从江香猪FoxO 4基因真核表达载体的构建及其在皮下脂肪前体细胞中的表达

本研究旨在克隆从江香猪FoxO 4基因编码区序列,对FoxO 4基因功能进行初步探究。采用qRT-PCR技术对从江香猪(6月龄)不同组织中FoxO 4基因的相对表达量进行检测;PCR扩增FoxO 4基因CDS区,构建真核表达载体pEGFP-N3-FoxO 4;利用脂质体法将重组质粒pEGFP-N3-FoxO 4瞬时转染从江香猪皮下脂肪前体细胞,通过qRT-PCR方法,检测FoxO 4、PPARγ、LPL、FAS、ACC、ATGL、HSL的表达水平。结果显示:FoxO 4基因在从江香猪脂肪组织中表达量最高;构建的重组真核表达载体pEGFP-N3-FoxO 4在从江香猪皮下脂肪前体细胞中成功表达,与对照组相比,LPL、FAS、ACC、ATGL、HSL基因的表达均显著上调。综上表明,FoxO 4对脂质代谢具有一定的调控作用,可能是影响从江香猪猪肉品质的重要候选基因,为进一步了解从江香猪脂肪沉积机制提供理论基础。

血府逐瘀胶囊对心肌缺血模型大鼠心肌SIRT1-FoxO-自噬通路基因表达的影响

目的:探讨血府逐瘀胶囊对心肌缺血模型大鼠心肌SIRT1-FoxO-自噬通路基因表达的影响.方法:将60只大鼠随机分成假手术组(无菌蒸馏水10mL·kg^(-1)灌胃)、模型组(无菌蒸馏水10mL·kg^(-1)灌胃)、血府逐瘀大剂量组(0.04g·kg^(-1))、血府逐瘀中剂量组(0.02g·kg^(-1))、血府逐瘀小剂量组(0.01g·kg^(-1))、L-NAME组(2mg/只腹腔注射).采用荧光定量PCR技术检测各组心肌组织SIRT1、FoxO1、FoxO3、FoxO4基因表达情况.结果:与假手术组相比,模型组、血府逐瘀小剂量组、L-NAME组缺血心肌细胞SIRT1表达水平明显降低(P<0.05);而与模型组、L-NAME组相比,血府逐瘀大、中、小剂量组缺血心肌细胞SIRT1表达水平明显升高(P<0.05).与假手术组相比,模型组、L-NAME组缺血心肌细胞FoxO1、FoxO3、FoxO4表达水平明显升高(P<0.05);血府逐瘀小剂量组缺血心肌细胞FoxO1、FoxO4表达水平明显升高(P<0.05);血府逐瘀大剂量组缺血心肌细胞Fox3表达水平明显升高(P<0.05);与模型组相比,血府逐瘀大、中剂量组缺血心肌细胞FoxO1、FoxO3、FoxO4表达水平明显降低(P<0.05);血府逐瘀小剂量组缺血心肌细胞FoxO3表达水平明显降低(P<0.05).与L-NAME组相比,血府逐瘀大、中剂量组缺血心肌细胞FoxO1、FoxO3、FoxO4表达水平明显降低(P<0.05);血府逐瘀小剂量组缺血心肌细胞FoxO1、FoxO3表达水平明显降低(P<0.05).结论:血府逐瘀胶囊对冠脉结扎致大鼠心肌缺血有保护作用,其作用可能是通过促进SIRT1基因表达,抑制FoxO1、FoxO3、FoxO4基因表达而发挥作用.

猪FoxO4基因cDNA部分序列的克隆及其组织表达

为探究FoxO4基因序列和组织表达特征,采用RT-PCR法从猪肝脏中克隆FoxO4基因c DNA的部分序列,采用荧光定量PCR对大白猪、从江香猪2个猪品种的不同组织m RNA表达进行了相对定量分析。结果:获得猪FoxO4基因615 bp编码区序列;FoxO4基因m RNA在大白猪所检测的9个组织样中均有表达,在肺中表达量最高,在脂肪中表达量次之;FoxO4基因m RNA在从江香猪所检测的9个组织样中也均有表达,在脂肪中表达量最高,在肺中表达量次之;在2个品种中FoxO4基因在肺、肾、大肠、脂肪中m RNA表达水平差异极显著(P<0.01)。