文冠果种皮中的香豆素类化合物及抗HIV-1活性研究

利用多种分离技术对文冠果种皮甲醇提取物的乙酸乙酯和正丁醇萃取部分进行分离纯化,根据理化性质和光谱数据鉴定结构,得到3个香豆素类化合物Ⅰ（臭矢菜素B）、Ⅱ（秦皮素）、Ⅲ（秦皮苷）,其中化合物Ⅰ为首次从无患子科中分离得到,Ⅱ、Ⅲ为首次从文冠果种皮中分离得到。通过对HIV-1ⅢB诱导感染C8166细胞致细胞病变的抑制试验及对HIV-1ⅢB感染MT4细胞的保护试验进行抗HIV-1活性研究,结果表明,化合物Ⅰ具有较强的体外抗HIV-1活性,CC50〉200μg/mL,EC50为8.61～12.76μg/mL,选择指数（SI）〉15.67～23.23;对HIV-1ⅢB感染的MT4细胞具有一定的保护作用。

HPLC法测定秦皮4种有效成分的含量

目的采用高效液相色谱法建立秦皮药材中秦皮甲素、秦皮苷、秦皮乙素、秦皮素的含量测定方法,为建立秦皮饮片质量评价体系提供含量测定方法学依据。方法制备秦皮供试品溶液,采用Inertsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以0.1%甲酸水为流动相A,甲醇为流动相B,进行梯度洗脱。检测波长:254 nm测定秦皮甲素、秦皮苷和秦皮乙素,340 nm测定秦皮素。进样量:10μL,柱温:30℃,流速:0.8 mL·min^-1,依次进样分析。结果秦皮甲素、秦皮苷、秦皮乙素和秦皮素质量浓度分别在78.60~1572、23.90~487.0、6.900~138.5、1.240~24.80 mg·L^-1内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数分别为0.9996、0.9996、0.9995、0.9996;秦皮供试品中,四者的平均回收率分别为98.1%、98.9%、98.1%和98.5%;RSD分别为1.5%、1.6%、1.2%和0.90%(n=6)。结论建立的方法适用于研究秦皮药材中秦皮甲素、秦皮苷、秦皮乙素和秦皮素的含量测定。

不同眼用剂型中秦皮苷的兔泪液药物动力学

目的：为了解滴眼液、速释眼膜和缓释眼膜中秦皮苷在兔泪液中的药物动力学差别。方法：采用薄层扫描法测定了不同时间兔泪液中秦皮苷的浓度。药物浓度时间数据采用非隔室统计矩原理进行分析。结果：滴眼液、速释眼膜、缓释眼膜中秦皮苷的泪液药物动力学参数间差异具非常显著性（Ｐ＜０．０１），ＭＲＴ分别为１４．４，２６．０，８８．５ｍｉｎ，速释眼膜和缓释眼膜的ＡＵＣ与剂量的比值分别为滴眼液比值的１．６６和２．５５。结论：缓释眼膜较优，在泪液中维持较长时间的药物浓度，可以提高药物疗效。

白头翁汤中秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮素和秦皮苷同时检测高效液相色谱法的建立及各药味对其溶出的影响

为了考察白头翁汤中其他药味对秦皮主要有效成分溶出的影响,试验采用高效液相色谱法（HPLC）[Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱,以乙腈（A溶液）-0.1%磷酸（含0.2%三乙胺,B溶液）为流动相进行梯度洗脱,0-23 min,流动相中A溶液含量由10%逐渐升为20%,流速0.8 mL/min,检测波长345 nm,柱温30℃,进样量10μL]检测白头翁汤及相关组方中的秦皮素、秦皮甲素、秦皮苷、秦皮乙素。结果表明：秦皮甲素、秦皮苷、秦皮乙素、秦皮素浓度分别在0.090-22.500,0.120-29.800,0.110-27.100,0.076-19.000μg/mL内,线性关系良好;仪器精密度、方法的重复性、稳定性、加样回收试验的相对标准偏差（RSD）均在2.0%以内;秦皮素溶出率受其他物质影响不大;黄柏和白头翁汤醇提液能明显增大秦皮乙素的溶出;白头翁汤中秦皮苷溶出率都低于秦皮药材;秦皮甲素的溶出规律与秦皮苷非常相似。说明该方法准确灵敏,可用于白头翁汤等相关中药组方中秦皮甲素、秦皮苷、秦皮乙素和秦皮素的含量测定;白头翁汤中的黄连、黄柏、白头翁对秦皮中秦皮素、秦皮甲素、秦皮苷、秦皮乙素的溶出都有影响。

多基原秦皮药材中秦皮甲素和秦皮苷的纯化工艺研究

目的建立一种适合纯化不同基原的秦皮药材中秦皮甲素和秦皮苷的工艺。方法以D101C大孔树脂为分离和纯化载体,以秦皮甲素和秦皮苷的含量为指标,建立并评价相关工艺参数。结果按照建立的工艺,分别以3种基原的秦皮药材为材料,采用确定的工艺处理,提取物中秦皮甲素和秦皮苷的转移率达到了80%以上,其质量分数可以提高5倍。结论该工艺适合多种基原的秦皮中秦皮甲素和秦皮苷的纯化。

正交试验法优选秦皮香豆素醇提工艺

研究了秦皮主要活性成分秦皮香豆素的最佳醇提工艺,并采用了毛细管区带电泳(CZE)快速分析了秦皮苷、秦皮甲素、秦皮乙素的含量。以3种秦皮香豆素含量作为考察指标,采用L9(34)正交表,通过考察乙醇体积分数、提取次数、提取时间和料液比4个因素对醇提效果的影响,得到秦皮最佳提取条件为:以体积分数65%的乙醇为提取溶剂,在料液比1∶9(g∶mL)的条件下,回流提取3次,每次1h,秦皮总香豆素的得率为3.61%。

秦皮苷减轻LPS诱导的肺炎小鼠肺组织炎症和氧化损伤

目的研究秦皮苷(fraxin)对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的肺炎小鼠肺组织炎症和氧化损伤的影响。方法实验分成Control(空白对照)、Model(肺炎模型)、fraxin-A(肺炎模型,8 mg/kg秦皮甙灌胃)、fraxin-B(肺炎模型,16 mg/kg秦皮甙灌胃治疗)、fraxin-C组(肺炎模型,32 mg/kg秦皮甙灌胃)。取肺组织和肺泡灌洗液,检测肺组织湿/干重比例,计数肺泡灌洗液细胞总数和中性粒细胞数目;ELISA法检测肺泡灌洗液中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)含量;比色法检测肺泡灌洗液中超氧化物歧化酶(superoxide orgotein dismutase,SOD)和一氧化氮(nitric oxide,NO)含量;可见分光光度法检测肺泡灌洗液中丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量;Western blot法检测肺组织中p-NF-κBp65、核转录因子-κB(nuclear factor-kappaB,NF-κB)p65、Toll样受体4(Toll-like receptor-4,TLR4)、诱导型一氧化氮合成酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、p-IκBα、IκBα蛋白表达。结果与Control组比较,Model组肺组织湿/干重比例升高,肺泡灌洗液细胞总数和中性粒细胞数目增多,肺泡灌洗液中IL-6、IL-1β、TNF-α含量和MDA、NO含量升高,SOD含量下降,肺组织中NF-κBp65、TLR4、i NOS蛋白水平升高。与Model组比较,fraxin-A、fraxin-B、fraxin-C组肺组织湿/干重比例降低,肺泡灌洗液细胞总数和中性粒细胞数目减少,肺泡灌洗液中IL-6、IL-1β、TNF-α含量和MDA、NO含量降低,SOD含量升高,肺组织中NF-κBp65、TLR4、iNOS蛋白水平降低。结论秦皮苷减轻LPS诱导的肺炎小鼠肺组织炎症和氧化损伤,其机制可能与TLR4/NF-κB有关。

水曲柳人工造林与培育技术的研究

在缓坡、轻微水湿地、农耕地等不同立地进行水曲柳人工造林,以农耕地为最佳,其次是缓坡。农耕地10 a生水曲柳人工幼林平均树高为5．430 m,为其它立地水曲柳人工幼林树高均值的150．0％,单位面积立木蓄积为其它立地立木蓄积的158．3％,树高、胸径最大值分别为6．80 m和7．3 cm,表现出较强的生长优势。水曲柳人工林生长规律为:3 a、6 a生时,树高、胸径、材积生长开始加快,速生期内胸径、树高连年生长量分别在0．40-0．67 cm之间和0．500 0-1．000 0 m之间。采用Riehards曲线进行水曲柳人工幼林树高生长过程拟合,结果为H=8．773 545×[1-EXP(-0．217 416 5 X)]3.574 767。

秦皮甙对重症肺炎大鼠炎症因子表达及相关通路活化的影响

目的研究研究秦皮甙(Fraxin)对肺炎克雷伯菌所致重症肺炎大鼠免疫功能及Janus蛋白酪氨酸激酶/信号转导和转录激活因子(JAK/STAT)和核转录因子κB(NF-κB)活化的作用。方法将50只雄性SD大鼠随机分为对照组,模型组和秦皮甙10、20和40 mg·kg^-1治疗组,通过肺炎克雷伯菌构建重症肺炎模型大鼠,秦皮甙灌胃干预治疗14 d后,组织观察和W/D比值分析肺组织损伤;采用HE染色进行病理学分析;ELISA试剂盒法检测各组大鼠血清中炎症因子IL-1β、IL-6、IL-10和IL-4的含量;Western blot印迹分析肺组织中活化的胱天蛋白酶3/9、JAK2/p-JAK2、STAT3/p-STAT3和P65/p-P65蛋白表达水平。结果与模型组比较,随着秦皮甙干预治疗剂量的增加,大鼠肺组织损伤评分和W/D值明显降低(P<0.05),肺损伤程度明显改善;肺组织中胱天蛋白酶3/9、p-JAK2、p-STST3和p-P65表达水平及血清中促炎症因子IL-1β和IL-6水平显著降低,抗炎因子IL-4和IL-10水平显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论秦皮甙通过抑制JAK/STAT和激活NF-κB信号途径,抑制细胞凋亡,促进肺组织损伤修复,进而缓解肺炎克雷伯菌所致重症肺炎症状。

秦皮苷对脂多糖诱导的软骨细胞氧化应激和炎症因子的影响

目的:探讨秦皮苷对脂多糖(LPS)诱导的软骨细胞炎症模型的抗炎抗氧化作用。方法:提取SD大鼠的软骨细胞并进行体外培养,并通过苏木精-伊红(HE)染色和番红O染色对软骨细胞进行鉴定。采用MTT法检测秦皮苷对软骨细胞的毒性。将细胞分为对照组、模型组和实验组。LPS诱导软骨细胞构建体外骨关节炎(OA)模型,并用秦皮苷进行干预。钙黄绿素/乙锭均二聚物(Calcein-AM/EthD-I)染色评价细胞活力,实时荧光定量PCR(qPCR)法检测炎症相关基因和软骨特异性基因的表达,免疫荧光染色观察软骨细胞内基质金属蛋白酶(MMP)-13的分泌情况,总抗氧化能力(T-AOC)实验检测秦皮苷的总抗氧化水平,二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)水平。结果:HE染色显示细胞形态与软骨细胞一致,番红O染色结果表明提取的细胞为软骨细胞。5μg/mL秦皮苷对软骨细胞无毒性,秦皮苷在该浓度下能维持软骨细胞正常的形态,抑制细胞外基质的降解,促进蛋白多糖的分泌,提高软骨细胞活力,显著下调炎症相关基因白介素(IL)-6、MMP-3、MMP-13和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达,上调软骨特异性基因Ⅱ型胶原纤维α1(Col2al)表达(P<0.05),减少MMP-13分泌,提高总抗氧化水平,清除ROS。结论:秦皮苷对LPS诱导的OA软骨细胞具有抗炎及抗氧化的作用,其可能是OA潜在的治疗药物。

落叶松林地土壤4种酚酸对水曲柳幼苗生长的影响

通过测定不同季节水曲柳-落叶松混交林4种落叶松根际和非根际土的酚酸(2,4-二羟基苯甲酸、7-羟基香豆素、阿魏酸和松香酸)的质量分数,研究了酚酸对水曲柳幼苗生长、根系活力和菌根侵染率的影响。结果表明:(1)施加落叶松根际土的处理中,7-羟基香豆素+阿魏酸组合的处理对水曲柳幼苗生物量及根系活力均起促进作用,但非根际土中的7-羟基香豆素+阿魏酸组合处理却产生抑制作用。(2)根际土与非根际土中的2,4-二羟基苯甲酸+松香酸、7-羟基香豆素+松香酸、7-羟基香豆素+阿魏酸+松香酸组合均显著抑制水曲柳幼苗生物量;2,4-二羟基苯甲酸+7-羟基香豆素、2,4-二羟基苯甲酸+7-羟基香豆素+阿魏酸组合均显著抑制水曲柳幼苗根系活力,而2,4-二羟基苯甲酸+阿魏酸组合却显著促进根系活力。(3)根际土与非根际土中的2,4-二羟基苯甲酸+7-羟基香豆素+阿魏酸均促进菌根侵染率;根际土的2,4-二羟基苯甲酸+7-羟基香豆素促进菌根侵染率,而非根际土的2,4-二羟基苯甲酸+7-羟基香豆素却抑制菌根侵染率。

秦皮药材的质量评价

目的 评价秦皮药材的质量 ,为药典标准修订及新药研究提供依据。方法 采用紫外分光度法定量分析秦皮有效部位的总香豆素 ;高效液相色谱法定量分析香豆素中的主要成份秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮苷及秦皮亭。结果 秦皮中的总香豆素及其主要成份在枝皮中远较干皮高 ,并以枝条越细含量越高 ,干皮中含量较低 ,远不能达药典限度要求 ;秦皮饮片炮制过程中 ,“洗净 ,润透”过程对香豆素类成分影响较大。结论 建议药典将秦皮干皮与枝皮的含量限度分列 ,或者考虑干皮不作为其入药部位 ;炮制时不再洗与浸 ,直接干切。

秦皮甙对幼鼠肺炎链球菌肺炎的改善作用及机制

【目的】观察秦皮甙对幼鼠肺炎链球菌肺炎的改善作用及机制。【方法】将50只幼鼠随机分为正常组、模型组、秦皮甙组、激活剂组、激活剂+秦皮甙组,每组各10只。除正常组外,其余各组建立肺炎链球菌肺炎模型。给予相应药物干预1周后,观察各组幼鼠一般情况,检测肺湿质量/干质量(W/D)比值,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测肺组织白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-10水平,苏木素-伊红(HE)染色法观察肺组织病理学变化并进行肺损伤评分,蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测肺组织Janus激酶(JAK)2、磷酸化(p)-JAK2、信号转导与转录激活子(STAT)1、p-STAT1、STAT5、p-STAT5、细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)蛋白相对表达水平。【结果】与正常组比较,模型组、秦皮甙组、激活剂组、激活剂+秦皮甙组肺组织W/D比值,IL-1β、IL-6水平升高(P<0.05),且激活剂组>模型组>激活剂+秦皮甙组>秦皮甙组,而IL-10水平降低(P<0.05),且秦皮甙组>激活剂+秦皮甙组>模型组>激活剂组。HE染色结果显示:正常组肺组织正常;模型组、激活剂组支气管黏膜上皮脱落或坏死,肺泡壁增厚并水肿,有大量渗出物;激活剂+秦皮甙组、秦皮甙组肺组织病理学变化逐渐改善。与正常组比较,模型组、秦皮甙组、激活剂组、激活剂+秦皮甙组p-JAK2、p-STAT1、p-STAT5蛋白相对表达水平升高(P<0.05),且激活剂组>模型组>激活剂+秦皮甙组>秦皮甙组,而SOCS3蛋白相对表达水平降低(P<0.05),且秦皮甙组>激活剂+秦皮甙组>模型组>激活剂组。【结论】秦皮甙可明显抑制幼鼠肺炎链球菌肺炎的炎症反应,减轻肺组织损伤,其机制可能与抑制JAK/STAT信号通路有关。

秦皮配方颗粒UPLC指纹图谱研究

目的：建立秦皮配方颗粒的超高效液相（UPLC）指纹图谱,为秦皮配方颗粒的鉴别及其质量控制提供实验依据。方法：采用UPLC法,以Zorbzx Eclipse XDB C18（2.1 mm×100 mm,1.8μm）为色谱柱;甲醇-0.4%醋酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速0.3 m L·min-1;检测波长为245 nm;柱温25℃。结果：建立了秦皮配方颗粒的UPLC指纹图谱,以秦皮甲素为参照,确定了15个共有峰为特征峰,并指认出1号峰为秦皮甲素、2号峰为秦皮乙素、3号峰为秦皮苷、4号峰为秦皮素,对照指纹图谱色谱峰丰富,相似性好。结论：该方法稳定、可靠,可用于秦皮配方颗粒的快速鉴别、质量评价与控制。

白鲜皮饮片标准汤剂质量评价体系构建

为了提高白鲜皮配方颗粒的质量标准,采用15批白鲜皮饮片标准汤剂,建立了质量评价体系。第1次加入10倍的水、浸泡30 min、煎煮20 min,第2次加入8倍的水、煎煮15 min,以标准化工艺制备标准汤剂,采用HPLC法测定黄柏酮和梣酮的含量及指纹图谱。结果显示:15批白鲜皮标准汤剂中黄柏酮的转移率为25.08%~44.08%,平均转移率为34.79%,标准偏差为5.37%;梣酮转移率为22.63%~32.86%,平均转移率为27.94%,标准偏差为3.56%;出膏率为20.56%~34.42%,平均出膏率为29.05%,标准偏差为3.33%。采用中药指纹图谱相似度评价系统进行指纹图谱测定,得到共有峰10个,指认出白鲜碱、黄柏酮、梣酮3个峰。由此可知,白鲜皮饮片标准汤剂的制备工艺规范,样品质量稳定,指纹图谱相似度大于0.92,可用于白鲜皮配方颗粒的质量控制,并为白鲜皮饮片标准汤剂的应用和其他根茎类饮片的研究提供参考。

秦皮苷对脂多糖诱导的巨噬细胞极化的影响

目的:初步探讨秦皮苷对脂多糖(LPS)诱导的小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7细胞向M1、M2型极化的影响。方法:体外培养小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7细胞系,将细胞随机分为对照组、LPS处理组(模型组)以及LPS+秦皮苷组(实验组)。培养细胞24 h后,利用细胞活力检测试剂盒(CCK-8试剂)和活/死细胞(Calcein-AM/PI)双染试剂盒检测秦皮苷对细胞增殖的影响;通过1.1-二苯基-2-苦肼基(DPPH)法测定秦皮苷的总抗氧化活性,二氯二氢荧光素二氢乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针检测各组细胞内活性氧(ROS)的表达水平;利用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测巨噬细胞相关基因的表达;免疫荧光染色观察巨噬细胞细胞内相关生物标志物[诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和CD206]的表达水平。结果:秦皮苷浓度为20μg/mL时,能够明显促进巨噬细胞的增殖,巨噬细胞活力最好。DPPH和DCFH-DA荧光探针检测结果均显示秦皮苷具有良好总抗氧化能力,能够清除细胞内的ROS。与对照组相比,模型组中炎症相关基因白介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、CD86和iNOS的表达上升,抗炎相关基因精氨酸酶-1(Arg-1)、CD206和白介素-10(IL-10)的表达上升(P<0.05)。通过秦皮苷处理后,与模型组相比,实验组中炎症相关基因表达下降,抗炎相关基因表达上升(P<0.05);同时,实验组中M1巨噬细胞相关蛋白(iNOS)分泌受到抑制(P<0.001),M2型巨噬细胞相关蛋白(CD206)表达升高(P<0.001)。结论:秦皮苷可以抑制LPS诱导的M1型巨噬细胞极化,促进巨噬细胞从M1表型向M2表型极化,对M1/M2亚型失衡具有调节作用,有利于维持其动态平衡,有望为炎症的临床治疗提供新的方式。

基于指纹图谱和网络药理学的秦皮质量标志物(Q-Marker)预测分析

目的在中药质量标志物(qualitymarker,Q-Marker)“五原则”指导下,基于指纹图谱和网络药理学方法,从可测性和有效性角度分析预测秦皮潜在的Q-Marker。方法建立15批秦皮饮片指纹图谱,进行聚类分析(hierarchicalcluster analysis,HCA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)和偏最小二乘判别分析(partial least-squares discrimination analysis,PLS-DA),运用网络药理学方法构建“成分-靶点-通路”网络图,并预测秦皮饮片的Q-Marker,同时进行定量分析。结果建立了15批秦皮饮片指纹图谱,在21个共有峰中指认出4号峰为秦皮苷、6号峰秦皮乙素、7号峰秦皮素、9号峰秦皮甲素,HCA、PCA和PLS-DA结果大体相符,网络药理学筛选出潜在的21个活性成分、129个核心靶点、159条关键通路,整合指纹图谱、模式识别及网络药理学方法,共同辨识出可测性、有效性、特有性原则的潜在Q-Marker为秦皮苷、秦皮乙素、秦皮素、秦皮甲素,四者含量依次为0.93%~2.51%、0.98%~1.41%、0.71%~1.09%、0.66%~1.25%。结论整合指纹图谱、模式识别和网络药理学分析预测了秦皮潜在的Q-Marker,为全面控制和评价秦皮饮片质量提供科学依据,为多基原中药质量标准的研究提供理论参考。

HPLC法测定芪桂痛风片中新绿原酸、秦皮甲素、绿原酸、秦皮乙素、秦皮苷、秦皮素、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸和蒙花苷

目的 建立测定芪桂痛风片中新绿原酸、秦皮甲素、绿原酸、秦皮乙素、秦皮苷、秦皮素、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸、蒙花苷的HPLC方法。方法 采用ACE Excel C18-AR色谱柱(150 mm×4.6 mm,3μm);流动相为0.1%甲酸水–乙腈,梯度洗脱;检测波长325 nm(新绿原酸、绿原酸、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸)、334 nm(秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮苷、秦皮素、蒙花苷);体积流量1 mL/min;柱温30℃;进样量10μL。结果 新绿原酸、秦皮甲素、绿原酸、秦皮乙素、秦皮苷、秦皮素、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸、蒙花苷的线性范围分别为1.86~59.45、26.21~838.80、8.01~256.47、3.60~115.45、17.79~569.18、1.93~61.76、3.67~117.51、2.27~72.76μg/mL,线性关系良好(r=1.000 0),平均回收率分别为95.56%、92.88%、95.49%、92.15%、93.03%、96.03%、99.90%、95.42%,RSD值分别为3.40%、3.11%、3.25%、3.17%、3.10%、3.52%、3.40%、3.34%。结论 建立的芪桂痛风片中8种成分HPLC定量方法简便、快速、准确,可以用于评价芪桂痛风片的质量。

秦皮总香豆素大孔树脂纯化工艺研究

目的优化大孔树脂对秦皮总香豆素的纯化工艺。方法以秦皮总香豆素及秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮苷、秦皮素4种香豆素的吸附率、解析率、转移率为考察指标,采用单因素方法,考察纯化秦皮总香豆素的树脂类型,树脂吸附、解吸附性能及纯化效果。结果所选择的7种大孔树脂中ADS-5最适合秦皮总香豆素的纯化。吸附参数：吸附容量为生药量-树脂0.8 g/g,上样药液质量浓度为生药0.75 g/m L,上样药液p H值为4.0～4.3（原药液）,上样体积流量为2～4 BV/h;洗脱参数：水清洗杂质1 BV,洗脱溶剂25%乙醇,洗脱体积流量2 BV/h,洗脱体积3 BV。经纯化,秦皮总香豆素转移率达74.27%,4种香豆素成分转移率达83.06%,秦皮总香豆素提取物出膏率为7.35%,除杂率达14.00%,其中总香豆素的量为54.72%,4种香豆素成分的量之和为36.01%,总香豆素提取率为4.02%。结论 ADS-5对秦皮总香豆素纯化效果较好,该纯化工艺稳定,提取物量符合中药5类新药的要求。

3种秦皮香豆素的毛细管区带电泳快速分析

目的考察秦皮香豆素在不同实验条件下的提取与电泳行为,建立其中主要活性成分秦皮苷、秦皮甲素、秦皮乙素的毛细管区带电泳快速定量方法。方法采用50mmol.L-1硼砂溶液为运行缓冲溶液,熔融石英毛细管有效长度45cm(75μm×53.5cm),以对羟基苯甲酸丙酯为内标,操作电压18kV,柱温25℃,于210nm波长处测定。结果在优化的电泳条件下,3种秦皮香豆素在10min内完全分离。秦皮苷、秦皮甲素、秦皮乙素的线性范围分别为:6.0～96mg.L-1(r=0.9997,n=5),7～112mg.L-1(r=0.9996,n=5)和4.7～75.2mg.L-1(r=0.9994,n=5);平均加样回收率分别为101.74%,l00.92%和102.44%,相应的RSD分别为2.18%,1.97%,2.66%(n=9)。结论本实验为秦皮苷、秦皮甲素和秦皮乙素的同时定量提供了一种快速简便的检测方法。