10株蜃楼弗朗西斯菌的鉴定与特征分析

目的对10株蜃楼弗朗西斯菌样细菌进行菌种鉴定和特征分析。方法对环境水源及临床患者样本中分离的10株实验菌株,进行菌体形态和生长特征观察、生化表型鉴定、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)鉴定和16S rRNA测序分析。E-test方法检测菌株对各种药物的最低抑菌浓度(MIC)。结果该10株菌均为着色较淡的革兰阴性小球杆菌;尿素酶阴性、硝酸盐还原试验阴性、V因子和X因子需求试验阴性,氧化酶和触酶试验阳性;在M-H平板和麦康凯平板上不生长,血平板、巧克力平板和BCYE平板上生长迅速,可形成白色不透明型、无色透明型和灰色光滑型,直径约2 mm大小的菌落。16S rRNA基因测序显示,该10株菌与蜃楼弗朗西斯菌ATCC 25015同源性在99.6%以上,系统发育分析亦位于同一个分枝上。MALDI-TOF MS分析显示,该10株均含有6 153 m/z、5 180 m/z、7 757 m/z和9 392 m/z等特征峰,与蜃楼弗朗西斯菌ATCC 25015类似。采用Vitek 2 GN卡及NH卡、API 20NE及NH试条则可能错误鉴定为少动鞘氨醇单胞菌、灰色奈瑟菌、气味黄杆菌和嗜血杆菌等。药敏试验显示,对氯霉素、多西环素、庆大霉素、四环素、氧氟沙星和环丙沙星等均敏感。结论该10株菌可鉴定为蜃楼弗朗西斯菌,其生化反应不活泼,常规方法鉴定会发生错误,应予以重视。

银翘散联合克拉霉素对蜃楼弗朗西斯菌的抑制作用研究

目的探究银翘散、克拉霉素对蜃楼弗朗西斯菌的体外抑制作用。方法选取蜃楼弗朗西斯菌ATCC25015为实验菌株,采用微量肉汤稀释法测定银翘散和克拉霉素的最低抑菌浓度(MIC);采用微量棋盘稀释法进行银翘散和克拉霉素的联合药敏试验;利用紫外分光光度法及RT-PCR测定银翘散和克拉霉素单用或联用时对蜃楼弗朗西斯菌生物膜形成的影响及greA基因mRNA表达的变化。结果银翘散、克拉霉素单药对蜃楼弗朗西斯菌MIC分别为6.40、0.32 mg/mL,二者联合用药时分级抑菌浓度指数(FIC)为0.75,提示两药配伍具有相加作用。与空白对照组比较,银翘散(1.6 mg/mL)、克拉霉素(0.08 mg/mL)可抑制蜃楼弗朗西斯菌生物膜的形成能力(P<0.05),而两药联合使用可增强抑制生物膜形成的能力,且较相同浓度单药组MIC浓度下降。与空白对照组比较,RT-PCR表明一定浓度的银翘散、克拉霉素单药或联用后菌株greA mRNA表达水平均呈现下调(P<0.05),但联合用药组较相同浓度的克拉霉素单药组下调更显著(P<0.05)。结论银翘散与克拉霉素联用时对蜃楼弗朗西斯菌的体外抑菌呈相加作用,同时可以增强对其生物膜形成及greA mRNA表达的抑制作用。