Southern印迹检测智力低下患者的脆性X基因

目的用Southern印迹法检测脆性X基因来确定脆性X基因携带者和脆性X综合征的患者。方法提取27例智力低下患者标本的DNA,用EagI和EcoRI酶切,酶切产物电泳后进行Southern转印,探针杂交后放射自显影,根据DNA片段大小检测脆性X综合征携带者与突变患者。结果检测24位智力低下患者的外周血及3例有智力低下家族史孕妇的羊水后发现3例患者患有脆性X综合征。结论用Southern印迹法诊断脆性X综合征,是一种可靠的首选检测方法,适用于出生后患儿及产前诊断及遗传咨询。

脆性X综合征3个家系的基因诊断

采用快速毛细管ＰＣＲ非同位素检测及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交技术，对３个脆性Ｘ综合征家系１８名成员进行了基因型鉴定，其检出全突变患者４例，前突变女性携带者４例及正常男性传递者（ＮＴＭｓ）２例，结果显示直接基因诊断方法较细胞遗传学检查更灵敏，对３个家系进行系谱分析证实其遗传特点符合Ｓｈｅｒｍａｎ推论及Ｓｍｉｔｈｓ的观察，同时提供了一种更加快速筛查脆性Ｘ综合征的非同位素ＰＣＲ诊断方法。

智低人群中脆性X综合征的细胞、分子遗传学研究

采用PCR、Southern Blot印迹杂交及细胞遗传学方法,对233名原发性智力低下患儿进行了FMR-1基因的突变分析和Xq27.3脆性位点检查。结果:确诊9名脆性X综合征患者,占3.86％,并在部分家庭成员中检出了女性前突变和全突变携带者,排除细胞学方法假阳性1例。PCR方法简便迅速,成本低,较细胞学方法更具优越性,适于临床普及应用和人群筛查,是遗传咨询中的有效检查手段。

FMRP检测在儿童脆性X综合征中诊断价值的实验评价

目的对脆性X智力低下蛋白(fragile X mental retardation protein,FMRP)免疫细胞化学诊断方法并进行临床流行病学评价;利用ROC曲线确定适合本地筛查脆性X综合征的外周血淋巴细胞FMRP免疫组化法的诊断临界点。方法对临床拟诊为不明原因智力低下的的41例不明原因的智力低下患儿,同时进行免疫细胞化学方法进行外周血淋巴细胞FMRP表达检测和7-deza-dGTP PCR法两种方法检查,以目前较为公认的7-deza-dGTP PCR法为诊断金标准,对外周血淋巴细胞FMRP细胞免疫组化法(SP法)进行实验评价,计算其灵敏度、特异度、阳性似然比、阴性似然比等统计学指标。采用ROC曲线确定适合本地筛查脆性X综合征的外周血淋巴细胞FMRP表达率的诊断临界点。结果41例不明原因智力低下患儿中染色体核型分析均正常,其中染色体脆性位点检查异常的1例,约为2.4%。7-deza-dGTP PCR法诊断FXS患者11例,约占26.2%,其中男9例,女2例;ROC计算得出最佳的外周血淋巴细胞FMRP表达率的诊断临界点为46%,灵敏度为90.9%,特异度为93.5%。结论外周血淋巴细胞FMRP免疫细胞化学检测是一种可靠的FXS诊断和筛查方法,具有快速、简便、廉价、相对无创伤性等优点,可进行大样本筛查及标本邮寄快递检测,适宜在我国基层开展早期FXS患者诊断和筛查。