深入研究。