New alkaloid isolated from Fritillaria pallidiflora

目的 确证从伊贝母中分离得到一种新的生物碱的结构。方法 IR,MS及 NMR。结果 其结构被鉴定为N- ( 1′,4′-二羟基 - 1′,2′,3′,4′-四氢化萘基 ) -丙基 - N-二苯基甲基 - N- 3 ,3 -二甲基丁胺。结论 这种生物碱为首次从植物中分离得到 ,它在骨架结构上与已知的贝母生物碱截然不同。

伊贝母标准汤剂制备及质量标准研究

目的:制备15批伊贝母饮片标准汤剂,建立其质量评价方法,为制定伊贝母配方颗粒质量标准提供参考依据。方法:以传统的水煎药工艺为基准制备伊贝母标准汤剂;采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)测定15批伊贝母标准汤剂中指标成分西贝母碱苷和西贝母碱的含量,计算二者的转移率;计算标准汤剂的出膏率并测定相对密度与pH;以薄层色谱法(TLC)对15批次伊贝母标准汤剂中的西贝母碱薄层检识,并同时建立伊贝母饮片和标准汤剂特征图谱。结果:15批伊贝母标准汤剂中西贝母碱苷成分转移率为20.19%~48.57%,西贝母碱成分转移率为18.89%~47.39%,平均转移率分别为32.02%、34.89%;出膏率范围为6.06%~10.12%,平均出膏率为7.83%;相对密度值为1.014~1.024;pH值为4.70~6.38;15批伊贝母饮片与标准汤剂特征图谱共标定了7个特征峰,并指认了其中的5个色谱峰,分别为峰2贝母辛,峰3西贝母碱苷,峰4伊贝碱苷A,峰6西贝母碱,峰7梭砂贝母碱,特征图谱批次间相似度均超过0.99。结论:该实验建立了定性、定量评价伊贝母标准汤剂的质量评价方法,该方法较为系统、简单易行,且专属性和重复性良好。饮片与标准汤剂特征图谱相似度高。可用于伊贝母标准汤剂质量控制,并为后续配方颗粒及其他研究提供参考。

伊犁贝母总生物碱的药效学研究

目的 :研究伊犁贝母总生物碱的镇咳、祛痰和平喘作用。方法 :以小鼠氨水引咳法、豚鼠枸橼酸引咳法和猫喉上神经刺激引咳法观察其镇咳作用 ;以小鼠酚红排泌法、大鼠毛细管排痰法观察其祛痰作用 ;以豚鼠乙酰胆碱 组胺引喘法观察其平喘作用。结果 :在 10mg/kg剂量下 ,十二指肠给药对电刺激猫喉上神经引咳具有显著的镇咳作用。连续灌胃给药 5d ,伊犁贝母总生物碱在 4 0 ,2 0 ,10mg/kg的剂量下对小鼠氨水引咳具有显著的镇咳作用 ;在 2 0 ,10mg/kg的剂量下对豚鼠枸橼酸引咳具有显著的镇咳作用 ,能显著增加大鼠毛细管排痰量 ;在 4 0 ,2 0mg/kg的剂量下具有显著增加小鼠酚红排泌量的作用 ,对乙酰胆碱 组胺所致的豚鼠哮喘具有显著的平喘作用。结论 :伊犁贝母总生物碱对实验动物具有显著的镇咳、祛痰及平喘作用。

伊犁贝母总生物碱对豚鼠的平喘作用及其机理

目的 :研究伊犁贝母总生物碱 (FPA)对豚鼠的平喘作用及其作用机理。方法 :以乙酰胆碱 组胺引喘法观察FPA对豚鼠的平喘作用 ;制备豚鼠气管螺旋条标本 ,通过观察其张力变化研究FPA对离体气管平滑肌基础张力的影响及其组胺和卡巴胆碱对气管收缩的抑制作用。结果 :FPA在 10 ,2 0 ,4 0mg/kg剂量下连续灌胃给药 5d ,对乙酰胆碱 组胺所致的豚鼠哮喘具有显著的延长引喘潜伏期的作用 ;对豚鼠离体气管平滑肌的基础张力无显著影响 ,对组胺引起的收缩也无显著的抑制作用 ,对卡巴胆碱引起的收缩 ,FPA在 10mg/L浓度时开始呈现非常显著的抑制作用 (P <0 .0 1) ,对 6 μmol/L卡巴胆碱的IC50 为 14 7mg/L。FPA可浓度依赖性地使卡巴胆碱量效曲线向右平移 ,最大收缩张力无显著变化。结论 :FPA对豚鼠具有平喘作用 。

伊贝碱甙B的分离和结构测定

本文报道自吉林栽培的伊贝母(Fritillaria pallidiflora Schrenk)中分得一种新的C-去甲-D-异甾体生物碱甙,命名为伊贝碱甙B(yibeinoside B)。根据红外、质谱、氢谱和碳谱确定了结构。

伊贝母种子发芽率影响因素的研究

目的探讨导致伊贝母种子在自然环境下发芽率低的关键影响因素。方法运用去皮、高温刺激,切除胚乳,流水冲洗等物理方法或GA3,硫脲,KT等化学试剂处理种子。结果发现去皮与切除胚乳的方法均能有效提高种子发芽率,达到90.0%左右,外源激素和高温刺激效果也较大,均超过50.0%。结论贝母种子属于种皮休眠和胚休眠的双重类型,物理方法和化学试剂对其破除休眠作用明显。

遥感技术在伊犁贝母调查中的应用

以种植伊犁贝母为研究对象,通过实地调查其物候特性、生长状况及分布特点,基于Worldview-2影像采用多种方法提取伊犁贝母信息,探讨遥感技术在伊犁贝母调查中的可行性。调查显示伊犁贝母多在4月中下旬开花且花期短,5月地面部分停止生长并陆续倒苗;不同年份的贝母形态各异,与其他作物无规则穿插种植,分布零散,大部分区块呈细长条状分布,面积不大,部分贝母植株低矮,种植稀疏且不均匀,也存在不同年份贝母混生现象。利用遥感影像的信息提取结果表明,受其分布及生长特点影响,常用的最大似然、支持向量机、决策树、面向对象等计算机分类法对伊犁贝母的提取存在一定局限性,无法获得有效结果,仅目视解译能有效提取。本研究为遥感技术在伊犁贝母调查中的应用提供了参考。

离体培养条件下伊犁贝母四倍体诱导及筛选

目的选育四倍体伊犁贝母Fritillaria pallidifloraSchrenk新种质,为高产、高生物碱含量的伊犁贝母育种打下基础。方法以鳞茎诱导出的不定芽为材料,将其接入含有2%二甲基亚砜、不同浓度秋水仙素的液体MS培养基诱导四倍体,利用处理后不定芽表型变化及染色体计数筛选鉴定四倍体伊犁贝母。结果成功获得了染色体加倍的伊犁贝母新材料,其中以含秋水仙素400 mg/L浸泡24 h效果最佳,四倍体诱导率达到33.3%,四倍体植株与二倍体对照相比,二者在表型性状、显微结构上有明显区别。结论四倍体植株体型大、生长优势明显,离体条件下利用不定芽诱导多倍体是伊犁贝母倍性育种的一条有效途径。

伊贝母组织培养中次生代谢产物的研究

以组织培养和细胞液印迹直接荧光观察法相结合，建立了伊贝母组织培养生物合成高含量贝母碱的技术，并通过薄层层析和薄层扫描对贝母生物碱的组成进行了比较分析。结果表明，不论是组织培养物还是栽培贝母中都含有贝母碱的主要成分——西贝素。但根中贝母碱的成分要比其它组织或器官中更为复杂，含量和活性也较高。继代培养８代的不定芽和不定根中贝母碱的含量分别高于栽培５年贝母根的０．０１％和０．０２％。

关于伊贝母微体繁殖植株再生途径的研究

本实验用组织培养方法，分别以伊贝母种胚切段、鳞瓣切块、幼茎切段为外植体，进行愈伤组织、鳞茎和胚状体诱导，并通过三种途径即①器官发生型途径；②器官型途径；③类胚体途径得到再生植株。

伊贝母总生物碱和总黄酮组分复方的止咳祛痰平喘作用研究

目的探讨伊贝母总生物碱和总黄酮组分复方的止咳和平喘作用,筛选组分复方的最优配比。方法基线等比增减设计法重组总生物碱和总黄酮的配比,分别采用豚鼠枸橼酸引咳法和整体动物引喘法比较各配伍组的止咳和平喘活性,优选复方的最佳配比;进而采用卵清蛋白诱导的豚鼠CVA病理咳嗽模型对优选配比进行药效验证。结果除了总黄酮组外,总生物碱和各复方配伍组均显示出止咳和平喘药效,其中总生物碱和总黄酮的等比例配伍组药效最高;在豚鼠CVA模型中,等比例配伍组具有显著的镇咳、抗气道高反应性和抗炎作用,且优于总生物碱和总黄酮组(P<0.05)。结论伊贝母中的总黄酮对于总生物碱有协同增效作用,两者的1∶1配伍组为复方最佳配比组。

伊贝母与平贝母胚状体诱导条件的比较

伊贝母与平贝母胚状体诱导条件的比较徐元红１朱四易２（１陕西师范大学生命科学学院，西安７１００６２；２西北大学生物学系，西安７１００６９；第一作者，女，３０岁，讲师）胚状体的发生是高等植物的一个普遍现象．贝母体细胞胚诱导的报道仅限于伊贝母［１，２］．本...

中药成分间油水分布系数变化与药效关系研究

目的研究中药中多成分油水分布系数变化与药效的关系。方法采用摇瓶法测定西贝素与伊贝母总黄酮混合前后油水分布系数的变化,然后采用Caco-2细胞模型研究西贝素与总黄酮混合前后透膜转运的差别,最后采用小鼠氨水引咳模型比较西贝素与总黄酮混合前后药效的差别。结果西贝素与总黄酮混合后油水分布系数变小,Caco-2细胞表观渗透系数和吸收率增大,止咳药效明显增强。结论伊贝母中多成分间油水分布系数的变化,会影响中药的药效,此研究思路和方法为中药药效物质基础研究开辟新的视角。

伊贝母鳞茎体外分化中几个生化指标的测定

在伊贝母组织培养过程中，建立了稳定的鳞茎发生体系。在鳞茎发生过程中，对ＰＡＬ活性、淀粉酶活力、核酸含量进行了测定。在整个过程中ＰＡＬ表现出２个活性高峰，第１个峰与分化无关，第２个峰是愈伤组织分化开始形成鳞茎的特征峰。在鳞茎分化前，淀粉酶活力和核酸含量都逐渐上升到高峰，鳞茎形成后，其逐渐下降，以后比较稳定。

伊贝母更新芽的成长与器官的营养更新

在自然条件下，伊贝母的组织器官每年部进行一次全面的营养更新。研究其生长发育和形态结构，认为它属于具有发达鳞茎器官的多年生短生植物类型，它的更新芽的形成和生长，分别在３个生长季中进行。在人工条件下，生长发育过程可以加快进行。切除主芽能引起侧芽和不定芽的大量发生、并在两个生长季发育成苗。在组织培养试验中，１年内可获得大量试管苗。

伊贝母体细胞胚和器官发生几种大分子活性的比较研究

本文报道了伊贝母(Fritillaria pallidiflora Schrenk)组织培养中体细胞胚发生和器官发生过程中的核酸、蛋白质含量及过氧化物酶活性动态的变化.共同特点是,培养初期几种大分子物质的含量均呈显著上升的趋势.说明两种途径均伴随着大分子物质的迅速合成.以后随着形态建成的进程,也都呈现相似的趋势.而 RNA 和蛋白质的合成总是先于 DNA 的合成,说明这几种大分子的动态变化具有顺序性.其区别在于,体细胞胚胎发生过程几种大分子的活性高于器官发生过程,前者是一个更为活跃的生理生化过程.此外,在体细胞胚胎发生途径中,RNA、DNA、蛋白质含量和过氧化物酶活性高峰期分别在培养第3、5、3和5d 时,而器官发生途径分别在第5、10、5和10 d 时.这种不同反映了两种途径在形态建成中的差异,也说明大分子代谢动态总是和形态发生相关.

伊贝母细胞悬浮培养的研究

研究了伊贝母细胞悬浮培养过程中接种量、培养方式和激素浓度对细胞生长的影响；测得细胞生长周期为１９～２４ｄ；分析了培养液的ｐＨ、蔗糖浓度、电导率和Ｄｏ变化的原因。鉴定了悬浮培养细胞中含有生物碱，其总生物碱和西贝素含量均高于栽培鳞茎。

伊犁贝母鳞茎中非生物碱化学成分的研究

目的研究伊犁贝母鳞茎的非生物碱类化学成分。方法对伊犁贝母鳞茎的乙醇提取物采用正、反相硅胶柱层析及Sephadex LH-20层析等方法进行分离纯化,通过理化及光谱学方法鉴定化合物的结构。结果分离得到7个非生物碱成分,分别为蛇床子素（1）、佛手柑内酯（2）、花椒毒内酯（3）、6,9,10-三羟基-7-十八烯酸（4）、5α,6β-二羟基胡萝卜苷（5）、胡萝卜苷（6）和β-谷甾醇（7）。结论化合物1~4为首次从贝母属植物中分离得到,化合物5~7为首次从该植物中分离得到,这也是首次从该属植物中分离得到香豆素类成分。

伊贝母中非生物碱类化学成分的分离与鉴定

目的:研究伊贝母中非生物碱类化学成分。方法:采用反复硅胶柱色谱、开放ODS柱色谱和HPLC等方法进行分离纯化,并通过NMR技术鉴定其化学结构。结果:从伊贝母乙醇提取物的三氯甲烷萃取部分分离鉴定了7个化合物,分别为(25R)-△5(6)-异螺甾-17α,3β-二醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)-[α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(1),β-谷甾醇(2),月桂酸(3),反式桂皮酸(4),月桂酸甘油酯(5),胡萝卜苷(6),β-谷甾醇棕榈酸酯(7)。结论:化合物1、7为首次从贝母属中分离得到,4、5为首次从伊贝母植物中分离得到。

ICP-MS法同时测定伊贝母中13种痕量元素

目的：建立伊贝母中痕量元素测定方法。方法：采用微波消解法,以HN03-H2O2对样品进行处理,用电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）同时测定伊贝母中的Cr、Pb、As、Cd、Be、Ni、Mn、Li、Cu、Ag、Tl、U和Zn等元素。结果：测定方法相对标准偏差为0.2%～5.8%,回收率为89.3%～108.7%。结论：微波消解、ICP-MS法测定伊贝母中痕量元素,具有灵敏度高、专属性强、干扰少、动态线性范围宽、分析速度快等优点。