秦皮提取物中香豆素类成分含量测定方法研究

目的 分别建立秦皮提取物总香豆素和4 种主要香豆素成分紫外分光光度法（UV）和高效液相色谱法（HPLC）含量测定方法.方法 采用UV,以秦皮甲素为对照品,在334 nm 测定秦皮提取物总香豆素的含量;采用HPLC,用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,以乙腈-0.01%磷酸溶液为流动相梯度洗脱,在334 nm 测定秦皮提取物中秦皮甲素、秦皮苷、秦皮乙素、秦皮素4 种主要香豆素成分的含量.结果 秦皮甲素的质量浓度在5.76～23.04 μg/mL 范围内线性关系良好（r =0.999 9）,平均回收率为100.6%（RSD=1.8%）;4种香豆素成分秦皮甲素、秦皮苷、秦皮乙素、秦皮素的质量分别在0.055 0～3.850 0 μg（r =0.999 7）、0.053 9～3.773 0 μg（r =0.999 8）、0.060 0～0.660 0 μg（r =0.999 9）、0.056 2～0.618 2 μg（r =0.999 9）范围内线性关系良好,平均回收率分别为96.97%（RSD=1.26%）、100.80%（RSD=2.22%）、99.04%（RSD=2.47%）、98.77%（RSD=1.94%）.结论 2 种含量测定方法简便、准确、可靠,可用于秦皮提取物总香豆素和主要香豆素成分的质量控制.

响应面分析法优化秦皮多酚超声提取工艺及体外抗氧化活性研究

目的优化秦皮多酚超声提取工艺条件,评价其抗氧化活性。方法以秦皮多酚提取率为考察指标,乙醇体积分数、超声时间、超声功率及料液比为影响因素,进行单因素实验,在此基础上采用响应面法优化秦皮多酚的提取工艺;选取维生素C作为阳性对照,考察秦皮多酚对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)及2,2′-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基的清除能力,评价其体外抗氧化活性。结果秦皮多酚的最佳超声提取工艺参数为体积分数为45%的乙醇,超声时间为33 min,超声功率为90 W,料液比为1∶26,秦皮多酚的提取率预测值为6.232%。秦皮多酚和维生素C抑制DPPH自由基的IC 50分别为6.217和6.032μg·mL^-1;抑制ABTS自由基的IC 50分别为4.048和3.639μg·mL^-1。结论采用响应面法优选获得的秦皮多酚提取工艺稳定、可行。秦皮多酚具有一定的体外抗氧化活性。

秦皮提取物及秦皮甲素对大鼠类风湿关节炎的保护作用

目的探讨秦皮提取物及秦皮甲素对大鼠类风湿关节炎的保护作用,比较秦皮提取物与秦皮甲素的抗炎效果。方法分别采用角叉菜胶和弗氏完全佐剂制备大鼠急性关节炎和类风湿关节炎模型,并给予秦皮提取物和秦皮甲素干预后,测量大鼠足厚度、体重变化,并记录关节评分,酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定大鼠血浆白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、丙二醛(MDA)水平及超氧化物歧化酶(SOD)活性变化。结果与空白组比较,2种炎症模型大鼠模型组的IL-1β,TNF-α,MDA水平显著上升,SOD活性显著下降(P<0.05);与模型组比较,在2种炎症模型中,秦皮提取物组和秦皮甲素组IL-1β,TNF-α含量均显著降低(P<0.05);在角叉菜胶模型中,秦皮甲素在致炎1,2 h表现出抑制作用(P<0.05),秦皮提取物对SOD活力有显著影响(P<0.05),秦皮甲素组在降低大鼠TNF-α水平上较秦皮提取物组显著(P<0.05);在佐剂模型中,秦皮提取物组和秦皮甲素组MDA含量显著降低(P<0.05),秦皮提取物组关节评分较低(P<0.05),秦皮甲素组在降低IL-1β水平上较秦皮提取物组更显著(P<0.05)。结论秦皮提取物及秦皮甲素对类风湿关节炎有一定的保护作用,秦皮甲素可能为秦皮的主要抗炎物质,其作用机制可能与调节IL-1β和TNF-α水平有关。

秦皮总香豆素超声辅助提取工艺优化

目的:优化秦皮总香豆素的超声醇提工艺。方法:采用单因素试验方法研究超声辅助提取过程中乙醇体积分数、料液比、提取温度、提取时间和超声频率对秦皮总香豆素提取率的影响,并采用正交试验确定最佳提取工艺条件。结果:秦皮总香豆素超声辅助提取的最佳提取工艺为:按1∶10(质量-体积比)的料液比加入60%乙醇,于50℃条件下用175 W超声辅助提取50 min,秦皮总香豆素提取率可达到6.283%。结论:与传统索氏提取相比,该工艺具有耗时少、耗能少和提取率高等优点。

秦皮不同溶剂提取物总酚含量及抗氧化活性

分别以水、加0.5%纤维素酶水和50%乙醇溶液为提取剂,超声辅助提取秦皮,采用Folin-Ci-ocalteu法测定提取物中总酚含量,同时利用清除DPPH.和羟自由基(.OH)法评价秦皮提取物的抗氧化活性。结果表明,不同溶剂水、50%乙醇和加0.5%纤维素酶水的秦皮提取物中总酚含量分别41.68mg/g、49.32mg/g和51.51mg/g;对DPPH.的半清除率(IC50)分别为0.29mL、0.22mL和0.17mL;对.OH的半清除率(IC50)分别为2.4mL、2.0mL和1.3mL。秦皮不同溶剂提取物都具有较强的抗氧化活性,其大小顺序为:加酶水提物>醇提物>水提物,抗氧化活性与提取物中总酚含量成正相关。

BP神经网络结合遗传算法多目标优化秦皮提取工艺的研究

目的:使用BP神经网络结合遗传算法用于秦皮提取工艺的多目标优化。方法:以秦皮甲素和秦皮乙素为指标,采用均匀设计法优化BP神经网络模型参数,并建立网络模型,再利用遗传算法对网络进行多目标寻优,获得秦皮的最佳提取工艺。结果:得到的最优工艺条件为提取温度99℃、乙醇体积分数50%、液固比7、提取时间94 min,网络在此条件下的预测值为秦皮甲素提取量为9.617 mg.g-1,秦皮乙素提取量为2.195 mg.g-1,和实际测量值的相对误差仅为-1.16%和-5.14%,具有较好的网络预测性。结论:BP神经网络结合遗传算法可用于秦皮提取工艺的多目标优化。

秦皮总香豆素不同提取工艺对比研究

目的考察不同提取工艺对秦皮总香豆素提取率及主要香豆素活性成分含量的影响,以确定其适宜的提取工艺。方法采用正交设计法,以综合指标秦皮总香豆素提取率为考察指标,分别以水和醇作为溶剂,对秦皮提取工艺进行优选。结果秦皮水提取最佳工艺:秦皮饮片加9倍量水,煎煮3次,每次煎煮1.5 h。水提取秦皮出膏率为28.87%,总香豆素含量为19.26%、提取率为5.56%,秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮苷、秦皮素总含量为13.47%。秦皮醇提取最佳工艺:秦皮饮片用8倍量75%乙醇回流2次,每次2 h。醇提取秦皮出膏率为30.47%,总香豆素含量为21.72%、提取率为6.62%,秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮苷、秦皮素总含量为15.29%。2种工艺对比,醇提取比水提取出膏率提高了5.54%,总香豆素含量提高了12.77%、提取率提高了19.06%,4种香豆素成分总含量提高了13.51%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论醇提取工艺各考察指标均优于水提取工艺,故应采用75%乙醇提取秦皮总香豆素,且工艺稳定。

秦皮提取物对真丝织物抗紫外线的影响

为得到秦皮提取液对染色真丝织物的抗紫外线性能,采用水浸法对中药秦皮进行浸提,将浸提液直接用于真丝织物的染色,并分别采用酸性固色剂DM-2539G、无醛固色剂DM-2518对染色后织物进行固色处理,通过测试样品抗紫外线性能,优化出秦皮提取物对染色真丝织物的最优染色工艺为:染色温度80℃,染色时间60min,染浴pH4.对两种不同固色剂的固色工艺进行优化,并对固色后的织物耐洗性进行测试,结果表明固色后织物具有耐久的抗紫外线性能.

秦皮提取物抑菌活性及稳定性研究

[目的]研究了秦皮中天然抗菌物质的提取工艺条件、抑菌效果和稳定性。[方法]采用牛津杯法研究了秦皮超声波辅助水提物的抑菌作用及温度、pH值、紫外光等因素对抑菌活性的影响。[结果]提取物的最高吸收峰为338 nm,抗菌物质提取效果的影响大小顺序为物料比、提取温度、提取时间、超声波功率;最佳提取工艺条件为物料比1∶10,提取时间50 min,提取温度80℃,频率40 kHz,其提取液的吸光度为0.893。同时,秦皮对细菌具有较好的抑菌效果,以金黄色葡萄球菌和大肠杆菌为指示菌,抑菌浓度分别为1.250%和2.500%。[结论]提取物经过酸、碱处理后在酸性条件下(pH值5～6)具有较高的抑菌活性。经处理后,提取液对大肠杆菌的抑制活性要高于金黄色葡萄球菌。

正交试验优选膝可保方中白芍和秦皮的提取工艺

目的优选膝可保方中白芍和秦皮的提取工艺。方法以芍药苷、秦皮甲素、秦皮乙素的含有量为评价指标,以加水量、煎煮时间、煎煮次数为影响因素,正交试验优选提取工艺。结果最佳条件为加水量10倍,煎煮3次,每次1 h,芍药苷的提取率为90.52%,秦皮甲素和秦皮乙素的总提取率为80.17%。结论该方法稳定可行,可用于提取膝可保方中的白芍和秦皮。

秦皮中秦皮甲素的提取工艺研究

目的通过正交设计优化回流法提取秦皮中秦皮甲素的提取工艺。方法通过单因素及L9(34)正交试验优选秦皮中秦皮甲素的提取工艺。考察回流提取法中乙醇浓度、料液比、提取时间、提取次数、提取温度对秦皮甲素量的影响。结果最佳提取工艺条件为:乙醇浓度75%,料液比为1:10,提取温度为65℃,提取次数为4次,每次提取2 h。结论正交设计优化提取工艺可较好地提取秦皮中的秦皮甲素。

正交设计优选助溶剂等对复方秦皮提取液的稳定性研究

在处方设计中,综合考虑各种增溶剂和助溶剂等添加剂对复方秦皮提取液的稳定性影响和标准,采用正交试验对其优化。取复方秦皮提取物10 g,加入0.6%吐温-80适当混匀,再加丙二醇10%,混合均匀,加入烟酰胺2 g,混合均匀的工艺最佳。

基于最小二乘支持向量机的秦皮提取工艺的研究

目的:应用最小二乘支持向量机(LS-SVM)技术优化秦皮的提取工艺。方法:以秦皮甲素和秦皮乙素为指标,采用均匀设计安排提取试验,并用最小二乘支持向量机建立关系模型。结果:最小二乘支持向量机对秦皮甲素和秦皮乙素的拟和相关系数分别为0.999 7与0.999 9;得到的最优工艺条件为提取温度100℃、乙醇浓度50%、液固比11、提取时间70min,机器模型在此条件下的预测值为秦皮甲素提取量为9.291mg·g^(-1),秦皮乙素提取量为2.241mg·g^(-1),和实际测量值的相对误差仅为～2.97%和2.66%,具有较好的预测性。结论:最小二乘支持向量机可用优化秦皮提取工艺。

秦皮中香豆素提取工艺优化及其抗氧化活性研究

以秦皮为原料,香豆素得率为考察指标,在单因素试验的基础上,采用正交试验优化超声辅助法提取秦皮中香豆素的工艺条件。结果表明,最佳提取工艺条件为:表面活性剂用量3%,乙醇体积分数50%,提取温度60℃,提取时间40 min,料液比1∶10(g/mL),在此工艺条件下,香豆素得率高达1.038%。对提取物进行抗氧化性试验,结果表明,相同浓度下香豆素提取液对DPPH自由基和羟自由基的清除能力均强于VC,秦皮中香豆素具有较强的抗氧化性。

遗传算法在秦皮提取液混批勾兑中的应用

目的:探讨遗传算法用于秦皮提取液多目标混批勾兑的可行性。方法:选择指纹图谱相似度和指标性成分含量的均方根误差为共同优化目标,对10批不同来源、批次的秦皮提取液建立多目标优化模型,运用遗传算法求得勾兑系数,对各批次提取液进行混批勾兑,以相似度和均方根误差评价确定勾兑后提取液的质量。结果:各批次秦皮提取液混批勾兑后,其质量明显改善,与对照样品间的指纹图谱相似度显著提高,变异程度降低,指标性成分相对偏差小于10%。结论:遗传算法可用于秦皮提取液多目标的混批勾兑,为中药提取液的质量控制提供新思路。

基于遗传算法结合最小二乘支持向量机的秦皮提取液快速定量分析方法

目的:探讨遗传算法(genetic algorithm,GA)结合最小二乘支持向量机(least squares support vector machine,LSSVM)用于秦皮提取液中多组分含量的快速测定的可行性。方法:以HPLC分析值作为参照,采集不同产地的秦皮提取液的紫外光谱,运用GA算法筛选光谱特征波长,再对筛选结果应用主成分分析(pricipal component analyze,PCA)进行特征提取,结合LSSVM算法建立快速测定秦皮甲素、秦皮乙素及秦皮素的数学模型。结果:应用GA算法筛选后,秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮素的建模光谱维数分别下降为全谱的44%,44%,32%,所建模型的预测集相关系数(RP)分别为秦皮甲素0.948 6,秦皮乙素0.960 3,秦皮素0.929 3,预测均方根(RMSEP)分别为秦皮甲素0.085 2,秦皮乙素0.033 4,秦皮素0.012 1。结论:GA算法可以在充分保留光谱有效信息的基础上,显著降低模型的复杂度,结合LSSVM算法建立的模型可以用于快速测定秦皮提取液中秦皮甲素、秦皮乙素及秦皮素的含量,为中药提取液的质量控制提供新思路。

浊点萃取HPLC法测定秦皮中秦皮甲素和秦皮乙素的含量

目的:建立浊点萃取高效液相色谱法测定秦皮中秦皮甲素和秦皮乙素含量的方法。方法:选择以表面活性剂Genapol X-080作为萃取剂,考察了表面活性剂浓度、液固比、盐浓度、平衡温度、平衡时间等因素对萃取结果的影响。结果:获得最佳萃取条件为Genapol X-080的质量浓度为0.18 g·m L-1,液固比定为100∶1,盐浓度1.5 mol·L-1,平衡温度60℃,平衡时间35 min。结论:浊点萃取是一种安全、高效、简便的样品处理方法。在最佳条件下,秦皮甲素和秦皮乙素的加样回收率分别为95.3%,96.0%,RSD分别为2.3%,2.1%。利用此方法成功测定了秦皮中秦皮甲素和秦皮乙素的含量。

淫羊藿、秦皮醇提取物体外抗乳腺癌细胞增殖的研究

目的：考察淫羊藿和秦皮的不同浓度乙醇提取物体外抗乳腺癌细胞增殖的作用.方法：将淫羊藿和秦皮20%、40%、70%和95%乙醇提取物作用于人乳腺癌MCF 7（ER^＋）和MDA-MB-231（ER^-）细胞,用MTT法检测其抗增殖活性.结果：淫羊藿95%的乙醇提取物在100～800 μg·mL^-1浓度范围内均能显著抑制人乳腺癌MCF-7细胞的增殖,70%的乙醇提取物也显示了一定的抗增殖活性,而20%和40%的乙醇提取物未见明显的抗增殖作用;但对人乳腺癌MDA-MB 231细胞,淫羊藿不同浓度的乙醇提取物均无明显的抗增殖作用.秦皮95%和70%的乙醇提取物在50～400 μg·mL^-1浓度范围内均能显著抑制人乳腺癌细胞的增殖,而40%和20%的乙醇提取物未见明显的抗人乳腺癌细胞增殖的作用.结论：淫羊藿和秦皮的乙醇提取物有一定的抑制乳腺癌细胞增殖的作用.

秦皮醇提物对亚急性衰老小鼠的抗衰老作用

目的:观察秦皮醇提物(EEFC)对D-半乳糖所致亚急性衰老小鼠的抗衰老作用。方法:将ICR小鼠60只随机分为空白组(生理盐水100 mg·kg-1),模型组(D-半乳糖100 mg·kg-1),阳性药维生素E组(D-半乳糖100 mg·kg-1+维生素E30 mg·kg-1),EEFC低剂量组(D-半乳糖100 mg·kg-1+秦皮醇提物37.5 mg·kg-1)、中剂量组(D-半乳糖100 mg·kg-1+秦皮醇提物75 mg·kg-1)和高剂量组(D-半乳糖100 mg·kg-1+秦皮醇提物150 mg·kg-1),每组10只。连续ig给药60 d,末次给药后摘眼球取血,之后取脑、胸腺、脾脏、肝、皮肤,测定脑、胸腺、脾脏的脏器指数;测定血清、脑、肝、皮肤超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化氢酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)。结果:模型组的脑、胸腺、脾脏指数比空白组明显降低(P<0.05,P<0.01),小鼠血清、肝脏、皮肤、脑模型组T-AOC,SOD,CAT的值与空白组明显降低,MDA升高。秦皮醇提物各剂量组与模型组相比,高剂量组的脑、胸腺、脾脏质量指数显著增加(P<0.05,P<0.01)。秦皮醇提物组血清、脑组织、肝和皮肤中的SOD,CAT活性均显著增强(P<0.05,P<0.01),MDA含量降低(P<0.05,P<0.01),T-AOC显著增强(P<0.05,P<0.01),血清和皮肤中的GSH-Px活性显著增强(P<0.05,P<0.01)。结论:秦皮醇提物具有延缓D-半乳糖所致亚急性衰老小鼠的衰老作用。