子宫内膜异位症组织IL-17和FoxP-3的表达及意义

目的探讨子宫内膜异位症(EMs)病人子宫内膜组织中白细胞介素17(IL-17)和转录因子FoxP-3表达及与其发病的关系。方法应用免疫组化法检测35例EMs病人的异位内膜、20例EMs病人的在位内膜和15例正常子宫内膜组织中IL-17和FoxP-3的表达。结果异位内膜、在位内膜及正常内膜组织IL-17的阳性表达率分别为85.71%(30/35)、20.00%(4/20)和6.67%(1/15),FoxP-3的阳性表达率分别为82.86%(29/35)、30.00%(6/20)和46.67%(7/15)。异位内膜组织IL-17和FoxP-3的阳性表达率均显著高于在位内膜及正常内膜组织,在位内膜组织IL-17的阳性表达率显著高于正常内膜组织(χ2=36.32、16.23,P<0.05),而在位内膜组织FoxP-3的阳性表达率与正常内膜组织比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 IL-17和FoxP-3的过表达可能参与了EMs的发生发展。

CD4^+ CD25^+ Foxp3^+ Treg细胞在HBV感染所致慢加急性肝衰竭中作用

目的:探讨CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞在HBV感染所致慢加急性肝衰竭发病过程中的表达。方法:采用流式细胞仪检测36例慢加急性肝衰竭患者、38例慢性乙型肝炎患者、40例无症状乙肝病毒携带者及40例健康对照者外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞水平,并追踪慢加急性肝衰竭组患者转归,评价好转组与未恢复组CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞百分率差异。结果:慢加急性肝衰竭组、慢性乙型肝炎组、无症状乙肝病毒携带组及健康对照组外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞分别为(5.14±1.03)%、(9.86±1.72)%、(7.93±1.67)%及(7.06±1.61)%,慢加急肝衰竭组外周血Treg细胞百分率显著低于慢性乙型肝炎组、无症状乙肝病毒携带组和健康对照组(P<0.01)。慢性乙型肝炎组外周血Treg百分率明显高于慢加急肝衰竭组及健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而无症状乙肝病毒携带组与健康对照组外周血Treg百分率比较差异无统计学意义(P>0.05)。各组CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的百分率与患者血清HBVDNA呈正相关。慢加急性肝衰竭好转组与未恢复组CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:慢加急性肝衰竭患者发病可能与CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞表达过低有关,Treg细胞表达水平不能预示慢加急性肝衰竭患者预后。

唾液乳杆菌对哮喘小鼠CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg细胞数量及TGF-β1表达的影响

目的探讨唾液乳杆菌对哮喘Balb/c小鼠CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞数量及转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响。方法将32只Balb/c雌性小鼠随机分成4组:正常对照组、哮喘组、唾液乳杆菌组和哮喘+唾液乳杆菌组。应用卵蛋白激发方法建立急性哮喘模型,原代提取脾细胞,应用流式细胞仪检测脾淋巴细胞中CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T比例,ELISA法测定小鼠脾细胞培养上清液中白细胞介素4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)、TGF-β1水平。结果哮喘组小鼠脾细胞培养上清液中Th2细胞因子(IL-4)较正常对照组明显增高,而Th1细胞因子(IFN-γ)较对照组明显降低(P<0.05);唾液乳杆菌干预组较哮喘组Th2细胞因子(IL-4)水平下降,Th1细胞因子(IFN-γ)水平升高(P<0.05);唾液乳杆菌干预组小鼠脾细胞培养上清液中TGF-β1含量明显高于哮喘组(P<0.05);哮喘组小鼠脾淋巴细胞中CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T细胞比例较正常对照组明显减少(P<0.05),而唾液乳杆菌干预组则明显高于哮喘组(P<0.05)。结论 CD4+CD25+Foxp3+Treg参与了支气管哮喘的发病过程,唾液乳杆菌可能通过上调CD4+CD25+Foxp3+Treg数量及增加TGF-β1表达调整Th1/Th2失衡,减轻哮喘炎症。

乳腺癌髓系来源抑制细胞中吲哚胺2,3-双加氧酶表达与Tregs分布关系及临床意义

目的:研究乳腺癌CD33+髓系来源的抑制细胞(MDSCs)中吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)表达情况及与Foxp3+调节性T细胞(Tregs)分布关系和临床意义。方法:运用免疫组化单染技术检测CD33+MDSCs细胞、Foxp3+Tregs,采用免疫组化双染检测CD33+MDSCs细胞中IDO的表达情况。结果:癌组织中CD33+MDSCs细胞、Foxp3+Tregs分布无序,呈散在分布;Foxp3+Tregs高比例组中,CD33+MDSCs细胞中IDO呈高表达,差异有统计学意义(P<0.05);CD33+MDSCs中IDO的表达与患者年龄、肿瘤直径和组织学分级无明显关系,但与是否有淋巴结转移有密切关系(P<0.05)。结论:乳腺癌中CD33+MDSCs中IDO高表达参与肿瘤细胞免疫耐受的形成,可能与乳腺癌淋巴转移存在密切联系。

抑郁焦虑情绪对复发性尖锐湿疣患者外周血调节性T细胞水平的影响

目的:确定抑郁焦虑情绪对CA复发和细胞免疫的影响。方法:采用抑郁自评量表(SDS)和焦虑自评量表(SAS)对100例初诊CA进行问卷调查,评估其情绪状态。SDS>50和/或SAS>50为抑郁焦虑者,其余患者为非抑郁焦虑者。选择健康体检32人为对照。流式细胞技术测定外周血Treg细胞水平。随后观察两组CA治疗后的复发率。结果:CA组外周血Treg细胞水平为(8.03±2.14)%,显著高于正常对照组(5.28±1.21)%(P<0.05);抑郁焦虑组外周血Treg细胞水平为(8.64±2.12)%,显著高于无抑郁焦虑组(7.55±2.05)%(P<0.05)。治疗后抑郁焦虑组第1、2、3、6个月的复发率均高于无抑郁焦虑组。结论:抑郁和/或焦虑情绪可加剧CA患者细胞免疫功能的抑制,导致CA更易复发。

IPEX综合征1例报告并文献复习

目的分析X连锁多内分泌腺病肠病伴免疫失调(IPEX)综合征的临床及遗传学特征。方法回顾分析1例IPEX综合征患儿的临床资料和基因检测结果,并复习相关文献。结果男性患儿14月龄时以免疫性血小板减少症起病,反复之后呼吸道感染继发免疫性血小板减少和肝炎,伴脾肿大和淋巴结病。基因检测发现患儿FOXP 3基因存在半合子变异,767号核苷酸由胸腺嘧啶T变为胞嘧啶C(c.767T>C),导致第256号氨基酸由甲硫氨酸变为苏氨酸(p.M256T)。家系验证,父亲该位点无变异,母亲该位点杂合变异。予雷帕霉素治疗1个月后,患儿血小板水平明显回升,肝功能降至正常水平,但最终于3个月后因重症感染而死亡。结论IPEX综合征临床表现为多器官的自身免疫性疾病,死亡率高,免疫抑制治疗控制病情后桥接异基因造血干细胞移植是目前最佳的治疗方案。

帕金森病患者T淋巴细胞亚群的检测及意义

目的:研究T淋巴细胞亚群在帕金森病患者(PD)外周血淋巴细胞中的改变,并探讨其在疾病进程中的意义。方法:选取PD患者28例,并依据改良的Hoehn&Yahr分级标准分为PD1(I级)、PD2(II级)和PD3(III级)3个亚组,用流式细胞术检测CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+和调节性T淋巴细胞(CD4+Foxp3+)在外周血淋巴细胞中的百分率,并与正常对照组18例进行比较。结果:PD3亚组外周血淋巴细胞中CD3+CD8+的百分率高于对照组(P<0.05)。PD2和PD3亚组的CD4+Foxp3+百分率显著低于对照组和PD1亚组(P<0.05)。结论:PD组外周血淋巴细胞中CD3+CD8+和CD4+Foxp3+百分率改变导致细胞免疫失衡,可能参与了帕金森病的病理进程。

益气温阳法联合顺铂对荷瘤小鼠调节性T细胞的影响

目的:研究益气温阳法联合顺铂对Lewis肺癌小鼠调节性T(T Regulatory,Treg)细胞的影响。方法:建立40只近交系C57BL/6纯系雄性小鼠Lewis肺癌细胞皮下移植瘤模型后,将40只造模后的小鼠随机分为模型组、中药组、顺铂组及联合用药组,每组10只,单笼饲养。模型组以0.4 mL生理盐水连续灌胃12 d;中药组以0.4 mL中药液连续灌胃12 d(20 g生药/kg);顺铂组以0.2 mL顺铂溶液腹腔注射,分别在第1天、第3天、第5天腹腔注射顺铂溶液(4 mg顺铂/kg);联合用药组以0.4 mL中药液连续灌胃12 d(20 g生药/kg),在第1天、第3天、第5天腹腔注射顺铂溶液0.2 mL(4 mg顺铂/kg)。给予药物干预12 d后,用流式细胞术检测各组小鼠脾脏组织Treg细胞的比例。结果:流式细胞术结果表明,益气温阳法治疗可显著降低Lewis肺癌小鼠脾脏组织Treg细胞,与模型组比较,中药组、顺铂组和联合用药组小鼠脾脏组织内CD4^(+)CD25^(+)Treg细胞比例与CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg细胞比例均显著降低(P<0.05)。结论:益气温阳法通过降低Treg细胞的水平增强机体的抗肿瘤免疫应答而发挥抑瘤作用。

结直肠癌组织中Foxp^(3+)Tregs和CD8^+T细胞的表达及意义

目的观察Foxp^(3+) Tregs和CD8^+ T细胞在结直肠癌组织中的表达水平,并探讨其在不同临床病理因素影响下的表达差异。方法选取2011年1月至2012年12月在本院病理科保存的结直肠癌组织标本82例,应用免疫组织化学二步法分别检测结直肠癌患者癌组织和癌旁组织(距癌组织小于3 cm)中Foxp^(3+) Tregs和CD8^+ T细胞的表达,并比较二者的表达率在不同临床病理因素影响下的差异。结果结直肠癌组织中Foxp^(3+) Tregs细胞阳性表达率均显著高于癌旁组织(P<0.05),结直肠癌组织中CD8^+ T细胞阳性表达率显著低于癌旁组织(P<0.05)。Foxp^(3+) Tregs和CD8^+ T细胞在癌组织的临床病理因素如浸润深度、分化程度、远处转移的影响下表达率有所差异(P<0.05),在不同性别、年龄、肿瘤生长部位、Ducks分期中差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Foxp^(3+) Tregs在结直肠癌组织中的表达显著高于正常组织中,CD8^+ T细胞在结直肠癌组织中的表达明显低于正常组织,提示其可能在结直肠癌浸润及侵袭转移的过程中发挥着重要作用,检测其表达对结直肠癌的诊断、治疗及判断预后有着重要的临床意义。

日本血吸虫感染小鼠CD4^+CD25^+Foxp3^+ T细胞的动态变化及其意义

目的分析小鼠脾细胞中CD4+CD25+Foxp3+T细胞在日本血吸虫感染后的动态变化,探讨CD4+CD25+Foxp3+T细胞与血吸虫感染的关系。方法常规逸出尾蚴,感染小鼠24只,随机分为4组,同时设立阴性对照。感染后第3、6、9、12周分批处死小鼠,取脾脏制备单细胞悬液,用FITC-CD4和PE-CD25单抗进行细胞表面染色,洗涤后,经打孔液和固定液处理,再用PE-cy5-Foxp3抗体进行核内染色,流式细胞仪检测CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的变化。结果小鼠感染血吸虫后第3、6、9、12周脾细胞中CD4+CD25+Foxp3+T细胞百分率分别为(2.57±0.13)%、(1.77±0.21)%、(1.10±0.05)%和(0.83±0.04)%,呈逐步下降趋势(P<0.05);CD4+CD25-Foxp3+T细胞百分率分别为(0.25±0.007)%、(0.27±0.13)%、(0.38±0.15)%和(0.35±0.07)%,差异无统计学意义(P>0.05)。未感染小鼠脾细胞中CD4+CD25+Foxp3+T细胞百分率分别为(2.63±0.09)%、(3.13±0.47)%、(2.78±0.19)%和(2.82±0.12)%,差异无统计学意义(P>0.05);CD4+CD25-Foxp3+T细胞百分率分别为(0.35±0.10)%、(0.43±0.13)%、(0.30±0.08)%和(0.31±0.09)%,差异无统计学意义(P>0.05)。感染组与未感染组相比从第6周开始脾细胞中CD4+CD25+Foxp3+T细胞百分率显著下降(P<0.05),CD4+CD25-Foxp3+T细胞百分率差异无统计学意义(P>0.05)。结论CD4+CD25+Foxp3+T细胞在日本血吸虫感染中具有免疫抑制作用,与血吸虫虫卵肉芽肿慢性病变具有相关性。

不同程度的非酒精性脂肪肝患者CD4^+CD25^+Foxp3T细胞的检测及其意义

目的探讨不同程度的非酒精性脂肪肝患者的CD 4+CD 25+Foxp 3T细胞水平的变化。方法应用流式细胞术检测不同程度的非酒精性脂肪肝60例患者和20例健康体检者外周血的CD 4+CD 25+和CD 4+CD 25+Foxp 3的比例。结果非酒精性脂肪肝组外周血CD 4+CD 25+细胞占CD 4+的比例为8.53±1.64%,显著低于健康对照组的11.4±2.17%,P<0.01;且非酒精性脂肪肝患者病情越重,CD 4+CD 25+Foxp 3占CD 4+的比例越低(P<0.05)。结论非酒精性脂肪肝患者血清调节性T细胞百分数下降水平与脂肪肝程度呈正相关,CD 4+CD 25+Foxp 3T调节性T细胞减少可能打破了免疫耐受,参与了非酒精性脂肪肝患者的发病。

麻醉相关药物对CD4^+CD25^+Foxp^3+调节性T细胞影响的研究进展

CD4^+CD25^+Foxp^3+调节性T细胞(regulatory T cells, Treg)是近年来围手术期免疫功能变化的新兴关注点。Treg有望成为评价围手术期免疫功能的指标。文章综述Treg的生理作用、其数量和功能改变后引起的相关疾病及麻醉相关药物对Treg的影响。进一步了解围手术期麻醉相关药物对免疫功能的影响,可为麻醉医师了解和评价患者围手术期免疫功能变化和临床合理使用麻醉相关药物提供重要依据。

稽留流产患者外周血CD^4+ CD25^+ Foxp3^+调节性T细胞的表达及意义

目的:探讨CD4+ CD25+ Foxp3+调节性T细胞在稽留流产患者外周血中的比例变化。方法:选取16例稽留流产患者,采用细胞内染色的流式细胞术及定量PCR方法分别在蛋白质和mRNA水平检测其外周血中CD4+ CD25+ Foxp3+的表达,并与正常妊娠和正常育龄妇女进行比较。结果:稽留流产患者外周血单个核细胞(PBMCS)CD4+ T细胞中CD25high细胞明显低于正常妊娠和正常育龄妇女,CD4+ CD25+ Foxp3+的表达显著降低。结论:稽留流产患者CD4+ CD25+ Foxp3+的表达明显减少,提示稽留流产的发生可能与患者外周血中CD4+ CD25+ Foxp3+下降有关;而在妊娠早期CD4+ CD25+ Foxp3+的表达明显升高,表明其可能是调控母-胎间免疫耐受形成的重要因素,参与了正常妊娠的维持。

青黛苦参配伍治疗溃疡性结肠炎大鼠的疗效及潜在机制的探究

目的从Treg/Th17免疫平衡角度探究青黛、苦参配伍对UC大鼠治疗的作用机制。方法60只健康雄性SD大鼠,随机均分为正常组、模型组、苦参组、青黛组、苦参+青黛组、西药组。4%DSS溶液饲喂复制UC大鼠模型,干预中正常组和模型组大鼠用生理盐水灌胃,治疗组以对应的药物溶液灌胃,疗程1周。干预结束后检测大鼠结肠黏膜的组织结构和TGF-β、RORγt、STAT3及FOXP-3蛋白的表达水平。结果各治疗组大鼠的结肠黏膜组织中腺体破坏和炎性细胞的浸润均得到明显改善。药物治疗后结肠组织中RORγt、STAT3蛋白含量明显降低(P<0.01),同时TGF-β及FOXP-3蛋白含量显著升高(P<0.01)。青黛配伍苦参的治疗组中大鼠结肠黏膜组织修复和炎症改善明显优于其他组别,同时和其他组别相比RORγt、STAT3蛋白的降低趋势和TGF-β、FOXP-3蛋白的升高趋势更加显著(P<0.05)。结论青黛、苦参配伍可以改善UC大鼠结肠黏膜损伤和炎症反应,其机制可能为通抑制RORγt、STAT3蛋白和促进TGF-β及FOXP-3蛋白的表达来调节Th17/Treg免疫平衡,起到治疗效果。

大麻素受体2与子宫颈癌组织内浸润T细胞亚群的关系

目的研究大麻素受体2(cannabinoid receptor 2,CB 2)在人子宫颈癌组织中的表达及其与肿瘤内浸润T细胞亚群,包括FOXP 3+T、CD 4+T、CD 8+T细胞的关系。方法选取2016年德州市中医院病理科保存的人体手术切除标本90例,纳入30例正常人宫颈组织为对照A组、30例人高级别宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)Ⅱ~Ⅲ级组织为对照B组、30例人子宫颈癌组织为观察组。采用免疫组织化学法及实时定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)检测CB 2在各组中表达情况,采用间接免疫荧光双标法检测观察组组织内浸润FOXP 3+、CD 4+T、CD 8+T细胞数目。结果 CB 2蛋白及mRNA在3组中均有表达,且在观察组中表达最高、对照B组中次之、对照A组中表达量最低,各组间差异均有统计学意义(P<0.05);观察组CB 2蛋白及mRNA的表达均与组织内浸润的CD8+T呈负相关(P<0.05)。结论 CB 2在人子宫颈癌组织内存在高表达现象,且与组织内浸润CD 8+T细胞数量减少有一定相关性。