丹参素介导Wnt-β-catenin通路增强丙泊酚对小鼠缺血再灌注肾组织损伤的保护作用机制

本研究基于Wnt-β-catenin通路探讨丹参素增强丙泊酚对小鼠缺血再灌注肾损伤的保护机制。本研究将96只健康雄性小鼠按照随机数字表法分为空白对照组(C组)、假手术对照组(S组)、缺血再灌注组(IR组)、缺血再灌注前进行丙泊酚处理组(IRP组)、缺血再灌注前进行丹参素处理组(IRS组)、缺血再灌注前进行丙泊酚联合丹参素处理组(IRPS组),每组16只。C组正常处理,S组仅游离双侧肾脏,IR组建立小鼠缺血再灌注模型,IRP组于小鼠缺血损伤前30min给予丙泊酚处理,IRS组于小鼠缺血损伤前30min给予丹参素处理,IRPS组于小鼠缺血损伤前30 min给予丙泊酚和丹参素处理,其余处理均与IR组相同。手术2 d后,收集小鼠血清和肾组织,检测血清中肌酐(Cr)和尿氮素(BUN)含量,检测肾组织中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;HE染色观察肾脏病理学变化;检测肾脏组织Wnt4、β-catenin、Lrp-6的mRNA和蛋白表达水平。结果表明,IR组、IRS组、IRP组、IRPS组的Cr、BUN、MDA水平显著高于C组和S组,且IRPS组的Cr、BUN、MDA水平显著低于IR组、IRP组和IRS组,差异均有显著性(P <0.05);IR组、IRS组、IRP组、IRPS组的SOD活性显著低于C组和S组,且IRPS组的SOD活性显著高于IR组、IRP组和IRS组,差异均有显著性(P <0.05);IR组、IRS组、IRP组、IRPS组的HE染色肾损害程度显著高于C组和S组,且IRPS组的肾损害程度显著低于IR组、IRP组和IRS组,差异均有显著性(P <0.05);IR组、IRS组、IRP组、IRPS组的Wnt4、β-catenin、Lrp-6的mRNA和蛋白水平显著高于C组和S组,IRP组、IRS组、IRPS组的Wnt4、β-catenin、Lrp-6的mRNA和蛋白表达水平显著高于IR组,且IRPS组的Wnt4、β-catenin、Lrp-6的mRNA和蛋白水平显著高于IRP组,差异均有显著性(P <0.05)。丹参素可增强丙泊酚对小鼠缺血再灌注肾组织损伤的保护作用,减小肾组织损伤,其机制可能是通过上调Wnt-β-catenin通路达到肾保护作用。

橙花叔醇通过Wnt-β-catenin通路调控黑色素瘤细胞的恶性生物学行为

目的:探讨橙花叔醇通过Wnt-β-catenin通路抑制黑色素瘤A-375和WM-115细胞恶性生物学行为的分子机制。方法:体外培养黑色素瘤细胞A-375和WM-115,用不同浓度的橙花叔醇处理,采用SRB法和克隆形成实验、FCM术、Transwell实验和细胞划痕实验、DCFH-DA染色法、qPCR和WB法分别检测橙花叔醇对A-375和WM-115细胞的增殖能力、细胞周期和凋亡、迁移能力、活性氧(ROS)水平和Wnt-β-catenin通路及其下游相关基因和相关蛋白表达的影响。利用ULCAN和GEPIA2数据库分析黑色素瘤中Wnt-β-catenin通路的激活与患者预后的关系。结果:与对照组比较,橙花叔醇处理组A-375和WM-115细胞的增殖能力受明显抑制(均P<0.01)、细胞周期阻滞于G2/M期(P<0.05或P<0.01)、细胞凋亡率增加(均P<0.01)、迁移能力降低(P<0.05或P<0.01)、ROS水平升高(均P<0.01)、Wnt-β-catenin通路被抑制而其下游基因和蛋白表达明显上调(均P<0.01)。数据库数据分析显示,WNT1基因高表达患者OS低于低表达患者(P<0.01)。结论:橙花叔醇通过上调A-375和WM-115细胞中ROS水平影响Wnt-β-catenin通路,从而抑制其恶性生物学行为;Wnt-β-catenin通路可能是黑色素瘤治疗的潜在靶点。

Wnt-1/β-catenin通路在亚硒酸钠抑制人增生性瘢痕成纤维细胞体外增殖过程中表达研究

目的:研究Wnt-1/β-catenin信号通路在亚硒酸钠抑制人增生性瘢痕(Hypertrophic scar,HS)成纤维细胞(Fibroblasts,FB)体外增殖的过程中的作用。方法:培养HSFB,设置试验组与对照组,试验组分为5组(A、B、C、D、E组),分别加入等量含2.5、5、10、20、40μmol/L浓度的亚硒酸钠10%胎牛血清的培养基,对照组加入等量的10%胎牛血清培养基(即0μmol/L浓度的亚硒酸钠),在24 h后进行细胞免疫组化检测Wnt-1和β-catenin蛋白在不同浓度亚硒酸钠的作用下在FB表达情况。结果:细胞免疫组化显示亚硒酸钠在0~40μmol/L,随着浓度的递增,FB内Wnt-1和β-catenin表达的阳性细胞数逐渐减少(P<0.05)。在未加入亚硒酸钠培养的HSFB中Wnt-1和β-catenin蛋白呈现强阳性表达。结论:亚硒酸钠在抑制HSFB的增殖过程中,对Wnt-1/β-catenin信号通路的抑制起到关键性的作用。

miR-182对直肠癌细胞增殖、侵袭及Foxo3a/Wnt/β-catenin通路的调节作用

目的研究miR-182对直肠癌细胞增殖、侵袭及Foxo3a/Wnt/β-catenin通路的调节作用。方法收集2016年6月—2019年7月手术切除的直肠癌组织及癌旁组织,培养直肠癌细胞株HT29、SW620、HCT-116及正常肠上皮细胞HIEC,检测miR-182的表达量。将SW620细胞进行分组处理,对照组用不含药物的RPMI-1640培养基处理,NC组转染NC模拟物、miR-182组转染miR-182模拟物。采用MTS法检测各组细胞增殖活力,采用Transwell检测侵袭活力,采用Western blot检测Foxo3a/Wnt/β-catenin通路分子的表达。结果直肠癌组织中miR-182的表达量(2.14±0.55)明显高于癌旁组织(1.06±0.24)(P<0.05);HT29、SW620、HCT-116细胞中miR-182的表达量明显高于HIEC(P<0.05),且SW620细胞中miR-182表达增加最显著;miR-182组细胞的增殖活力(0.92±0.15)明显高于对照组(0.52±0.08)和NC组(0.55±0.07)(P<0.05),侵袭数目(39.49±7.61)明显多于对照组(23.25±5.85)和NC组(21.84±4.77)(P<0.05),迁移数目(44.12±9.29)明显多于对照组(29.39±6.18)和NC组(32.83±6.68)(P<0.05);Foxo3a的表达水平(0.36±0.07)明显低于对照组(0.83±0.15)和NC组(0.86±0.12)(P<0.05);Wnt2的表达水平(0.86±0.15)明显高于对照组(0.62±0.09)和NC组(0.58±0.07)(P<0.05);β-catenin的表达水平(0.79±0.15)明显高于对照组(0.41±0.07)和NC组(0.45±0.08)(P<0.05)。结论miR-182能够促进直肠癌细胞的增殖和侵袭,其机制可能与靶向Foxo3a/Wnt/β-catenin通路相关。

Wnt-β-catenin信号分子在急性肾损伤大鼠肾组织中的表达及意义

目的:探讨Wnt-β-catenin信号分子在急性肾损伤大鼠肾组织中的表达。方法:将48只大鼠按照随机数字表法分为正常对照组(Control组)、假手术组(Sham组)和缺血再灌注组(IRI组),每组16只;Control组正常喂养,IRI组建立大鼠缺血再灌注损伤模型,Sham组背侧切开后直接将伤口关闭。分别于术后第1天、第3天、第5天、第7天处死4只大鼠,观察三组大鼠肾脏组织病理学改变,并检测三组大鼠血肌酐、尿素氮水平;采用免疫印迹法检测三组大鼠肾脏组织Wnt4、β-catenin、Lrp6蛋白表达,实时定量RT-PCR检测肾脏组织Wnt4、β-catenin、Lrp6 mRNA表达。结果:Control组、Sham组各时段肾脏损伤评分、血肌酐比较差异无统计学意义(P>0.05);IRI组术后第1天至第7天肾脏损伤评分、血肌酐、尿素氮先上升后逐渐降低,其中术后第3天肾脏损伤评分、肌酐、尿素氮最高;IRI组术后1、3、5、7 d肾脏损伤评分、血肌酐、尿素氮显著高于Control组、Sham组(P<0.05)。Control组、Sham组各时段Wnt4、β-catenin、Lrp6蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);IRI group术后Wnt4、β-catenin、Lrp6蛋白逐渐增加,至术后第5天达表达高峰,随后逐渐降低;IRI组术后1、3、5、7 d Wnt4、β-catenin、Lrp6蛋白均显著高于Control组、Sham组(P<0.05);Control组、Sham组各时段Wnt4、β-catenin、Lrp6 mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05);IRI group术后Wnt4、β-catenin、Lrp6 mRNA显著增加,至术后第3天达表达高峰,随后逐渐降低;IRI组术后1、3、5、7 d Wnt4、β-catenin、Lrp6 mRNA均显著高于Control组、Sham组(P<0.05)。结论:Wnt-β-catenin信号分子在急性肾损伤组织中表达显著增加,激活的Wnt-β-catenin信号通路参与了肾脏组织的修复过程。

Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的检测对甲状腺腺瘤患者及临床意义

本研究旨在探讨甲状腺腺瘤患者Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白Wnt-1,β-catenin的检测及临床意义。采用RT-PCR方法检测Wnt-1,β-catenin mRNA表达情况,采用Western blot和免疫组化方法检测Wnt-1,β-catenin蛋白表达情况。结果显示,与对照组相比,疾病组Wnt-1,β-catenin mRNA和蛋白的表达量均升高。肿瘤组织中,疾病组的Wnt-1蛋白表达阳性率和β-catenin蛋白表达阳性率均高于对照组。结果表明,Wnt-1表达与甲状腺腺瘤患者肿瘤直径密切相关。β-catenin表达也与甲状腺腺瘤患者肿瘤直径密切密切相关。甲状腺腺瘤患者Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白Wnt-1,β-catenin蛋白表达上调,且其表达与肿瘤生物学状态密切相关。

独活寄生汤拆方通过Wnt/β-catenin信号通路抑制软骨细胞炎症反应

背景:Wnt/β-catenin信号通路在骨关节炎的炎症反应病理过程中扮演着重要角色,而独活寄生汤拆方有效抑制软骨细胞的炎症反应有待进一步深入研究。目的:探讨独活寄生汤拆方是否可以通过调控Wnt/β-catenin信号通路抑制由脂多糖诱导的软骨细胞炎症反应。方法:①取SD雄性大鼠,采用机械Ⅱ型胶原酶消化法获取膝关节软骨细胞,倒置相差显微镜观察软骨细胞的形态结构,Ⅱ型胶原免疫组化鉴定软骨细胞。②用不同质量浓度的独活寄生汤拆方(300,400,500 mg/L)干预由脂多糖(10μg/L)诱导的软骨细胞炎症模型,干预8 h后,采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定各组软骨细胞培养液中白细胞介素1β、肿瘤坏子因子α水平,确定独活寄生汤拆方干预浓度。③将第2代软骨细胞分为4组:空白组含正常培养液;模型组培养液中含10μg/L脂多糖;独活寄生汤拆方组培养液中含10μg/L脂多糖和400 mg/L独活寄生汤拆方;抑制剂组培养液中含10μg/L脂多糖和10 mg/L Dickkopf-1。干预8 h后,采用Western blot法检测β-catenin、Wnt-4、Frizzled-2、GSK-3β、CKI-ε的蛋白表达量。结果与结论:①软骨细胞鉴定:获取的软骨细胞Ⅱ型胶原免疫组化染色胞浆呈棕黄色,具备软骨细胞典型特征;②ELISA结果显示:模型组培养液中白细胞介素1β和肿瘤坏子因子α水平均高于空白组,400 mg/L独活寄生汤拆方干预后两种炎症因子水平较模型组显著降低,所以确定独活寄生汤拆方干预浓度为400 mg/L;③Western blot结果显示:模型组β-catenin、Wnt-4、Frizzled-2、CKI-ε的蛋白表达量均高于空白组,而GSK-3β蛋白表达量低于空白组;独活寄生汤拆方组和抑制剂组β-catenin、Wnt-4、Frizzled-2、CKI-ε蛋白表达量低于模型组,而GSK-3β蛋白表达量高于模型组。④结果表明:独活寄生汤拆方通过调控Wnt/β-catenin信号通路抑制由脂多糖诱导的软骨细胞炎症反应。

梓醇对H_(2)O_(2)诱导成骨细胞损伤的影响及机制

目的探究梓醇对H_(2)O_(2)诱导成骨细胞损伤的影响及机制。方法将小鼠成骨细胞MC3T3-E1分为对照组、模型组、空载组(转染空载质粒)、梓醇组(100μmol/L)、梓醇+叉头框蛋白O3(FoxO3)过表达组(100μmol/L梓醇+转染FoxO3过表达质粒),经梓醇和转染处理后,除对照组细胞不作处理外,其余各组细胞以H_(2)O_(2)诱导建立成骨细胞氧化应激模型。检测各组细胞活力、凋亡率、碱性磷酸酶(ALP)活性、钙结节光密度(OD)值、活性氧(ROS)的平均荧光强度(MFI)、抗氧化酶[超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)]活性、炎症因子[白细胞介素6(IL-6)、IL-1β]水平、FoxO3/Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路相关蛋白表达水平。结果与对照组比较,模型组细胞活力、ALP活性、钙结节OD值、抗氧化酶活性和Wnt、β-catenin蛋白表达水平均显著降低,凋亡率、ROS的MFI、炎症因子水平和FoxO3蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);与模型组比较,空载组细胞上述指标均无明显变化(P>0.05),梓醇组细胞上述指标均显著逆转(P<0.05);与梓醇组比较,梓醇+FoxO3过表达组细胞上述指标的逆转效果均被显著削弱(P<0.05)。结论梓醇可通过下调FoxO3激活Wnt/β-catenin信号通路,抑制H_(2)O_(2)诱导的MC3T3-E1细胞氧化应激和炎症反应,提高细胞活力与成骨分化能力,抑制细胞凋亡。

裂果薯总皂苷对WB-F344恶性转化细胞上皮间质转化及迁移、侵袭的影响

目的:探讨裂果薯总皂苷(SSPHs)对WB-F344恶性转化细胞上皮间质转化(EMT)及迁移、侵袭的影响及其机制。方法:采用致癌剂1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍(MNNG)体外诱导大鼠肝卵圆细胞系WB-F344制备恶性转化细胞模型。实验分为对照组、MNNG组、MNNG+SSPHs组、MNNG+Wnt-1/β-catenin信号通路激活剂氯化锂(LiCl)+信号通路抑制剂(XAV-939)组、MNNG+LiCl组、MNNG+LiCl+SSPHs组。CCK-8法检测SSPHs对WB-F344恶性转化细胞活力;细胞划痕和Transwell侵袭实验分别检测WB-F344恶性转化细胞的迁移、侵袭能力;蛋白质免疫印迹(western blotting)法检测E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、Wnt-1、β-catenin蛋白表达。结果:SSPHs处理后,WB-F344恶性转化细胞活力受到抑制(P<0.05)。与对照组比较,MNNG组划痕愈合率升高,细胞穿膜数增多,N-cadherin、Vimentin、Wnt-1、β-catenin蛋白表达上调,E-cadherin蛋白表达下调(均P<0.05)。与MNNG组比较,MNNG+SSPHs组划痕愈合率降低,穿膜数减少,N-cadherin、Vimentin、Wnt-1、β-catenin蛋白表达下调,E-cadherin蛋白表达上调(均P<0.05)。与MNNG+LiCl组比较,MNNG+LiCl+SSPHs组N-cadherin、Vimentin、Wnt-1、β-catenin蛋白表达下调,E-cadherin蛋白表达上调(均P<0.05),与MNNG+LiCl+XAV-939组结果相同。结论:SSPHs可抑制WB-F344恶性转化细胞的EMT和迁移、侵袭,其机制可能与调控Wnt-1/β-catenin信号通路相关。

SOST和β-catenin在不同分期膝骨关节炎患者软骨及软骨下骨表达的研究

目的通过测定β-catenin和骨硬化蛋白(SOST)在不同分期人膝关节骨关节炎软骨、软骨下骨中的表达变化情况,探讨Wnt-β-catenin信号通路在骨关节炎患者的疾病进展中起到的作用。方法所有的骨关节炎标本均取自因膝关节骨关节炎合并内翻屈曲畸形行全膝人工关节置换术(TKA)的患者自愿捐赠的新鲜内侧胫骨平台组织,共39例。正常的软骨及软骨下骨组织均取自因下肢毁损伤行下肢截肢术的患者所捐赠的新鲜内侧胫骨平台组织,共6例。切片后用番红O固绿染色,采用改良Mankin评分将所有标本分为正常组,中度OA组和重度OA组。用免疫组化方法检测这3组中软骨及软骨下骨中β-catenin和SOST的表达情况。结果根据改良Mankin评分结果,45例标本中,6例为正常,14例为中度OA,25例为重度OA。β-catenin在软骨和软骨下骨中表达均持续升高,软骨中染色阳性细胞数量百分比在正常组,中度OA组和重度OA组中分别为17%,49%和62%,软骨下骨中分别为42%,59%和74%。而软骨中SOST染色阳性细胞百分比在则在中度OA组中表达量最高(59%),在正常组(11%)和重度OA组(12%)中表达量均明显少于中度组。在软骨下骨中,SOST染色阳性细胞百分比正常组中为58%,中度OA组为38%,重度OA组为16%,其表达量持续降低。结论β-catenin及SOST与骨关节炎疾病的发展及严重程度有关,甚至影响到Wnt-β-catenin信号通路,其可能在骨关节炎疾病的发展中起到重要作用。

蒙药蓝刺头调控FoxO/Wnt/β-catenin通路抗氧化应激防治绝经后骨质疏松研究

目的:探讨蒙药蓝刺头抗氧化应激防治骨质疏松症(OP)作用;阐明蒙药蓝刺头调控FoxO/Wnt/β-catenin信号通路介导成骨细胞分化、骨形成机制。方法:77只SD雌性大鼠,随机分7组。制备绝经后骨质疏松症(PMOP)模型,阴道上皮角化实验验证造模成功。造模后90d除模型组、假手术组予0.9%氯化钠溶液灌胃,其余各组予相应药物灌胃。采血离心血清;处死剔除双侧完整股骨并标记,右侧股骨4%多聚甲醛溶液固定,左侧股骨-196℃液氮贮存罐保存。右侧股骨采用骨密度仪测定离体骨骨密度(BMD)(股骨近端BMD)。ELISA法测定大鼠血清氧化应激指标。左侧股骨Western Blot法测骨p-p66(S36)、p66、β-catenin、Wnt2、FoxO3a蛋白。结果:蒙药蓝刺头可有效抑制FoxO转录,增强Wnt信号通路调控能力,促进骨成骨分化,使骨形成大于骨吸收;蒙药蓝刺头干预去卵巢PMOP模型大鼠,骨髓间充质干细胞抑制(BMSCs)向成骨方向分化,有效下调破骨细胞(OC)的形成。结论:蓝刺头能显著改善PMOP大鼠氧化应激状态;可交叉调控FoxO/Wnt/β-catenin通路,抑制氧化应激FoxO转录,上调Wnt表达,促进模鼠骨成骨分化、骨形成。

电针对颈椎病模型大鼠椎间盘纤维环细胞Wnt-β-catenin信号通路的影响

目的:观察电针"大椎"穴对颈椎病模型大鼠椎间盘纤维环细胞Wnt-β-catenin信号通路的影响。方法:40只SD大鼠随机分成对照组、模型组、电针组、药物组,每组10只。对照组予以假手术,仅切开局部皮肤,其余建立动静力失衡性颈椎病模型。造模成功后,对照组及模型组只进行同等条件的固定处理;电针组取"大椎"穴电针治疗,每次30min;药物组给予美洛昔康片灌胃治疗,均每天1次,14d为一疗程,两个疗程间间隔2d,共治疗2个疗程。治疗结束后,采用免疫组化法检测椎间盘纤维环细胞Wnt、糖原合成酶激酶(GSK-3β)、轴蛋白(Axin)的表达,采用Western blot检测磷酸化β-连环蛋白(P-β-catenin)的表达情况。结果:对照组中Wnt、GSK-3β、Axin阳性细胞较多,分布密集,着色深,表达为强阳性;模型组中Wnt、GSK-3β、Axin阳性细胞少,分布较散,弱阳性表达。模型组中Wnt、GSK-3β、Axin和P-β-catenin的表达量较对照组减少(均P<0.05),电针组和药物组中Wnt、GSK-3β、Axin和P-β-catenin的表达量较模型组显著增多(均P<0.05),电针组和药物组间Wnt、GSK-3β、Axin和P-β-catenin的表达差异无统计学意义(均P>0.05)。结论:电针能够延缓椎间盘的退变,其取效途径可能与电针抑制Wnt-β-catenin信号通路有关。

黄芪甲苷通过调控FoxO3a/Wnt2/β-catenin通路抑制去卵巢大鼠骨质疏松的作用

目的：通过调控转录因子叉头框蛋白O3a（FoxO3a）/分泌型糖蛋白2（Wnt2）/β-连环蛋白（β-catenin）通路评价黄芪甲苷对去卵巢大鼠骨质疏松的作用,并探讨其作用机制。方法：雌性SD大鼠随机均分6组,分别为假手术组,模型组,阳性药组（尼尔雌醇,1.5 mg·kg-1）,黄芪甲苷低、中、高剂量组（20,40,80 mg·kg-1）,每组8只。通过摘除大鼠双侧卵巢复制绝经后大鼠骨质疏松模型。术后6周,灌胃给药,每日1次,连续8周。酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒检测大鼠骨钙素（bone gla protein,BGP）,降钙素（calcitonin,CT）,骨保护素（osteoprotegerin,OPG）,核转录因子-κB（NF-κB）受体活化因子配体（receptor activator for nuclear factor-κB ligand,RANKL）,丙二醛（malondialdehyde,MDA）,过氧化氢酶（catalase,CAT）,谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）含量,双能X射线骨密度检测仪分别测定股骨和腰椎的骨密度值（bone mineral density,BMD）,采用三点弯曲法测量胫骨生物力学指标,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠股骨组织中β-catenin,FoxO3a,Wnt2,p66（shc）,p-p66（shc）蛋白的表达。结果：与模型组比较,黄芪甲苷组CT和OPG水平显著升高,BGP和RANKL水平则显著降低（P〈0.05,P〈0.01）;黄芪甲苷显著升高腰椎、股骨的BMD和胫骨的最大载荷及最大应力（P〈0.05,P〈0.01）;同时,黄芪甲苷显著降低MDA水平（P〈0.05）,升高CAT,SOD和GSH-Px水平（P〈0.05,P〈0.01）。Western blot显示,黄芪甲苷显著降低p-p66（shc）/p66（shc）水平（P〈0.05）;升高β-catenin和Wnt2蛋白表达水平（P〈0.05,P〈0.01）,抑制FoxO3a蛋白表达水平（P〈0.01）。结论：黄芪甲苷能够有效缓解氧化应激介导的去卵巢大鼠的骨质疏松,该作用可能与其调节FoxO3a/Wnt2/β-catenin通路有关。

姜黄素对食管癌细胞中5-FU化疗敏感性的影响

目的探讨姜黄素对食管癌细胞中5-氟尿嘧啶(5-FU)化疗敏感性的影响。方法选取食管癌细胞EC-9706和EC-109,单独给予5-FU或联合姜黄素干预后,采用CCK-8法检测细胞增殖,RT-qPCR法检测miR-590-3p表达,Western blot法检测Wnt-2、β-catenin蛋白表达。结果姜黄素能够抑制食管癌EC-9706和EC-109细胞的增殖(P<0.05),并呈剂量依赖性。姜黄素能够增强食管癌细胞EC-9706和EC-109对5-FU的敏感性,降低其IC50值(P<0.01)。miR-590-3p在食管癌细胞系中低表达;过表达miR-590-3p能够抑制食管癌细胞的增殖,并增加EC-9706和EC-109细胞对5-FU的敏感性,降低其IC_(50)值(P<0.01)。姜黄素能够增加食管癌细胞中miR-590-3p的表达;抑制miR-590-3p的表达能够逆转姜黄素对食管癌细胞增殖的影响。姜黄素能够通过调节miR-590-3p表达抑制Wnt-2、β-catenin蛋白表达(P<0.01)。结论姜黄素能够增加5-FU对食管癌的化疗敏感性,其机制可能是通过调控miR-590-3p表达从而抑制Wnt-2/β-catenin通路的活性。

Wnt-β-catenin信号通路相关长链非编码RNA在胶质瘤中的研究进展

胶质瘤是中枢神经系统中最常见且侵袭性高的恶性肿瘤之一,Wnt-β-catenin信号通路为经典Wnt通路,参与胶质瘤等多种肿瘤的发生发展。长链非编码RNA(LncRNA)为无蛋白编码功能的功能性RNA分子,在多种肿瘤的发生、发展中发挥着调控作用。研究表明,LncRNA与Wnt-β-catenin信号通路共同参与胶质瘤的生长、侵袭、迁移等过程,但其中的复杂机制目前并未得到深入的阐述。文章就Wnt-β-catenin信号通路及其相关的LncRNA对胶质瘤的影响进行综述。

大鼠急性心肌梗死后心肌组织中Wnt-1和β-catenin的mRNA表达

目的探讨Wnt-1，β—catenin在大鼠急性心梗后心肌组织中mRNA的表达及意义。方法成年雄性SD大鼠108只，由阜外医院实验动物中心提供。将大鼠随机（随机数字法）分成2组，对照组（c组）和实验组，每组54只。实验组动物的心脏分为梗死区与非梗死区，分设为Ⅰ组（梗死组）和N组（非梗死组）。建立在体大鼠急性心梗模型，模型制作成功后分别于术后1，4，7，10，14，28d各处死9只动物；对照组只穿线，不结扎血管。采用实时荧光定量PCR（real—time fluorescent quantitative polymerase chain reaction，RT—FQ—PCR）技术检测Wnt-1，β—cateninmRNA在C组、I组和N组心肌组织中的时空表达，同时观察心梗后心肌组织的病理学变化。采用SAS软件的q检验和秩和检验进行统计学分析。结果心肌组织中Wnt-1、β—catenin的mRNA表达水平在c组与N组中差异无统计学意义；Ⅰ组1，4，7，10，14d心肌组织中的表达水平较C组、N组均明显增高（P〈0．01），且动态变化与心梗后心肌的愈合过程相平行。结论Wnt信号通路参与、调控急性心梗后心肌组织的修复和愈合过程。

雌激素受体拮抗剂氟维司群对MMQ细胞系的抗肿瘤作用及机制

目的探讨雌激素受体拮抗剂氟维司群对大鼠泌乳素瘤MMQ细胞系的作用及机制。方法体外培养MMQ细胞系并分为实验组和对照组。实验组分别加入浓度为0.04、1、25、625 nmol/L氟维司群,对照组加入等量DMSO。MTS法检测各组MMQ细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,ELISA检测泌乳素水平,RT-PCR和Western blot分别检测雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)、β-catenin和WIF-1的mRNA及蛋白表达水平。采用Wnt-β-catenin通路抑制剂SB 216763和Decitabine,观察其对细胞增殖以及β-catenin和WIF-1表达的影响。结果氟维司群可抑制细胞增殖和泌乳素的分泌,促进细胞凋亡,均呈剂量依赖性(P<0.05),IC50=32.4 nmol/L;并诱导细胞ERα和β-catenin的mRNA及蛋白的低表达,WIF-1的mRNA及蛋白的高表达(P<0.05)。与氟维司群组比较,SB 216763+氟维司群组细胞增殖明显,β-catenin的mRNA及蛋白表达升高(P<0.05)。Decitabine处理后细胞WIF-1的mRNA及蛋白表达升高,细胞增殖受到明显抑制(P<0.001)。结论氟维司群能够抑制MMQ细胞系的增殖和泌乳素的分泌,促进细胞凋亡,可能与抑制ERα的表达和抑制Wnt-β-catenin通路的激活有关。

长链非编码RNA FOXD2-AS1对胃癌细胞增殖、侵袭和转移的影响及其机制

目的探究lncRNA FOXD2-AS1对胃癌细胞增殖侵袭转移的影响及机制。方法数据挖掘及临床样本验证lncRNA FOXD2-AS1在胃癌与癌旁组织中的表达情况、与患者临床病理分期及预后的相关性;在胃癌细胞系BGC-823中抑制lncRNA FOXD2-AS1的表达,采用CCK8比色法检测细胞增殖情况,采用细胞划痕和Transwell实验检测细胞迁移及侵袭情况;蛋白印迹实验检测上皮-间质转化相关蛋白E-Cadherin、N-cadherin、Vimentin的表达以及Wnt-β-catenin通路关键蛋白分子表达情况。结果lncRNA FOXD2-AS1在胃癌组织中较癌旁组织明显增高,并与患者肿瘤分期及预后相关;lncRNA FOXD2-AS1在胃癌各细胞系中表达升高,抑制lncRNA FOXD2-AS1的表达明显降低胃癌细胞增殖、迁移及侵袭能力,并上调E-Cadherin的表达,下调N-cadherin、Vimentin、β-catenin及Cyclin-D1的表达(均P<0.05)。结论lncRNA FOXD2-AS1在胃癌组织中高表达,并通过Wnt-β-catenin通路调节EMT相关蛋白表达从而促进胃癌的发展,影响患者生存预后。

电针“关元”穴对绝经后骨质疏松症大鼠Wnt信号通路的影响

目的:观察电针"关元"穴对绝经后骨质疏松症大鼠血清骨钙素(BGP)、碱性磷酸酶(ALP)、骨生物力学、骨密度以及Wnt 3a、β-连环蛋白(catenin)、Runx 2表达的影响,探讨电针治疗绝经后骨质疏松症的可能机制。方法:SD雌性大鼠分为假手术组、模型组、关元组、非经非穴组,每组10只。采用双侧卵巢切除制备绝经后骨质疏松症模型。关元组电针"关元",非经非穴组电针胁下髂嵴上20~25mm、后正中线旁开20mm处,每日电针1次,每次20min,10d为1个疗程,共治疗3个疗程。治疗后光学显微镜下观察股骨组织形态结构,三点弯曲实验检测股骨生物力学性能,X线检测骨密度,酶联免疫法检测血清BGP,生化分析仪测定血清ALP,RT-PCR法和免疫组化法检测Wnt 3a、β-catenin、Runx 2表达。结果:电针"关元"穴能够显著改善绝经后骨质疏松症大鼠骨小梁结构松散、排列紊乱、密度降低等骨质疏松形态学改变,提高血清ALP、BGP水平,改善股骨最大载荷和断裂载荷,并提高骨密度,与模型组比较差异均有统计学意义(P<0.05);RT-PCR及免疫组化结果表明电针"关元"穴较模型组能够明显上调Wnt 3a、β-catenin、Runx 2的表达(P<0.05)。非经非穴组不能显著改善上述生物学指标。结论:通过激活Wnt-β-catenin信号通路、提高骨代谢过程中的骨形成并增强骨强度可能是电针"关元"穴治疗绝经后骨质疏松症的机制之一。

Wnt-1在病理性瘢痕中的表达及意义

目的研究wnt-1在病理性瘢痕中的表达，探讨Wnt/β-catenin信号传导通路在病理性瘢痕发病机制中的作用。方法应用免疫组化技术检测Wnt-1在30例瘢痕疙瘩（A组）、30例增生性瘢痕（B组）及20例正常皮肤（C组）中的表达，并进行统计学分析。结果Wnt-1在A、B组中的表达与C组比较，其差异具有统计学意义（P〈0．05），但A、B组之间的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论wnt．1可能是病理性瘢痕形成的重要机制，其导致的Wnt/β-catenin信号传导通路的激活在病理性瘢痕的形成机制中可能起着重要作用。