lncR FOXD2-AS1调控miR-145-5p对非小细胞肺癌细胞生物学特性的影响

目的 探讨长链非编码RNA(lncR)FOXD2-AS1调控微小RNA(miR)-145-5p对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、迁移、侵袭和上皮-间质转化(EMT)等生物学特性的影响。方法 体外培养人NSCLC细胞系A549、H1299、SK-MES-1及人正常肺支气管上皮细胞系16HBE,应用RT-qPCR检测各细胞系中lncR-FOXD2-AS1和miR-145-5p表达。选取lncR-FOXD2-AS1相对高表达的SK-MES-1作为敲低实验的研究对象,将SK-MES-1细胞按照转染处理的不同分为NC组(转染si-NC)和si-FOXD2-AS1组(转染si-FOXD2-AS1),转染后,RT-qPCR检测细胞中lncR-FOXD2-AS1、miR-145-5p表达,CCK-8法检测细胞增殖活性,Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力,Western blotting法检测细胞中E-cadherin、N-cadherin、Fibronectin蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证lncR-FOXD2-AS1和miR-145-5p的相互关系。结果 与16HBE细胞相比,lncR-FOXD2-AS1在NSCLC细胞系中高表达(P<0.05),miR-145-5p在NSCLC细胞系中低表达(P均<0.05)。与NC组比较,si-FOXD2-AS1组细胞miR-145-5p表达升高(P<0.05),0、24、48 h时OD值降低(P均<0.05),迁移及侵袭穿膜细胞数减少(P均<0.05),E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05),N-cadherin、Fibronectin蛋白表达降低(P均<0.05)。双荧光素酶实验证实miR-145-5p是lncR-FOXD2-AS1的靶基因。结论 lncR-FOXD2-AS1在NSCLC细胞系中表达升高,敲低lncR-FOXD2-AS1通过靶向调控miR-145-5p抑制NSCLC细胞的增殖、迁移、侵袭和EMT进程。

子宫内膜癌组织中lncRNA HOXA-AS2、FOXD2-AS1、CRNDE的表达与患者临床病理特征及预后的关系

目的探讨子宫内膜癌组织中长链非编码RNA HOXA-AS2(lncRNA HOXA-AS2)、长链非编码RNA FOXD2-AS1(lncRNA FOXD2-AS1)、长链非编码RNA CRNDE(lncRNA CRNDE)的表达与患者临床病理特征及预后的关系。方法收集2017年10月至2020年2月于该院住院手术的119例子宫内膜癌患者术中切除的子宫内膜癌的癌组织及癌旁组织标本。回顾性分析组织中HOXA-AS2、FOXD2-AS1、CRNDE相对表达水平,以及三者表达与患者临床病理特征、3年生存率的关系。结果子宫内膜癌患者癌组织HOXA-AS2、FOXD2-AS1、CRNDE相对表达水平均高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。子宫内膜癌患者癌组织HOXA-AS2、FOXD2-AS1、CRNDE相对表达水平两两之间均呈正相关(r_(HOXA-AS2 vs.FOXD2-AS1)=0.384,P=0.001;r_(HOXA-AS2 vs.CRNDE)=0.576,P<0.001;r_(FOXD2-AS1 vs.CRNDE)=0.326,P=0.003)。HOXA-AS2、FOXD2-AS1、CRNDE高表达组中国际妇产科学联合会分期为Ⅲ+Ⅳ期、发生淋巴结转移、浸润深度为深层、分化程度为低分化的患者所占比例高于低表达组,差异有统计学意义(P<0.05)。子宫内膜癌患者癌组织HOXA-AS2低表达组3年生存率(52/60,86.67%)高于子宫内膜癌患者癌组织HOXA-AS2高表达组(40/59,67.79%),差异有统计学意义(χ^(2)=6.039,P<0.05);子宫内膜癌患者癌组织FOXD2-AS1低表达组3年生存率(53/59,89.83%)高于子宫内膜癌患者癌组织FOXD2-AS1高表达组(39/60,65.00%),差异有统计学意义(χ^(2)=10.456,P<0.05);子宫内膜癌患者癌组织CRNDE低表达组3年生存率(51/60,85.00%)高于子宫内膜癌患者癌组织CRNDE高表达组(41/59,69.49%),差异有统计学意义(χ^(2)=4.079,P<0.05)。HOXA-AS2、FOXD2-AS1、CRNDE是子宫内膜癌患者死亡的危险因素(P<0.05)。结论子宫内膜癌的癌组织HOXA-AS2、FOXD2-AS1、CRNDE的表达与患者临床病理特征及预后密切相关。

非小细胞肺癌组织中lncRNA FOXD2-AS1、miR-1913表达与患者生存期的关系

目的探究非小细胞肺癌(NSCLC)组织中长链非编码RNA(lncRNA)FOXD2-AS1、miR-1913的表达与患者生存期的关系。方法选取2017年11月—2019年11月滨州医学院烟台附属医院肿瘤中心收治的NSCLC患者100例癌组织和癌旁组织作为研究对象。根据术后3年预后情况分为生存组58例和死亡组42例,采用实时荧光定量—聚合酶链式反应(qRT-PCR)测定组织中lncRNA FOXD2-AS1、miR-1913表达水平;Pearson法分析NSCLC组织中lncRNA FOXD2-AS1与miR-1913表达水平的相关性;用Kaplan-Meier法分析NSCLC组织中lncRNA FOXD2-AS1、miR-1913表达与预后的关系;Cox分析NSCLC患者预后的影响因素。结果与癌旁组织比较,NSCLC组织中lncRNA FOXD2-AS1表达水平升高,miR-1913表达水平降低(t/P=11.439/<0.001、17.709/<0.001);Target Scan Human网址预测lncRNA FOXD2-AS1与miR-1913间存在结合位点;NSCLC组织中lncRNA FOXD2-AS1与miR-1913表达水平呈负相关(r=-0.406,P<0.001);与生存组比较,死亡组患者癌组织中lncRNA FOXD2-AS1表达水平升高,miR-1913表达水平降低(t/P=6.973/<0.001、6.307/<0.001);TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期、发生淋巴结转移、低分化程度的NSCLC患者癌组织lncRNA FOXD2-AS1高表达比例高于TNM分期为Ⅰ+Ⅱ期、未发生淋巴结转移、中/高分化程度的NSCLC患者(χ^(2)/P=5.962/0.015、5.104/0.024、6.150/0.013),而miR-1913低表达比例高于TNM分期为Ⅰ+Ⅱ期、未发生淋巴结转移、中/高分化程度的NSCLC患者(χ^(2)/P=11.457/0.001、7.695/0.006、11.349/0.001);lncRNA FOXD2-AS1高表达NSCLC患者3年生存率低于lncRNA FOXD2-AS1低表达患者,miR-1913高表达患者3年生存率高于miR-1913低表达NSCLC患者(χ^(2)/P=7.830/0.005、6.125/0.013);多因素Cox分析显示,miR-1913高是NSCLC患者预后的保护因素[OR(95%CI)=0.864(0.774~0.964)],lncRNA FOXD2-AS1高、TNMⅢ+Ⅳ期、有淋巴结转移、分化程度低是NSCLC患者预后的危险因素[OR(95%CI)=2.544(1.481~4.370)、3.647(1.614~8.242)、2.544(1.481~4.370)、2.986(1.361~6.553)]。结论NSCLC组织中lncRNA FOXD2-AS1表达水平升高,miR-1913的表达水平降低,两者与患者预后生存期有关。

宫颈癌组织lncRNA FOXD2-AS1、miR-506-5p表达变化及其临床意义

目的探讨宫颈癌组织长链非编码RNA(lncRNA)FOXD2-AS1、微小RNA-506-5p(miR-506-5p)表达变化及其临床意义。方法选择宫颈癌患者91例,取手术切除的宫颈癌组织及其配对的癌旁正常组织,采用RT-qPCR法检测lncRNA FOXD2-AS1、miR-506-5p表达。比较宫颈癌组织与癌旁正常组织lncRNA FOXD2-AS1、miR-506-5p表达变化,分析宫颈癌组织lncRNA FOXD2-AS1、miR-506-5p表达的关系以及二者表达与患者临床病理特征和预后的关系。结果宫颈癌组织lncRNA FOXD2-AS1相对表达量明显高于癌旁正常组织,miR-506-5p相对表达量明显低于癌旁正常组织(P均<0.05)。宫颈癌组织lncRNA FOXD2-AS1相对表达量与miR-506-5p相对表达量呈负相关关系(r=-0.621,P<0.01)。FIGO分期Ⅲ期、组织分化程度低分化的宫颈癌患者肿瘤组织lncRNA FOXD2-AS1、miR-506-5p表达均高于FIGO分期Ⅰ、Ⅱ期和组织分化程度高中分化的宫颈癌患者(P均<0.05)。以宫颈癌组织lncRNA FOXD2-AS1、miR-506-5p相对表达量的平均数为截断值,将患者分为lncRNA FOXD2-AS1高表达者46例与lncRNA FOXD2-AS1低表达者45例、miR-506-5p高表达者47例与miR-506-5p低表达者44例。lncRNA FOXD2-AS1高表达者3年总生存率低于lncRNA FOXD2-AS1低表达者(χ^2=22.864,P<0.05);miR-506-5p高表达者3年总生存率高于miR-506-5p低表达者(χ^2=18.485,P<0.05)。结论宫颈癌组织lncRNA FOXD2-AS1高表达、miR-506-5p低表达,二者表达呈负相关关系;早期检测宫颈癌组织lncRNA FOXD2-AS1、miR-506-5p表达可能有助于判断患者预后。

lncRNA FOXD2-AS1通过靶向miR-506-5p调控宫颈癌细胞增殖与凋亡

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)FOXD2-AS1是否通过靶向miR-506-5p调控宫颈癌细胞增殖和凋亡。方法:体外培养人宫颈癌细胞系HeLa、Siha、Caski与正常宫颈细胞株Ect1/E6E7,用qPCR检测细胞中FOXD2-AS1和miR-506-5p的表达水平。用脂质体转染技术分别构建抑制FOXD2-AS1表达和过表达miR-506-5p的宫颈癌细胞,用MTT实验和流式细胞术检测细胞的增殖和凋亡情况,WB实验检测细胞中增殖相关蛋白CyclinD1、p21和p27及凋亡相关蛋白Bcl-2、BAX和cleaved-capase-3的表达。用双荧光素酶报告基因实验验证FOXD2-AS1是否靶向miR-506-5p,并分析同时抑制FOXD2-AS1和miR-506-5p表达对宫颈癌细胞增殖与凋亡的影响。结果:与Ect1/E6E7细胞比较,宫颈癌HeLa、Siha和Caski细胞中FOXD2-AS1表达水平显著升高,miR-506-5p表达水平降低(均P<0.01)。抑制FOXD2-AS1表达可显著抑制宫颈癌细胞中CyclinD1蛋白和Bcl-2蛋白表达,并促进p21、p27和BAX、cleaved-capase-3蛋白的表达,抑制细胞增殖并促进细胞凋亡(均P<0.01)。过表达miR-506-5p可显著抑制宫颈癌细胞中CyclinD1和Bcl-2蛋白表达,促进p21和BAX蛋白表达,抑制细胞增殖并促进细胞凋亡(均P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验证实宫颈癌细胞中FOXD2-AS1靶向负调控miR-506-5p的表达(P<0.01)。抑制miR-506-5p表达逆转了抑制FOXD2-AS1表达对宫颈癌细胞增殖和凋亡的作用(P<0.01)。结论:FOXD2-AS1通过靶向miR-506-5p的表达调控宫颈癌细胞的增殖和凋亡。

LncRNA FoxD2-AS1靶向miR-324-5p对结肠癌SW480细胞增殖和迁移侵袭的影响

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)FoxD2-AS1是否通过靶向miR-324-5p影响结肠癌SW480细胞增殖、迁移和侵袭。方法RT-qPCR检测人正常结肠黏膜上皮细胞株NCM460及结肠癌细胞株SW480、HCT116和HT29中FoxD2-AS1和miR-324-5p表达水平;MTT法检测FoxD2-AS1和miR-324-5p表达对结肠癌SW480细胞增殖活力的影响;Transwell小室实验检测FoxD2-AS1和miR-324-5p表达对结肠癌SW480细胞迁移和侵袭能力的影响;双荧光素酶报告基因实验检测FoxD2-AS1是否靶向miR-324-5p。结果与NCM460细胞相比,结肠癌各细胞株中FoxD2-AS1表达明显上调(P<0.05),miR-324-5p表达明显下调(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验证实FoxD2-AS1靶向抑制miR-324-5p的表达;MTT和Transwell小室实验结果表明,干扰FOXD2-AS1和过表达miR-324-5p后结肠癌SW480细胞增殖活力均明显降低,细胞迁移和侵袭能力均明显减弱;与干扰FOXD2-AS1相比,同时干扰FOXD2-AS1和miR-324-5p后细胞增殖、迁移和侵袭能力明显增强(P<0.05)。结论lncRNA FOXD2-AS1通过靶向负调控miR-324-5p的表达影响结肠癌SW480细胞增殖、迁移和侵袭能力。

LncRNA FOXD2-AS1对胶质瘤细胞增殖及迁移能力的影响

目的研究lncRNA FOXD2-AS1对胶质瘤细胞增殖及迁移的作用。方法利用脂质体转染小干扰RNA以沉默lncRNA FOXD2-AS1基因,通过MTT、平板克隆形成实验和transwell小室等实验方法检测胶质瘤细胞的增殖及迁移。结果对照组在96h增殖率为19.8%±1.09%、20.3%±1.12%,沉默lncRNA FOXD2-AS1基因后的增殖率为7.59%±0.615%、17.9%±0.720%,差异有统计学意义。对照组的克隆形成数为119.3±11.0、162.3±50.2,沉默lncRNA FOXD2-AS1基因后克隆形成数为90.33±7.51、21.00±2.65,差异有统计学意义。对照组的细胞迁移数为134.33±32.72、377.67±61.51,沉默lncRNA FOXD2-AS1基因后细胞迁移数为43.000±15.13、196.67±23.46,差异有统计学意义。结论 lncRNA FOXD2-AS1在胶质瘤细胞中可能起促癌作用,促进胶质瘤细胞的增殖及迁移。

长链非编码RNA FOXD2-AS1对卵巢癌细胞增殖和迁移的影响

目的:观察长链非编码RNA(lnc RNA)FOXD2-AS1对卵巢癌细胞增殖和迁移的影响。方法:收集2017年2月至2017年9月华中科技大学同济医学院附属武汉儿童医院(武汉市妇幼保健院)手术切除的16例卵巢癌患者的组织标本,采用荧光实时定量聚合酶链式反应(quantitative PCR,q PCR)检测组织标本、人卵巢癌细胞系及人正常卵巢上皮细胞系中的FOXD2-AS1表达水平。将HO-8910细胞分为实验组和对照组,分别转染si RNA-FOXD2-AS1和阴性对照RNA。细胞计数CCK-8法、Transwell迁移实验分别检测沉默FOXD2-AS1表达对卵巢癌HO-8910细胞增殖活性和迁移能力的影响。生物信息学方法预测FOXD2-AS1的下游靶基因,q PCR检测下游靶基因表达,Western blot法检测葡萄糖调节蛋白94(glucose regulated protein94,GRP94)和信号通路Wnt/β-catenin的蛋白表达。结果:卵巢癌组织中的FOXD2-AS1相对表达量8.56±0.51明显高于正常癌旁组织的2.38±0.21(P<0.01),FOXD2-AS1在卵巢癌细胞系OC3、HO-8910、A2780、SKOV-3中表达明显增加(P<0.05)。下调FOXD2-AS1表达明显抑制卵巢癌HO-8910细胞的增殖活性和迁移能力(均P<0.01)。生物信息学方法显示,FOXD2-AS1靶向结合mi R-150-5p后,可靶向结合GRP94基因。实验组和对照组mi R-150-5p相对表达量分别为5.45±0.91和1.01±0.08(P<0.01),GRP94 m RNA相对表达量分别为0.32±0.05和1.02±0.11(P<0.01)。GRP94和Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达减少。结论:FOXD2-AS1在卵巢癌组织和细胞系呈高表达,下调FOXD2-AS1可调控mi R-150-5p表达,抑制卵巢癌HO-8910细胞的增殖和迁移,可发挥抑癌基因的功能。

lncRNA FOXD2-AS1靶向miR-1299抑制口腔鳞癌细胞增殖和诱导凋亡的体外研究

目的探讨lncRNAFOXD2-AS1靶向miR-1299抑制口腔鳞癌细胞增殖和诱导凋亡的体外研究。方法实验分为si-NC组、si-FOXD2-AS1组、pcDNA-NC组、pcDNA-FOXD2-AS1组、miR-NC组、miR-1299组、anti-miR-NC+si-FOXD2-AS1组、anti-miR-1299+si-FOXD2-AS1组。实时荧光定量PCR(qPCR)检测lncRNAFOXD2-AS1和miR-1299的表达水平。细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞增殖能力。流式细胞术检测细胞凋亡。双荧光素酶报告实验检测lncRNAFOXD2-AS1与miR-1299的靶向作用。Western blot法检测CyclinD1、Cleaved-caspase-3、β-连环蛋白(β-catenin)蛋白表达。结果口腔鳞癌细胞CAL27、SCC-090、HSC-3中lncRNAFOXD2-AS1表达水平显著升高,miR-1299表达水平显著降低(P<0.05)。lncRNAFOXD2-AS1低表达或miR-1299高表达均可抑制口腔鳞癌细胞增殖,促进细胞凋亡。lncRNAFOXD2-AS1靶向调控miR-1299,低表达miR-1299可以逆转lncRNAFOXD2-AS1低表达对口腔鳞癌细胞增殖和凋亡的影响。lncRNAFOXD2-AS1低表达抑制β-catenin蛋白表达,而低表达miR-1299逆转了lncRNAFOXD2-AS1低表达对β-catenin蛋白表达的抑制作用。结论干扰lncRNAFOXD2-AS1表达可能通过上调miR-1299抑制Wnt/β-catenin信号通路抑制口腔鳞癌细胞增殖,促进细胞凋亡。

FOXD2-AS1在肿瘤中的功能与调控机制的研究进展

长链非编码RNA(lncRNA)是一类长度大于200个核苷酸的非编码RNA。由于缺乏开放阅读框架,lncRNA仅有有限的或无蛋白质编码能力。lncRNA参与多种细胞过程,其异常表达可能导致肿瘤的发生发展。FOXD2-AS1在多种恶性肿瘤中呈现异常表达,并且其表达水平与患者预后密切相关。文章主要对FOXD2-AS1在肿瘤中的生物学功能与分子调控机制进行综述。

lncRNA FOXD2-AS1通过调控miR-185-5p/CCND2分子轴诱导胃癌细胞MGC-803对阿帕替尼的耐药性

目的:探讨lncRNA FOXD2-AS1(FOXD2-AS1)通过调控miR-185-5p/CCND2分子轴参与胃癌细胞对阿帕替尼耐药性的分子机制。方法:收集无锡市第五医院2016年4月至2017年12月间收治的资料完整的25例胃癌患者癌组织和相应癌旁组织标本,采用qRT-PCR检测FOXD2-AS1、miR-185-5p和CCND2在胃癌组织或细胞系中的表达水平;采用CCK-8、Transwell和Annexin V-FITC/PI双染流式术检测胃癌细胞对阿帕替尼药物的敏感性;采用双荧光素酶报告基因验证FOXD2-AS1、miR-185-5p和CCND2的靶向关系,并通过Western blotting和qRT-PCR检测其调控关系。结果:FOXD2-AS1在胃癌组织和阿帕替尼耐药细胞株中高表达;同时,过表达FOXD2-AS1可促进胃癌MGC-803/AP细胞对阿帕替尼的耐药性。双荧光素酶报告基因证实FOXD2-AS1靶向作用miR-185-5p并下调其表达水平。miR-185-5p通过抑制胃癌MGC-803/AP细胞增殖、侵袭和促进凋亡进而下调FOXD2-AS1对胃癌细胞阿帕替尼耐药性的促进作用。miR-185-5p可靶向负调控CCND2的表达,FOXD2-AS1通过下调miR-185-5p对CCND2的抑制作用进而促进胃癌MGC-803/AP细胞增殖、侵袭和抑制凋亡,从而上调胃癌细胞对阿帕替尼的耐药性。结论:FOXD2-AS1通过调控miR-185-5p/CCND2分子轴诱导胃癌细胞对阿帕替尼的耐药性。

lncRNA FOXD2-AS1靶向miR-3194-3p对口腔鳞癌细胞增殖及凋亡影响的体外研究

目的:探讨lncRNA FOXD2-AS1对口腔鳞癌细胞增殖及凋亡的影响及分子机制。方法:实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测口腔鳞癌细胞系中lncRNA FOXD2-AS1和miR-3194-3p的表达水平;将FOXD2-AS1干扰表达载体、miR-3194-3p模拟物、miR-3194-3p抑制剂+FOXD2-AS1干扰表达载体转染至CAL27细胞中,Western blot法检测蛋白表达;MTT检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告实验检测lncRNA FOXD2-AS1和miR-3194-3p的靶向关系。结果:口腔鳞癌细胞系中lncRNA FOXD2-AS1表达水平升高,miR-3194-3p表达水平降低(P<0.01)。lncRNA FOXD2-AS1低表达或miR-3194-3p高表达,口腔鳞癌CAL27细胞中细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)表达水平和细胞存活率降低,裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved-caspase-3)表达水平和细胞凋亡率升高(P<0.01);且lncRNA FOXD2-AS1低表达降低了β-连环蛋白(β-catenin)蛋白表达。lncRNA FOXD2-AS1靶向调控miR-3194-3p,低表达miR-3194-3p逆转了FOXD2-AS1低表达对口腔鳞癌细胞CAL27增殖和凋亡及Wnt/β-catenin信号通路的影响。结论:下调lncRNA FOXD2-AS1表达可能通过上调miR-3194-3p抑制Wnt/β-catenin信号通路抑制口腔鳞癌细胞增殖,促进细胞凋亡。

莪术醇下调FoxD2-AS1逆转胶质瘤细胞替莫唑胺化疗耐药的作用研究

[目的]初步明确长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)FoxD2-AS1与胶质瘤替莫唑胺(Temozolomide,TMZ)耐药的关系,并探索莪术醇逆转胶质瘤替莫唑胺耐药与FoxD2-AS1基因表达的相关性。[方法]以生物信息学分析胶质瘤lncRNA表达谱;以胶质瘤A172、U251细胞系为研究对象,采用药物浓度递增法建立耐药细胞系A172/TMZ、U251/TMZ;以流式细胞术检测干扰FoxD2-AS1对耐药细胞凋亡的影响;莪术醇以不同浓度和时间梯度处理耐药细胞后,以Hoechst染色观察细胞形态变化,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测不同浓度莪术醇处理后耐药细胞中FoxD2-AS1的表达水平。[结果]lncRNA FoxD2-AS1在胶质瘤患者瘤体组织中高表达,其高表达与患者总生存率呈负相关;敲除FoxD2-AS1可显著增加耐药细胞对TMZ的敏感性并促进细胞凋亡,诱导细胞周期发生S和G2/M期阻滞;莪术醇和TMZ联用显著增加耐药细胞凋亡的典型变化。RT-qPCR结果显示,莪术醇处理后耐药细胞内FoxD2-AS1的含量明显下降,且具有浓度和时间依赖性。[结论]敲除FoxD2-AS1基因可以逆转胶质瘤细胞TMZ耐药。莪术醇可抑制胶质瘤耐药细胞的增殖,并呈时间和剂量依赖性,其作用机制与下调FoxD2-AS1基因表达有关。

长链非编码RNA FOXD2-AS1在恶性肿瘤的研究进展

长链非编码RNA(lncRNA)是一种不编码蛋白质的RNA,其转录长度超过200个核苷酸,并且缺乏编码蛋白质的能力。近年来,越来越多的相关研究表明,lncRNA参与肿瘤细胞的多种恶性生物学过程,例如肿瘤的发生、增殖、侵袭、凋亡、分化和代谢。FOXD2相邻对链RNA 1(FOXD2-AS1)是lncRNA的一种,近年研究显示,FOXD2-AS1在多种恶性肿瘤中过表达,与肿瘤的形成、进展和转移密切相关,并且其表达水平与肿瘤患者的存活和预后有关。本文现将对FOXD2-AS1在恶性肿瘤发生发展的作用进行综述,以期寻找有效的肿瘤诊断与治疗靶点及预后标志物。

长链非编码RNA FOXD2-AS1对舌鳞癌细胞迁移、侵袭的影响

目的:研究长链非编码RNA FOXD2-AS1对舌鳞癌(tongue squamous cell carcinoma,TSCC)细胞迁移和侵袭的影响。方法:利用RT-qPCR检测长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)FOXD2-AS1在35对舌鳞癌临床组织样本中的表达,结合第8版UICC口腔癌TNM分期标准,对样本的临床病理特征信息进行分析。根据癌组织与癌旁组织的RT-qPCR检测数据,建立受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)。在舌鳞癌细胞系SCC-9和CAL-27中,应用siRNA敲低FOXD2-AS1,进行Transwell迁移和侵袭实验、克隆形成实验,分别检测其对舌鳞癌细胞迁移、侵袭及增殖的影响,Western免疫印迹实验检测其对下游信号通路分子的影响。采用SPSS 23.0软件包对数据进行统计分析。结果:RT-qPCR结果表明,与癌旁组织相比,lncRNA FOXD2-AS1在舌鳞癌组织中显著高表达,且其高表达与颈淋巴结转移以及不良临床分期相关。ROC曲线下面积(area under curve,AUC)为0.8122,95%CI为0.7141~0.9103,灵敏度和特异度分别为0.6和0.8857,cutoff值为4.122。在SCC-9和CAL-27中敲低FOXD2-AS1后,Transwell迁移和侵袭实验显示,舌鳞癌细胞的迁移和侵袭能力被抑制;克隆形成实验显示,其对舌鳞癌细胞增殖能力无显著影响。Western免疫印迹实验显示,敲低lncRNA FOXD2-AS1后,Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin分子表达下调。结论:lncRNA FOXD2-AS1在舌鳞癌中高表达,其高表达与舌鳞癌颈淋巴结转移以及不良临床分期相关,lncRNA FOXD2-AS1可促进舌鳞癌细胞的迁移侵袭能力,并可能通过Wnt/β-catenin信号通路进行调控。

lncRNA FOXD2-AS1对胶质瘤患者预后的评估及对胶质瘤细胞增殖和侵袭的影响

目的 探讨长链非编码RNA FOXD2-AS1在评估临床胶质瘤患者预后方面的意义,并研究FOXD2-AS1对胶质瘤细胞增殖和侵袭能力的影响。方法 收集2012年1月至2015年1月间空军军医大学唐都医院神经外科收治的53例胶质瘤患者的标本组织,同期取脑外伤行开颅手术的30例患者的正常脑组织作为对照组。qRT-PCR法检测两组患者组织中FOXD2-AS1的表达。然后采用χ;检验分析FOXD2-AS1的表达水平与胶质瘤患者临床参数资料之间的关系,采用Kaplan-Meier法进行生存分析并用Log-rank检验。采用单因素和多因素分析观察影响胶质瘤患者预后的因素。应用qRT-PCR法检测FOXD2-AS1在U251人胶质瘤细胞株和HEB细胞中的表达水平。利用人工合成的shRNA在U251细胞中对FOXD2-AS1表达进行干扰,采用MTT实验和Transwell实验评估U251细胞的增殖和侵袭能力。结果 与正常脑组织相比,FOXD2-AS1在胶质瘤组织中的表达显著上调(P<0.001),且与Ⅰ~Ⅱ级胶质瘤相比,Ⅲ~Ⅳ级胶质瘤中FOXD2-AS1的表达显著上调(P=0.001 2)。χ;检验分析结果显示,胶质瘤组织中FOXD2-AS1的高表达与患者的KPS评分(P=0.022)、WHO分级(P=0.024)、患者术后复发(P=0.042)有关。生存分析结果提示,与低表达组相比,高表达组患者5年生存率明显降低(P=0.002 3)。此外,单因素及多因素分析结果证实,高FOXD2-AS1表达、KPS评分<80、高WHO分级以及术后复发均为影响胶质瘤患者预后的独立风险因素(P分别为0.002,0.010,0.007,0.004)。在体外实验中发现,较之于HEB细胞,FOXD2-AS1在胶质瘤细胞株中显著过表达(P=0.005)。MTT实验和Transwell实验结果表明转染sh-FOXD2-AS1可降低U251细胞的增殖和侵袭能力(P<0.05)。结论 FOXD2-AS1在胶质瘤中表达显著增高,并与胶质瘤患者生存率、预后密切相关,抑制其表达可降低胶质瘤细胞的增殖和侵袭能力,其有望成为潜在的治疗靶点。

FOXD2-AS1、MIR4435-1HG和HOXC-AS2联合诊断胃癌的临床价值及机制研究

目的:筛选胃癌中差异性表达的长链非编码RNA(lncRNA),探讨代表性lncRNA在胃癌诊断中的潜在价值及相关机制。方法:从TCGA数据库中筛选在胃癌中差异性表达的lncRNA,通过GSE179252和GSE184336数据集以及qRT-PCR检测胃癌患者血清中lncRNA的表达水平对结果进行验证。绘制ROC曲线评价代表性lncRNA单独及联合检测的诊断效能。分析HOXC-AS2与胃癌患者临床病理参数的相关性。利用在线数据库对HOXC-AS2进行下游靶基因预测以及PPI蛋白互作分析,构建HOXC-AS2-miRNA-mRNA调控网络。结果:从TCGA数据库中筛选出3个在胃癌中差异性表达的lncRNA。TCGA-STAD、GSE179252和GSE184336数据集中FOXD2-AS1、MIR4435-1HG和HOXC-AS2联合检测胃癌的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.994、0.958和0.921。血清中检测结果发现与胃良性疾病患者相比,FOXD2-AS1、MIR4435-1HG和HOXC-AS2在胃癌患者血清中表达升高(P<0.001),三者联合检测诊断胃癌的AUC为0.843,灵敏度和特异度分别为80%和86%。HOXC-AS2与胃癌肿瘤分级有相关性(P<0.05)。HOXC-AS2可与下游mRNA竞争miR-9-5p等miRNA结合位点,调控DLX6与HOXC蛋白家族之间的相互作用。结论:FOXD2-AS1、MIR4435-1HG和HOXC-AS2的联合检测可用作胃癌的诊断标志物,HOXC-AS2可作为ceRNA促进胃癌进展。

lncRNAFOXD2-AS1靶向miR-185/SIX1轴对子宫内膜癌细胞增殖迁移及顺铂敏感性的影响

目的探讨长链非编码RNA FOXD2-AS1是否通过靶向微小RNA-185/SIX1轴影响子宫内膜癌细胞增殖迁移及顺铂敏感性。方法体外培养人子宫内膜癌细胞HEC-1-B(HEC-1-B组)和正常子宫内膜细胞HESC(HESC组),构建子宫内膜癌顺铂(DDP)耐药细胞(HEC-1-B/DDP组)。qRT-PCR检测细胞中FOXD2-AS1、miR-185和SIX1表达水平,MTT法检测各组细胞活性及子宫内膜癌细胞对顺铂药物的敏感性,Transwell检测各组细胞迁移、侵袭能力,Western blot检测细胞中SIX1蛋白表达水平。结果与HESC组相比,HEC-1-B组、HEC-1-B/DDP组细胞中FOXD2-AS1表达依次升高(P<0.05);与si-con组相比,si-FOXD2-AS1组HEC-1-B细胞FOXD2-AS1表达、迁移、侵袭显著降低(P<0.05),细胞增殖抑制率显著增加(P<0.05);与si-con组相比,si-FOXD2-AS1组miR-185表达显著升高(P<0.05);与pcDNA组相比,pcDNA-FOXD2-AS1组miR-185表达显著降低(P<0.05);与miR-con组相比,miR-185-5p组HEC-1-B细胞中miR-185表达、细胞增殖抑制率显著升高(P<0.05),细胞迁移、侵袭数、SIX1蛋白表达显著降低(P<0.05);与HEC-1-B/DDP组相比,si-FOXD2-AS1组、miR-185-5p组细胞RI值显著降低(P<0.05)。结论FOXD2-AS1可以通过调控miR-185/SIX1轴促进子宫内膜癌细胞增殖迁移,减弱细胞对顺铂敏感性。

lncRNA FOXD2-AS1对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖和凋亡的机制研究

目的探讨lncRNA FOXD2-AS1对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RASFs)增殖和凋亡的影响及分子机制。方法培养正常滑膜成纤维细胞和RASFs,用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测lncRNA FOXD2-AS1和mi R-331-3p表达水平;将正常滑膜成纤维细胞转染至RASFs中随机分为对照(NC)组、si-NC组、si-lncRNA FOXD2-AS1组、miRNC组、mi R-331-3p组、anti-miR-NC+si-lncRNA FOXD2-AS1组、anti-miR-331-3p+si-lncRNA FOXD2-AS1组,细胞计数试剂盒8检测细胞活性;流式细胞术检测RASFs细胞凋亡;双荧光素酶报告实验检测lncRNA FOXD2-AS1和mi R-331-3p的靶向关系。结果RASFs中lncRNA FOXD2-AS1表达较正常滑膜成纤维细胞升高,miR-331-3p表达较正常滑膜成纤维细胞降低(均P<0.05)。低表达lncRNA FOXD2-AS1或过表达mi R-331-3p的RASFs细胞活性降低,凋亡率升高(均P<0.05)。lncRNA FOXD2-AS1靶向调控miR-331-3p;抑制miR-331-3p表达可以逆转lncRNA FOXD2-AS1低表达对RASFs增殖和凋亡的影响。结论低表达lncRNA FOXD2-AS1通过靶向miR-331-3p抑制类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖,促进凋亡。

FOXD2-AS1与喉鳞状细胞癌临床病理参数的关系及其对喉癌细胞增殖的作用

目的:探究长链非编码RNA FOXD2-AS1在喉癌组织中的表达及其临床意义,并在喉癌细胞中探究其对细胞增殖的作用。方法:利用实时荧光定量PCR检测FOXD2-AS1在85例喉癌组织中的表达,利用单因素方差分析判断其表达与喉癌临床病理参数的关系,利用生物信息学技术探究FOXD2-AS1在头颈部肿瘤中的预后意义。利用siRNA技术干扰FOXD2-AS1在喉癌细胞TU686中的表达,并用MTT、克隆形成实验等探究FOXD2-AS1的生物学作用。使用双荧光素酶实验探究与FOXD2-AS1结合的microRNA。结果:长链非编码RNA FOXD2-AS1在喉癌组织中的表达显著高于正常组织(t=10.012,P<0.05),FOXD2-AS1的表达与喉癌侵犯的范围(T分期)显著相关(χ~2=6.41,P=0.016),与患者的年龄、性别、吸烟史、肿瘤原发部位、淋巴结转移(N分期)等无关。利用GEPIA对TCGA数据库中头颈部肿瘤进行生存分析显示,FOXD2-AS1高表达的患者预后较差(P=0.048)。在TU686细胞中使用siRNA干扰FOXD2-AS1的表达可下调细胞的克隆形成能力(t=8.053,P<0.05),MTT实验证实干扰FOXD2-AS1可下调喉癌细胞的增殖活性(t=9.337,P<0.05)。双荧光素酶实验显示FOXD2-AS1能与miR-206结合,MTT实验证实miR-206inhibitor的转染可显著促进喉癌细胞的增殖(t=4.200,P<0.05);与si-FOXD2-AS1相比,si-FOXD2-AS1+miR-206inhibitor组的喉癌细胞增殖显著增强(t=6.803,P<0.05)。结论:长链非编码RNA FOXD2-AS1与喉鳞状细胞癌的临床病理参数显著相关,其可通过结合miR-206促进喉癌细胞增殖。