免疫检查点抑制剂相关抗神经元抗体阳性副肿瘤神经综合征临床特征分析

目的 分析抗神经元抗体阳性免疫检查点抑制剂相关副肿瘤神经综合征(ICI-PNS)的临床特征。方法与结果 纳入2012年1月至2024年3月中国医学科学院北京协和医院诊断与治疗的5例抗神经元抗体阳性ICI-PNS患者,肿瘤类型包括小细胞肺癌(2例)、恶性黑色素瘤(1例)、霍奇金淋巴瘤(1例)、宫颈癌(1例),免疫检查点抑制剂包括程序性死亡蛋白-1抑制剂(3例)、程序性死亡蛋白配体-1抑制剂(1例)、程序性死亡蛋白-1/细胞毒性T细胞相关抗原4双抑制剂(1例)。5例患者均出现副肿瘤神经综合征的高风险表型,其中4例表现为边缘性脑炎,1例表现为快速进展的小脑综合征。血清和(或)脑脊液中检出的抗神经元抗体包括抗Hu、γ-氨基丁酸B型受体、Y染色体性别决定区相关高迁移率组盒蛋白1、代谢型谷氨酸受体5型、Yo抗体。4例神经系统症状出现在应用免疫检查点抑制剂2周内。4例病情达峰时改良Rankin量表评分为3分,1例为5分。5例患者常见不良事件评价标准分级(CTCAE)均为3级。治疗方面,停用免疫检查点抑制剂,给予糖皮质激素联合静脉注射免疫球蛋白治疗,神经系统症状均有改善。结论 中高风险抗神经元抗体是ICI-PNS的诊断标志物,可依据ICI-PNS临床表型及CTCAE分级等综合制定免疫治疗方案,停用免疫检查点抑制剂,应用糖皮质激素、静脉注射免疫球蛋白可以改善患者预后。

福尔马林皮下注入引起大鼠脊髓背角表层神经元Fos蛋白和蛋白激酶Cβ亚型的共同表达 :免疫细胞化学双标法研究(英文)

目的 :研究慢性伤害性模型大鼠脊髓背角表层神经元中Fos蛋白和蛋白激酶Cβ亚型的表达间的关系。方法 :用免疫细胞化学双标技术 ,观察了大鼠一侧后脚掌注射福尔马林 1h后 ,脊髓腰段背角神经元中Fos蛋白和蛋白激酶Cβ亚型 (PKCβ)的表达及二者的共存情况。结果 :1)注射侧背角表层中有大量Fos蛋白样免疫组化染色阳性神经元出现 ,且其中一半以上同时有PKCβ样免疫反应的增强 ,而背角表层中有PKCβ样免疫反应增强的神经元中 ,只有 1/5同时有Fos蛋白样阳性反应出现 ;2 )在注射侧背角Ⅴ～Ⅶ层中也有少量Fos蛋白样阳性反应神经元出现 ,但它们都不出现PKCβ LI反应的增强。结论 :背角表层中的双标免疫阳性神经元可能与慢性伤害性输入引起的脊髓过敏状态的形成有关。

rhIL 1β、rhIL 2和rhIL 6诱导体外培养大鼠海马神经元Fos表达——免疫组织化学研究

采用免疫组织化学方法， 观察了人重组白细胞介素１ （ｒｈＩＬ１β）、人重组白细胞介素２ （ｒｈＩＬ２）和人重组白细胞介素６ （ｒｈＩＬ６） 诱导体外培养大鼠海马神经元Ｆｏｓ表达。结果显示， 培养１２ ｄ 的海马神经元分别与ｒｈＩＬ１β、ｒｈＩＬ２ 和ｒｈＩＬ６ 培养２ｈ 后， Ｆｏｓ免疫反应（ＦｏｓＩＲ） 阳性细胞百分率增多。随着所给剂量增加，ＦｏｓＩＲ阳性细胞百分率明显增多。图像分析的结果显示，ＦｏｓＩＲ阳性细胞的平均光密度亦随所给剂量的增大而增加。以上结果表明， ｒｈＩＬ１β、ｒｈＩＬ２ 和ｒｈＩＬ６ 均能诱导体外培养大鼠海马神经元Ｆｏｓ表达。提示ｒｈＩＬ１β、ｒｈＩＬ２ 和ｒｈＩＬ６ 对体外培养的大鼠海马神经元具有生物学作用。推测Ｆｏｓ表达可能是ｒｈＩＬ１β、ｒｈＩＬ２ 和ｒｈＩＬ６ 等细胞因子发挥生物效应的重要中间途径。

小胶质细胞活化介导的神经元损伤与抑郁症的研究进展

抑郁症是一种常见的神经障碍,其发病率高,复发性高,致残性高,但发病机制未明。近年来,胶质细胞对神经元的保护与攻击作用已成为神经疾病研究的前沿方向。小胶质细胞(microglia, MG)异常活化导致神经元损伤在抑郁症发病中具有重要作用,该文通过GeenMedical、CNKI等进行文献检索,对MG活化相关通路及关键靶标在抑郁症中的研究进行归纳总结,为进一步的临床研究提供理论性的依据。

乙状结肠痛诱导大鼠远位触液神经元Fos蛋白的表达

目的:探讨远位触液神经元在乙状结肠痛刺激信息调控中的作用。方法:采用CB-HRP/Fos双重标记技术,观察乙状结肠痛大鼠远位触液神经元中Fos样免疫反应蛋白(Fos)表达的变化。结果:乙状结肠痛刺激后,不仅疼痛行为学评分显著增加,而且远位触液神经元内Fos表达的数量显著增加,与空白对照组相比有显著性差异。结论:远位触液神经元可能参与了机体对乙状结肠痛刺激信息传递或调控。

肾缺血引起大鼠儿茶酚胺神经元Fos表达(英文)

实验应用Fos蛋白和酪氨酸羟化酶 (tyrosinehydroxylase ,TH)的双重免疫组化方法 ,观察肾脏动脉阻断(renalarteryocclusion ,RAO)是否激活脑干中核团的儿茶酚胺能神经元。所得结果如下 :(1)脑干中Fos样蛋白的基础性表达低 ;RAO可诱发孤束核 (nucleustractussolitarius ,NTS)、最后区 (areapostrema ,AP)、巨细胞旁外侧核 (paragi gantocellularislateralis ,PGL)和蓝斑 (locuscoeruleus ,LC)核团中许多神经元显示Fos样免疫反应 (Fos likeimmunoreactivi ty ,FLI)。 (2 )NTS、AP、PGL和LC核团中含有较多的儿茶酚胺能神经元 ;RAO能激活其中的部分儿茶酚胺能神经元。 (3)腺苷受体阻断剂 8 苯茶碱可明显减弱RAO所致的上述效应。以上结果表明 ,肾脏短暂缺血能激活脑干内的一些神经核团以及其中的部分儿茶酚胺能神经元。此效应可能是肾缺血时腺苷释放作用于肾内腺苷受体后引起肾传入神经活动增加的结果。

Ghrelin免疫反应阳性神经元在鸡脑中的定位分布、发育性变化及禁食对其影响

本试验应用免疫组织化学方法和显微图像分析技术,研究了鸡脑Ghrelin免疫反应阳性神经元的定位分布,分析了2、16、30、44、58日龄鸡下丘脑Ghrelin免疫反应阳性神经元的发育性变化规律,并探讨了30日龄鸡分别禁食12、24、48h及重新采食4h对下丘脑Ghrelin免疫反应阳性神经元的影响。结果表明,在下丘脑弓状核、室旁核、内侧核、室周区、内侧区、外侧区,丘脑卵圆核、圆核,中脑丘中央灰质层、红核,脑桥前庭腹外侧核,小脑内侧核、小脑皮质颗粒层,大脑皮质多形细胞层等,均可观察到Ghrelin免疫反应阳性神经元;随着日龄的增长,下丘脑主要核团中的Ghrelin免疫反应阳性神经元的数量增多,免疫反应强度增强,但细胞密度下降;在禁食条件下,下丘脑Ghrelin免疫反应阳性神经元的免疫反应强度减弱,细胞密度下降。

侧脑室注射肾上腺髓质素增加大鼠心血管相关核团中c-fos的表达并激活脑内一氧化氮神经元(英文)

本研究利用Fos蛋白和一氧化氮合酶(nNOS)双重免疫组化方法,观察侧脑室注射肾上腺髓质素(adrenomedullin,ADM)对大鼠心血管相关核团中c-fos表达及一氧化氮神经元的影响,以探讨ADM在中枢的作用部位并研究其在中枢的作用是否有NO神经元参与。侧脑室注射ADM(1 nmol/kg,3 nmol/kg)诱发脑干的孤束核、最后区、蓝斑核、臂旁核和外侧巨细胞旁核,下丘脑的室旁核、视上核和腹内侧核以及前脑的中央杏仁核和外侧缰核等多个部位的心血管中枢出现大量Fos样免疫反应神经元。侧脑室注射ADM(3 nmol/kg)引起脑干的孤束核、外侧巨细胞旁核,下丘脑的室旁核、视上核内的Fos-nNOS双标神经元增加;ADM(1 nmol/kg)亦可引起室旁核、视上核内的Fos-nNOS双标神经元增加,而对孤束核、外侧巨细胞旁核内的Fos-nNOS双标神经元无影响。降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)受体拮抗剂CGRP_(8-37)(30 nmol/kg)可明显减弱此效应。以上结果表明,ADM可兴奋脑内多个心血管相关核团的神经元并激活室旁核、视上核、孤束核及外侧巨细胞旁核内的一氧化氮神经元,此效应可能部分由CGRP受体介导。

全脑缺血再灌注对大鼠延髓内脏带NADPH-d阳性神经元分布与Fos蛋白表达的影响

目的 观察大鼠全脑缺血 再灌注不同时间点延髓内脏带 (MVZ)内NADPH d阳性神经元与Fos蛋白表达的变化及相互关系。 方法 采用 4血管闭塞 (4VO)改良法以及运用NADPH d组织化学反应和Fos免疫组织化学反应及双重染色技术对全脑缺血 30min ,再灌注 2h、4h、8h、12h、2 4h、4 8h对MVZ进行研究。 结果 脑缺血组MVZ内NADPH d阳性神经元染色反应增强和Fos蛋白表达随脑缺血后再灌注时程而变化 ,并见有 15 %～ 2 0 %阳性双染细胞。 结论 在全脑缺血再灌注过程中 ,MVZ内NADPH d阳性神经元与Fos蛋白表达的分布变化具有相关性 。

急性热应激与热惊厥幼龄大鼠脑内Fos的免疫反应性及ZnT3 mRNA原位杂交研究

目的探讨热应激（HS）和热性惊厥（FC）对脑内Fos免疫反应性和ZnT3 mRNA定位表达的影响，揭示FC发生的神经解剖学机制和对海马苔藓纤维发芽相关基因ZnT3表达的影响，为临床合理干预提供依据。方法采用热水浴诱导21日龄大鼠FC模型，应用免疫组织化学技术对HS和FC大鼠Fos免疫反应性在不同脑区的定位表达进行比较分析，采用原位杂交技术对海马ZnT3 mRNA表达进行检测。结果①Fos—IR阳性细胞的分布：正常对照组大鼠大脑皮层偶见零星淡染的圆形棕褐色细胞核，无定位分布特征；HS组Fos—IR阳性细胞分布具有明显群集分布特征，丘脑内呈典型核特异性分布，主要位于丘脑中线一带，即自侧脑室的背侧部沿中线延伸至第三脑室的背侧部，下丘脑室旁核（PVN）小细胞部明显表达，而下丘脑外侧区（LH）、下丘脑腹内侧核（VMH）、弓状核（Arc）和下丘脑视上核（SON）则无表达，大脑皮层见于杏仁周皮质（PIR）、内嗅皮质（Ent）、嗅周皮质（PRH）、顶皮质（PAR）、压部后皮质（RSG、RSA）、额皮质（Fr）等区域，PIR和Ent主要见于Ⅱ层。海马内偶见阳性细胞，杏仁核阴性。FC组海马明显表达，在丘脑和下丘脑则呈弥漫性分布，缺乏明显核团分布特征，PIR和Ent全层分布，Ⅱ、Ⅳ～Ⅵ层明显表达。②FC组海马区域可见明显ZnT3 mRNA表达，而HS组和对照组无明显表达。结论①Fos—IR阳性神经元图布（mapping）：HS组特征性分布于PVN小细胞部和丘脑中线一带核团，在大脑皮层以PIR和EntII层分布为主，海马表达极弱；FC组大鼠则以海马，杏仁核，大脑皮层Ⅱ、Ⅳ-Ⅵ层为主，丘脑和下丘脑呈均匀泛化分布，丘脑中线一带缺乏核团分布特征。这种神经解剖学的差异可能是造成HS和FC大鼠行为学迥异的基础。②FC组海马ZnT3 mRNA明显表达提示FC组海马区域存在异常增高的锌离子转运。

侧脑室注射肾上腺髓质素对大鼠脑内心血管相关核团儿茶酚胺神经元及c-fos表达的影响

目的和方法:利用Fos蛋白和酪氨酸羟化酶(TH)的双重免疫组化方法,观察侧脑室注射肾上腺髓质素对大鼠心血管相关核团中儿茶酚胺神经元及c fos表达的影响,以探讨肾上腺髓质素的中枢效应是否通过激活脑内儿茶酚胺能神经元而诱发。结果:①侧脑室注射肾上腺髓质素(3nmol/kg)诱发脑干、下丘脑及前脑等多个部位的心血管中枢出现大量Fos样免疫反应神经元。②侧脑室注射肾上腺髓质素引起最后区(AP)、孤束核(NTS)、巨细胞旁外侧核(PGL)和蓝斑核(LC)内Fos TH双标神经元明显增加。③降钙素基因相关肽受体拮抗剂CGRP8-37(30nmol/kg)可明显减弱肾上腺髓质素的效应。结论:肾上腺髓质素可兴奋脑干、下丘脑及前脑等多个部位心血管相关核团的神经元,其中枢效应通过激活儿茶酚胺能神经元而诱发,降钙素基因相关肽受体介导这一效应。

鸡基底前脑胆碱能皮质投射神经元区的ChAT样免疫反应神经元

应用免疫组织化学SP法 ,对 5只产蛋高峰期鸡基底前脑胆碱能皮质投射神经元区的ChAT样免疫反应神经元的分布特征进行了研究。结果发现 :从内侧隔核至Meynert基底核 ,ChAT样免疫反应神经元呈连续性分布 ,且各区神经元的密度、大小及着色强度不均。MS、NDBV/H及旧纹体膨大部的阳性细胞分布密集 ,且突起较明显 ;原始旧纹体部阳性细胞分布稀疏 ,突起明显。结果表明 ,在鸡的基底前脑胆碱能皮质投射神经元区广泛分布着ChAT样免疫反应神经元 ,这为鸡的基底前脑—海马投射系统积累了资料 ,表明该区在鸡的学习、记忆中起着重要的调节作用。

弗氏佐剂致炎大鼠脊髓背角Fos神经元的表达

目的探讨完全弗氏佐剂(CFA)致炎性痛大鼠Fos神经元(Fos-LIN)在脊髓背角痛觉传导通路中的表达及意义。方法①16只SD大鼠随机均分为两组,于右后肢踝关节外侧皮下分别注射0.9%生理盐水(NS)或CFA50μl,观察注射前后大鼠热缩足反射潜伏期TWL的变化;②48只大鼠随机平分为两组后分别注射NS和CFA(剂量和注射部位同前)以免疫组化法检测脊髓背角Fos-LIN表达。结果①大鼠注射CFA后TWL逐渐降低,12h时为最低点,持续3d后逐渐恢复,14d时基本恢复至基础水平;②NS组脊髓背角Fos-LIN散在出现,而CFA组中Fos-LIN1h时最先出现在大鼠右侧脊髓背角I-II层,4h时出现在V-VI层的数目逐渐增多,12h时为脊髓全层出现最多,至14d时在背角各层少见,且同组左侧脊髓各层Fos-LIN在1h-14d均比较少见。结论50μlCFA能诱导大鼠产生为期2周的炎性痛觉过敏。炎症期间脊髓背角Fos神经元的持续表达与外周痛觉信号的传导和中枢的调控有关。

动脉粥样硬化兔弓状核NPY免疫反应阳性神经元的形态学变化

目的 观察动脉粥样硬化兔下丘脑弓状核NPY免疫反应阳性神经元的形态变化 ,为研究神经体液因素在动脉粥样硬化形成中的作用提供形态学依据。方法 采用免疫组织化学ABC法和计算机图像分析技术。结果 实验组下丘脑弓状核NPY免疫反应阳性神经元体积、数目及积分光密度出现明显改变 (P <0 0 5 )。

辣椒素对大鼠三叉神经降钙素基因相关肽免疫反应性神经元的影响

目的:研究辣椒素对大鼠三叉神经节降钙素基因相关肽(calcitoningene-relatedpeptide,CGRP)免疫反应性神经元的影响,探讨辣椒素治疗三叉神经的镇痛机制。方法:把辣椒素配成浓度为30mmoL/L溶液备用,20只Wister大鼠按辣椒素用量分成4组(A组20μL,B组30μL,C组50μL和D组100μL),大鼠左侧面区为对照侧,右侧面为实验侧,分别皮下注射处理大鼠三叉神经眶下支,24h取材,切片,免疫组化染色,镜检,计算机图像分析。结果:经方差分析,对照侧,A,B,C,D组实验侧CGRP平均吸光度均值分别为2.526,2.499,2.199,1.812,1.549,组间比较差异有显著性意义(F=170.645,P<0.01)。并且随着用药量的增加其差值也更大。结论:辣椒素对大鼠三叉神经节CGRP免疫反应性神经元有明显的影响,CGRP参与口面部的痛与镇痛。

远位触液神经元Fos蛋白的表达在CCI致神经病理性疼痛中的作用

目的 :研究坐骨神经松扎致神经病理性疼痛大鼠远位触液神经元Fos蛋白表达的变化。方法 :雄性SD大鼠16只,随机分为2组(n=8):假手术组、坐骨神经松扎模型(chronic contriction injury,CCI)组。采用侧脑室注射霍乱毒素B亚单位结合辣根过氧化物酶(cholera toxin subunit B labeled with horseradish peroxidase,CB-HRP)和CB-HRP/Fos免疫组织化学双重标记技术,观察大鼠远位触液神经元的Fos表达的变化。结果:各组大鼠都可见大量的CB-HRP标记神经元,组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。CCI术前该细胞簇内未见有CB-HRP/Fos双重标记神经元,CCI术后可见CBHRP/Fos双重标记神经元,尤其术后5、7、14 d,CB-HRP/Fos双重标记神经元数目显著增多(P<0.01)。与假手术组比较,CCI组1、3 d CB-HRP/Fos双重标记的神经元数目增加(P<0.05),CCI术后5、7、14 d CB-HRP/Fos双标的神经元明显增加(P<0.01)。结论:远位触液神经元可能参与坐骨神经松扎致神经病理性疼痛的形成和维持。

固定液浓度与固定时间对人乙酰胆碱受体抗体与大鼠神经元-nAchR之间免疫结合反应的影响

目的 :探讨进行膜受体免疫组化染色的标本制备时应采用的合适固定液浓度和固定时间 ,以提高反应的敏感性和稳定性。方法 :在不同固定液浓度和固定时间固定的脑切片 ,用免疫组织化学法显示人乙酰胆碱受体抗体( Ach Rab)与大鼠膜受体 Ach R的免疫结合反应。结果 :4 %多聚甲醛灌注固定 0 .5h且不经后固定组的染色结果最好 ,受体的免疫组化染色深 ,细胞数量多 ,突起长 ,其它组均不如这一组结果满意。结论 :用免疫组化检测膜受体时 ,应采用 4 %多聚甲醛灌注固定 0 .

人胎海马结构小白蛋白免疫反应性神经元的分布

目的 观察人胎海马结构小白蛋白 (PV)免疫反应性神经元的分布。 方法 取孕龄为 30周的人胎尸体 ,用ABC免疫细胞化学方法显示PV免疫反应性神经元。 结果 海马结构的各区域内均有丰富的PV免疫反应性神经元分布 ,以锥体细胞层最为密集。CA1、CA2、CA3始层PV免疫反应性神经元呈散在分布 ,胞体较小 ,多为三角形或梭形 ,细胞突起 2～ 3个 ,锥体细胞层PV免疫反应性神经元数量最多 ,分布密集 ,细胞形态多样 ,细胞的突起伸向浅层的始层和深层的分子层 ;分子层PV免疫反应性神经元较稀少。门区PV免疫反应性神经元分布密集 ,但细胞分层不明显 ,可见部分细胞的突起伸向齿状回 ;齿状回PV免疫反应性神经元集中分布于颗粒细胞层 ,其余各层有少量散在的PV免疫反应性神经元 ,细胞染色浅淡 ,无明显突起。下托复合体PV免疫反应性神经元主要分布于锥体细胞层 ,始层和分子层较稀少 ,细胞淡染 ,突起不明显。 结论 海马结构的各区域均有丰富的PV免疫反应性神经元分布 ,主要分布于锥体细胞层和齿状回的颗粒层。各区域PV免疫反应性神经元发育成熟的时间可能并不同步 ,CA1～

甘珀酸抑制大鼠唇下注射Formalin引起的伤害性行为和Sp5C神经元的Fos表达

目的探讨缝隙连接阻断剂甘珀酸(CBX)注入大鼠小脑延髓池后,对由福尔马林唇下注射所引发的伤害性行为,以及三叉神经尾侧亚核(Sp5C)神经元、星形胶质细胞的影响。方法20只SD大鼠分为生理盐水(NS)注射、Formalin注射、CBX+Formalin注射、ShamCBX+Formalin注射组,观察注射后45min内大鼠抓挠的累计时间;用免疫组织化学方法,显示Sp5CFos和胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)免疫反应性变化。结果NS组大鼠抓挠时间、范围、强度以及FosLI神经元、GFAPLI星形胶质细胞均明显小于Formalin组和ShamCBX+Formalin组,CBX+Formalin组介于NS、Formalin组之间,有明显差异。结论缝隙连接可能参与中枢神经系统对疼痛反应的调控。