FOXP3及ROR-γ转录因子在非重型再生障碍性贫血的意义及与肾虚证的相关性

目的研究FOXP3、ROR-γ转录因子在非重型再生障碍性贫血(NSAA)中的意义及与肾虚分型的相关性。方法收集CAA患者102例,用RT-PCR方法检测FOXP3及ROR-γ转录因子水平,与正常对照组比较。结果与正常对照组比较,FOXP3mRNA、ROR-γtmRNA表达水平高于正常对照组;ROR-γt mRNA在肾虚组间比较有差异,肾阴虚组>肾阳虚组>肾阴阳两虚组(P<0.05);ROR-γt mRNA与肾虚分型有相关性,P<0.01。结论FOXP3、ROR-γ转录因子与NSAA发病有一定相关性,主要异常发生在ROR-γ转录因子之间的调控,中医肾虚分型与转录因子有相关性。

转录因子Foxp3 mRNA在斑秃患者外周血单个核细胞中的表达

目的:探讨斑秃患者外周血单个核细胞(PBMCs)中转录因子Foxp3 mRNA的表达水平。方法:采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测50例未治疗的斑秃患者PBMCs中转录因子Foxp3 mRNA的表达,进行相关性分析,以30例健康志愿者作为正常对照。结果:斑秃患者PBMCs中转录因子Foxp3 mRNA表达明显低于正常对照组,差异有统计学意义(t=3.14,P<0.01),且重型患者组与正常对照组、局限型患者组与正常对照组,两组比较,差异均有统计学意义(t=2.85/2.89,P<0.01),但重型患者组与局限型患者组,两组间差异无统计学意义(t=0.39,P>0.05)。斑秃患者PBMCs转录因子Foxp3mRNA与秃发严重评分工具(SALT)评分呈显著负相关(r=-0.426,P<0.01)。结论:斑秃患者PBMCs中转录因子Foxp3 mRNA表达水平降低可能与斑秃病情严重程度有关。

转录因子FOXP3基因多态性与不明原因复发性自然流产的易感性研究

目的:基于不明原因复发性自然流产(URSA)的免疫耐受学说,探讨转录因子FOXP3基因多态性与URSA的易感性。方法:采用等位基因特异性扩增-聚合酶链反应(PCR-SSP)法检测FOXP3基因rs2232365A/G和rs5902434del/ATT多态性在146例URSA患者(URSA组)和112例健康体检者(对照组)中的基因型分布。结果:①rs2232365A/G的3种基因型在URSA组和对照组的分布差异具有统计学意义(P<0.05),且携带G等位基因明显增加URSA的风险(P=0.01,OR=1.61)。②rs59024343种基因型在两组的分布差异无统计学意义(χ2=4.62,P=0.10),但等位基因del缺失型频率URSA组较对照组高(χ2=4.40,P=0.036)。③单倍体型分析:G/del单体型明显增加URSA的发病风险(P=0.02,OR=1.53),而A/ATT单体型则对URSA的发病具有保护作用(P=0.02,OR=0.63)。结论:转录因子FOXP3基因启动子区rs2232365和rs5902434多态性与URSA的遗传易感性有关,携带G和del等位基因明显增加URSA的发病风险。

广西壮族及汉族人群转录因子FoxP3基因遗传多态性的研究

目的研究转录因子FoxP3基因启动子-3501 A/G多态性各等位基因及基因型在广西地区壮族及汉族人群中的分布频率,比较其在不同种族间分布的差异。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术和DNA测序法检测160例壮族人和150例汉族人的FoxP3基因-3501 A/G多态性,比较两组FoxP3基因型及等位基因的分布频率;并结合文献进行不同种族间的比较分析。结果在广西壮族及汉族人群中FoxP3基因多态性的分布频率差异均无显著性(P>0.05),但与欧洲及非洲人群比较,FoxP3基因多态性的分布频率差异均有显著性(P<0.05)。结论在广西地区壮族及汉族人群中存在FoxP3基因多态性,其基因多态性的分布频率差异无显著性。但与其他种族人群比较差异存在,这种差异可能是导致一些疾病在不同种族间的发病率和临床表现存在显著不同的因素之一。

核转录因子FOXP3在肺癌组织中的表达及意义

目的:检测核转录因子FOXP3在不同病变肺组织中的表达,分析CD4+CD25+调节性T细胞在不同病变肺组织中的浸润情况,并进一步探讨不同病理类型的肺癌组织中FOXP3表达的异同。方法:使用RT-PCR及W estern b lotting方法,检测21例肺癌、7例支气管扩张、5例炎性假瘤、3例结核球以及15例病灶旁手术切除正常肺组织共153份标本中FOXP3 mRNA及蛋白的表达。结果:肺癌、肺良性病变及病灶旁正常肺组织FOXP3mRNA及蛋白的表达阳性分别为41/63、8/45、0/45(P<0.05),肺癌与肺良性病变组织均有FOXP3 mRNA及蛋白表达,分析其平均吸光度A值之间有显著差异(P<0.01)。病灶旁正常肺组织FOXP3 mRNA及蛋白无表达。不同病理类型肺癌组织中均有FOXP3 mRNA及蛋白的表达,分析其平均吸光度A值之间无显著差异(P>0.05)。结论:FOXP3可作为CD4+CD25+调节性T细胞的一种标志物。肺癌与肺良性病变组织均有FOXP3 mRNA及蛋白表达,FOXP3在肺癌组织中表达强于肺良性病变组织。

慢阻肺患者调节性T细胞核转录因子Foxp3的表达及单核苷酸多态性的研究进展

慢性阻塞性肺疾病（慢阻肺）是一种以持续性气流受限为特征的肺部疾病，其气流受限呈不完全可逆的进行性发展。该病以小气道损伤、黏液分泌过多及肺实质破坏为病理特征，是一种由T淋巴细胞参与，并且与炎症及自身异常免疫反应相关的疾病。在慢阻肺的发生及发展过程中，

转录因子Foxp3在子宫内膜异位症局部组织中的表达及意义

目的:检测Foxp3在子宫内膜异位症组织中的表达,探讨内异症的发病机制。方法:通过免疫组化染色,观察21例子宫内膜异位症卵巢巧克力囊肿及同一患者盆腔腹膜中Foxp3的表达,并与10例正常子宫内膜和10例正常腹膜进行比较。结果:子宫内膜异位症患者卵巢巧克力囊肿及其盆腔腹膜中均可见到Foxp3阳性细胞表达,且二者Foxp3阳性细胞计数比较差异无显著;正常子宫内膜和正常腹膜中无Foxp3阳性细胞表达。结论:Foxp3启动了调节性T细胞的免疫抑制功能,使盆腔内免疫环境呈免疫耐受状态,当有活性的子宫内膜细胞进入盆腔后没有被免疫系统识别和清除,而是在盆腔内异位处发生侵袭、种植及进一步生长,这可能是子宫内膜异位症发生的机制之一。

PTPN22和转录因子FOXP3基因多态性与系统性红斑狼疮遗传易感性的关联性分析

目的探讨蛋白酪氨酸磷酸22(PTPN22)和转录因子FOXP3基因多态性与系统性红斑狼疮(SLE)遗传易感性的关联性。方法选取2013年1~6月我院收治的系统性红斑狼疮患者80例为研究组,选取同期健康体检人员80例为对照组,对比两组研究对象的PTPN22和转录因子R3XP3基因多态性。结果 FOXP3位点基因频率在两组研究对象当中的分布存在明显区别(P<0.05);FOXP3基因-23S3C/T同-3281C/A存在连锁不平衡,-2383T/-3281A的单倍型携带者明显加大SLE发病的风险(P<0.05);PTPN2.2基因-112.3G/C位点的等位基因以及基因型分布在两组研究对象之间无明显差异(P>0.05)。结论 FOXP3基因-2383C/T的多态性同SLE发生发展之间存在显著的关联性,并且-23S3T基因可能是该病重要的遗传易感基因,同时PTPN22基因位点1S58C/1858T以及-1123G/C同SLE发病无明显关联性。

梅毒患者外周血特异性转录因子FOXP3 mRNA的表达

目的探讨梅毒患者外周血单个核细胞(PBMCs)中转录因子FOXP3 m RNA的表达水平。方法采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测70例未治疗的梅毒患者PBMCs中转录因子FOXP3 m RNA的表达进行相关性分析,以20例健康志愿者作为正常对照。结果血清固定组梅毒患者外周血中FOXP3 m RNA表达较正常对照组增高,差异有统计学意义(t=7.86,P<0.01)。而潜伏梅毒患者、妊娠梅毒、RPR阴转组患者外周血中FOXP3 m RNA表达与正常对照组比较差异无统计学意义(t分别为0.99,0.10,0.06,P>0.05)。结论梅毒患者外周血中FOXP3 m RNA表达增高造成的免疫抑制可能在梅毒血清固定的发生中起着一定的作用。

原发性胆汁性肝硬化患者肝组织Foxp3^+和转化生长因子β_1的表达及临床意义

目的检测原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者肝组织Foxp3^+和转化生长因子(TGF)β_1表达与肝组织病理的相关性。方法采用免疫组织化学法检测29例PBC患者肝组织中Foxp3^+和TGFβ_1表达。同时选取20例正常肝组织作为正常对照组。结果 PBC患者肝组织Foxp3^+表达量显著高于正常对照组,差异有统计学意义(P=0.000),且Ⅰ期/Ⅱ期PBC患者肝组织表达量与Ⅲ期/Ⅳ期,差异有统计学意义(P=0.002)。PBC患者肝组织TGFβ31表达量显著高于正常对照组,差异有统计学意义(P=0.000),且Ⅰ期/Ⅱ期PBC患者肝组织表达量与Ⅲ期/Ⅳ期差异无统计学意义(P>0.05)。PBC患者肝组织Foxp3^+和TGFβ_1表达量之间存在显著正相关(r=0.765,P=0.000)。结论 PBC患者肝组织中Foxp3^+和TGFβ_1表达与肝组织炎症活动度密切相关。

1,25二羟基维生素D_3对大鼠脾调节性T细胞及其特异性转录因子表达的影响

目的:探讨用1,25二羟基维生素D3[1,25(OH)2VitD3]预干预对大鼠辅助性T细胞(Th1)免疫应答中脾CD4+CD25+调节性T细胞及其特异性转录因子Foxp3基因表达的影响。方法:采用近交系大鼠,随机分为对照组、脂多糖(LPS)组和VitD3组。分别给予对照组和LPS组赋形剂,VitD3组用1,25(OH)2VitD3(0.25μg/只.d-1),连续灌胃14 d。第15天LPS组和VitD3组腹腔注射致死剂量LPS(10 mg/kg)。6 h后处死,用流式细胞仪检测脾CD4+CD25+调节性T细胞比例,用Realtime RT-PCR检测脾中Foxp3 mRNA的表达。结果:1,25(OH)2VitD3明显上调大鼠Th1免疫应答中脾CD4+CD25+调节性T细胞的比例及其特异性转录因子Foxp3 mRNA的表达。结论:1,25(OH)2VitD3预干预对大鼠Th1免疫应答中脾CD4+CD25+调节性T细胞及其特异性转录因子Foxp3的基因表达有显著影响。1,25(OH)2VitD3有可能通过促进CD4+CD25+调节性T细胞的发育,发挥其免疫调节作用。

白细胞介素-6及叉状头转录因子3在老年口腔鳞癌患者外周血及癌组织中表达及意义

目的探讨老年口腔癌患者中白细胞介素(IL)-6、叉状头转录因子(Foxp) 3表达的意义及生理功能。方法经病理分析确诊的60例原发性口腔癌患者为观察组,同时选取50例口腔良性肿瘤患者为对照组。通过免疫组织化学方法,检测各组组织切片中IL-6及Foxp3表达水平;通过酶联免疫吸附法(ELISA)检测外周血中IL-6、Foxp3的表达,并分析两者表达的相关性及与口腔癌发生发展的关系。结果观察组外周血中IL-6、Foxp3表达显著高于对照组(P<0. 05);观察组Ⅲ期和Ⅳ期患者IL-6、Foxp3表达水平显著高于Ⅰ期和Ⅱ期(P<0. 05); IL-6与Foxp3表达呈正相关(r=0. 40,P<0. 05); IL-6与Foxp3在口腔癌组织中阳性率显著高于正常组织(P<0. 05);Ⅲ期和Ⅳ期患者IL-6、Foxp3阳性细胞数显著高于Ⅰ期和Ⅱ期(P<0. 05),口腔癌患者癌组织中IL-6与Foxp3表达呈正相关(r=0. 38,P<0. 05)。结论 IL-6及Foxp3在口腔鳞癌发生发展过程中起一定作用;二者可能具有协同作用,从而共同促进肿瘤形成。

子痫前期患者外周血及其新生儿脐血中CD_4^+CD_(25)^+ Foxp3^+ Treg水平变化和意义

目的观察子痫前期患者外周血及其新生儿脐血中特异性表达Foxp3转录因子的CD4+CD2+5调节性T细胞(CD4+CD2+5Foxp3+Treg)的水平变化,并探讨其在子痫前期免疫耐受失衡中的作用。方法选择子痫前期患者15例(轻度7例、重度8例),正常晚期妊娠妇女15例。分别采集子痫前期患者、正常晚期妊娠妇女外周血及其新生儿脐带血,用流式细胞仪检测CD4+CD2+5Foxp3+Treg。结果子痫前期患者外周血及其新生儿脐血中的CD4+CD2+5Foxp3+Treg表达率明显低于正常晚期妊娠者及其新生儿(P均<0.05)。结论子痫前期患者外周血及其新生儿脐血CD4+CD2+5Foxp3+Treg水平均降低,这一结果造成母胎免疫耐受失衡,导致子痫前期的发生。

吞噬PUVA处理的同种异基因细胞的树突细胞对抗原特异性CD4^+ CD25^+ Foxp3^+调节T细胞的体外诱导作用

目的探讨吞噬体外光化学法(PUVA)处理的同种异基因淋巴细胞的树突细胞(DC)对抗原特异性CD4+ CD25 +Foxp3+调节性T细胞的体外诱导作用。方法分离LEW大鼠骨髓细胞,经大鼠重组IL-4和GM-CSF共同诱导培养制备骨髓来源的LEW大鼠DC。分离DA大鼠脾淋巴细胞(SP),制备经PUVA处理的DA大鼠脾淋巴细胞(PUVA-SP)并用流式细胞仪检测其凋亡率。在体外将DA大鼠的PUVA-SP或SP与LEW大鼠骨髓来源的DC共同培养,得到PUVA-SPDC和SPDC,以Luminex液相芯片法检测PUVA-SPDC和SPDC培养上清中IL-10、IL-12的含量。以CFSE标记PUVA-SP,流式细胞仪检测LEW大鼠DC对DA大鼠PUVA-SP的摄取情况。将LEW大鼠CD4+25-T细胞与PUVA-SPDC或SPDC混合培养5d,流式细胞仪检测诱导形成的CD4+ CD25+ Foxp3+ T细胞,同时分离培养体系中的CD4+ CD25+ T细胞,通过混合淋巴细胞反应(MLR)检测PUVA-SPDC诱生的CD4+ CD25+ T细胞对LEW大鼠CD4+ CD25- T细胞(效应性T细胞)体外增殖的抑制作用。结果DA大鼠脾淋巴细胞经PUVA处理后细胞凋亡率为81.93%。LEW大鼠DC可有效摄取PUVA-SP,吞噬率达70.72%。SPDC培养上清中IL-12和IL-10浓度分别为700±18、39±3pg/ml;与SPDC相比,PUVA-SPDC培养上清中的IL-12水平(148±9pg/ml)明显降低(P<0.01),而IL-10水平(75±4pg/ml)则明显增加(P<0.01)。与PUVA-SPDC混合培养后,LEW大鼠CD4+T细胞中CD4+ CD25+ T细胞的比例为15.4%,其中Foxp3阳性率为44.1%;而与SPDC混合培养后LEW大鼠CD4+T细胞中CD4+ CD25+ T细胞的比例只有6.5%,其中Foxp3阳性率仅为8.2%。PUVA-SPDC诱生的CD4+ CD25+ T细胞对体外增殖反应有明显的抗原特异性抑制作用。结论PUVA-SPDC在体外能够有效诱生抗原特异性CD4+ CD25+ Foxp3+调节性T细胞。

溃疡性结肠炎患者外周血单个核细胞中Foxp3 mRNA的表达水平

目的:探讨溃疡性结肠炎(UC)患者外周血单个核细胞中Foxp3 mRNA表达及其与疾病活动性的关系．方法:应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR) 检测142例UC患者(活动期22例、缓解期20例) 和30例正常对照组外周血单个核细胞Foxp3 mRNA的表达水平．结果:UC患者急性期Foxp3 mRNA水平低于正常人,差异有显著性(1．58±0．31 vs 3．27± 0．40,P<0．05);缓解期Foxp3 mRNA水平与正常人差异无显著性(P=0．104);PBMC中Foxp3 mRNA表达水平与Walmsley评分标准有相关性,且呈负相关．结论:UC患者外周血单个核细胞中Foxp3 mRNA表达水平显著低于正常人,其参与了 UC的发病过程并与疾病的活动性有关．

异基因造血干细胞移植患者FOXP3 mRNA表达与移植物抗宿主病发生的关系

背景:转录因子FOXP3是调节性T细胞的特异性标志,对于造血干细胞移植后移植物抗宿主病的发生与FOXP3表达水平的关系目前仍存在争议。目的:观察异基因造血干细胞移植后患者外周血FOXP3mRNA的表达,初步探讨利用FOXP3mRNA表达水平的变化进行临床早期诊断移植物抗宿主病的可能性。设计:回顾性病例分析。对象:选取2001-03/2007-06在广东省人民医院血液科行异基因造血干细胞移植的白血病患者31例,男18例,女13例,平均年龄32岁。方法:所有患者均采用改良BU/CY联合FLU方案进行预处理,经深静脉输入单个核细胞数5.48(3.7～8.4)×108/kg,CD34+细胞数10.45(3.6～28.0)×106/kg。移植后出现移植物抗宿主病的患者在治疗前、治疗好转或缓解时留取外周血标本,尚无移植物抗宿主病的患者复查时采集外周血标本。主要观察指标:采用实时定量PCR技术监测外周血样本FOXP3mRNA表达及其与患者移植物抗宿主病的发生情况。结果:31例患者行异基因造血干细胞移植后,9例未出现移植物抗宿主病,9例发生急性移植物抗宿主病,13例出现慢性移植物抗宿主病。FOXP3表达水平的变化与急性移植物抗宿主病的临床演变相关,急性移植物抗宿主病发生时FOXP3水平较临床无移植物抗宿主病时明显降低(P=0.009),好转后FOXP3水平又逐步升高或恢复到基础水平;慢性移植物抗宿主病患者FOXP3的表达水平与无移植物抗宿主病患者相比无明显差异(P=0.107)。结论:急性移植物抗宿主病的发生与FOXP3表达降低有关,动态检测FOXP3mRNA表达水平的变化有可能为临床早期诊断急性移植物抗宿主病或预测其发生提供参考。实验数据未发现慢性移植物抗宿主病的发生与FOXP3表达有关。

Foxp3在慢性乙型肝炎肝组织中表达与病理及血清学相关性研究

目的 探讨慢性乙型肝炎患者肝组织中Foxp3表达及定位情况，并分析其与肝组织病理及血清学相关性。方法慢性乙型肝炎患者119例，对肝组织进行病理炎症活动度分级（G0-G4组）和纤维化分期（S1-S4组）。免疫组织化学法测定肝组织中Foxp3表达，并进行半定量分析。结果肝组织汇管区、小叶内Foxp3阳性表达G1-G4组均高于G0组（P均〈0．05），肝组织汇管区Foxp3阳性表达量与炎症活动度呈正相关（r=0．561，P〈0．01），但小叶区Foxp3各组阳性表达与炎症活动度无相关性（r=0．133，P〉0．05）。Foxp3表达与不同肝纤维化分期、血清ALT水平及HBVDNA载量之间均无相关性（P均〉0．05）。结论汇管区Foxp3的表达与病理炎症活动度具有相关性，迁延不愈的免疫损伤可能与机体缺少足够的调节性T细胞抑制有关。

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中Foxp3的表达及意义

目的:探讨转录因子Foxp3在系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血单个核细胞中的表达水平及其在SLE发病中的作用及意义。方法:选择SLE活动性、SLE非活动性患者和正常对照,运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot技术检测SLE患者和对照组外周血单个核细胞中Foxp3 mRNA和蛋白的表达水平。结果:SLE活动组Foxp3 mRNA和蛋白的表达水平明显低于SLE缓解组和对照组(P<0.05),SLE缓解组患者Foxp3 mRNA和蛋白的表达水平明显低于对照组(P<0.05)。结论:SLE患者外周血单个核细胞中Foxp3 mRNA和蛋白的表达水平显著低于正常对照,随着SLE患者病情的好转,Foxp3 mRNA和蛋白的表达水平逐渐增高。提示Foxp3与SLE疾病的活动性呈一定的线性相关关系。

乙型肝炎患者外周血单个核细胞中Foxp3 mRNA表达水平

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染患者外周血单个核细胞中叉头状螺旋转录因子(Foxp3)mRNA表达及其与HBV感染后转归的关系。方法应用实时RT-PCR方法检测19例急性乙型肝炎、50例慢性乙型肝炎、21例乙型肝炎后肝硬化、15例慢性乙型重型肝炎和15例正常对照组外周血单个核细胞中Foxp3 mRNA表达,应用ELISA法检测其血清中白细胞介素(IL)-10、转化生长因子β(TGF-β)含量,并观察它们与Foxp3 mRNA的相关性。结果急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎、肝硬化、慢性重型肝炎患者Foxp3 mRNA水平高于正常对照组(P<0.05),重型肝炎Foxp3 mRNA水平高于其他各组(P<0.05)。HBV感染各组IL-10、TGF-β含量较正常组明显升高(P<0.05),急性乙型肝炎组IL-10含量较慢性乙型肝炎组明显升高(P<0.05);急性乙型肝炎组TGF-β含量与肝硬化组、重型肝炎组比较差异无统计学意义(P>0.05),其他各组两两比较差异有统计学意义(P<0.05)。IL-10、TGF-β与Foxp3 mRNA表达水平无相关性。结论急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎、肝硬化、慢性重型肝炎患者Foxp3 mRNA水平高于正常人,重型肝炎患者Foxp3 mRNA水平高于其他各组HBV感染者,表明Foxp3参与了HBV发病过程,外周血单个核细胞中Foxp3 mRNA表达水平可能与疾病预后密切相关。

肝脏MRI联合血清DKK1、GPC3、FOXP3、CXCL13和AFP检测诊断肝细胞癌价值分析

目的探究MRI技术联合检测血清DKK1、GPC3、FOXP3、CXCL13及AFP在肝细胞癌(HCC)患者中的诊断价值。方法选取2017年1月至2018年6月,北京朝阳医院住院HCC患者80例为肝癌组,肝硬化以及健康体检者各60例为良性肝病组和对照组。各组纳入患者均行MRI检查,并采用ELISA法测定血清DKK1、GPC3、FOXP3、CXCL13、AFP。计算并比较各指标的阳性率、灵敏度、特异性。结果血清中四种标志物含量比较,肝癌组和良性肝病组均高于健康人,肝癌组高于良性肝病组(P<0.05)。MRI技术及血清DKK1、GPC3、FOXP3、CXCL13肝癌诊断的灵敏度分别为88.8%、95.0%、91.3%、85.0%、93.7%,特异性分别为76.7%、85.0%、80.0%、71.7%、81.7%,且均高于AFP的[(81.3%,56.7%),P<0.05)]。结论MRI技术联合血清DKK1、GPC3、FOXP3、CXCL13可以提高对HCC的检出率,具有较高的临床应用价值。