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Genetic Relationship between Francisella Tularensis Strains from China and from Other Countries 被引量:7
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作者 WANG YanHua HAI Rong ZHANG ZhiKai XIA LianXu CAI Hong LIANG Ying SHEN XiaoNa YU DongZheng 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2011年第3期310-314,共5页
Objective To study the types of subspecies of Francisella tularensis from China and to investigate the genetic relationships between F. tularensis strains from China and from other countries. Methods Ten strains of F.... Objective To study the types of subspecies of Francisella tularensis from China and to investigate the genetic relationships between F. tularensis strains from China and from other countries. Methods Ten strains of F. tulorensis isolated from China were amplified by using typing primers Cl/C4 and RD1. On the basis of the lengths of the polymerase chain reaction (PCR) products, it was concluded that these strains of F. tularensis belonged to the same subspecies. At the same time, thefopA, tul4, and 16S rRNA genes of the I0 strains were amplified, and a three-gene based phylogenetic analysis was performed using the Molecular Evolutionary Genetics Analysis software version 4.0. Results The 10 strains of F. tularensis from China were all identified as belonging to subspecies holarctica (type B). We found no direct relationship between the genotypes of F. tulurensis subsp. holarctica and the geographical area from where they were isolated. Conclusion The F. tularensis strains isolated from North China mainly belong to subspecies holorctica (type B). The strains of F. tularensis subsp, holarctico from China may have evolved earlier than those from Europe and North America. 展开更多
关键词 francisella tularensis TULAREMIA Phylogenetic analysis Genotyping PCR
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An outbreak of granulomatous inflammation associated with Francisella noatunensis subsp, orientalis in farmed tilapia (Oreochromis niloticus × O. aureus) in China
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作者 林强 李宁求 +7 位作者 付小哲 胡钱东 常藕琴 刘礼辉 张德锋 王广军 伞桂宝 吴淑勤 《Chinese Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 2016年第3期460-466,共7页
In 2013,a novel disease was detected in tilapia( Oreochromis niloticus × O.aureus) in Guangzhou,South China.To identify the causative pathogen,we conducted histological examination,bacteria isolation,and purifica... In 2013,a novel disease was detected in tilapia( Oreochromis niloticus × O.aureus) in Guangzhou,South China.To identify the causative pathogen,we conducted histological examination,bacteria isolation,and purification,and sequenced the 16 S rRNA gene of isolates.Infected fish had a large number of white granulomas in the kidney,liver,heart,and spleen.The head kidney and spleen were markedly swollen.A bacterium strain designated as gz201301 was recovered from the spleen of infected tilapia.The 16 S rRNA sequence of gz201301 revealed that it was highly similar to F.noatunensis subsp.orientalis.This is the first report of a Francisella-like infection in farmed tilapia in China. 展开更多
关键词 中国南部 弗朗西斯 罗非鱼 肉芽肿 亚种 养殖 侧柏 RRNA基因序列
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土拉弗朗西斯菌致病机制研究进展
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作者 董译滟 王聪 +2 位作者 任晨洋 文雪霞 张莹 《动物医学进展》 北大核心 2023年第12期108-112,共5页
土拉弗朗西斯菌(Francisella tularensis,Ft)是一种可引起人畜共患的胞内病原菌,属于革兰氏阴性菌,具有多形性,无芽孢,无鞭毛,可感染多种类型的细胞。在体内,Ft主要感染巨噬细胞并在其中复制。为了在宿主体内建立有效感染,Ft已进化出多... 土拉弗朗西斯菌(Francisella tularensis,Ft)是一种可引起人畜共患的胞内病原菌,属于革兰氏阴性菌,具有多形性,无芽孢,无鞭毛,可感染多种类型的细胞。在体内,Ft主要感染巨噬细胞并在其中复制。为了在宿主体内建立有效感染,Ft已进化出多种策略以拮抗宿主的免疫机制,适应宿主巨噬细胞质的环境并延缓细胞凋亡。这些策略主要包括增强机体对菌体的摄取、菌体从吞噬小体中逃逸、拮抗宿主的氧化防御、抑制宿主的炎症反应和维持菌体自身的稳定等。论文主要从这些方面对Ft的致病机制研究进展进行综述,以期为该病原的研究提供参考。 展开更多
关键词 土拉弗朗西斯菌 病原特征 致病机制
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土拉弗朗西斯菌FopA单抗阻断ELISA抗体检测方法的建立
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作者 崔国林 戚心怡 +4 位作者 吴村 蔡梦雷 张政钢 赵东旭 翟新国 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期850-856,共7页
目的建立一种基于FopA单抗的阻断ELISA抗体检测方法。方法以pET-32a为载体表达土拉弗朗西斯菌的FopA蛋白,并以其免疫BALB/c小鼠制备单抗,以LVS超声裂解液为包被抗原、HRP标记FopA单抗为阻断抗体,建立直接阻断ELISA方法,利用阴性血清平均... 目的建立一种基于FopA单抗的阻断ELISA抗体检测方法。方法以pET-32a为载体表达土拉弗朗西斯菌的FopA蛋白,并以其免疫BALB/c小鼠制备单抗,以LVS超声裂解液为包被抗原、HRP标记FopA单抗为阻断抗体,建立直接阻断ELISA方法,利用阴性血清平均值+2SD或3SD确定该方法临界值,测定该方法特异性、敏感性、重复性及其与平板凝集试验的符合率,并利用该方法检测攻毒小鼠血清抗体变化趋势。结果筛选获得1株稳定分泌IgG1(κ型)单抗的杂交瘤细胞,并基于该单抗建立阻断ELISA方法,包被抗原最优浓度为3μg/mL、HRP标记FopA单抗最优稀释度为1∶4000、待检血清最优稀释度为1∶10,阴性临界值为27%、阳性临界值为41%、可疑区间为27%~41%,该方法的特异性、敏感性、重复性和符合率均良好,可检出攻毒9 d后小鼠血清抗体。结论成功制备FopA单抗,并基于该单抗建立一种快速、准确和高通量抗体检测的阻断ELISA方法,为我国土拉弗朗西斯菌流调和防控提供技术支撑。 展开更多
关键词 土拉弗朗西斯菌 FopA 阻断ELISA 单抗 原核表达
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从中哈边境亚洲璃眼蜱中检测到弗朗西斯氏菌样内共生体核酸 被引量:6
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作者 尹小平 赵姗姗 +5 位作者 刘丹 田延河 巴特尔 程天立 张江国 王远志 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期170-172,177,共4页
目的对中哈边境铁路线区域的亚洲璃眼蜱中弗朗西斯菌属及内共生体检测。方法 2015年在中哈边境采集的游离蜱进行形态学与分子学鉴定后,扩增弗朗西斯菌属及共生体16SrRNA和sdhA基因,对阳性产物测序后进行Blast分析,用Mega 6.0构建分子遗... 目的对中哈边境铁路线区域的亚洲璃眼蜱中弗朗西斯菌属及内共生体检测。方法 2015年在中哈边境采集的游离蜱进行形态学与分子学鉴定后,扩增弗朗西斯菌属及共生体16SrRNA和sdhA基因,对阳性产物测序后进行Blast分析,用Mega 6.0构建分子遗传进化树。结果对243只游离蜱经形态学与分子学鉴定为亚洲璃眼蜱后,经PCR病原学检测及测序得到35份(只)阳性,阳性率为14.4%。分析得到两株(Seq1和Seq2)不同基因型的序列,遗传进化树显示,这两株弗朗西斯菌属内共生体聚到1支,未检测到土拉弗朗西斯菌。结论在中哈边境铁路线区域亚洲璃眼蜱中首次检测到弗朗西斯菌样核酸。 展开更多
关键词 亚洲璃眼蜱 PCR 弗朗西斯菌 中哈边境
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10株蜃楼弗朗西斯菌的鉴定与特征分析 被引量:11
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作者 张磊 叶大柠 +4 位作者 朱焱 柴海云 朱庆义 陈茶 屈平华 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2017年第4期271-276,共6页
目的对10株蜃楼弗朗西斯菌样细菌进行菌种鉴定和特征分析。方法对环境水源及临床患者样本中分离的10株实验菌株,进行菌体形态和生长特征观察、生化表型鉴定、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)鉴定和16S rRNA测序分析。E-... 目的对10株蜃楼弗朗西斯菌样细菌进行菌种鉴定和特征分析。方法对环境水源及临床患者样本中分离的10株实验菌株,进行菌体形态和生长特征观察、生化表型鉴定、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)鉴定和16S rRNA测序分析。E-test方法检测菌株对各种药物的最低抑菌浓度(MIC)。结果该10株菌均为着色较淡的革兰阴性小球杆菌;尿素酶阴性、硝酸盐还原试验阴性、V因子和X因子需求试验阴性,氧化酶和触酶试验阳性;在M-H平板和麦康凯平板上不生长,血平板、巧克力平板和BCYE平板上生长迅速,可形成白色不透明型、无色透明型和灰色光滑型,直径约2 mm大小的菌落。16S rRNA基因测序显示,该10株菌与蜃楼弗朗西斯菌ATCC 25015同源性在99.6%以上,系统发育分析亦位于同一个分枝上。MALDI-TOF MS分析显示,该10株均含有6 153 m/z、5 180 m/z、7 757 m/z和9 392 m/z等特征峰,与蜃楼弗朗西斯菌ATCC 25015类似。采用Vitek 2 GN卡及NH卡、API 20NE及NH试条则可能错误鉴定为少动鞘氨醇单胞菌、灰色奈瑟菌、气味黄杆菌和嗜血杆菌等。药敏试验显示,对氯霉素、多西环素、庆大霉素、四环素、氧氟沙星和环丙沙星等均敏感。结论该10株菌可鉴定为蜃楼弗朗西斯菌,其生化反应不活泼,常规方法鉴定会发生错误,应予以重视。 展开更多
关键词 蜃楼弗朗西斯菌 鉴定 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱
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巢式-PCR检测蜱体中土拉弗氏菌的fopA基因及血清学调查 被引量:5
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作者 李志清 刘增加 +5 位作者 上官改珍 何莹 巨敏 李旭光 胡良煜 徐燕 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2014年第3期160-164,共5页
为调查陕西省部分地区是否存在土拉弗氏菌病,采集子午岭山区的的蜱标本及人群血标本.蜱标本提取体内细菌DNA,采用巢式PCR法进行检测并对阳性标本进行基因分型;对人群血清采用免疫吸附实验进行血清学抗体检测;统计处理应用SPSS软件.结果... 为调查陕西省部分地区是否存在土拉弗氏菌病,采集子午岭山区的的蜱标本及人群血标本.蜱标本提取体内细菌DNA,采用巢式PCR法进行检测并对阳性标本进行基因分型;对人群血清采用免疫吸附实验进行血清学抗体检测;统计处理应用SPSS软件.结果在富县、陇县共采集3个蜱种1 116只蜱标本,其中达吉斯坦革蜱、日本血蜱、嗜群血蜱3个蜱种25只蜱标本检测到土拉弗氏菌的fopA基因,总阳性率为2.24%;不同蜱种阳性率存在差异,以日本血蜱的阳性率最高(15.39%).从25份阳性标本中选取10份进行序列测序,获得核酸序列与土拉弗氏菌B亚种菌株序列AF247690.2 100%同源.对阳性标本进行SSTR9区域扩增,共有6种不同的拷贝数,其中以拷贝数9的占多数(40.00%).利用MEGA (4.0)软件进行聚类分析显示主要分为两大群.检测当地居民血清标本725份,检测出土拉弗氏菌病血清IgG抗体阳性者37份,阳性率5.10%.本文首次证实陕西省土拉弗氏菌病的存在,对预防控制具有重要指导意义. 展开更多
关键词 土拉弗氏菌 基因型别 血清流行病学
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TaqMan探针实时荧光定量PCR快速检测土拉弗朗西斯菌 被引量:3
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作者 赵素慧 王春晖 +6 位作者 周莹 韦耀 韩桂圆 钮红岺 赵卫 张其威 万成松 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期602-606,共5页
目的建立TaqMan探针实时荧光定量PCR方法(QF-PCR),快速检测土拉弗朗西斯菌。方法针对土拉弗朗西斯菌的外膜蛋白fopA基因,利用Primer 5.0设计引物及TaqMan探针,人工合成fopA基因保守片段,克隆到载体作为阳性标准品,进行荧光定量检测,制... 目的建立TaqMan探针实时荧光定量PCR方法(QF-PCR),快速检测土拉弗朗西斯菌。方法针对土拉弗朗西斯菌的外膜蛋白fopA基因,利用Primer 5.0设计引物及TaqMan探针,人工合成fopA基因保守片段,克隆到载体作为阳性标准品,进行荧光定量检测,制作定量标准曲线,并以合成fopA基因为模板,PF、PR为引物,研究其灵敏度、特异性和准确性。结果构建了含fopA基因的重组质粒,以不同浓度的重组质粒制作标准曲线,在103~107拷贝数之间有较好的线性关系。灵敏度试验表明,该方法可检测到30.6个拷贝数的重组质粒,比普通PCR灵敏度高;特异性试验表明,能选择性检测土拉弗朗西斯菌,而与其他病原菌无交叉反应,与普通菌落PCR结果一致;重复性试验表明,拷贝数为3.06×106样品5次平行试验,标准差为0.201,变异系数为0.88%。结论本研究建立了TaqMan探针QF-PCR快速检测技术,具有灵敏度高、特异性强、重复性好等特点,可用于快速、实时、定量检测土拉弗朗西斯菌,为快速检测生物战剂级微生物建立了一种人工合成特异基因TaqMan探针实时荧光定量PCR新方法。 展开更多
关键词 土拉弗朗西斯菌 TAQMAN探针 fopA基因 荧光定量PCR
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土拉菌单克隆抗体的制备及其特性的研究 被引量:6
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作者 端青 赵忠利 +1 位作者 田青 张国珍 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第2期3-4,共2页
用土拉弗朗西斯菌疫苗株作为抗原获得了2株单克隆抗体Ftg和Ft44,其抗体亚类分别为IgC2b和IgM,Ft9单抗识别的抗原位点是土拉菌的外膜蛋白,Ft44识别的是脂多糖。2株单抗均可在酶联免疫吸附试验中检出土拉菌,Ft9单抗还可在凝集和免疫... 用土拉弗朗西斯菌疫苗株作为抗原获得了2株单克隆抗体Ftg和Ft44,其抗体亚类分别为IgC2b和IgM,Ft9单抗识别的抗原位点是土拉菌的外膜蛋白,Ft44识别的是脂多糖。2株单抗均可在酶联免疫吸附试验中检出土拉菌,Ft9单抗还可在凝集和免疫荧光试验中与土拉菌发生特异性反应,并不与相关细菌交叉。 展开更多
关键词 土拉弗朗西斯菌 单克隆抗体 抗体亚类
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应用TaqMan荧光定量PCR检测土拉弗朗西斯菌 被引量:8
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作者 史清海 曲识 +3 位作者 周冬生 郭兆彪 翟俊辉 杨瑞馥 《生物技术通讯》 CAS 2009年第6期806-809,共4页
目的:利用Roche LightCycler实时定量PCR系统建立一种快速、灵敏、特异的检测土拉弗朗西斯菌的方法。方法:基于TaqMan荧光探针实时定量PCR技术,选择土拉弗朗西斯菌染色体上的特异序列[醇醛酮还原酶(AKR)和外膜蛋白FopA基因]作为检测靶序... 目的:利用Roche LightCycler实时定量PCR系统建立一种快速、灵敏、特异的检测土拉弗朗西斯菌的方法。方法:基于TaqMan荧光探针实时定量PCR技术,选择土拉弗朗西斯菌染色体上的特异序列[醇醛酮还原酶(AKR)和外膜蛋白FopA基因]作为检测靶序列,建立土拉弗朗西斯菌实时定量PCR检测方法;评价该检测方法的特异性和灵敏性;采用克隆菌株污染环境土壤来模拟实际样品,评价该检测方法在快速检测与现场检测等实际应用中的表现。结果:优化筛选基因组中的FT-AKR和FT-fopA片段作为检测靶序列,所建立的土拉弗朗西斯菌实时定量PCR检测方法检测克隆菌株质粒的灵敏度均为10个拷贝/每个反应体系;以其他非土拉弗朗西斯菌为模板未出现非特异扩增;模拟环境土壤样品检测灵敏度2个引物对分别为440和960CFU/g土壤;盲测实验结果显示对于灵敏度范围内的阳性样本均能正确识别,并能正确检测出不同浓度的阳性样本。以FT-fopA片段为靶序列的扩增效率不及基于FT-AKR引物对的扩增。结论:基于FT-AKR片段的引物对扩增效率高,检测土拉弗朗西斯菌具有特异、灵敏的特点,对临床诊断、环境污染监测、防治生物突发事件等具有重要意义。 展开更多
关键词 土拉弗朗西斯菌 荧光定量PCR TAQMAN探针 定量检测
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西北地区重要蜱媒疾病的调查研究 被引量:4
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作者 李依萍 庞众多 刘增加 《中华卫生杀虫药械》 CAS 2016年第2期180-183,共4页
目的了解西北地区存在的及可能存在的蜱媒疾病。方法采用布旗法收集地区内的蜱标本进行分子生物学检测;收集当地居民的血清标本,运用血清学方法检测莱姆病、Q热、土拉菌病及无形体病等相关疾病的抗体;收集西北地区内所有相关蜱媒疾病的... 目的了解西北地区存在的及可能存在的蜱媒疾病。方法采用布旗法收集地区内的蜱标本进行分子生物学检测;收集当地居民的血清标本,运用血清学方法检测莱姆病、Q热、土拉菌病及无形体病等相关疾病的抗体;收集西北地区内所有相关蜱媒疾病的发病资料,分类整理。结果文献调研显示,西北地区已报道的蜱媒疾病共有7种。在西北地区内共采集蜱标本2 460只,分属11个蜱种;其中304只蜱标本检测发现莱姆病螺旋体、207只感染无形体,75只感染土拉弗菌,200只感染Q热立克次体。除无形体外,其他3种病原体在4个调查点内均存在。采集当地人群血清725份,其中185份血清存在目标抗体,进一步证实调查疾病的存在。结论首次对西北地区内蜱媒疾病进行了较系统的调查,证实多种蜱媒疾病的存在,对西北地区蜱媒疾病的预防控制具有重要意义。 展开更多
关键词 莱姆病螺旋体 Q热立克次体 土拉弗氏菌 流行病学调查
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基于高通量测序的平均核苷酸一致性在1株弗朗西斯菌鉴定中的应用 被引量:6
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作者 张磊 郑敏玲 +5 位作者 王亚 柴海云 邓光远 朱庆义 陈茶 屈平华 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2017年第7期499-502,共4页
目的对一溺水性肺炎患者血液标本中分离的弗朗西斯菌(编号Wenzhou1)进行菌种鉴定。方法采用Illumina二代测序平台2000/mi Seq系统对实验菌株进行高通量测序,Microbe Trakr Plus软件对测得的全基因组草图进行序列拼接。在Gen Bank数据库... 目的对一溺水性肺炎患者血液标本中分离的弗朗西斯菌(编号Wenzhou1)进行菌种鉴定。方法采用Illumina二代测序平台2000/mi Seq系统对实验菌株进行高通量测序,Microbe Trakr Plus软件对测得的全基因组草图进行序列拼接。在Gen Bank数据库中,对实验菌株的16S rRNA基因、mdh基因、rpo B基因和sdh A基因序列进行NCBI BLAST分析,获得与实验菌株遗传关系接近的近缘菌种信息。Java 8运行环境,Ortho ANI软件对实验菌株和近缘菌种进行全基因组序列NCBI BLAST搜索和全基因组平均核苷酸一致性(average nucleotide identity,ANI)分析。结果测得的弗朗西斯菌Wenzhou1的基因组大小为1.96×10~6bp,含74个重叠群(contigs)。基因组G+C mol%为32.1%,与其他弗朗西斯菌和另弗朗西斯菌一致。Gen Bank数据库NCBI BLAST分析结果显示,Wenzhou1的16S rRNA基因、mdh基因、rpo B基因和sdh A基因序列与西班牙弗朗西斯菌FSC454和"土拉弗朗西斯菌新凶手亚种"3523最为近缘。ANI分析显示,实验菌株Wenzhou1与西班牙弗朗西斯菌FSC454的ANI为97.8%,与"土拉弗朗西斯菌新凶手亚种"3523的ANI在97.5%~97.6%之间,而与土拉弗朗西斯菌的4个亚种的ANI在91.3%~91.5%之间。结论基于全基因组序列的ANI分析是一种准确和有效的菌种鉴定方法。Wenzhou1可明确鉴定为西班牙弗朗西斯菌。 展开更多
关键词 西班牙弗朗西斯菌 平均核苷酸一致性分析 菌种鉴定
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肌动蛋白结合脂筏促进巨噬细胞摄入土拉弗朗西斯菌 被引量:2
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作者 潘欣 曾思良 +3 位作者 蔡家麟 吴鉴今 杨光 黄通来 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2011年第4期31-35,共5页
观察土拉弗朗西斯菌LVS借助脂筏以肌动蛋白为动力被鼠巨噬细胞摄入的过程。细胞胆固醇用菲律平Ⅲ染色,结合神经节苷酯GM1的霍乱毒素B亚基用键合了Alexa 594的兔抗霍乱毒素B亚基二抗显色;肌动蛋白用键合了Alexa 594的鬼笔环肽显色。免疫... 观察土拉弗朗西斯菌LVS借助脂筏以肌动蛋白为动力被鼠巨噬细胞摄入的过程。细胞胆固醇用菲律平Ⅲ染色,结合神经节苷酯GM1的霍乱毒素B亚基用键合了Alexa 594的兔抗霍乱毒素B亚基二抗显色;肌动蛋白用键合了Alexa 594的鬼笔环肽显色。免疫荧光显微镜观察到脂筏成分中的胆固醇、神经节苷酯GM1均可与细菌共定位;胆固醇可与肌动蛋白共定位。随着感染时间的延长,细菌可离开脂筏。离开脂筏的细菌囊泡可与肌动蛋白共定位。这些发现提示肌动蛋白与脂筏结合,在弗朗西斯菌早期进入巨噬细胞期间发挥重要作用。 展开更多
关键词 巨噬细胞 土拉弗朗西斯菌 脂筏 胆固醇 肌动蛋白
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PCR和Southern Blot检测土拉弗氏菌气溶胶 被引量:4
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作者 翟俊辉 杨瑞馥 +2 位作者 车凤翔 陈梅玲 张松乐 《微生物学免疫学进展》 1998年第2期35-39,共5页
为提高检测土拉弗氏菌的特异性和敏感性,建立了土拉菌PCR及核酸杂交检测方法。运用平板计数、多聚酶链反应对土拉菌气溶胶稳定性进行了比较,结果表明PCR具有较高灵敏度,并且在采样后3小时PCR就可以得出定性结果,而平板计... 为提高检测土拉弗氏菌的特异性和敏感性,建立了土拉菌PCR及核酸杂交检测方法。运用平板计数、多聚酶链反应对土拉菌气溶胶稳定性进行了比较,结果表明PCR具有较高灵敏度,并且在采样后3小时PCR就可以得出定性结果,而平板计数则需要3~7天。采用PCR法合成了土拉菌376-bp探针,分别对细菌菌液、568-bpPCR产物和气溶胶样品进行杂交,结果表明菌悬液直接杂交可检出105CFU左右的细菌,检测PCR产物可达40pg。 展开更多
关键词 土拉弗氏菌 PCR 野兔热 气溶胶
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不同微生物在自然环境中的存活力研究 被引量:2
15
作者 张松乐 张朝隆 姜黎 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期309-311,共3页
目的 研究日光辐射对土拉杆菌、B2 71噬菌体和炭疽杆菌存活力的影响 ,为公共卫生防疫、生物环境污染治理提供参考依据。方法 选择直径为 14mm的不锈钢圆片和细沙土作为表面污染样片 ,每个样片上加一定浓度的菌液 ,放在由石英玻璃覆盖... 目的 研究日光辐射对土拉杆菌、B2 71噬菌体和炭疽杆菌存活力的影响 ,为公共卫生防疫、生物环境污染治理提供参考依据。方法 选择直径为 14mm的不锈钢圆片和细沙土作为表面污染样片 ,每个样片上加一定浓度的菌液 ,放在由石英玻璃覆盖的盒内暴露 ,间隔不同时间采样分析不同样品的存活情况 ,用天空辐射表测定日光直接辐射和散射辐射强度。结果 日光直射对 3种微生物存活的影响最大 ,散射次之 ;在同一条件下 ,直射 2 0min ,土拉杆菌的衰亡率达 99 6 5 % ,散射为 78 0 % ;直射 2h ,B2 71噬菌体的衰亡率为 95 4 5 % ,散射 8h为 82 70 % ,对照组还不到 1 0 % ;炭疽杆菌在不锈钢片上的抵抗能力要比细沙土表面上的低得多 ,直射第 16d前者存活率为 0 ,而后者为11 81% ,散射第 6 0d ,前者存活率为 0 ,后者为 34 4 9% ,对照组第 10个月前者的存活率为 5 38% ,而后者为 2 5 5 1%。结论  3种不同微生物对自然环境抵抗能力依次为炭疽杆菌、B2 71噬菌体和土拉杆菌。 展开更多
关键词 日光辐射 土拉杆菌 B271噬菌体 炭疽杆菌
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土拉弗朗西斯菌与巨噬细胞膜的早期相互作用 被引量:2
16
作者 潘欣 祁建城 +1 位作者 李广波 贾文凯 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2009年第2期1-5,共5页
评估土拉弗朗西斯菌LVS在感染鼠巨噬细胞早期与细胞膜的相互作用。用表达GFP的土拉弗朗西斯菌LVS感染鼠巨噬细胞J774A.1。结合单抗的小窝蛋白-1或转铁蛋白受体-1分别用键合了Alexa594的羊抗鼠二抗显色。土拉弗朗西斯菌疫苗株LVS可以诱... 评估土拉弗朗西斯菌LVS在感染鼠巨噬细胞早期与细胞膜的相互作用。用表达GFP的土拉弗朗西斯菌LVS感染鼠巨噬细胞J774A.1。结合单抗的小窝蛋白-1或转铁蛋白受体-1分别用键合了Alexa594的羊抗鼠二抗显色。土拉弗朗西斯菌疫苗株LVS可以诱导宿主细胞膜伸出伪足,将细菌吸收进入巨噬细胞。分布在细胞膜上的小窝蛋白-1和转铁蛋白受体-1参与巨噬细胞对弗朗西斯菌的摄入。这些发现说明,弗朗西斯菌进入巨噬细胞需要细胞膜微结构域和小窝蛋白;在感染早期转铁蛋白受体-1参与了细菌的摄入,这可能与弗朗西斯菌获取铁以利在胞内生存有关。 展开更多
关键词 巨噬细胞 土拉弗朗西斯菌 微膜结构域 小窝蛋白-1 转铁蛋白受体-1
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土拉弗朗西斯氏菌LAMP快速检测方法的应用 被引量:4
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作者 李子微 邓仲良 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期212-217,共6页
旨在应用环介导恒温扩增技术(LAMP)检测土拉弗朗西斯氏菌。针对土拉弗朗西斯氏的FopA基因设计LAMP引物,优化LAMP反应条件,并对其特异性、灵敏度进行评价。结果显示,(1)对12种细菌和蜱的DNA(含大量假单胞菌属细菌)进行LAMP扩增,仅土拉弗... 旨在应用环介导恒温扩增技术(LAMP)检测土拉弗朗西斯氏菌。针对土拉弗朗西斯氏的FopA基因设计LAMP引物,优化LAMP反应条件,并对其特异性、灵敏度进行评价。结果显示,(1)对12种细菌和蜱的DNA(含大量假单胞菌属细菌)进行LAMP扩增,仅土拉弗朗西斯氏菌发生了扩增反应;(2)土拉弗朗西斯氏菌纯培养物检出限为4.9×102 pg/mL;克隆株质粒检出限为10 copies/μL,低于普通PCR的最低检出值1×103 copies/μL;(3)土壤模拟样本检出限为44 CFU/g;(4)和进口荧光定量PCR试剂对比检测24份(8个稀释度)土拉弗朗西斯氏菌污染土壤样本,在灵敏度范围内,均能准确检测。LAMP技术检测土拉弗朗西斯氏菌特异性强、灵敏度高、高效,对土拉热的病原学诊断具有应用价值。 展开更多
关键词 土拉弗朗西斯氏菌 FopA基因 环介导恒温扩增技术 快速检测
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西北4省区蜱虫自然感染3种病原体的分子流行病学研究 被引量:3
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作者 李依萍 周小平 《国际检验医学杂志》 CAS 2012年第16期1966-1967,共2页
目的了解西北4省区蜱虫自然感染莱姆病螺旋体、土拉弗氏菌和Q热立克次体的情况。方法采用布旗法收集西北地区内的蜱标本进行分子生物学检测。结果文献调研显示:西北地区已报道的虫媒疾病共有15种。西北地区内共采集蜱标本2460只,涉及11... 目的了解西北4省区蜱虫自然感染莱姆病螺旋体、土拉弗氏菌和Q热立克次体的情况。方法采用布旗法收集西北地区内的蜱标本进行分子生物学检测。结果文献调研显示:西北地区已报道的虫媒疾病共有15种。西北地区内共采集蜱标本2460只,涉及11个不同蜱种。共有304只蜱标本检测发现莱姆病螺旋体,75只感染土拉弗菌,200只感染Q热立克次体,3种病原体在4个调查点内均存在。共采集到西北地区内当地人群血清725份,共有183份血清存在目标抗体,进一步证实调查疾病的存在。结论证实西北四省区存在3种蜱媒疾病在,对预防控制具有重要意义。 展开更多
关键词 伯氏疏螺旋体 弗朗西丝菌 土拉热 考克斯体 伯内特
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金标银染免疫渗滤法检测土拉弗朗西斯菌 被引量:3
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作者 张宏刚 陈苏红 +2 位作者 张敏丽 赵素莲 王升启 《生物技术通讯》 CAS 2011年第3期415-418,共4页
目的:建立金标银染免疫渗滤法检测土拉弗朗西斯菌(土拉菌)的方法,评价其灵敏度、特异性、重复性及其应用。方法:以小鼠抗土拉菌脂多糖单克隆抗体作为捕获抗体包被硝酸纤维素膜、兔抗土拉菌多克隆抗体作为检测抗体标记胶体金,通过金标银... 目的:建立金标银染免疫渗滤法检测土拉弗朗西斯菌(土拉菌)的方法,评价其灵敏度、特异性、重复性及其应用。方法:以小鼠抗土拉菌脂多糖单克隆抗体作为捕获抗体包被硝酸纤维素膜、兔抗土拉菌多克隆抗体作为检测抗体标记胶体金,通过金标银染技术放大检测信号,建立金标银染免疫渗滤法检测土拉弗朗西斯菌体系;评价该方法的灵敏度、特异性和重复性;以经荧光定量PCR定量的土拉弗朗西斯菌为检测对象,比较金标银染免疫渗滤法和免疫层析法。结果:金标银染免疫渗滤法检测土拉弗朗西斯菌的最小检出量为1.0×103 CFU/mL,灵敏度高于免疫层析法;检测大肠杆菌、炭疽芽孢杆菌、布鲁菌和鼠疫耶尔森菌的结果均为阴性;密封保存的检测卡80 d内重复性良好,100 d后反应强度略有降低。结论:金标银染免疫渗滤法检测土拉弗朗西斯菌敏感性高、特异性强、重复性好,且方便快捷,不需要仪器设备,可作为快速检测土拉弗朗西斯菌的首选方法。 展开更多
关键词 土拉弗朗西斯菌 免疫渗滤法 金标银染
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陕西省部分地区土拉弗朗西斯菌病自然疫源地调查研究 被引量:9
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作者 郑龙 《西北国防医学杂志》 CAS 2018年第7期426-431,共6页
目的:调查陕西省是否存在土拉弗朗西斯菌病的自然疫源地。方法:蜱类调查采用布旗法;小型啮齿动物调查采用夜夹法,病例采用回顾性流行病学调查;血清学检测采用酶联免疫吸附实验;病原分子生物学检测采用巢式-PCR法;统计学处理应用SPSS 9.... 目的:调查陕西省是否存在土拉弗朗西斯菌病的自然疫源地。方法:蜱类调查采用布旗法;小型啮齿动物调查采用夜夹法,病例采用回顾性流行病学调查;血清学检测采用酶联免疫吸附实验;病原分子生物学检测采用巢式-PCR法;统计学处理应用SPSS 9.0统计学软件。结果:调查发现富县、陇县和南郑县硬蜱科(ixodidae)5属15种蜱类,即硬蜱属(ixodes)1种、革蜱属(dermacentor)5种、血蜱属(haemaphysalis)4种、璃眼蜱属(hyalomma)3种和扇头蜱属(rhipicephalus)2种,以革蜱和血蜱种类较多。啮齿目7科16属24种,即松鼠科(sciuridae)2属2种,鼯鼠科(pteromyidae)2属2种,跳鼠科(dipididae)1属1种,鼹形鼠科(spalacidae)1属2种,仓鼠科(cricetidae)4属5种,鼠科(muridae)5属11种,豪猪科(hystricidae)1属1种,以鼠科种类最多。检测富县、陇县和南郑县部分林区居民血清样本707份,其中土拉弗朗西斯菌病血清IgG抗体阳性49份,总阳性率为6.93%,说明当地人群中存在土拉弗朗西斯菌病的自然感染。检测蜱标本1 117只,从达吉斯坦革蜱(D.daghestanicus)、日本血蜱(H.japonica)、嗜群血蜱(H.concinna)等3个蜱种中检测出25只蜱为土拉弗朗西斯菌标本阳性,总阳性率为2.24%。其中以日本血蜱的阳性率最高,为15.39%(χ2=20.91,P=0.01),说明当地蜱体中存在土拉弗朗西斯菌的自然感染。当地分布的达乌尔黄鼠(S.dauricus)、花鼠(T.sibiricus)、黑线姬鼠(A.agrarius)、小家鼠(M.musculus)和褐家鼠(R.norvegicus)等小型兽类,在周边省区已被学者证实为土拉弗朗西斯菌病的保菌宿主和传播者,提示富县、陇县和南郑县部分林区存在土拉弗朗西斯菌的保菌宿主啮齿目小型兽类。从25份阳性标本中选取10份进行序列测序,获得核酸序列与土拉弗朗西斯菌B亚种菌株序列AF247690.2 100%同源;对阳性标本进行SSTR9区域扩增,共有6种不同的拷贝数,其中拷贝数为9的居多(40.00%);利用MEGA 4.0软件进行聚类分析显示20份标本主要分为两大群。结论:陕西省富县、陇县和南郑县部分林区存在土拉弗朗西斯菌病的自然疫源地。 展开更多
关键词 土拉弗朗西斯菌病 土拉弗朗西斯菌 自然疫源地 陕西省
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